黃酮類(lèi)化合物的研究進(jìn)展

1、2010年第2期0引言黃酮類(lèi)化合物廣泛存在于自然界。以前這類(lèi)化合物主要是指基本母核2-苯基色原酮（2-phenyl-chromone ）類(lèi)化合物，現(xiàn)在則是泛指2個(gè)苯環(huán)通過(guò)中央三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物（C 6-C 3-C 6），由于這類(lèi)化合物大多呈黃色或淡黃色，因此稱(chēng)為黃酮。此類(lèi)化合物在植物的組織內(nèi)大多與糖結(jié)合，以黃酮苷的形式存在，少部分以游離態(tài)存在。黃酮類(lèi)化合物廣泛存在于植物界，其生理活性的多樣性引起國(guó)內(nèi)外廣泛關(guān)注，研究進(jìn)展很快。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前已分離出的黃酮類(lèi)類(lèi)化合物已超過(guò)4000種，為天然酚類(lèi)化合物之首1。1黃酮類(lèi)化合物的基本結(jié)構(gòu)及功能黃酮類(lèi)化合物的基本結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。根據(jù)三碳鏈氧化程度、

2、B 環(huán)（苯基）聯(lián)結(jié)位置（2位或3位）以及三碳鏈?zhǔn)欠癯虱h(huán)狀等特點(diǎn)，可將天然黃酮類(lèi)化合物大致分為：黃酮類(lèi)（Flavones ）、黃酮醇類(lèi)（Flavonol ）、二氫黃酮類(lèi)（Flavanones ）、二氫黃酮醇類(lèi)（Flavanonols ）、異黃酮類(lèi)（Isoflavones ）、二氫異黃酮類(lèi)（Isoflavones ）、黃烷-3-醇（Flavan-3-ols ）、查爾酮類(lèi)（Chalcones ）、黃烷-3，4-二醇類(lèi)（Flavan-3,4-diols ）、二氫查爾酮類(lèi)（Dihydrochalcones ）、花色素類(lèi)（Anthoyanidins ）、雙苯吡酮類(lèi)（Xanthones ）。除了上述12種外

3、，還有橙酮類(lèi)、新黃烷類(lèi)化合物，這2種化合物在結(jié)構(gòu)上與以上12種稍有差異2，3。黃酮類(lèi)化合物因其廣泛的藥理活性和較低毒性，已成為國(guó)內(nèi)外天然藥物開(kāi)發(fā)利用研究的熱點(diǎn)。該類(lèi)化合物具有保護(hù)心血管、抗氧化、抗腫瘤、鎮(zhèn)咳祛痰、抗炎抗病毒、調(diào)節(jié)免疫力等功能。2黃酮類(lèi)化合物的提取2.1溶劑提取法目前，植物中總黃酮的提取一般采用溶劑提取法。通常用水、乙醇、甲醇或其他極性溶劑。熱水一般僅用于提取苷類(lèi)，但由于提取出的雜質(zhì)較多，故不常用；乙醇或是甲醇是提取黃酮類(lèi)化合物最常用的溶劑，高體積分?jǐn)?shù)的醇（90%95%）適合提取收稿日期：2009-10-09作者簡(jiǎn)介：董彩軍（1981-），女，河北人，在讀碩士，講師，研究方向：天

4、然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)。E-mail ：colour2005 。黃酮類(lèi)化合物的研究進(jìn)展董彩軍，李鋒（南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇南通226007）摘要：黃酮類(lèi)化合物具有廣泛的生理和藥理活性。這類(lèi)化合物已成為國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥界研究的熱點(diǎn)，是一類(lèi)極具有廣闊開(kāi)發(fā)前景的天然藥物。綜述了近幾年黃酮類(lèi)化合物在提取、含量測(cè)定、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定等方面的研究進(jìn)展。關(guān)鍵詞：黃酮類(lèi)化合物；提取；含量測(cè)定；分離純化；結(jié)構(gòu)鑒定中圖分類(lèi)號(hào)：R914.4文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A doi ：10.3969/jissn.1671-9646(X.2010.02.020The Research Progress of Flavonoids Compou

5、ndDong Caijun ，Li Feng（Nantong Agricultural Vocational Technology College ，Nantong ，Jiangsu 226007，China ）Abstract ：Flavonoids compound was a kind of compounds with wide development prospect which has important physiological and pharmacological activity. It has become a research hotspot in medicine

