斜面培養(yǎng)基的制作方法

1、斜面培養(yǎng)基制作方法(僅供參考)1斜面培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基（agarslantculture-medium ）：固體培養(yǎng)基（solid culture medium ）的一種形式；制作時(shí)應(yīng)趁熱定量分裝于試管內(nèi)，并凝固成斜面的稱為斜面培養(yǎng)基，用于菌種擴(kuò)大轉(zhuǎn)管及菌種保藏。其制作流程圖如下圖1.圖12操作要點(diǎn) 倒入培養(yǎng)基的體積以試管1/4左右為宜，斜面的長(zhǎng)度不超過試管的一半，一般用15 × 150mm 試管，其容量為5ml。2.1定型棉塞 將制作松緊適宜的棉塞塞進(jìn)試管，然后放進(jìn)鼓風(fēng)的干熱滅菌箱中于160定型2小時(shí)。定型后切記不能立即打開干熱滅苗箱，否則棉塞易燃燒。要讓其冷至100以下才能打開，接

2、近室溫打開更理想。這樣制作的棉塞，便于培養(yǎng)基分裝及接種，還有利于減少污染。棉塞的制作方法見下圖2.圖2-a圖2-b 2.2分裝試管 將配制好的培養(yǎng)基按常規(guī)方法分裝試管，在此過程中切勿將培養(yǎng)基沾到度管上部。若沾到上部，一是影響試管的外觀，二是易污染棉塞。如下圖3.圖32.3捆扎試管 管口堵入棉塞后7或9支試管扎一捆，棉塞部分用牛皮紙包扎。在包裝紙上標(biāo)明培養(yǎng)基名稱，制備組別和姓名、日期等。如下圖4.圖42.4滅菌將手提式高壓鍋內(nèi)的水換成干凈的自來(lái)水，水按要求加入，不能過多。將捆成把的試管立放裝進(jìn)高壓鍋的內(nèi)桶中，在試管頂上放適量棉花使之成凸形，再在上面蓋上一層牛皮紙，蓋上蓋進(jìn)行高壓滅菌，在滅苗放冷氣

3、的過程中，要盡量慢，以免減壓過快，培養(yǎng)基沸騰，打濕棉塞。冷氣放徹底后，待壓力達(dá)到滅苗要求時(shí)，穩(wěn)壓一定時(shí)間（培養(yǎng)基種類不同，滅苗時(shí)間要求不一樣）。當(dāng)達(dá)到滅菌時(shí)間后、最好讓壓力自然下降至零時(shí)再打開高壓鍋。打開高壓鍋時(shí)，移去試管上面的牛皮紙和棉花，然后蓋上鍋蓋，并使鍋留一條縫隙，讓鍋內(nèi)余熱烘干棉塞。2.5擺斜面 試管內(nèi)的凝聚水主要是高溫游離水在培養(yǎng)基凝固過程中遇外界溫差過大形成的凝結(jié)水和擺放斜面時(shí)沒有足夠的熱量烘干棉塞上的水分所致，要擺出高質(zhì)量的斜面試管，必須在培養(yǎng)基凝固過程中避免溫差過大，讓其緩慢降溫，使高溫施離水被培養(yǎng)基所吸收，擺出的斜面才不會(huì)出現(xiàn)濕棉塞。具體做法為：首先讓培養(yǎng)基在高壓鍋內(nèi)把棉塞烘干，待試管冷卻至50左右時(shí)取出擺斜面，然后覆蓋保溫物，讓其自