色譜組基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)

1、中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)中檢集團(tuán)理化檢測(cè)有限公司CCIC PHYSICAL&CHEMICAL色譜組基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)色譜組基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)目 錄 索式提取(Soxhlet Extraction，SE)前處理 超聲提取(Ultrasonic Extraction，USE) 微波提取(Microwave Extraction，ME) 氣相色譜儀(GC)儀器分析 氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS) 液相色譜儀 離子色譜儀(IC)高效液相色譜儀(HPLC) 中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)前處理-索式提取Soxhlet Extraction 利用溶劑回流和虹吸原理，使固體物質(zhì)每一次都能為純的溶劑所萃取。萃取前應(yīng)先將固體物

2、質(zhì)研磨細(xì)，以增加液體浸溶的面積。然后將固體物質(zhì)放在濾紙?zhí)變?nèi)，放置于提取管中。當(dāng)溶劑加熱沸騰后，蒸汽通過(guò)導(dǎo)氣管上升，被冷凝為液體滴入提取器中。當(dāng)液面超過(guò)虹吸管最高處時(shí)，即發(fā)生虹吸現(xiàn)象，溶液回流入燒瓶，因此可萃取出溶于溶劑的部分物質(zhì)。就這樣利用溶劑回流和虹吸作用，使固體中的可溶物富集到燒瓶?jī)?nèi)。 優(yōu)點(diǎn)：提取效率高 缺點(diǎn)：提取的時(shí)間較長(zhǎng) 消耗溶劑較多 操作略微繁瑣中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)前處理-超聲提取Ultrasonic Extraction 利用超聲波具有的機(jī)械效應(yīng)，空化效應(yīng)和熱效應(yīng)，通過(guò)增大介質(zhì)分子的運(yùn)動(dòng)速度、增大介質(zhì)的穿透力，使固體樣品不斷與溶劑充分接觸，從而使固體樣品在溶劑中容易分散、乳化，加速了樣

3、品在溶劑中的溶解速度。優(yōu)點(diǎn)：提取效率高 提取時(shí)間短 提取溫度低 適用性廣 設(shè)備簡(jiǎn)單缺點(diǎn)：超聲波能量分布不均勻 隨時(shí)間變化超聲波能量要衰減中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)前處理-微波提取Microwave Extraction 利用微波能強(qiáng)化溶劑萃取效率，即在密閉容器中用微波加熱樣品及有機(jī)溶劑，將待測(cè)有機(jī)物組分從樣品基體中提取出來(lái)的一種方法。優(yōu)點(diǎn)：加熱均勻，且熱效率較高 試劑用量少，節(jié)能，污染小 萃取效率高，省時(shí) 選擇性較好缺點(diǎn)：設(shè)備較為昂貴中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)前處理-其他u 頂空法(Head Space，HS)u 吹掃捕集法(Purge and Trap，PT)u 熱脫附法(Thermal Desorption，

4、TD)u 固相微萃取(Solid Phase Extraction，SPE)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)1、色譜的起源：、色譜的起源：俄國(guó)植物學(xué)家茨維特于1906年首先提出。將植物葉的石油醚浸出液倒入填充滿碳酸鈣的玻璃管，并使用純的石油醚淋洗，植物葉中的不同色素在玻璃管內(nèi)得到分離，形成不同顏色的譜帶。 隨著色譜技術(shù)的發(fā)展，色譜對(duì)象已不再限于有色物質(zhì)，但“色譜”一詞卻沿用下來(lái)。起分離作用的柱體稱“色譜柱”，固定在柱內(nèi)的填充物稱“固定相”，柱內(nèi)流動(dòng)的流體稱“流動(dòng)相”中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)2、色色譜分離基本原理：譜分離基本原理： 組分在固定相和流動(dòng)相間發(fā)生的吸附、脫附或溶解、揮發(fā)的過(guò)程叫做分