6、industry at home and abroad. The recent research progress on extraction ，content determination ，purification and structure elucidation of flavonoids were reviewed in this paper. Key words ：flavonoids compoud ；extraction ；content determination ；separation and purification ；structure identification圖1黃

7、酮類(lèi)化合物的基本結(jié)構(gòu)第2期(總第199期 農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊No.22010年2月Academic Periodical of Farm Products ProcessingFeb.文章編號(hào)：1671-9646(2010 02-0065-05農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊2010年第2期苷元，體積分?jǐn)?shù)60%的醇適合提取苷類(lèi)，提取次數(shù)為24次。可用加熱回流或冷浸法提取，然后將提取液濃縮，可得其粗提物。極性溶劑提取前或提取后，往往用石油醚或乙醚等處理，以除去油脂、色素等雜質(zhì)1。2.2堿溶酸沉法黃酮類(lèi)物質(zhì)一般易溶于堿性溶液（如碳酸鈉、氫氧化鈉、氫氧化鈣水溶液），但卻難溶于酸性溶液。這是由于黃酮

8、酚羥基呈酸性，而黃酮母核在堿性條件下開(kāi)環(huán)，形成2'-羥基查爾酮，極性增大而溶解。所以在提取的時(shí)候可用堿性溶液提取，再向提取液中加酸，黃酮類(lèi)化合物即可沉淀析出。此法簡(jiǎn)便易行，如蘆丁、橙皮甙、黃芩甙的提取都應(yīng)用此方法1。2.3吸附法4聚酰胺是良好的黃酮類(lèi)吸附劑，具有多個(gè)酰胺基，在水溶液中與酚羥基通過(guò)氫鍵結(jié)合吸附黃酮類(lèi)，一些不被吸附的化合物則隨水流出。將吸附有黃酮化合物的聚酰胺用不同濃度的乙醇、丙酮以及堿溶液洗脫，也可達(dá)到粗分的目的。除用聚酰胺外，也有用活性炭吸附的。將植物原料用水煎煮（或直接用甲醇提取），水煎液濃縮至漿狀，加入甲醇溶解、過(guò)濾，在濾液中分次加入活性炭，檢測(cè)至溶液中不含黃酮為止

9、，過(guò)濾。將吸附有黃酮的活性炭依次用沸甲醇、沸水洗脫，即得總黃酮。2.4超臨界流體萃取超臨界流體萃?。⊿FE 或SCFE ）是利用超臨界流體的溶解能力及其與密度的關(guān)系，即利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行的。在超臨界狀態(tài)下，隨著壓力和溫度發(fā)生微小的變化，流體的密度隨之發(fā)生改變，從而引起溶解度的變化。在食品領(lǐng)域，經(jīng)常采用的是超臨界CO 2流體萃取，因?yàn)镃O 2有適中的臨界溫度和臨界壓力（c =31.1；p c =713.92kPa ）。與傳統(tǒng)方法相比，SFE 具有無(wú)毒、無(wú)味、清潔、安全、實(shí)用，易與物料分離，有機(jī)試劑的污染小等優(yōu)點(diǎn)58。越來(lái)越多的研究者將其應(yīng)用于黃酮類(lèi)化合物的提取。在超臨

10、界流體萃取中，不僅可以用CO 2單一流體作為萃取劑萃取極性較低的游離黃酮類(lèi)或黃酮苷類(lèi)成分，還可以加入乙醇作夾帶劑，萃取極性較高的黃酮或黃酮苷類(lèi)成分911。Petra Kotnik 利用超臨界CO 2萃取從甘菊花中提取-紅沒(méi)藥醇、母菊素和母菊薁，與傳統(tǒng)的提取方法相比，超臨界CO 2萃取具有很多優(yōu)點(diǎn)12。2.5微波輔助提取法微波是指波長(zhǎng)為0.0011m ，頻率為300MHz300GHz 的電磁波，具有穿透力強(qiáng)、選擇性好、加熱效率高等特點(diǎn)。微波能將細(xì)胞壁和細(xì)胞膜破碎或溶解，以提高藥物有效成分或有效部位的提取率13。微波輔助提取技術(shù)（M AE ）是利用微波場(chǎng)的生物效應(yīng)、熱效應(yīng)及“擾動(dòng)”效應(yīng)來(lái)加速物質(zhì)的

