PBS緩沖液的配制方法

1、PBS 緩沖液配方不管是免疫組化，還是細胞培養(yǎng)中，常用到PBS 緩沖液，下面是常用配方，供大家參考。用于細胞培養(yǎng)的PBS需含有氯化鉀稱取 8g NaCl、0.2g KCl、1.44g NaJHPO4 和 0.24g KH2PO4,溶于 800ml蒸餾水中，用 HCl 調(diào)節(jié)溶液的pH 值至7.4， 最后加蒸餾水定容至1L，滅菌即可。0.01M PBS緩沖液稱取 NaCl?8g， KCl?0.2g， Na2HPO4?12H2O?3.63g,?KH2PO4?0.24，g 溶于900ml雙蒸水中，用鹽酸調(diào)pH值至7.4,加水定容至1L,常溫 保存?zhèn)溆?。一般免疫組化用PBS,主要用來清洗，都只包含Na2

2、HPO4?12H20(磷酸氫二鈉) 和NaH2PO4?2H20 (磷酸二氫鈉)兩種組分，母液的配制： ?0.2M?Na2HPO4:稱取？71.6g?NaHPO4-12H2O,溶于？1000ml冰0.2M?NaH2P04:稱?。?1.2g?NaH2PO4-2H2O,溶于 1000ml?zk各種濃度PB(pH=7.4)的配制：先 配 ?0.2M?PB?(pH=7.4 ，100ml) ： 取 19ml?0.2mol/L的？NaH2PO4, ?81ml?0.2mol/L?的？Na2HPO4,?可。然后？只需將0.2M?PB?(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當稀釋？即可，如：0.1M?PB (PH=7.4)

3、 ?:??？500ml?0.2M?PB,力口水稀釋至？1000ml?即 可。0.01M?PB?(PH=7.4):取 50ml?0.2M?PB,加水稀釋至？1000ml?即可。0.02M?PB? (PH=7.4):取 100ml?0.2?M?PB,力口水稀釋至？1000ml?即 可。 ?若需要？NaCL?的話，加入？NaCL?至0.9% (g/100ml)即可。？另：其它各種另？PH值的？0.2M?PB (100ml)配方？：pH?0.2M?NaH2PO(4 ml) ?0.2M?Na2HPO4( ml)5.7?93.5?6.55.8?92?8?5.9?90?106.0?87.7?12.3 6.1?

4、85?156.2?81.5?18.5 6.3?77.5?22.56.4?73.5?26.56.5?68.5?31.5 6.6?62.5?37.56.7?56.5?43.5 6.8?51?496.9?45?55 7.0?38?62 7.1?33?677.2?28?72 7.3?23?77 7.4?19ml?81ml7.5?16?84 7.6?13?877.7?10.5?0.5 7.8?8.5?91.5 7.9?7?93 8.0?5.3?94.7?關(guān)于磷酸緩沖溶液的一些問答PBS可以為三種溶液的英文縮寫，分別是1 .磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffered solution)、2 .磷

5、酸鹽緩沖鹽水(phosphate buffered saline)及3 .磷酸鹽緩沖鈉(phosphate buffered sodium),其配制方法不同，pH值不同，發(fā)揮的生物學作用亦不完全相同。如無特殊說明，生物學上常用的 PBS是中性磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffered solution)。無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水(PBS)(0O5Mol/L PH 7.2)NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g(如為 Na2HPO4 12H2O,則為 2.89g)KH2PO4 0.2g將上述試劑依次溶于1 000ml去離子水中，完全溶解后，115c高壓 滅菌10mi

6、n15min,存在4c冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細 胞分散劑以及洗滌細胞培養(yǎng)物。 常用的都是第二種。問題1:磷酸鹽緩沖鹽水(phosphate buffered sodium),為什么用第 三種或第一i種呢：這么多年以來我都以為PBS就是磷酸鹽緩沖溶液，其他兩種說 法的英語名稱常見到，不過我一直都以為他們是差不多的東西。不同 的漢語翻譯倒是第一次聽說。我們公司用的PBS有很多種，抗體組用的中和 PBS配方就比較 簡單，沒有K+離子， 只起到緩沖PH的作用；Na2HPO4+ KH2PO4 按照不同比例混勻，可以得到不同 PH的緩沖液，用于不同目的， 這個在分子生物學中用得很多；用于活細胞或

7、者細菌處理的，為了保持滲透壓，會加入其他的溶液，最常見的就是 NaCl和KCl調(diào)節(jié) 離子濃度。以上是個人的理解，歡迎批評。：問題2:既然抗體組的PBS是起到緩沖PH的作用，那加入80G的N ACL作用是什么？需要平衡滲透壓嗎？還有加入K離子的是不是因為細胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又沒有細胞，何來NA-K泵一 說啊？我覺得之所以這么配，其實就是對血清中緩沖環(huán)境的一種模擬罷 了，血清里面又沒有細胞，何來 NA-K泵一說?。繂栴}3:不加NACL會怎么樣??？多省錢啊在中和磷酸鹽緩沖液中，NaCl的主要作用應(yīng)當是保持一定的離 子濃度，以維持抗體的活性。在離子濃度過高或過低的情況下，蛋白 質(zhì)都會變性，抗體當然不例外。ps：哺乳類需用生理鹽水濃度是0.9%。稱取0.9克氯化鈉，溶解在少 量蒸儲水中，