姜黃生姜醇提物對(duì)幼齡SD大鼠前列腺的作用

1、姜黃生姜醇提物對(duì)幼齡SD大鼠前列腺的作用         11-03-29 10:43:00     編輯：studa20                作者：楊家慶，張志華，胡英杰，張美義，朱宇同,李國橋【摘要】  目的觀察姜黃與生姜醇提物對(duì)幼齡SD大鼠前列腺生長的影響。方法 取姜黃與生姜各500 g，粉碎混勻后加7

2、0%乙醇回流提取制得醇提物;取體質(zhì)量約50 g的SD大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組、陽性藥物組、醇提物低、中、高劑量組，每組13只。正常對(duì)照組及陽性藥物組均按20 mL·kg-1體質(zhì)量灌胃(ig)給予生理鹽水(NS)，另陽性藥物組按1 mg·kg-1體質(zhì)量皮下注射(sc)己烯雌酚，每周3次;低、中、高劑量組按20 mL·kg-1體質(zhì)量ig給予醇提物，連續(xù)3周。3周后，測定血清總酸性磷酸酶(TAP)水平，再取睪丸、精囊腺、前列腺(腹葉、側(cè)葉、背葉)分別稱取濕重，計(jì)算各指數(shù)。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，醇提物中、高劑量組的大鼠前列腺生長均受到明顯抑制(P<0.05)，低劑量

3、組雖顯示一定的抑制作用，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;醇提物低、中、高劑量對(duì)大鼠睪丸生長影響不大而對(duì)精囊腺影響顯著(P<0.01);醇提物低、中、高劑量均能顯著降低TAP的水平(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論 姜黃生姜醇提物中、高劑量均明顯抑制幼齡大鼠的前列腺生長，對(duì)睪丸的生長無明顯影響。 【關(guān)鍵詞】  姜黃;生姜;幼齡大鼠;良性前列腺增生(BPH)Abstract:Objective To observe the combined effects of Curcuma and Ginger on the growth of prostate of juvenile Spra

4、gue Dawley rats. Methods Take Curcuma and Ginger 500 g respectively,add 70% ethanol to get the ethanol extracts. SD rats with body weight about 50 g were randomly divided into normal control group,positive medicine group,ethanol extracts of low-,mid- and high-dose groups,with 13 rats in each group.

5、Rats in the normal group and positive medicine group were given NS at 20 mL per kg body weight,and rats in the positive medicine group were treated by diethylstilbestrol through subcutaneous injection at 1 mg per kg body weight three times a week. Rats in low-,mid- and high-dose groups were treated

6、by ethanol extract through intragastric administration at 20 mL per kg body weight. Three weeks later,the level of total acid phosphatase(TAP)in serum was determined and the testis,seminal vesicle and prostate (ventral,lateral and dorsal)were separated and weighted for viscera index. Results In comp

7、arison with the normal control group,significant inhibition was observed in prostate growth in mid- and high-dose groups(P<005)in three weeks,while the similar effect was observed in the rats in low dose group but with no statistical significance. No side effect on testis was observed in the rats

8、 in various groups,while significant effect on seminal vesicle was observed. Serological tests of TAP showed that TAP levels of the rats in the low-,mid-,and high-dose groups decreased significantly(P<0.05 or 0.01). Conclusion The growth of prostate of juenile Sprague Dawley rats in mid- and high

9、-dose groups were inhibited significantly,and no side effect on testis was observed.Key words:Curcuma;Ginger;juvenile rats;benign prostatic hyperplasia(BPH)良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia，BPH)是困擾老年男性的常見疾病，以排尿困難、尿閉等為主要臨床特征。姜黃根莖中主要含揮發(fā)油類及姜黃素兩大類成分。姜黃素類為二苯基庚烴類成分，主要含姜黃素、去甲氧基姜黃素和雙去甲氧基姜黃素1。生姜的塊莖主要含揮發(fā)油類