5、配分配。色譜法是利用不同物質(zhì)在流動(dòng)相流動(dòng)相和固定相固定相兩相間的分配系數(shù)分配系數(shù)不同，當(dāng)兩相做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，試驗(yàn)中各組分就在兩相中經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配，從而使原來(lái)分配系數(shù)僅有微小差異的各組分能夠彼此分離。3、色譜流出曲線及有關(guān)術(shù)語(yǔ)、色譜流出曲線及有關(guān)術(shù)語(yǔ)（1）基線：只有流動(dòng)相通過(guò)檢測(cè)器時(shí)響應(yīng)信號(hào)的記錄即為基線。（2）保留值：試樣中各組分在色譜柱內(nèi)滯留的程度，通常用時(shí)間或者相應(yīng)的載氣體積來(lái)表示。（3）區(qū)域?qū)挾龋杭瓷V峰寬度。儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)4、色譜柱效能、色譜柱效能 色譜柱的分離效能常根據(jù)一對(duì)難分離組分的分離情況來(lái)判斷。如下圖所示，左邊的圖兩個(gè)峰嚴(yán)重重疊，分離不完全；右邊的

6、圖兩個(gè)峰間有一定距離，分離完全。可見(jiàn)要使兩組分分離，兩組分的保留值要有足夠的差別，而且要求峰形較窄。 組分保留值保留值的大小由組分在兩相中的分配系數(shù)分配系數(shù)決定，受色譜過(guò)程的熱力學(xué)熱力學(xué)因素因素控制，而色譜峰的寬窄色譜峰的寬窄則由色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)因素動(dòng)力學(xué)因素控制。儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)5、色譜定性方法、色譜定性方法 色譜的定性能力相對(duì)較弱，目前主要是和質(zhì)譜、紅外光譜、核磁共振等技術(shù)進(jìn)行聯(lián)用，將色譜的強(qiáng)分離能力和光譜分析的強(qiáng)鑒定能力相結(jié)合。（1）利用保留值定性：）利用保留值定性：根據(jù)不同物質(zhì)在一定的色譜條件下的保留值來(lái)進(jìn)行定性。該方法局限性較大，結(jié)

7、果受色譜條件影響較大。（2）與其它方法聯(lián)用）與其它方法聯(lián)用定性：定性：質(zhì)譜、紅外光譜、核磁共振等儀器的鑒定能力很強(qiáng)，但不適合復(fù)雜混合物的定性鑒定，但如果經(jīng)過(guò)色譜儀的分離后再進(jìn)行鑒定，則能夠得到很好的效果。其中，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）是目前解決復(fù)雜未知物定性問(wèn)題的有效工具之一，已建成大量化合物的標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)，可用于數(shù)據(jù)的快速處理和檢索，給出未知試樣各色譜峰的分子結(jié)構(gòu)信息。后面將專門(mén)介紹安捷倫科技的GC-MS聯(lián)用儀。中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)6、色譜定量方法、色譜定量方法 色譜常見(jiàn)的定量方法主要有歸一化法、內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法三種。在這三種方法中都涉及到一個(gè)概念：定量校正因子（也

8、叫響應(yīng)因子，RF）質(zhì)量： 100 100 200面積： 3000 2500 4000 引入引入RF的原因：校正檢測(cè)的原因：校正檢測(cè)器的響應(yīng)。相同質(zhì)量的不同物器的響應(yīng)。相同質(zhì)量的不同物質(zhì)通過(guò)檢測(cè)器時(shí)峰面積不等。質(zhì)通過(guò)檢測(cè)器時(shí)峰面積不等。 中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)（1）歸一化法）歸一化法 當(dāng)試樣中所有組分都能夠流出色譜柱，且在色譜圖上都顯示色譜峰時(shí)，可用此法計(jì)算其組分含量。假定假定所有組分都所有組分都流出；所有流出；所有組分都被檢測(cè)到組分都被檢測(cè)到優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)單、快速的定量簡(jiǎn)單、快速的定量過(guò)程；進(jìn)過(guò)程；進(jìn)樣量不要求嚴(yán)格樣量不要求嚴(yán)格缺點(diǎn)缺點(diǎn)所有組分峰都要所有組分峰都要流出；流出；需測(cè)量所有的需測(cè)量所有的組分

