促滲劑對青蒿琥酯貼劑體外經(jīng)皮吸收的影響

1、促滲劑對青蒿琥酯貼劑體外經(jīng)皮吸收的影響(1) 作者：邱琳,王乃婕,杜豐,梁秉文,葉祖光【摘要】 目的 考察幾種促滲劑對青蒿琥酯體外經(jīng)皮吸收的影響,為青蒿琥酯貼劑的開發(fā)提供參考。方法 采用TK-6A型透皮擴(kuò)散儀,以SD大鼠腹部皮膚為透皮屏障,測定含有不同濃度促滲劑的青蒿琥酯貼劑的累計(jì)透過量和經(jīng)皮滲透速率。結(jié)果 各促滲劑對青蒿琥酯促滲作用大小依次為：油酸(OA)N-甲基吡咯烷酮(NMP)丙二醇(PG)氮酮(Azone)己二酸二異丙酯(IPA)。NMP和OA的促滲作用呈濃度依賴性,IPA和PG的促滲效果不隨濃度的升高而增強(qiáng),處方中高濃度的IPA和PG反而會抑制青蒿琥酯的透皮吸收。結(jié)論 10%OA對青

2、蒿琥酯的促滲作用最顯著。 【關(guān)鍵詞】 青蒿琥酯；貼劑；經(jīng)皮吸收；促滲劑；大鼠 Abstract：Objective To investigate the effect of penetration enhancers on the percutaneous absorption of artesunate, and provide a reference for the development of artesunate transdermal delivery systems. Methods Penetration enhancers (in different concentration

3、s) were incorporated into a 25% w/w artesunate matrix patch formulation. Modified Franz diffusion chambers and SD rat abdominal skin were used for in vitro skin permeation studies, the transdermal flux and permeation rate of artesunate in vitro were determined by HPLC. Result The enhancing effective

4、ness of the enhancers decreased in the order：OANMPPGAzoneIPA. Skin permeation was significantly enhanced by increasing the loading concentration of OA or NMP, larger IPA amount (8%) or PG amount (20%) could inhibit the permeation of artesunate. Conclusion Oleic acid was found to be the most efficien

5、t enhancer for artesunate, 10% is the most effective concentration. Key words：artesunate；transdermal delivery system；percutaneous absorption；penetration enhancers；rat 青蒿琥酯(Artesunate)為常用的抗瘧藥,在臨床上對搶救和治療腦型瘧和惡性瘧等療效顯著,目前研究還發(fā)現(xiàn)其具有平喘、治療弓形蟲病、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用。青蒿琥酯多采用口服、肌肉注射、靜脈注射給藥,由于體內(nèi)代謝迅速,消除半衰期很短,臨床需要多次給藥,才能有效降低

6、復(fù)燃率,給患者帶來很多不便,而透皮貼劑可以避免這些不利因素。本研究考察了不同促滲劑對青蒿琥酯透皮行為的影響,為青蒿琥酯透皮貼劑的研究和開發(fā)奠定基礎(chǔ)。1 材料1.1 動(dòng)物 SD雄性大鼠,體重200 g左右,北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。1.2 藥物和試劑 青蒿琥酯,批號061118,重慶華立武陵山制藥有限公司；聚丙烯酸酯壓敏膠(國民淀粉5號,美國國民淀粉公司提供)；氮酮(Azone,藥用,湖北南星化工總廠)；油酸(OA,藥用,德國APPLICHEM)；丙二醇(PG,藥用,云南省玉溪市天山化工有限公司)；己二酸二異丙酯(IPA,國際特品公司提供)；棕櫚酸異辛酯(IOP,國際特品公司提供)。甲醇

7、為色譜純,水為自制超純水,其他試劑均為分析純。1.3 儀器 涂布機(jī)(T2000L)；改良Franz擴(kuò)散池(TK-20A)；安捷倫高效液相色譜儀(Agilent 110)。2 方法與結(jié)果2.1 貼劑的制備 稱取處方量丙烯酸酯類壓敏膠,按處方量加入青蒿琥酯及促滲劑,混勻攪拌,真空脫氣。控制涂布厚度為0.7 mm,使含藥壓敏膠均勻涂布在保護(hù)膜上,在50 下干燥60 min,冷卻后壓覆背襯膜,備用。2.2 貼劑的體外經(jīng)皮滲透試驗(yàn)2.2.1 離體皮膚的制備SD大鼠脫頸處死,剃除腹部皮膚毛,剝?nèi)「共科つw,小心去除皮下組織,生理鹽水清洗后,用保鮮膜包好,置冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?.2.2 透皮試驗(yàn)將預(yù)處理皮膚置