11、擴(kuò)散溶解，有效地提高化合物的提取率和含量。微波場(chǎng)對(duì)類(lèi)黃酮提取的輔助作用，主要來(lái)源于微波對(duì)細(xì)胞膜的生物效應(yīng)。微波使細(xì)胞內(nèi)部溫度升高，壓力增大，當(dāng)壓力超過(guò)細(xì)胞壁的承受能力時(shí)，細(xì)胞壁破裂，位于細(xì)胞內(nèi)部的黃酮類(lèi)物質(zhì)從細(xì)胞中釋放出來(lái)，被周?chē)娜軇┤芙?，因熱量傳遞和質(zhì)量傳遞的方向是一致的，從而有助于黃酮類(lèi)物質(zhì)的快速溶出。此外，微波對(duì)極性的黃酮類(lèi)物質(zhì)可以產(chǎn)生熱效應(yīng)而使溫度迅速升高，擴(kuò)散系數(shù)增大，在固體表面的液膜產(chǎn)生一定的微觀“擾動(dòng)”，使其變薄，減少了黃酮類(lèi)物質(zhì)擴(kuò)散的阻力，從而提高了提取過(guò)程的傳質(zhì)速率和效果，起到了輔助提取的效果14。微波萃取是通過(guò)離子遷移和偶極子轉(zhuǎn)動(dòng)2種方式里外同時(shí)加熱，對(duì)體系中的不同組分進(jìn)

12、行選擇性加熱，使目標(biāo)組分直接從基體中分離的過(guò)程15。同傳統(tǒng)的溶劑回流提取法相比，M AE 選擇性高，可以提高收率及提取物純度，操作簡(jiǎn)單，快速高效，節(jié)省溶劑，污染小，質(zhì)量穩(wěn)定，可以避免長(zhǎng)時(shí)間高溫引起的樣品分解，特別適合處理熱敏性組分或從天然物質(zhì)中提取有效成分，可同時(shí)處理多份試樣，也特別適合處理大批量樣品1618。劉忠英等人采用微波技術(shù)提取刺五加總黃酮，大大縮短了提取時(shí)間，提取效率比索氏抽提法提高了40%，為該藥材的進(jìn)一步研究和合理利用提供了理論基礎(chǔ)19。張夢(mèng)軍等人采用微波輔助提取法和水提法提取甘草黃酮，提取率較高，提取時(shí)間大大縮短。這證明了微波輔助提取法適合甘草黃酮的提取20。目前，國(guó)內(nèi)外有一些

13、研究者認(rèn)為采用動(dòng)態(tài)微波輔助萃?。―M AE ），能使溶劑和物料充分接觸，萃取的更完全。Chen 等人采用動(dòng)態(tài)微波輔助萃取法從淫羊藿中萃取黃酮類(lèi)物質(zhì)，并用HPLC M S 分析了其中的成分21。2.6酶解法酶解法是指在黃酮類(lèi)物質(zhì)的提取過(guò)程中，通過(guò)加入酶發(fā)生轉(zhuǎn)糖反應(yīng)和酶解反應(yīng)，使產(chǎn)品黃酮類(lèi)物質(zhì)得率和含量大大提高的新興技術(shù)。在傳統(tǒng)的水（或醇溶液）提取中，只能提取以糖苷為中心的水溶性黃酮類(lèi)物質(zhì)，很多油溶性的黃酮類(lèi)物質(zhì)很難被提取出來(lái)，致使黃酮類(lèi)物質(zhì)得率過(guò)低。如果加入恰當(dāng)?shù)拿?，不僅可以將油溶性的黃酮類(lèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為易溶于水的糖苷類(lèi)物質(zhì)而有利于提取，而且還可通過(guò)酶反應(yīng)將植物組織分解，使提取傳質(zhì)阻力減小，利于提取

