Takara實(shí)驗(yàn)技能講座之Westernblot

1、蛋白相關(guān)產(chǎn)品介紹蛋白相關(guān)產(chǎn)品介紹-Western Blot上海皓嘉科技發(fā)展有限公司上海皓嘉科技發(fā)展有限公司什么是什么是Western blotWestern blot？2 免疫印跡（免疫印跡（immuno blotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（）又稱蛋白質(zhì)印跡（western blot），它是根據(jù)抗），它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合，檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白質(zhì)的方法。原抗體的特異性結(jié)合，檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白質(zhì)的方法。western blot是是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有于免

2、疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)?，F(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。用途：常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白的豐度進(jìn)行定性和半定量分析。用途：常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白的豐度進(jìn)行定性和半定量分析。HRP標(biāo)記的二抗HRP底物(Luminol)化學(xué)發(fā)光信號Western blotWestern blot步驟步驟3 樣品制備樣品制備4 細(xì)胞裂解蛋白純化蛋白定量細(xì)胞裂解細(xì)胞裂解5 xTractor Buffer635656xTractor Buffer Kit 635623 裂解細(xì)胞種類：Ba

3、cterial cells、Mammalian cellsYeast cells、Baculovirus-infected cellsYeast Protein Extraction Reagent9780酵母總蛋白質(zhì)提取試劑酵母總蛋白質(zhì)提取試劑簡捷、快速的提取酵母菌總蛋白質(zhì)的試劑蛋白酶抑制劑蛋白酶抑制劑ProteoGuard EDTA-Free Protease Inhibitor Cocktail 635672Calpastatin7316細(xì)胞裂解液細(xì)胞裂解液CalpainCalpain競爭性抑制劑競爭性抑制劑細(xì)胞裂解：比較常用超聲波破碎法和酶溶破碎法。6 蛋白純化蛋白純化高特異性的高特異

4、性的CoCo2+2+樹脂：樹脂：TALONTALON系列系列高產(chǎn)量的高產(chǎn)量的NiNi2+2+樹脂：樹脂：His60 NiHis60 Ni系列系列6 組氨酸標(biāo)簽融合蛋白質(zhì)的純化蛋白定量蛋白定量方法方法靈敏靈敏度度時間時間原理原理干擾物質(zhì)干擾物質(zhì)說明說明產(chǎn)品產(chǎn)品紫外吸收法20-100 mg/ml快速5-10分鐘蛋白質(zhì)中的酪氨酸和色氨酸殘基在280 nm處的光吸收各種嘌呤和嘧啶；各種核苷酸干擾物質(zhì)較多Bradford法1-1000 g/ml快速5分鐘考馬斯染料與蛋白質(zhì)結(jié)合后，溶液的顏色發(fā)生變化。這種顏色的變化與溶液中的蛋白質(zhì)濃度成正比。表面活性劑：TritonX-100；SDS操作簡便；可對含有還原

5、劑的樣品進(jìn)行測定；顏色穩(wěn)定；顏色深淺隨不同蛋白質(zhì)變化。TaKaRa Bradford Protein Assay Kit（T9310A）BCA法0.02-2 mg/ml較快速30分鐘內(nèi)二價銅離子 (Cu+2) 在堿性條件下被蛋白質(zhì)的肽鍵還原成一價銅離子 (Cu+) ，兩個分子的BCA 絡(luò)合一個一價銅離子 (Cu+) ，形成一種在562 nm處有強(qiáng)吸收值的紫色復(fù)合物。螯合劑、還原劑：EDTA、EGTA、-巰基乙醇不受蛋白質(zhì)種類的影響；對表面活性劑的干擾影響小。TaKaRa BCA Protein Assay Kit（T9300A）7 8 相關(guān)產(chǎn)品相關(guān)產(chǎn)品方法名稱Code包裝量價格（元）特點(diǎn)BCA

6、法TaKaRa BCA Protein Assay KitT9300A500 次700不受蛋白質(zhì)種類的影響，在0.022 mg/ml濃度范圍內(nèi)蛋白質(zhì)濃度與吸光度值成線性關(guān)系；對表面活性劑的干擾影響??；2種操作方法（標(biāo)準(zhǔn)操作方法；低濃度測定操作方法）Bradford法TaKaRa Bradford Protein Assay KitT9310A500 次500操作簡便，可快速地對濃度范圍在11,000g/ml的蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行定量?？蓪羞€原劑的樣品進(jìn)行測定；2種操作方法（標(biāo)準(zhǔn)操作方法；低濃度測定操作方法）8 9 Western blotWestern blot步驟步驟9 電泳電泳電泳(SDS-