9、；組分；必須校正所有的必須校正所有的峰峰儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)（2）外標(biāo)法）外標(biāo)法 外標(biāo)法是以待測(cè)成分的對(duì)照品作為對(duì)照物質(zhì)，相對(duì)比較以求得供試品含量。外標(biāo)法在操作上可分為校正曲線法校正曲線法和校正因子求算法校正因子求算法。校正曲線法校正曲線法 取純物質(zhì)配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用色譜儀作出峰面積和濃度的關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線直接查出待測(cè)組分濃度。優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)操作和計(jì)算簡(jiǎn)便，無(wú)需操作和計(jì)算簡(jiǎn)便，無(wú)需所有峰都能被檢測(cè)到所有峰都能被檢測(cè)到進(jìn)樣量必須準(zhǔn)確，儀器要求具有良好的穩(wěn)定性進(jìn)樣量必須準(zhǔn)確，儀器要求具有良好的穩(wěn)定性儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)（3）內(nèi)標(biāo)法）

10、內(nèi)標(biāo)法 當(dāng)試樣中所有的組分不能全部出峰，或者試樣中各組分含量差異很大，或僅需測(cè)定其中某個(gè)或某幾個(gè)組分時(shí)，可用此法。注：內(nèi)標(biāo)法中常以內(nèi)標(biāo)物為基準(zhǔn)，即注：內(nèi)標(biāo)法中常以內(nèi)標(biāo)物為基準(zhǔn)，即RF（內(nèi)）（內(nèi)）=1.0優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)進(jìn)樣量和操作條件不嚴(yán)格要求；只對(duì)欲分析的組分峰做校正必須加一個(gè)組分進(jìn)到樣品，易增加面積測(cè)量誤差。儀器分析-色譜分析理論基礎(chǔ)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-氣相色譜儀(GC)1、氣相色譜法的特點(diǎn)和應(yīng)用、氣相色譜法的特點(diǎn)和應(yīng)用 氣相色譜法是以氣體為流動(dòng)相的色譜分析法，它具有高效、快速、靈敏。應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)。氣相色譜法適合分離、分析的試樣應(yīng)該是可揮發(fā)、熱穩(wěn)定的，沸點(diǎn)一般不超過(guò)500。在目前

11、已知的化合物中，15%20%可用氣相色譜直接分析，該方法不適合分析難揮發(fā)物質(zhì)和熱不穩(wěn)定物質(zhì)。2、氣相色譜分析流程、氣相色譜分析流程 一般的氣相色譜儀由五個(gè)部分組成：載氣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜載氣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、柱、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)系統(tǒng)系統(tǒng)。載氣載氣進(jìn)樣口進(jìn)樣口色譜柱色譜柱檢測(cè)器檢測(cè)器數(shù)據(jù)系統(tǒng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-氣相色譜儀(GC)3、色譜柱簡(jiǎn)介、色譜柱簡(jiǎn)介 氣相色譜分離是在色譜柱中完成的，因此色譜柱是色譜儀的核心部件。色譜柱主要分為填充柱和毛細(xì)管柱兩大類，目前氣相色譜主要使用的是毛細(xì)管柱。氣相色譜柱中固定相是影響組分分配系數(shù)的主要因素，固定相可以是固體（即氣固色譜）或

12、者液體（即氣液色譜）。中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-氣相色譜儀(GC)4、氣相色譜檢測(cè)器簡(jiǎn)介、氣相色譜檢測(cè)器簡(jiǎn)介 檢測(cè)器的作用是將經(jīng)色譜柱分離后的各組分按其特性及含量轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào)，在一定的范圍內(nèi)，信號(hào)的大小與進(jìn)入檢測(cè)器的物質(zhì)的質(zhì)量（或濃度）成正比。 檢測(cè)器種類雖然多，但常用的僅四五種，其中尤以熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）和氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）應(yīng)用最多。熱導(dǎo)檢測(cè)器氫火焰檢測(cè)器中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)符號(hào)TCDFIDECDFPDNPDMSD檢測(cè)方法物理常數(shù)法氣相電離法氣相電離法光度法氣相電離法質(zhì)譜法工作原理熱導(dǎo)率差異火焰電離化學(xué)電離分子發(fā)射熱表面電離電離與質(zhì)量色散結(jié)合類型濃度型通用型非破壞性質(zhì)量型準(zhǔn)通用