14、。另外酶解法也可將提取液中的雜質(zhì)（如淀粉、蛋白質(zhì)、果膠等）分解除去，從而簡(jiǎn)化后續(xù)分離純化工序。因此，酶解法在黃酮類(lèi)物質(zhì)提取工藝占主·66·2010年第2期導(dǎo)地位的工業(yè)化生產(chǎn)中，具有良好的可行性，并有利于保護(hù)黃酮類(lèi)物質(zhì)的活性，具有提取條件溫和、成本低、安全等優(yōu)點(diǎn)。此外，該技術(shù)對(duì)干燥或浸濕的原料皆適用14。王曉等人用纖維素酶和果膠酶的復(fù)合酶提取山楂葉和牡丹花中的黃酮類(lèi)物質(zhì)，提取率比常用的方法分別提高了16.9%和19.8%22，23。2.7超聲輔助提取法超聲波是在機(jī)械能或電能轉(zhuǎn)換成高頻振動(dòng)的過(guò)程中產(chǎn)生的、波長(zhǎng)大于20kHz 的聲波。超聲波主要是指頻率在2035kHz 的聲波24

15、。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，超聲技術(shù)已廣泛應(yīng)用于中草藥有效成分的提取中25。其理論依據(jù)是超聲具有空化、粉碎和攪拌等特殊作用，能破壞植物藥材的細(xì)胞，加速溶劑運(yùn)動(dòng)，使溶媒滲透到藥材細(xì)胞中，以便使藥材中的化學(xué)成分溶于溶媒之中，再通過(guò)分離提純，以獲得所需的化學(xué)成分26。與常規(guī)浸泡提取法的浸潤(rùn)、滲透、解吸、溶解、擴(kuò)散、置換等過(guò)程相比，超聲空化作用加快了提取速度，縮短了提取時(shí)間，進(jìn)而提高了天然產(chǎn)物中活性成分的提取率27。該法具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、提取時(shí)間短、產(chǎn)率高和無(wú)需加熱等優(yōu)點(diǎn)，在工業(yè)生產(chǎn)中具有廣闊的應(yīng)用前景25。郭孝武用超聲輔助法提杜仲葉中總黃酮物質(zhì)，結(jié)果表明，超聲能使葉肉粉碎，細(xì)胞壁破裂，加速葉片中

16、總黃酮類(lèi)物質(zhì)成分向溶劑中溶解28。他還用超聲輔助法提取淫羊藿葉，結(jié)果表明，藥用植物淫羊藿葉經(jīng)超聲提取后，超聲振動(dòng)的作用不但清洗了葉表面，而且使葉表面肉質(zhì)遭到破壞，細(xì)胞破裂，造成細(xì)胞損傷，從而提高了化學(xué)成分的提取率29。3黃酮含量的測(cè)定黃酮含量的測(cè)定方法有紫外分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜法、紙色譜PC 和薄層色譜TLC 法、熒光測(cè)定法、原子吸收光譜法、近紅外漫反射光譜法、共振散射光譜法、薄層掃描法和單掃示波極譜法等，其中最常用的就是紫外分光光度法和高效液相色譜法，其他方法使用頻率不高。采用紫外分光光度法的儀器設(shè)備比較簡(jiǎn)單，操作方便快速，且準(zhǔn)確性能達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求，所以廣泛應(yīng)用于總黃酮含量的測(cè)

17、定。高效液相色譜法（HPLC ）具有分離效果好、準(zhǔn)確性好、分析速度快，以及儀器自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，尤其適合于揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大，以及對(duì)離子型化合物的分析，已廣泛用于對(duì)天然產(chǎn)物的分析。HPLC 法已成為中草藥、食品化學(xué)成分或功能因子的純度鑒定、含量測(cè)定和質(zhì)量監(jiān)控的常用手段。采用HPLC 法分析黃酮類(lèi)化合物通常使用反相C 18色譜柱，這是由于黃酮分子中存在酚羥基，流動(dòng)相中加入少量的酸可改善其峰形30。Zhang Yu 等人31利用反相C 18色譜柱DAD 檢測(cè)器，同時(shí)測(cè)定加入抗氧化劑AOB 的食物中4種黃酮成分葒草素、異葒草素、牧荊素、異牡荊素的含量。色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是一種新興起的檢測(cè)