7、PAGE)(SDS-PAGE)10 蛋白分子量蛋白分子量膠濃度膠濃度 40 kDa 80 kDa 12.5%小于40 kDa 15%大于80 kDa 10% 凝膠的選擇樣品制備還原處理的樣品和非還原處理的樣品同時電泳分子量Marker的選擇預(yù)染蛋白marker普通蛋白marker設(shè)立對照樣品設(shè)立比對樣品空質(zhì)粒對照樣品、整個菌液、上清、沉淀對比樣品與檢測樣品同時電泳SDS-PAGE電泳中蛋白質(zhì)分子所帶的電荷差異對電泳的影響是微乎其微的，可以忽略不計(jì)。SDS-PAGE電泳中白質(zhì)的遷移速度與其分子量大小成反比，分子量越小，遷移速度越快。11 相關(guān)產(chǎn)品相關(guān)產(chǎn)品11 CLEARLY Stained Pr

8、otein Ladder3454ACLEARLY Protein Ladder (Unstained)3453ATris-Glycine-SDS Buffer (TG-SDS) Powder, pH8.3T9101Tris-Glycine Buffer (TG) Powder, pH8.3T9102TaKaRa CBB Protein Safe StainT9320Au 以CBB為主要成分制備的蛋白質(zhì)高靈敏度染色液u 迅速（染色5分鐘后可確認(rèn)蛋白質(zhì)片段）u 使用安全不含有害物質(zhì)甲醇和乙酸可使用去離子水進(jìn)行脫色2Protein SDS PAGE Loading Buffer91724Protei

9、n SDS PAGE Loading Buffer9173 上樣上樣loadingloading 預(yù)染預(yù)染MarkerMarker與非預(yù)染與非預(yù)染MarkerMarker 電泳緩沖液電泳緩沖液 染色液染色液12 電泳儀電泳儀12 垂直電泳系列產(chǎn)品垂直電泳系列產(chǎn)品詳情請見：http:/ blotWestern blot步驟步驟13 轉(zhuǎn)膜轉(zhuǎn)膜轉(zhuǎn)膜14 膜的選擇常用的轉(zhuǎn)移膜主要有PVDF膜（Polyvinylidene-Fluoride）和硝酸纖維素膜。PVDF膜與目的蛋白的結(jié)合能力高，靈敏度高，不易破碎，同時也適用于再次標(biāo)記(Reprobing)（為了增加PVD膜的親水性，膜使用前需浸泡在甲醇中）

10、。而硝酸纖維素膜雖不需要浸泡但極易破碎。膜標(biāo)記好正反面膜標(biāo)記好正反面轉(zhuǎn)膜緩沖液Tris-Glycine Buffer (TG) Powder, pH8.3T9102轉(zhuǎn)膜：蛋白質(zhì)從SDS聚丙烯酰胺凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。15 轉(zhuǎn)膜儀（轉(zhuǎn)印儀）轉(zhuǎn)膜儀（轉(zhuǎn)印儀）15 水平半干轉(zhuǎn)印系列產(chǎn)品水平半干轉(zhuǎn)印系列產(chǎn)品詳情請見：http:/ blotWestern blot步驟步驟16 封閉封閉封閉封閉劑的選擇 有時特定的封閉劑達(dá)不到預(yù)期的封閉效果。另外封閉時間過長會抑制抗原抗體反應(yīng)及標(biāo)記抗體的酶活性，應(yīng)準(zhǔn)備幾種封閉劑進(jìn)行點(diǎn)雜交預(yù)研討實(shí)驗(yàn)選擇合適的封閉劑。17 注意避免讓膜變干封閉的作用：為了防止蛋白檢測用抗體非特異性