13、型破壞性質(zhì)量型選擇型非破壞性濃度型選擇型破壞性質(zhì)量型選擇型破壞性質(zhì)量選擇型靈敏度2500mv.ml/mg10-11g/s10-13g/s硫10-10g/s磷10-11g/s氮510-11g/s磷210-12g/s線形范圍104106102-104硫102磷103-104105105應(yīng)用范圍所有化合物有機(jī)化合物電負(fù)性化合物硫、磷化合物氮、磷化合物、農(nóng)藥殘留所有化合物(結(jié)構(gòu)檢定)常用檢測(cè)器中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)5、氣相色譜操作條件的選擇、氣相色譜操作條件的選擇（1）載氣的選擇：載氣的選擇：一般為惰性、干燥、純凈的氣體，并考慮檢測(cè)器的種類，TCD常用He（或H2），F(xiàn)ID常用N2，GC常用N2，GC-MS

14、聯(lián)用時(shí)常用He。（2）柱溫的選擇：柱溫的選擇：柱溫的選擇應(yīng)使難分離的兩組分達(dá)到預(yù)期的分離效果，一般柱溫應(yīng)比試樣中各組分的平均沸點(diǎn)低2030；對(duì)于沸點(diǎn)范圍較寬的試樣，宜采用程序升溫。（3）進(jìn)樣量和進(jìn)樣時(shí)間：進(jìn)樣量和進(jìn)樣時(shí)間：進(jìn)樣量太少會(huì)導(dǎo)致無(wú)法檢出、太多會(huì)導(dǎo)致色譜峰重疊，液體進(jìn)樣約在0.1L5L，氣體進(jìn)樣約在0.1ml10ml。為防止影響分離效果，進(jìn)樣速度必須快，一般在1秒內(nèi)完成。（4）氣化溫度的選擇：氣化溫度的選擇：氣化溫度一般較柱溫高3070，與試樣的平均沸點(diǎn)相近，但氣化溫度也不宜過(guò)高，以防試樣分解。儀器分析-氣相色譜儀(GC)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)一一、質(zhì)譜法基

15、本原理、質(zhì)譜法基本原理 以某種方式使有機(jī)分子電離、碎裂，然后按質(zhì)荷比大小把各種離子分離，檢以某種方式使有機(jī)分子電離、碎裂，然后按質(zhì)荷比大小把各種離子分離，檢測(cè)它們的強(qiáng)度，并排列成譜，稱為質(zhì)譜法。測(cè)它們的強(qiáng)度，并排列成譜，稱為質(zhì)譜法。質(zhì)譜法是分離和記錄離子化的原子或分子的方法。它能夠提供有機(jī)物的相對(duì)分子質(zhì)量、分子式、所含結(jié)構(gòu)單元及連接次序等信息，是有機(jī)物結(jié)構(gòu)分析的重要工具之一。中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè) 上圖為苯酚的電子轟擊質(zhì)譜圖，譜圖的縱坐標(biāo)為離子相對(duì)強(qiáng)度（豐度），橫坐標(biāo)是離子的質(zhì)荷比。有機(jī)分子經(jīng)電子轟擊后，將產(chǎn)生多種離子，其中最重要的是分子離子分子離子、同位素離子同位素離子和碎片離子碎片離子，它們的質(zhì)