8、于擴(kuò)散室與接受室之間(角質(zhì)層面向擴(kuò)散室),在角質(zhì)層表面貼上藥貼,固定好。在接收室中加入20%乙醇生理鹽水約6 mL,液面恰與皮膚內(nèi)層接觸,開動(dòng)電磁攪拌器(約400 r/min)和恒溫維持在(370.5),在設(shè)定的時(shí)間(2、4、6、8、24 h)取樣,每次取完,補(bǔ)充相同體積的新鮮接收液。樣品0.45 m微孔濾膜過濾,用紫外分析方法檢測濃度,計(jì)算累計(jì)透過量：QCnVC(n-1)V/A。 Q：單位面積累積釋放量；V：接收液體積；A：擴(kuò)散池口面積；Cn：第n次取樣的濃度。 以藥物穩(wěn)定透過皮膚時(shí)的累積透過量Q對時(shí)間t線性回歸所擬合直線的斜率即為經(jīng)皮滲透速率(dQ/dt)g/(cm2h)。2.3 接收液樣

9、品處理和檢測方法的建立1-22.3.1 色譜條件色譜柱：Kromasil C18(250 mm4.6 mm,5 m)；流動(dòng)相：乙腈-0.01 mmol/L KH2PO4(4852,稀磷酸調(diào)pH值至3.0)；流速：1.0 mL/min；檢測波長：210 nm；柱溫：25 。在該條件下青蒿琥酯與其他成分能達(dá)到基線分離,色譜圖見圖1。本篇論文由網(wǎng)友投稿，讀書人只給大家提供一個(gè)交流平臺，請大家參考，如有版權(quán)問題請聯(lián)系我們盡快處理。2.3.2 溶液的制備對照品溶液：取青蒿琥酯對照品50 mg,精密稱定,置50 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,得對照品溶液(每1 mL含青蒿琥酯1.04 mg)。精密吸

10、取1.0 mL貯備液于10 mL量瓶中,加乙醇稀釋至刻度,搖勻,得對照品溶液(每1 mL含青蒿琥酯104 g)；供試品溶液：取青蒿琥酯貼劑,按“2.2.2”項(xiàng)下方法進(jìn)行體外透皮試驗(yàn),取接收液,用0.45 m微孔濾膜濾過,既得供試品溶液。2.3.3 陰性對照試驗(yàn)取不含青蒿琥酯的空白貼片,按照“2.3.2”項(xiàng)下供試品溶液制備方法操作,得陰性對照溶液。對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液在“2.3.1”色譜條件下進(jìn)樣分析。結(jié)果表明,陰性對照液在青蒿琥酯色譜峰位置處無相應(yīng)峰出現(xiàn)。見圖1。2.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取對照品溶液,用接收液定容,配置一系列不同濃度的溶液(20.8、41.6、62.4、

11、83.2、104 g/mL)。分別吸取上述溶液各20 L,按“2.3.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣分析,記錄峰面積。以青蒿琥酯峰面積為縱坐標(biāo),濃度(g/mL)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為：Y0.921 2X0.28(r0.999 9,n3)。結(jié)果表明,青蒿琥酯在20.8104 g/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.3.5 精密度試驗(yàn)精密吸取供試品溶液20 L,注入液相色譜儀,測定青蒿琥酯峰面積值,并重復(fù)進(jìn)樣6次。結(jié)果RSD為0.54%。2.3.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液,分別于0、4、8、12、24 h進(jìn)樣測定。結(jié)果表明,樣品供試液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。2.3.7 回收率試驗(yàn)用陰性對照溶液配制低、中