11、與膜結(jié)合，對未結(jié)合蛋白的膜區(qū)域進(jìn)行封閉很重要。18 相關(guān)產(chǎn)品相關(guān)產(chǎn)品18 Western BLoT Blocking Buffer (Fish Gelatin)T7131AWestern BLoT Blocking Buffer (Protein Free）T7132A在TBS-T Buffer含有魚源明膠的封閉緩沖液。同哺乳動物來源的奶粉和BSA相比，不會與哺乳動物來源抗體出現(xiàn)非特異性交叉反應(yīng)?？梢种票尘?，能夠明確地檢測出抗原。不含蛋白質(zhì)（Protein Free）的化學(xué)成分封閉緩沖液。同一般的脫脂奶粉相比，可提高檢測靈敏度。有效地用于檢測磷酸化蛋白質(zhì)。19 洗滌洗滌洗滌液的選擇一般使用PB

12、S或TBS緩沖液。根據(jù)目的蛋白和檢測試劑選擇洗滌液。選擇不含抑制HRP的疊氮化鈉的洗滌液比較好。磷酸化蛋白質(zhì)適合使用TBS緩沖液或含Tween20的TBS緩沖液。19 Tris Buffered Saline with Tris Buffered Saline with Tween20 (TBS-T) Tablets, Tween20 (TBS-T) Tablets, pH7.6pH7.6T9142T9142 ELISA ELISA、Western BlottingWestern Blotting的清洗的清洗BufferBuffer或封閉或封閉BufferBuffer。 抗體稀釋?？贵w稀釋。T

13、ris Buffered Saline (TBS) Tablets, Tris Buffered Saline (TBS) Tablets, pH7.6pH7.6T9141T9141 ELISA ELISA、Western BlottingWestern Blotting、免疫組織染色用的清洗、免疫組織染色用的清洗BufferBuffer。 樣品稀釋。樣品稀釋。Phosphate Buffered Saline with Phosphate Buffered Saline with Tween20 (PBS-T) Tablets, Tween20 (PBS-T) Tablets, pH7.4p

14、H7.4T9183T9183 ELISA ELISA、Western BlottingWestern Blotting的清洗的清洗BufferBuffer或封閉或封閉BufferBuffer。 抗體稀釋?？贵w稀釋。Phosphate Buffered Saline (PBS) Phosphate Buffered Saline (PBS) Tablets, pH7.4Tablets, pH7.4T9181T9181 ELISA ELISA、Western BlottingWestern Blotting、免疫組織染色用的清洗、免疫組織染色用的清洗BufferBuffer。 清洗細(xì)胞。清洗細(xì)胞。

15、 樣品稀釋。樣品稀釋。Western Blotting操作過程中需洗膜，洗膜可除去未反應(yīng)的試劑，抑制背景。20 Western blotWestern blot步驟步驟20 一抗孵育二抗孵育一抗孵育一抗孵育一抗的選擇抗體有識別1個抗原決定簇的單克隆抗體和識別多個抗原決定簇的多克隆抗體。另外有的抗體識別一級結(jié)構(gòu)，有的抗體識別立體結(jié)構(gòu)，后者不能與變性或還原的蛋白質(zhì)結(jié)合。制備抗體時，如果免疫原是變性蛋白，那么制備的抗體只能與變性蛋白結(jié)合，不能與天然蛋白質(zhì)結(jié)合。用于Western Blotting的一抗一般都有銷售。購買抗體時要考慮以上幾點(diǎn)，選擇抗體時，對同一個抗原的不同類型抗體在產(chǎn)品數(shù)據(jù)上進(jìn)行詳細(xì)調(diào)

16、查后再購買，盡量使用特異性高的單克隆抗體。反應(yīng)方法減少失敗的最好方法是將高度稀釋的低濃度抗體溶液添加到托盤中，放入膜后，4緩慢搖動過夜孵育。如果抗體使用量有限制，建議使用雜交袋，使用雜交袋時要確保不能有氣泡。21 使用一抗進(jìn)行目的蛋白的檢測。抗體查詢抗體查詢22 http:/www.takara-bio.co.jp/antibody_search/antibody_search.php抗體種類細(xì)胞間連接、鈣粘著蛋白抗體細(xì)胞外基質(zhì)關(guān)聯(lián)骨代謝關(guān)聯(lián)血小板關(guān)聯(lián)信號傳導(dǎo)關(guān)聯(lián)等疾病相關(guān)抗體（IBL）His標(biāo)簽抗體二抗孵育二抗孵育二抗的選擇可從不同宿主獲得的二抗，如果背景較高，使用另一種宿主的二抗可減少背景