18、手段，它是以色譜方法分離，以質(zhì)譜作為檢測(cè)（或用質(zhì)譜進(jìn)一步分離，再用質(zhì)譜檢測(cè)）的分離方法。這類(lèi)方法具有高分離和高分辨能力，靈敏度高（檢測(cè)下限可以達(dá)到pg 級(jí)或ng 級(jí)），應(yīng)用范圍廣，分析速度快等特點(diǎn)。Carmona T P 32等人應(yīng)用LC DAD M S/MS方法分析研究了不同產(chǎn)地的藏紅花，發(fā)現(xiàn)了5種以山奈酚為苷元的黃酮類(lèi)化合物。Termentzi 等人33用LC DAD MS （ESI +）測(cè)定花楸果生長(zhǎng)過(guò)程中5個(gè)階段的酚類(lèi)化合物含量，包括安息香酸、苯基丙酸和類(lèi)黃酮。4黃酮類(lèi)化合物的分離與純化4.1溶劑萃取利用黃酮類(lèi)化合物的極性，以及雜質(zhì)極性的不同，選用不同溶劑進(jìn)行萃取，可達(dá)到精制、純化、分

19、離的目的。用水或乙醇提取得到的浸出物成分復(fù)雜，往往不能直接析出黃酮類(lèi)化合物，需要盡量蒸去溶劑，然后用不同極性的溶劑進(jìn)行相繼萃取。如用石油醚可除去葉綠素和胡蘿卜素等脂溶性雜質(zhì)；用乙醚可萃取出苷元；用乙酸乙酯可萃取出苷，從而分離黃酮苷及苷元。乙醚萃取液回收后，再用極性小的溶劑分步結(jié)晶，可進(jìn)一步分離出不同極性的苷元1。4.2柱色譜法2，4分離黃酮類(lèi)化合物常用的柱色譜吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺、纖維素粉、葡聚糖凝膠、活性炭、氧化鋁、氧化鎂和硅藻土等。4.2.1硅膠柱色譜此法應(yīng)用范圍最廣，主要適于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化（或乙?；┑狞S酮及黃酮醇類(lèi)。分離黃酮苷元時(shí)，可用氯仿甲醇混合溶

20、劑作流動(dòng)相；分離黃酮苷時(shí)，可用氯仿甲醇水或乙酸乙酯丙酮水作流動(dòng)相。4.2.2聚酰胺柱色譜對(duì)黃酮類(lèi)化合物的分離來(lái)說(shuō)，聚酰胺是較為理想的吸附劑。其吸附強(qiáng)度主要取決于黃酮類(lèi)化合物分子中羥基的數(shù)目與位置，以及溶劑與黃酮類(lèi)化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的大小。4.2.3葡聚糖凝膠柱色譜在葡聚糖凝膠（Sephadex-gel ）分離黃酮類(lèi)化合物的過(guò)程中，主要用2種型號(hào)的凝膠：Sephadex-G董彩軍，等：黃酮類(lèi)化合物的研究進(jìn)展·67·農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊2010年第2期型；Sephadex LH 20型。分離游離黃酮時(shí)，主要靠吸附作用，分子中的游離酚羥基越多，吸附程度越大

21、；分離黃酮苷時(shí)，主要利用分子篩的作用。在洗脫時(shí)黃酮苷類(lèi)大體上按分子量由大到小的順序流出柱體。4.2.4活性炭柱色譜活性炭容易得到，價(jià)格便宜，在水中吸附力大，在有機(jī)溶劑中吸附力?。粚?duì)大分子化合物的吸附力大于對(duì)小分子化合物的吸附力。主要用于對(duì)苷類(lèi)的精制。4.2.5氧化鋁柱色譜氧化鋁的吸附作用很強(qiáng)，一般只用于甲基化黃酮、無(wú)鄰二羥基或3-位、5-位無(wú)羥基的黃酮化合物的分離。4.3梯度pH 值萃取法梯度pH 值萃取法適合于對(duì)酸性強(qiáng)弱不同的游離黃酮類(lèi)化合物的分離。根據(jù)黃酮類(lèi)化合物酚羥基數(shù)目及位置的不同，其酸性也不同的性質(zhì)，可以將混合物溶于有機(jī)溶劑（如乙醚）后，依次用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的NaHCO 3（萃取出7

22、,4'-二羥基黃酮），5%的Na 2CO 3（萃取出7-羥基黃酮或4'-羥基黃酮），0.2%NaOH （萃取出一般酚羥基黃酮）及4%的NaOH 水溶液（萃取出5-羥基黃酮）分步萃取，從而達(dá)到分離的目的1。4.4高效液相色譜法（HPLC 法）HPLC 已經(jīng)廣泛用于對(duì)黃酮類(lèi)化合物的分離純化以及定量和定性分析上。正相固定相的HPLC 主要用于分離無(wú)羥基、甲基化或乙?；狞S酮；反相固定相（如C 18）的應(yīng)用最為普遍。采用甲醇水乙酸（或磷酸緩沖液）或乙腈水作流動(dòng)相，既可用于黃酮苷元的分離，又適應(yīng)于黃酮苷的分離4。采用制備柱和半制備柱來(lái)分離純化黃酮單體，是目前最先進(jìn)和有效的方法。如果分離條