12、、高濃度(41.6、62.4、83.2 g/mL)3種水平的青蒿琥酯溶液,每種濃度各做3個(gè)樣品。精密吸取上述溶液20 L,注入液相色譜儀,測定青蒿琥酯峰面積積分值。以下述公式計(jì)算回收率。9份平均回收率為98.59%,RSD3.53%,說明本法回收率符合規(guī)定。2.4 己二酸二異丙酯對青蒿琥酯透皮的影響 以丙烯酸酯類壓敏膠作為基質(zhì),固定青蒿琥酯含量為25%,調(diào)節(jié)壓敏膠用量,使IPA在系統(tǒng)中的含量分別為2%、4%、6%、8%,考察IPA用量對青蒿琥酯透皮的影響。結(jié)果4%IPA對青蒿琥酯的促滲效果最好,處方中高濃度IPA(8%)對青蒿琥酯的透皮有抑制作用。見表1。表1 IPA對青蒿琥酯累計(jì)透過量和經(jīng)皮

13、滲透速率的影響(略)2.5 N-甲基吡咯烷酮對青蒿琥酯透皮的影響 以丙烯酸酯類壓敏膠作為基質(zhì),固定青蒿琥酯含量為25%,調(diào)節(jié)壓敏膠用量,使N-甲基吡咯烷酮(NMP)在系統(tǒng)中的含量分別為2%、4%、6%、8%,考察NMP用量對青蒿琥酯透皮的影響。結(jié)果NMP對青蒿琥酯有明顯促滲作用,且其對青蒿琥酯的促滲作用隨著濃度的升高而增強(qiáng)。見表2。表2 NMP對青蒿琥酯累計(jì)透過量和經(jīng)皮滲透速率的影響(略)2.6 油酸對青蒿琥酯透皮的影響 以丙烯酸酯類壓敏膠作為基質(zhì),固定青蒿琥酯含量為25%,調(diào)節(jié)壓敏膠用量,使OA在系統(tǒng)中的含量分別為5%,10%,考察OA用量對青蒿琥酯透皮的影響。結(jié)果OA對青蒿琥酯促滲作用明顯

14、,其對青蒿琥酯的促滲作用隨著濃度的升高而增強(qiáng)。見表3。表3 OA對青蒿琥酯累計(jì)透過量和經(jīng)皮滲透速率的影響(略)2.7 卡必醇對青蒿琥酯透皮的影響以丙烯酸酯類壓敏膠作為基質(zhì),固定青蒿琥酯含量為15%,調(diào)節(jié)壓敏膠用量,使卡必醇(Transcutol)在系統(tǒng)中的含量分別為10%、20%,考察Transcutol用量對青蒿琥酯透皮的影響。結(jié)果Transcutol對青蒿琥酯沒有明顯促滲作用,甚至有抑制作用。見表4。表4 Transcutol對青蒿琥酯累計(jì)透過量和經(jīng)皮滲透速率的影響(略)2.8 丙二醇對青蒿琥酯透皮的影響 以丙烯酸酯類壓敏膠作為基質(zhì),固定青蒿琥酯含量為15%,調(diào)節(jié)壓敏膠用量,使PG在系統(tǒng)中

15、的含量分別為10%、20%,考察PG用量對青蒿琥酯透皮的影響。結(jié)果PG10%對青蒿琥酯的促滲作用明顯,而當(dāng)PG濃度從10%提高到20%,PG的促滲作用變?nèi)酢Ｒ姳?。表5 PG對青蒿琥酯累計(jì)透過量和經(jīng)皮滲透速率的影響(略)2.9 其他促滲劑對青蒿琥酯透皮的影響 以丙烯酸酯類壓敏膠作為基質(zhì),固定青蒿琥酯含量為25%,調(diào)節(jié)壓敏膠用量,使系統(tǒng)中含Azone 3%,IOP 5%,考察這2種促滲劑對青蒿琥酯透皮的影響。結(jié)果3%Azone對青蒿琥酯的促滲作用較好。見表6。表6 Azone和IOP對青蒿琥酯累計(jì)透過量和經(jīng)皮滲透速率的影響(略)3 討論 綜合比較各促滲劑對青蒿琥酯經(jīng)皮滲透速率的影響, 10%OA對青蒿琥酯的促滲作用最強(qiáng),各促滲劑對青蒿琥酯促滲作用大小依次為：OANMPPGAzoneIPA,NMP和OA的促滲作用呈濃度依賴性。IPA和PG的促滲效果不隨濃度的升高而增強(qiáng),處方中高濃度的IPA和PG反而會抑制青蒿琥酯的透皮吸收。可能由于青蒿琥酯在IPA和PG中溶解性較好,低濃度的IPA和PG能提高藥物在基質(zhì)中的