17、。還銷售宿主以外的對動物種屬來源血清蛋白進(jìn)行吸收操作的抗體。確認(rèn)動物種屬后根據(jù)檢測方法選擇合適的抗體。一般使用HRP（辣根過氧化物酶）標(biāo)記的二抗進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測的方法。其它還有使用AP（堿性磷酸酶）標(biāo)記抗體（對發(fā)光物質(zhì)進(jìn)行檢測）、熒光物質(zhì)及放射性同位素標(biāo)記的二抗。23 使用二抗進(jìn)行一抗的檢測。二抗孵育前應(yīng)進(jìn)行點(diǎn)雜交預(yù)實(shí)驗(yàn)，研討二抗的正確使用量。Western blot Western blot 快速檢出試劑（二抗替代物）快速檢出試劑（二抗替代物） - Western BLoT Rapid Detect v2.0 - Western BLoT Rapid Detect v2.024 短時間內(nèi)有效

18、的進(jìn)行抗體反應(yīng)，可以使用Rapid操作方法提高檢出感度，IgG Detector標(biāo)記50個HRP分子增加信號強(qiáng)度。動物種HRP標(biāo)記二抗替代物（檢測Mouse IgG時需要使用Enhancer，不能替代goat IgG、human IgG3二抗）Western BLoT Rapid Detect v2.0T7122A50 次次3170 元元Western blotWestern blot步驟步驟25 檢測化學(xué)發(fā)光檢測檢測檢測( (化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光 顯色顯色) )按照各試劑的操作流程進(jìn)行重復(fù)操作，研討最佳實(shí)驗(yàn)條件。將轉(zhuǎn)膜后的膜放置在保鮮膜上，將檢測試劑滴加在膜上，確保試劑均勻覆蓋在膜上。因目的蛋白

19、的濃度和使用的抗體濃度不同，膠片曝光條件也不同，因此要進(jìn)行預(yù)研討實(shí)驗(yàn)。在發(fā)光持續(xù)時間內(nèi)可改變膠片曝光條件進(jìn)行多次檢測。26 檢測方法有化學(xué)發(fā)光法和顯色法。顯色法操作簡便，但化學(xué)發(fā)光檢測法檢測靈敏度高，一般經(jīng)常使用化學(xué)發(fā)光檢測法?；瘜W(xué)發(fā)光檢測法是利用基質(zhì)被二抗的HRP分解時生成的有色物對目的蛋白的有無及蛋白量進(jìn)行檢測。相關(guān)產(chǎn)品相關(guān)產(chǎn)品化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光27 產(chǎn)品名稱產(chǎn)品名稱CodeCode包裝量包裝量價格價格（元）（元）檢出靈敏度檢出靈敏度概要概要檢測方法檢測方法Western BLoT Western BLoT ChemiluminescenceChemiluminescence HRP HRP

20、 SubstrateSubstrateT7101AT7101A250 ml250 ml1,6001,600pgpg級級其他公司同等產(chǎn)品其他公司同等產(chǎn)品發(fā)光強(qiáng)度比較發(fā)光強(qiáng)度比較X filmX filmWestern BLoT Western BLoT QuantQuant HRP HRP SubstrateSubstrateT7102AT7102A100 ml100 ml2,0502,050低低pgpg級級發(fā)光持續(xù)而穩(wěn)定發(fā)光持續(xù)而穩(wěn)定CCDCCD成像、成像、X X filmfilmWestern BLoT Western BLoT Hyper Hyper HRP HRP SubstrateSub

21、strateT7103AT7103A100 ml100 ml2,5002,500中中fgfg級級檢出靈敏度的比較檢出靈敏度的比較CCDCCD成像、成像、X X filmfilmWestern BLoT Western BLoT UltraUltra SensitiveSensitive HRP Substrate HRP SubstrateT7104AT7104A100 ml100 ml4,1304,130低低fgfg級級檢出靈敏度和抗體檢出靈敏度和抗體用量用量CCDCCD成像、成像、X X filmfilm28 發(fā)光強(qiáng)度比較發(fā)光強(qiáng)度比較28 Western BLoT Chemilumines