16、荷比及相對(duì)強(qiáng)度可提供有機(jī)物豐富的結(jié)構(gòu)信息。二二、質(zhì)譜分析簡(jiǎn)介、質(zhì)譜分析簡(jiǎn)介儀器分析-氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)1、分子離子、分子離子 分子失去一個(gè)價(jià)電子后生成的正離子成為分子離子。分子離子是質(zhì)譜圖中最重要的離子，因?yàn)椋海?）它的質(zhì)荷比就等于化合物的相對(duì)分子質(zhì)量；）它的質(zhì)荷比就等于化合物的相對(duì)分子質(zhì)量；（2）它的相對(duì)強(qiáng)度表明分子的穩(wěn)定程度，由此可推測(cè)化合物的類型；（3）譜圖中所有碎片離子都是由分子離子直接或間接碎裂產(chǎn)生的。2、同位素離子、同位素離子 組成有機(jī)化合物的常見(jiàn)元素中，除了個(gè)別元素外，基本都有一個(gè)以上的穩(wěn)定的同位素，它們的相對(duì)豐度是恒定的。根據(jù)分子離子和它的同位素離子質(zhì)量根

17、據(jù)分子離子和它的同位素離子質(zhì)量和相對(duì)強(qiáng)度可以推測(cè)有機(jī)物中含有元素的種類和原子個(gè)數(shù)。和相對(duì)強(qiáng)度可以推測(cè)有機(jī)物中含有元素的種類和原子個(gè)數(shù)。3、碎片離子、碎片離子 有機(jī)分子被高能電子轟擊碎裂后產(chǎn)生的帶正電的碎片叫碎片離子。每一個(gè)每一個(gè)有機(jī)分子都有獨(dú)特的、可以重復(fù)的碎裂方式，不同的分子得到不同的質(zhì)荷比和有機(jī)分子都有獨(dú)特的、可以重復(fù)的碎裂方式，不同的分子得到不同的質(zhì)荷比和相對(duì)強(qiáng)度的碎片離子，所以可以把它們區(qū)別開(kāi)。相對(duì)強(qiáng)度的碎片離子，所以可以把它們區(qū)別開(kāi)。儀器分析-氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)調(diào)節(jié)閥分子篩捕集阱 氧氣捕集阱載氣色譜柱MSDGC三、安捷倫三、安捷

18、倫GCMS系統(tǒng)系統(tǒng)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)安捷倫安捷倫MS系統(tǒng)簡(jiǎn)介系統(tǒng)簡(jiǎn)介真空系統(tǒng)+.e+離子源電離分子四極桿過(guò)濾質(zhì)量檢測(cè)器測(cè)量響應(yīng)+ + +- -檢測(cè)器離子聚焦高能打拿極電子倍增器電子正離子信號(hào)輸出中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)1、高效液相色譜法的特點(diǎn)和應(yīng)用、高效液相色譜法的特點(diǎn)和應(yīng)用 高效液相色譜法是以液體為流動(dòng)相的色譜分析法，它在經(jīng)典色譜理論的基礎(chǔ)上，采用了高壓泵、化學(xué)鍵合固定相高效分離柱、高靈敏專用檢測(cè)器等實(shí)驗(yàn)技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。適用于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機(jī)介質(zhì)溶液)，不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，對(duì)分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的樣品及高分子和離子型樣

19、品均可檢測(cè)，用途廣泛，可分析80%的有機(jī)化合物。2、高效液相色譜分析流程、高效液相色譜分析流程 一般的高效液相色譜儀由五個(gè)部分組成：高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、數(shù)統(tǒng)、色譜分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)據(jù)處理系統(tǒng)。儀器分析-高效液相色譜儀(HPLC)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-高效液相色譜儀(HPLC)3、高效液相色譜法的分類、高效液相色譜法的分類 根據(jù)使用的固定相和流動(dòng)相極性的不同，分為正相液相色譜和反相液相色譜：正相鍵合相色譜法(Normal phase chromatography)：固定相的極性大于流動(dòng)相的極性，適用于分離油溶性或水溶性的極性或強(qiáng)極

