c-fos基因表達(dá)與應(yīng)激性胃黏膜損傷的相關(guān)性

1、c-fos基因表達(dá)與應(yīng)激性胃黏膜損傷的相關(guān)性         08-01-15 13:18:00     編輯：studa20                          作者：宋政軍周曉麗畫(huà)偉萇新明李長(zhǎng)順【摘要】 

2、; 目的 探討c-fos基因表達(dá)在心理應(yīng)激性胃黏膜損傷發(fā)生機(jī)制中的作用。方法 利用光電刺激儀，建立心理應(yīng)激動(dòng)物模型。大鼠隨機(jī)分為3組，對(duì)照組(C)、規(guī)則光組(R)和不規(guī)則光組(I)。計(jì)數(shù)胃黏膜損傷指數(shù)(UI)，觀察胃黏膜組織學(xué)變化；采用比色法測(cè)定胃黏膜和血液中丙二醛(MDA)的水平；免疫組化法觀察胃黏膜中cfos基因的表達(dá)情況。結(jié)果 R組和I組的UI值明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，且隨著應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸升高；胃黏膜中cfos表達(dá)水平隨應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，R組與I組明顯高于對(duì)照組；cfos表達(dá)水平與黏膜MDA含量呈正相關(guān)(r=0.693，P<0.05)。結(jié)論 心理應(yīng)激性胃黏膜

3、損傷程度隨應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng)和嚴(yán)重程度的增加而加重；心理應(yīng)激下胃黏膜cfos表達(dá)可能與氧自由基大量生成有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】  心理應(yīng)激；丙二醛；cfos基因Correlation between cfos gene expression andgastric mucosa lesion induced by psychological stress in ratsABSTRACT: Objective  To study relationship between cfos gene expression and oxygen free radical in gastric muc

4、osa lesion induced by psychological stress in rats. Methods  The rats were divided into 3 groups randomly: regular flashing light group (group R), irregular flashing light group (group I ) and control group (group C). The contents of malonaldehyde (MDA), and gastric ulcer index (UI) were measur

5、ed after stress in different groups. The cfos gene expression in gastric mucous was detected by immunochemistry. Results  UI increased significantly in group I and group R. The content of MDA was increased more significantly than that of the controls. The cfos expression in gastric mucosa was s

6、ignificantly correlated with MDA content (r=0.693, P<0.05).  And the expression level was increased gradually following the stress time. Conclusion   Under the psychological stress condition, gastric mucosa lesion is aggravated with the prolonged time. The cfos expression in gastri

7、c mucosa is correlated with oxygen free radicals. And cfos expression may be induced by oxygen free radicals.KEY WORDS: psychological stress; malonaldehyde (MDA); cfos gene隨著社會(huì)的發(fā)展，職業(yè)競(jìng)爭(zhēng)、工作壓力等均可引起應(yīng)激反應(yīng)，心理應(yīng)激對(duì)機(jī)體造成的危害越來(lái)越受到重視1。為此，探討心理應(yīng)激性胃黏膜損傷的發(fā)病機(jī)制，對(duì)于臨床治療和預(yù)防心理應(yīng)激性胃黏膜損傷具有重要意義。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)激大鼠胃組織內(nèi)cfos基因表達(dá)升高。在本研究中，

8、我們主要探討cfos基因與應(yīng)激性胃黏膜損傷的發(fā)生的關(guān)系，為臨床治療提供理論依據(jù)。1  材料與方法1.1  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物  SpragueDawley(SD)雄性大鼠144只，體重180-220g，購(gòu)于西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。室溫(20±2)，自然光照,大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料，自由進(jìn)水。1.2  試劑及儀器  丙二醛(MDA)測(cè)試盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所；cfos免疫組化試劑盒購(gòu)自西安寶信生物工程公司。光電刺激器由西安交通大學(xué)公共衛(wèi)生系研制，刺激電流由SMI1型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)儀供給，電流強(qiáng)度1.0mA，電壓80V，持續(xù)2s。1.3 

9、方法  參照文獻(xiàn)2制備心理應(yīng)激動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)分3期進(jìn)行。期(適應(yīng)期，1-7d)：所有動(dòng)物每天放置實(shí)驗(yàn)盒內(nèi)25min，適應(yīng)環(huán)境并篩選，動(dòng)物一般在第4天自動(dòng)鉆入實(shí)驗(yàn)盒，不鉆者剔除，以消除實(shí)驗(yàn)盒對(duì)大鼠造成的應(yīng)激的影響。期(心理應(yīng)激形成期，8-14d)，從第8天起大鼠隨機(jī)分為3組，即對(duì)照組(C組)、規(guī)則光組(R組)和不規(guī)則光組(I組)，其中R組和I組又依應(yīng)激天數(shù)分為2、4、6、8d 4個(gè)亞組，每個(gè)亞組16只大鼠。C組不給光電刺激，每天僅在實(shí)驗(yàn)盒內(nèi)呆20min；R組給予規(guī)則光電刺激，即光照和電刺激的間隔為6s，兩次光照的間隔為20s，總時(shí)間為20min；I組給予不規(guī)則光照和電擊，即光照和電擊的

10、先后次序、間隔時(shí)間是隨機(jī)的，但在20min內(nèi)接受的總刺激同R組。期(心理應(yīng)激記憶期，15d以后)，除不給電刺激外，余同期。    參照Guth評(píng)價(jià)胃黏膜損傷指數(shù)(ulcer index, UI)，即胃黏膜損傷面積1mm記1分；1-2mm記2分；2-3mm記3分；3-4mm記4分；4mm即分段測(cè)量，全胃得分之和為損傷指數(shù)。用7522型分光光度計(jì)比色測(cè)定血清及胃黏膜中MDA活性，免疫組化染色檢測(cè)胃黏膜中cfos基因的表達(dá)。1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  實(shí)驗(yàn)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，取雙測(cè)

11、0.05或0.01，P<0.05或P<0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2  結(jié)果2.1  應(yīng)激大鼠胃黏膜損傷指數(shù)(UI)  隨著應(yīng)激天數(shù)的增加，胃黏膜損傷程度逐漸加重，R組、I組胃黏膜損傷較對(duì)照組明顯(P<0.05)。在同一時(shí)間點(diǎn)I組較R組損傷明顯，I組UI高于R組。兩組在第6天胃黏膜損傷最重(表1，圖1、2、3)。表1  應(yīng)激大鼠胃黏膜損傷指數(shù)(UI)的比較（略）Table 1  The comparison of gastric ulcer index on stressed rats*P<0.05, *P<0.01 vs. 2d圖1  對(duì)照組胃黏膜的結(jié)構(gòu)（略）Fig.1 Gastric mucous membrane structure of control group (×400)圖2  心理性應(yīng)激6d R組胃黏膜的結(jié)構(gòu)（略）Fig.2 Gastric mucous membrane structure