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血液非蛋白氮的測(cè)定血液非蛋白氮的測(cè)定內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心制作人：王瑞剛實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)試劑實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)原理 血液中除蛋白質(zhì)外的含氮物質(zhì)稱為非蛋白氮。主要包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、谷胱甘肽、氨基酸、核苷酸等蛋白質(zhì)和核酸的代謝物及代謝產(chǎn)物。 非蛋白氮物質(zhì)不被蛋白質(zhì)沉淀劑所沉淀。因此，以蛋白沉淀劑去除蛋白質(zhì)，制得的無(wú)蛋白濾液即含有非蛋白氮物質(zhì)。鎢酸是主要的蛋白質(zhì)沉淀劑。將無(wú)蛋白濾液內(nèi)的非蛋白氮物質(zhì),經(jīng)強(qiáng)酸消化后轉(zhuǎn)變?yōu)榱蛩徜@,加入奈氏試劑呈現(xiàn)棕黃色,其含量與經(jīng)同樣加入奈氏試劑之標(biāo)準(zhǔn)銨鹽溶液比色測(cè)定之。實(shí)驗(yàn)試劑1消化液2標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨3奈氏試劑4 30%雙氧水實(shí)驗(yàn)步驟1以草酸鉀抗凝全血，以鎢酸法制備1：10無(wú)蛋白濾液。2取3支硬質(zhì)大試管按表操作 混勻后，在波長(zhǎng)420nm處進(jìn)行比色，以空白管調(diào)零，讀 取各管光密度。3計(jì)算測(cè)定管光密度 標(biāo)準(zhǔn)管光密度 0.015 100 0.05 = 血液非蛋白氮mg%試管試劑空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管血濾液（ml）標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液（ml）消化液（ml）0.10.50.10.50.1將測(cè)定管加熱消化，待管中充滿白煙，官底液體由黑轉(zhuǎn)為透明為止（可加雙氧水1滴以加速消化） 蒸餾水（ml）奈

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