生物選修1知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

1、.專題一課題 1 果酒和果醋的制作1 、發(fā)酵：通過(guò)微生物技術(shù)的培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過(guò)程。2 、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵 ·無(wú)氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式：出芽生殖4、在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。C 6H 12O 66O 2 6CO 2 6H 2O5、在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。C6H 12O 6 2C2H 5OH 6CO 26、 20左右 最適宜 酵母菌繁殖酒精 發(fā)酵 時(shí)一般將溫度控制在18 -257、在葡萄酒自然發(fā)酵的過(guò)程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在發(fā)酵過(guò)程中 ,隨著

2、酒精濃度的提高 ,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色 . 在缺氧 呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、果醋制作過(guò)程中，起作用的菌種是醋酸菌，該菌種是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物 ),代謝類型是異養(yǎng)需氧型 ,生殖方式為二分裂9 、當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。C2H5OH O2 CH 3COOH H2O在變酸的酒的表面觀察到的菌膜就是醋酸菌在液面繁殖而形成的10 、控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也

3、會(huì)引起醋酸菌死亡。醋酸菌最適生長(zhǎng)溫度為30 35，控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時(shí)間縮短，又減少雜菌污染的機(jī)會(huì)。有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。11 、實(shí)驗(yàn)流程：挑選葡萄沖洗 榨汁 酒精發(fā)酵 果酒（ 醋酸發(fā)酵 果醋）12 、酒精檢驗(yàn)：果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2 L ，再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L 的 H2SO 43滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3 滴，振蕩試管，觀察顏色;.13 、充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳的；出料口是用來(lái)取

4、樣的。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。開口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)該充氣口連接氣泵，輸入氧氣。14 利用上圖制作果酒、果醋時(shí)，在發(fā)酵過(guò)程中，每隔12h將瓶蓋擰松一次（注意，不能打開瓶蓋）目的是放出二氧化碳。當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)生酒精后，對(duì)裝置的處理是打開瓶蓋，蓋上一層紗布，進(jìn)行制葡萄醋的發(fā)酵15 防止發(fā)酵液被污染：榨汁機(jī)要清洗干凈，并晾干發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精消毒，或用洗潔精洗滌。裝入榨好的葡萄汁后，封閉充氣口。16 控制好發(fā)酵條件：將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶，留大約三分之一的空間。制葡萄酒的過(guò)

5、程中，將溫度嚴(yán)格控制在 18 25 ，時(shí)間控制在 10 到 20 天，可通過(guò)出料口發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。在制葡萄醋的過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在 30 35，時(shí)間控制在 7 到 8 天，并注意適時(shí)通過(guò)充氣口充氣。疑難解答（ 1）你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。（ 2）你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？如：要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并進(jìn)行酒精消毒；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。（ 3）制葡萄酒時(shí)，為什么要將溫度控制在18 25 ？制葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制

6、在;.30 35 ？溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。20 左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為30 35 ，因此要將溫度控制在30 35 。專題二課題 1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)·培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。·培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，固體培養(yǎng)基

7、應(yīng)用于微生物的分離和鑒定，半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。·培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水 、 無(wú)機(jī)鹽、 碳源、 氮源，此外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)Ph 、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH 、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH 調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH 調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無(wú)氧的條件·無(wú)菌技術(shù)·獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，要注意以下幾個(gè)方面：對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的

8、器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？答：無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。·消毒與滅菌的區(qū)別;.消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對(duì)于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌

9、方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。比較理化因素的作用強(qiáng)消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消項(xiàng)度滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生不能物滅菌強(qiáng)烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（ 1 ）方法步驟：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。稱量：牛肉膏比較黏稠，可以用玻棒挑取，放在稱量紙上稱量。牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮，稱取時(shí)動(dòng)作要迅速，稱后要及時(shí)蓋上瓶蓋。倒平板時(shí)要待培養(yǎng)基冷

10、卻至50 左右時(shí)，在酒精燈火焰附近進(jìn)行，等平板冷凝將平板倒置·倒平板操作的討論1. 培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到 50 左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn);.行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基

11、濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌（ 1 ）微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。（ 2 ）平板劃線法是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。（ 3 ）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。（ 4 ）用平板劃線法和稀釋

12、涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便于純化菌種。（ 5 ）平板劃線法操作步驟：將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。將試管口通過(guò)火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過(guò)火焰，并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)皿。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，;.從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。·平板劃

13、線操作的討論1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2. 在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3. 在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是

14、從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。（ 6 ）涂布平板操作的步驟：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8 10s 。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第 2 步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？提示：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌” 。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸

15、任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。;.菌種的保存（ 1 ）對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法。臨時(shí)保藏方法將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長(zhǎng)成后，將試管放入4 的冰箱中保藏。以后每3 6 個(gè)月，都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。缺點(diǎn)：這種方法保存的時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。（ 2 ）對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在 3mL 的甘油瓶中，裝入 1mL 甘油后滅菌。將 1mL 培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在 20 的冷凍箱中保存。疑難解答確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱

16、中保溫 1 2 天，無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。課題 2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕改蛩刈畛跏菑娜说哪蛞褐邪l(fā)現(xiàn)的篩選菌株（ 1 ）實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH 等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。（ 2 ）選擇性培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。;.（ 3 ）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)

17、根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如，培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物；加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目（ 1 ）測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法（活菌計(jì)數(shù)法）和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。（ 2 ）稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般設(shè)置3 5 個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30 300 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往