22、cent HRP Substrate（Code：T7101A）同其他公司同等HRP反應(yīng)基質(zhì)制品比較，利用HRP標(biāo)記二抗（395,000 pg）進(jìn)行slot blot檢測發(fā)光信號?？贵w：Goat Anti-Mouse IgG(H+L) Peroxidase conjugated膜：nitrocellulose使用Western BLoT Chemiluminescent HRP Substrate可高靈敏度地檢測出清晰的信號（曝光時間：5秒、X film。本公司數(shù)據(jù)） 明亮的發(fā)光信號29 發(fā)光持續(xù)而穩(wěn)定發(fā)光持續(xù)而穩(wěn)定29 穩(wěn)定發(fā)光持續(xù)時間長使用Western BLoT Quant HRP Sub

23、strate（制品Code： T7102A）利用slot blot方法可以確認(rèn)發(fā)光的持續(xù)性sample：人Transferrin ，200 ng起始2倍梯度稀釋一抗 ：Goat anti-Human Transferrin Affinity Purified 二抗 ：Affinity Purified Antibody -Anti-Goat IgG(H+L) Peroxidase labeled 從反應(yīng)開始從反應(yīng)開始90min90min，發(fā)光還持續(xù)穩(wěn)，發(fā)光還持續(xù)穩(wěn)定，一次反應(yīng)也可重復(fù)進(jìn)行曝光定，一次反應(yīng)也可重復(fù)進(jìn)行曝光檢測。檢測。本公司數(shù)據(jù)30 檢出靈敏度比較檢出靈敏度比較30 使用少量抗體，

24、可進(jìn)行高靈敏度檢出HeLa細(xì)胞裂解液梯度稀釋后作為樣品，改變抗體使用量，western blot檢測出GAPDH。sample ： HeLa細(xì)胞裂解液總蛋白，從10 g起始2倍梯度稀釋一抗： Anti-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase, clone 6C5 （1 mg/ml） 二抗： Pierce Goat Anti-Mouse IgG(H+L) Peroxidase conjugated （0.8 mg/ml） 使用Western BLoT Hyper Substrate（T7103A）更少的抗體量也可以檢出本公司數(shù)據(jù)31 檢出靈敏度和抗體使用

25、量檢出靈敏度和抗體使用量Hela細(xì)胞裂解液梯度稀釋的樣品，SDS-PAGE電泳后，根據(jù)制品的靈敏度調(diào)整抗體稀釋倍數(shù)，Western blot檢出GAPDH。31 Sample ： HeLa細(xì)胞裂解液總蛋白，從10 g起始2倍梯度稀釋 一抗：Anti-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase, clone 6C5（1mg/ml）（Merck Millipore） 二抗：Pierce Goat Anti-Mouse IgG(H+L) Peroxidase conjugated （0.8 mg/ml） 使用使用Western BLoT Western BLoT

26、 Ultra SensitiveUltra Sensitive即使減少抗體使用量也可進(jìn)行高靈敏度檢測即使減少抗體使用量也可進(jìn)行高靈敏度檢測本公司數(shù)據(jù)32 檢測增強(qiáng)劑檢測增強(qiáng)劑32 適用于包括Western印跡和ELISA在內(nèi)的各種免疫檢測 可提高最終的檢測靈敏度(從數(shù)倍到數(shù)十倍) 不影響辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)活性 兼容于交聯(lián)二抗的酶和使用任何一種檢測方法(如：比色檢測法或發(fā)光檢測法)檢測檢測Human TransferrinHuman Transferrin（各種抗體稀釋液使用情況比較）（各種抗體稀釋液使用情況比較）1TBS-T2Western BLoT Immuno B

27、ooster（code：T7111A）3A社反応促進(jìn)試薬4Western BLoT Immuno Booster PF（code：T7115A）抗體稀釋：抗體稀釋溶液情況如下： Immuno Booster本公司數(shù)據(jù)33 檢測系統(tǒng)檢測系統(tǒng)33 生物發(fā)光檢測生物發(fā)光檢測 (冷光儀冷光儀) 系統(tǒng)系統(tǒng)詳情請見：http:/ 重新標(biāo)記重新標(biāo)記34 lWestern進(jìn)行了膜上的一抗及二抗的消除試劑l相對溫和的條件下（室溫，30分）的反應(yīng)Western BLoT Stripping Buffer T7135A1 HeLa Cell Lysate 10 g 2 HeLa Cell Lysate 5 g 3