23、件選擇的適當(dāng)，可一次性分離多種單體物質(zhì)。4.5高速逆流色譜法HSCCC 是一種連續(xù)高效的液液分配色譜技術(shù)。它利用兩相溶劑體系，在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單相流體動(dòng)力學(xué)平衡，使相對(duì)移動(dòng)的互不相溶的2個(gè)相（固定相和由恒流泵連續(xù)輸入的流動(dòng)相）在螺旋管中實(shí)現(xiàn)高效的接觸、混合、分配和傳遞，并按照分配系數(shù)的不同，依次洗脫而達(dá)到分離的目的34。由于不用固態(tài)支撐體或載體來(lái)保留固定相，因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活或變性等問(wèn)題，不僅能夠全部回收樣品，而且回收的樣品更能反映其本來(lái)的特性，特別適用于對(duì)天然生物活性成分的分離。相對(duì)于傳統(tǒng)的固液柱色譜技術(shù)，HSCCC 法具有適用范圍廣、操作靈活、

24、高效、快速、制備量大、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)35。目前，HSCCC 法已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于對(duì)天然產(chǎn)物、抗生素、食品、無(wú)機(jī)物等物質(zhì)的分離與純化36中，在中藥有效成分的分離開(kāi)發(fā)方面顯示出強(qiáng)大的優(yōu)勢(shì)，主要是對(duì)黃酮、生物堿、苷類(lèi)、萜類(lèi)、多糖、醌類(lèi)等成分的分離37。Min Gao 等人采用2個(gè)溶劑體系：正己烷、乙酸乙酯、甲醇、乙酸、水；正己烷、正丁醇、乙腈、質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的HCl ，從燈盞細(xì)辛中分離純化得到了純度為95.6%的黃芩素38。5黃酮的結(jié)構(gòu)鑒定5.1化學(xué)方法用化學(xué)方法是將復(fù)雜的分子降解為幾個(gè)穩(wěn)定的碎片，碎片一般能通過(guò)一些官能團(tuán)的顯色反應(yīng)、理化常數(shù)的測(cè)定、元素的分析或可合成證明的簡(jiǎn)單化合物，然后按降解反應(yīng)的

25、原理推導(dǎo)出原化合物可能的結(jié)構(gòu)。這種方法耗時(shí)，操作繁瑣，需要大量的分析樣品，對(duì)于特別復(fù)雜的化合物很難得出其準(zhǔn)確的結(jié)構(gòu)。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，各種科學(xué)儀器的發(fā)明和普及，化學(xué)法測(cè)定黃酮類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)已基本上讓位于各種光譜和波譜的綜合分析，化學(xué)法在確定化合物的類(lèi)型上僅起到指導(dǎo)性的作用4。5.2波譜技術(shù)波譜技術(shù)主要包括紫外可見(jiàn)光譜（UV VIS ）、紅外光譜（IR ）、質(zhì)譜（MS ）、核磁共振氫譜（1H NMR ）、核磁共振碳譜（13C NM R ）、二維核磁共振譜（2D-NMR ）等方法4。這些方法成功地解決了含糖數(shù)目較多的黃酮苷中苷鍵的構(gòu)型，以及糖與糖之間的連接順序和連接位置等一系列結(jié)構(gòu)確定中的棘手問(wèn)

26、題。結(jié)合單晶X 射線(xiàn)衍射法可以獲取化合物分子中各原子的坐標(biāo)，得到了化合物中各原子空間的結(jié)合位置，為確定分子結(jié)構(gòu)提供了直觀可靠的立體圖形39。參考文獻(xiàn)：楊紅. 中藥化學(xué)實(shí)用技術(shù)M. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2004. 劉湘，汪秋安. 天然產(chǎn)物化學(xué)M. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.Bent H ，Havsteen. The biochemistry and medical signifi cance of the flavonoids J. Pharmacology &Therapeutics ，2002，96：67-202.陳業(yè)高. 植物化學(xué)成分M. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2004.Q

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