大腸桿菌的檢測(cè)

1、精選文檔食品中大腸桿菌的檢測(cè)大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。大腸菌群不是細(xì)菌學(xué)上的分類命名，而是根據(jù)衛(wèi)生學(xué)方面的要求，提出的與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，即作為食品、水體等是否受過人畜糞便污染的指示菌，這些細(xì)菌在生化及血清學(xué)方面并非完全一致。根據(jù)進(jìn)一步的生化試驗(yàn)，可將這群細(xì)菌再分為大腸艾希氏菌（俗稱大腸桿菌）、弗氏檸檬酸桿菌、肺炎克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。 衛(wèi)生學(xué)意義大腸菌群和大腸桿菌是評(píng)價(jià)衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)，作為食品中的糞便污染指標(biāo)。食品中檢出大腸菌群，表明該食品有糞便污染，既可能有腸道致病菌存在，因而也就有可能通過污染的食品引起腸道傳染病的流行。大腸菌群

2、數(shù)的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對(duì)人體健康危害性的大小。大腸桿菌在外界存活時(shí)間與一些主要腸道致病菌接近，它的出現(xiàn)預(yù)示著某些腸道病原菌的存在，因此該菌是國(guó)際上公認(rèn)的衛(wèi)生監(jiān)測(cè)指示菌。近年來，有些國(guó)家在執(zhí)行HACCP管理中，將大腸桿菌檢測(cè)作為微生物污染狀況的監(jiān)測(cè)指標(biāo)和HACCP實(shí)施效果的評(píng)估指標(biāo)。檢測(cè)程序大腸桿菌測(cè)定EMB選擇性分離鑒別伊紅和美藍(lán)可抑制G+生長(zhǎng)；不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌菌落無色透明；能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸力弱，菌落為棕色；發(fā)酵乳酸，產(chǎn)酸能力強(qiáng)，菌落紫色，有綠色金屬閃光菌名菌落形態(tài)大腸埃希氏菌 紫黑色，有綠色金屬光澤肺炎克雷伯氏菌粉色，中心色深陰溝腸桿菌粉色，中心色深弗氏志賀氏菌無色鼠傷寒沙

3、門氏菌 無色糞鏈球菌無色EMB平板典型大腸桿菌菌落特征：中心黑色或紫紅色，有或無綠色金屬光澤、測(cè)定方法： 1 檢樣稀釋：1.1 以無菌操作將檢樣25ml(或25g放于含有225ml滅菌生理鹽水的滅菌塑料燒杯中，經(jīng)充分振搖成1：10均勻稀釋液。 1.2 用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，注入含有9ml滅菌生理鹽水的試管中，振搖成1：100稀釋液。 1.3 重復(fù)1.2的操作，使成1：1000稀釋液。 2乳糖膽鹽發(fā)酵試驗(yàn)：根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選擇二個(gè)稀釋度，每一稀釋度接種3管，接種量在1ml以上者，用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管

4、。1ml及1ml以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。然后置于36±1 培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2hr，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為大腸菌群陰性；如有產(chǎn)氣者，則可按以下程序進(jìn)行。3分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別接種于伊紅美蘭瓊脂平板上，置36±1溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24hr后取出，觀察菌落形態(tài)，并作革蘭氏染色。4證實(shí)試驗(yàn)：在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落12個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置于36±1溫箱內(nèi)培養(yǎng)24±2hr，觀察產(chǎn)氣情況。乳糖發(fā)酵管產(chǎn)氣，革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽性。  5報(bào)告：根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN檢索表，報(bào)告每100ml(g)大腸菌群的最可能數(shù)。注意事項(xiàng)1采樣應(yīng)該注意的問題采樣應(yīng)該有無菌操作的概念，在無菌操作進(jìn)行下，盡快送到檢驗(yàn)室，途中應(yīng)該注意對(duì)樣品的保護(hù)，因?yàn)榇竽c桿菌繁殖較快，所以送檢時(shí)間和開始檢驗(yàn)時(shí)間越短越好。途中可以降低溫度來保存降低大腸桿菌的繁殖能力