28、HeLa Cell Lysate 2 g 4 HeLa Cell Lysate 1.25 g 5 HeLa Cell Lysate 0.625 g 1 1-actin-actin検出（検出（第一次第一次抗原抗原 抗體抗體反應(yīng)反應(yīng)）Stripping （條件 : 室溫、30分、0.25 ml/cm2 membrane ）2 2GAPDHGAPDH検出（検出（第二次第二次抗原抗原 抗體抗體反應(yīng)反應(yīng)）Stripping （條件 : 室溫、30分、0.25 ml/cm2 membrane ）3 3-Tubulin-Tubulin検出（検出（第三次第三次抗原抗原 抗體抗體反應(yīng)反應(yīng)）4 4殘存抗體検出殘存

29、抗體検出Stripping （條件 : 室溫、30分、0.25 ml/cm2 membrane ）本公司數(shù)據(jù)35 常見技術(shù)問答常見技術(shù)問答 有污漬或斑點(diǎn)，整體背景普遍偏高 出現(xiàn)白色條帶 出現(xiàn)非特異性條帶 信號弱或無信號 膜上部分無信號 條帶擴(kuò)散35 36 洗膜不充分 使用的膜有問題 封閉不充分 使用的封閉劑不適合 封閉劑與一抗或二抗有交叉反應(yīng) 實(shí)驗(yàn)器具有污染 緩沖液有污染 曝光時間過長 抗體濃度過高 HRP標(biāo)記抗體發(fā)生凝集 使用雜交袋進(jìn)行抗體孵育時，雜交袋內(nèi)有殘留氣泡轉(zhuǎn)膜轉(zhuǎn)膜抗體抗體封閉封閉其他其他有污漬或斑點(diǎn)，整體背景普遍偏高有污漬或斑點(diǎn)，整體背景普遍偏高37 20132015201401

30、抗原、抗體檢測檢測 020203 蛋白 抗體量不充分 標(biāo)記抗體失活 膜上的抗原分解 發(fā)光底物孵育時間過短 曝光時間過短 發(fā)光底物劣化 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜不成功 目的蛋白質(zhì)量較差 蛋白制備過程中降解 膜上保存的蛋白質(zhì)分解 目的蛋白blocking后被屏蔽洗膜、重新標(biāo)記洗膜、重新標(biāo)記信號弱或無信號信號弱或無信號Western BLoT Immuno BoosterWestern BLoT Immuno Booster（code T7111A）Western BLoT Rapid Detect v2.0Western BLoT Rapid Detect v2.0（code T7122A）其他常見問題其他常見

31、問題38 膜上部分無信號 轉(zhuǎn)膜不完全出現(xiàn)白色條帶出現(xiàn)白色條帶抗體濃度過高出現(xiàn)非特異性條帶出現(xiàn)非特異性條帶 抗體濃度過高 SDS對蛋白質(zhì)的非特異性吸附條帶擴(kuò)散條帶擴(kuò)散抗體濃度過高電泳用的蛋白量過高其他問題相關(guān)產(chǎn)品相關(guān)產(chǎn)品方法名稱Code包裝量價格（元）特點(diǎn)BCA法TaKaRa BCA Protein Assay KitT9300A500 次700不受蛋白質(zhì)種類的影響，在0.022 mg/ml濃度范圍內(nèi)蛋白質(zhì)濃度與吸光度值成線性關(guān)系；對表面活性劑的干擾影響小；2種操作方法（標(biāo)準(zhǔn)操作方法；低濃度測定操作方法）Bradford法TaKaRa Bradford Protein Assay KitT9310A500 次500操作簡便，可快速地對濃度范圍在11,000g/ml的蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行定量?？蓪羞€原劑的樣品進(jìn)行測定；2種操作方法（標(biāo)準(zhǔn)操作方法；低濃度測定操作方法）39 特別推薦特別推薦蛋白定量蛋白定量名稱名稱CodeCode包裝量包裝量價格（元）價格（元）優(yōu)惠價（元）優(yōu)惠價（元）TaKaRa BCA Protein Assay KitTaKaRa BCA Protein Assay KitT9300AT9300A500 500 次（次（1 ml1 ml）2500 2500 次（次（0.2 ml0.2 ml）