10、、姜辣素、二苯基庚烷2。楊磊等3的研究表明姜黃素能抑制雄激素受體的表達(dá)，說明姜黃素具有類雌激素的作用。Shukla等4通過研究發(fā)現(xiàn)6-姜酚(姜辣素)在LNCap細(xì)胞和大鼠前列腺腹葉中對(duì)睪酮誘導(dǎo)的抗凋亡蛋白bcl-2和存活素的表達(dá)具有向下調(diào)節(jié)作用，表明6-姜酚可能具有一定的抗雄性激素作用?？梢?，兩者可能具有的類雌激素作用與治療前列腺增生的抑制雄性激素的水平相符。當(dāng)前市面上用于治療前列腺增生的制劑中未見有姜黃或生姜。本研究以姜黃為主輔以生姜，考察兩者組合的醇提物對(duì)幼齡SD大鼠前列腺的影響，為開拓良性前列腺增生的用藥范圍提供參考?，F(xiàn)報(bào)道如下。1材料1.1藥物姜黃(批號(hào)080401D510，四川)與生

11、姜(購自農(nóng)貿(mào)市場)經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)青蒿研究中心朱宇同教授鑒定，分別為姜科植物姜黃Curcuma longa L.的干燥根莖與姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的新鮮根莖;姜黃素對(duì)照品(自制)，經(jīng)HPLC法測定純度為98.6%;己烯雌酚注射液(2 mg/mL，批號(hào)080605，上海通用藥業(yè)股份有限公司)。1.2動(dòng)物SD大鼠，雄性，體質(zhì)量4555 g，SPF級(jí)，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)0046490，許可證號(hào)：SCXK(粵)2008-0002，粵監(jiān)證字2008A020。1.3儀器LC-10A高效液相色譜儀，SPD-M10Avp光二極管陣列檢測器(

12、日本島津公司);Olympus全自動(dòng)生化分析儀(AU5421，日本奧林巴斯公司)，由南方醫(yī)院檢驗(yàn)科提供;Startorius(BS224S)萬分之一電子天平(德國賽多利斯公司)。1.4實(shí)驗(yàn)方法1.4.1醇提物的制備及含量測定參考文獻(xiàn)5-9制備姜黃生姜提取物。取姜黃、生姜各500 g粉碎，混合均勻，加生藥3倍量的70%()乙醇回流2次，時(shí)間分別為1.5 h、1.0 h，過濾，合并濾液，回收，濃縮制成干膏(每克干膏相當(dāng)于姜黃或生姜均為54 g)，以HPLC法對(duì)有效成分姜黃素進(jìn)行定量。1.4.2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1.4.2.1分組及給藥將SD大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組，陽性藥物組(己烯雌酚)，醇提物低、中、高劑量

13、組(共5組)，每組13只。正常對(duì)照組及己烯雌酚組均按20 mL·kg-1體質(zhì)量灌胃(ig)給予生理鹽水(NS)，陽性藥物組再按1 mg·kg-1體質(zhì)量皮下注射(sc)己烯雌酚，每周均3次;低、中、高劑量組分別按20 mL·kg-1體質(zhì)量ig給予醇提物(分別相當(dāng)于生藥8、22 、36 g·kg-1·d-1)。各組均自由飲水，攝食，連續(xù)3周(21 d)。1.4.2.2解剖、計(jì)算于第22天稱取大鼠體質(zhì)量，取血，測定總酸性磷酸酶(TAP)水平;隨后處死動(dòng)物，剖取前列腺腹葉、側(cè)葉、背葉及精囊腺、睪丸，分別稱取濕質(zhì)量，計(jì)算各臟器指數(shù)。1.4.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處

14、理采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(±s)表示，各組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有顯著性。2結(jié)果2.1HPLC法測定醇提物中姜黃素的含量2.1.1色譜條件參考文獻(xiàn)10-11擬定以下色譜條件。色譜柱：Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 m);流動(dòng)相：乙腈-4%()冰醋酸溶液(5050);流速：0.8 mL/min;柱溫：25 ;檢測波長：254 nm。2.1.2流動(dòng)相的選擇取姜黃素對(duì)照品適量，加甲醇制成0.1 mg/mL的溶液，精密量取10 L注入液相色譜儀，記錄色譜圖。分別以不同比例的流動(dòng)相進(jìn)樣，最終確定乙腈-4%()冰醋酸溶液比例為6040，在該條件下姜黃素的峰形較佳。2.1.3max的選擇利用二極管