18、往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來(lái)表示。采用此方法的注意事項(xiàng)：選擇菌落數(shù)在30 300 的平板上計(jì)數(shù)。需培養(yǎng)計(jì)算出三個(gè)或三個(gè)以上的平板菌落求平均數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。每克樣品中的菌落數(shù)(C ÷V) ×M 其中， C 代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V 代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(ml) ， M 代表稀釋倍數(shù)。設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括實(shí)驗(yàn)方案，所需儀器、材料、用具和藥品，具

19、體的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。（ 1 ）土壤取樣：同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物，數(shù)量最大，種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長(zhǎng)。從富含有機(jī)物、潮濕、pH 7 的土壤中取樣。鏟去表層土，在距地表約 3 8cm 的土壤層取樣。;.（ 2 ）樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30300 之間、適于計(jì)數(shù)的平板。測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用10410510 6測(cè)定放線菌的數(shù)量，一般選用103104105測(cè)定真菌的數(shù)量，一般選用102103104（ 3 ）微生物的培養(yǎng)與觀察不

20、同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。細(xì)菌3037 12 天放線菌 2528 57 天 霉菌 2528 34 天每隔24 小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時(shí)間），同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色疑難解答（ 1）如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)？統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3 個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值每克樣品中的菌落數(shù)= （C/V ） *M 其中， C 代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V 代表

21、涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（ml ）， M 代表稀釋倍數(shù)專題三課題 1 菊花的組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程細(xì)胞分化：在生物個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過(guò)程。離體 的植物組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)了一段時(shí)間以后，會(huì)通過(guò)細(xì)胞分裂，形成愈傷組織，愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生 愈傷組織 的過(guò)程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過(guò)程叫做再分化 。再分化形成的試管苗，移栽到地;.里，可以發(fā)育成完整的植物體。植物細(xì)胞工程具有某種生物

22、全套遺傳信息的任何一個(gè)活細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整個(gè)體 的能力，即每個(gè)生物細(xì)胞都具有 全能性 。但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中并不表現(xiàn)出來(lái)，這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和空間條件下，通過(guò)基因的 選擇性表達(dá) ，構(gòu)成不同組織和器官。植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖 ；培育 脫毒 作物；制作 人工 種子；培育作物新品種 以及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn) 等。·細(xì)胞分化是一種持久性的變化，它有什么生理意義？使多細(xì)胞生物體中細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率。影響植物組織培養(yǎng)的條件1 材料：不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大。植物材料的選擇直接關(guān)系到試驗(yàn)的成敗。植物的種類、材料

23、的年齡和保存時(shí)間的長(zhǎng)短等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。一般來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。選取生長(zhǎng)旺盛嫩枝進(jìn)行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。2 營(yíng)養(yǎng)：離體的植物組織和細(xì)胞，對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基是 MS 培養(yǎng)基 ，其中含有的 大量元素 是 N 、 P、 S 、K、 Ca 、 Mg ，微量元素 是 Fe 、Mn 、 B 、 Zn 、 Cu 、 Mo 、 I、 Co ，有機(jī)物 有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等，常常需要添加植物激素。3 激素 ：植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素

24、是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)趨勢(shì)。在培養(yǎng)基中需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等植物激素，其 濃度、使用的先后順序、用量的比例 等都影響結(jié)果。;.生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果促根分化，先生長(zhǎng)素，有利于分裂但不分比值高時(shí)后細(xì)胞分裂素化抑芽形成先細(xì)胞分裂促芽分化，比值低時(shí)抑根形成素，細(xì)胞既分裂也分化后生長(zhǎng)素比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)+同時(shí)使用分化頻率提高4 環(huán)境條件： PH 、溫度、光等環(huán)境條件。不同的植物對(duì)各種條件的要求往往不同。進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，一般將pH 控制在5.8 左右，溫度控制在 1822 ，并且每日用日光燈照射12h

25、.4 、操作流程（ 1 ）配制 MS 固體培養(yǎng)基：配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液（培養(yǎng)基母液）。·使用時(shí)根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量，并加蒸餾水稀釋。·配制培養(yǎng)基：應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到 1000 毫升。·在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加 植物激素 。原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。·滅菌：采取的滅菌方法是 高壓蒸汽滅菌。（ 2 ）外植體的 消毒 外植體：用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。選取菊花莖段時(shí)，要取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷

26、洗后在流水下沖洗20min左右。用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70% 的酒精中搖動(dòng)23 次，持續(xù)67s ，立即將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗。取出后仍用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面水分，放入;.質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0.1% 的氯化汞溶液中 12min 。取出后，在無(wú)菌水中至少清洗3 次，漂洗消毒液。注意：對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力 。（ 3）接種：接種過(guò)程中插入外植體時(shí)形態(tài)學(xué)上端朝上，每個(gè)錐形瓶接種7 8 個(gè)外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似，操作步驟相同，而且都要求無(wú)菌操作。插入時(shí)應(yīng)注意方向，不要倒插。（ 4）培養(yǎng)：應(yīng)該放在無(wú)菌箱中進(jìn)行，并定期進(jìn)行消毒，保持適宜的溫度（1822 ）和光照（ 12h ）（ 5 ）移栽：栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時(shí)間，進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露天栽培。（ 6 ）栽培外植體在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)被污染，原因有外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。專題六課題 2胡蘿卜素的提取胡蘿卜素性質(zhì)：橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