20、性化合物反相鍵合相色譜法(Reversed phase chromatography)：固定相的極性大于流動(dòng)相的極性，適于分離非極性、極性和離子性化合物。應(yīng)用最廣泛中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)4、固定相、固定相 用來(lái)制備鍵合固定相的載體，幾乎都是用硅膠。利用硅膠表面的硅醇基(Si-0H)與有機(jī)官能團(tuán)可成鍵，即可得到各種性能的固定相。疏水基團(tuán) 如不同鏈長(zhǎng)的烷烴（C8和C18）和苯基等極性基團(tuán) 如氨丙基，氰乙基、醚和醇等儀器分析-高效液相色譜儀(HPLC)SiOOHSiOOHSiOOH固定相表面C H SiCl18 373SiOOSiOOSiOO固定相表面C H18 37Si中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-高效液相

21、色譜儀(HPLC)類型分離方式應(yīng)用特點(diǎn)C-18反相、離子對(duì)普適性好，保留值大。溶于水的高極性化合物、中等極性化合物C-8反相、離子對(duì)與C-18類似，保留值略小C-3,C-4反相保留值小，適合肽類和蛋白質(zhì)苯基反相保留適中，選擇性不同。非極性、中等極性化合物-CN反相、正相選擇性與硅膠類似，保留小，用途廣-NH2反相、正相、離子交換分離糖類、核苷酸、固醇等二醇基正相分離有機(jī)酸、排阻分蛋白質(zhì)等醚基反相、正相分離酚類、芳硝基化合物，保留比C-18強(qiáng)聚苯乙烯基反相PH使用范圍廣，對(duì)部分分離峰形好，壽命長(zhǎng)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-高效液相色譜儀(HPLC)5、流動(dòng)相、流動(dòng)相 - 溶劑具有穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì) -

22、 溶劑的選擇與使用的檢測(cè)器要有相容性 - 溶劑的粘度要小 - 溶劑的沸點(diǎn)不能太低 - 溶劑的純度要高且價(jià)格便宜正相：正己烷、正庚烷、乙醚、二氯甲烷、氯仿等，己烷為主體，加入質(zhì)子接受體乙醚或甲基叔丁基醚，質(zhì)子給予體氯仿，偶極溶劑二氯甲烷 反相：水、甲醇、乙腈、四氫呋喃、乙醇及其混合物等，以水為主體，加入質(zhì)子接受體甲醇，質(zhì)子給予體乙腈，偶極溶劑四氫呋喃。中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-高效液相色譜儀(HPLC)6、高效液相色譜檢測(cè)器簡(jiǎn)介、高效液相色譜檢測(cè)器簡(jiǎn)介 檢測(cè)器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的信號(hào)。常用檢測(cè)器種類： 可變波長(zhǎng)檢測(cè)器VWD(Variable Wavelengt

23、h Detector) 二極管陣列檢測(cè)器DAD(Diode Array Detector) 示差折光檢測(cè)器RID(Refractive Index Detector) 熒光檢測(cè)器FLD(Fluorescence Detector) 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器ELSD(Evaporative Light Scattering Detector) 中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)7、高效液相色譜操作條件的選擇、高效液相色譜操作條件的選擇 流動(dòng)相種類與配比 梯度 溫度 流速 檢測(cè)波長(zhǎng) 進(jìn)樣量?jī)x器分析-高效液相色譜儀(HPLC)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子色譜儀(IC)一一、離子色譜法的基本原理、離子色譜法的基本原理 離子色

24、譜法是利用被測(cè)物質(zhì)的離子性物質(zhì)的離子性進(jìn)行分離和檢測(cè)的液相色譜液相色譜方法。 離子性：在水溶液中能夠電離，生成帶離子性：在水溶液中能夠電離，生成帶+、電荷的物質(zhì)電荷的物質(zhì)： 陰離子：F-、Cl-、NO3-、SO42- 陽(yáng)離子：Li+、Na+、K+、Ca2+ 中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子色譜儀(IC)離子色譜分析的對(duì)象物質(zhì)離子類別離子類別主要離子種類主要離子種類無(wú)機(jī)陰離子鹵素及簡(jiǎn)單陰離子、酸根陰離子、陽(yáng)離子的配陰離子無(wú)機(jī)陽(yáng)離子堿金屬、銨離子、堿土金屬、過(guò)渡金屬、稀土元素有機(jī)陰離子有機(jī)酸、烷基硫酸、烷基磺酸、磷酸、多聚磷酸有機(jī)陽(yáng)離子胺、醇胺、銨鹽、吡啶、生物堿、锍鹽天然有機(jī)物糖、醇、酚、醛、維生

25、素生物物質(zhì)有機(jī)磷化合物、氨基酸、肽、核酸、蛋白質(zhì)、堿基、抗生素中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子色譜儀(IC)二二、離子色譜基本構(gòu)成、離子色譜基本構(gòu)成 u 輸液系統(tǒng)： 雙柱塞高壓泵（并聯(lián)或串聯(lián)）u 進(jìn)樣系統(tǒng)： 六通閥固定體積定量環(huán)u 分離系統(tǒng) ： 離子交換分離u 抑制系統(tǒng)： 填充柱抑制，膜抑制，柱膜混合抑制u 檢測(cè)系統(tǒng)： 電導(dǎo)檢測(cè) 中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子色譜儀(IC)三三、離子色譜分離方式、離子色譜分離方式離子交換離子交換 就固定相而言 . 陽(yáng)離子需要陽(yáng)離子交換基團(tuán) .陰離子需要陰離子交換基團(tuán)固定相結(jié)構(gòu)固定相結(jié)構(gòu): :苯乙烯苯乙烯二乙烯基苯二乙烯基苯苯乙烯苯乙烯- -二乙烯基苯樹(shù)脂二乙烯基

26、苯樹(shù)脂陽(yáng)離子交換基團(tuán)陽(yáng)離子交換基團(tuán)陰離子交換基團(tuán)陰離子交換基團(tuán)中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子色譜儀(IC)離 子 色 譜 離子交換色譜 固定相由3部分組成: l 乳膠物質(zhì)或 樹(shù)脂載體 l 間隔基l 承載離子交換的基團(tuán)材料: 苯乙烯/二乙烯基苯 聚甲基丙烯酸酯 硅酸鹽 / 硅膠 羥乙基甲基丙烯酸酯 (HEMA)陰離子交換劑: 季胺功能團(tuán) 堿性胺基 羥基堿性季胺鹽 丙烯酸基堿性季胺鹽 交聯(lián)方式陽(yáng)離子交換劑: 磺酸基 羧酸鹽間隔基: 烷基鏈中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子色譜儀(IC)離 子 色 譜 離子交換色譜 流動(dòng)相解吸和運(yùn)載樣品 . 水相洗脫液:陰離子陰離子 (I)l 鄰苯二甲酸鄰苯二甲酸l 鄰

27、羥基苯甲酸（水楊酸）鄰羥基苯甲酸（水楊酸） l p-羥基苯甲酸羥基苯甲酸l 苯甲酸苯甲酸l 硼酸鹽硼酸鹽l 硼酸鹽硼酸鹽 / 乙酸鹽乙酸鹽l 氫氧化鉀氫氧化鉀.陰離子陰離子 (II)l 碳酸鹽碳酸鹽 / 碳酸氫鹽碳酸氫鹽l 氫氧化鉀氫氧化鉀l 硼酸鹽硼酸鹽陽(yáng)離子陽(yáng)離子 (I)l 硝酸硝酸l 酒石酸酒石酸l 酒石酸酒石酸 / 吡啶二羧酸吡啶二羧酸 l 酒石酸酒石酸 / 檸檬酸檸檬酸l 磷酸二磷酸二 氫鉀氫鉀l 草酸草酸 / 乙二胺乙二胺 / 丙酮丙酮.中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子色譜儀(IC)離 子 色 譜 離子交換色譜 固定相和流動(dòng)相競(jìng)爭(zhēng)待測(cè)組份 陽(yáng)離子分離機(jī)理 中鼎檢測(cè)中鼎檢測(cè)儀器分析-離子