藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)中藥教學(xué)部重慶郵電學(xué)院生物學(xué)院二 O O四 年六月前 言    藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的目的，不僅是驗(yàn)證藥理學(xué)理論，還可培養(yǎng)學(xué)生基本操作技能，觀察和分析解決問題的能力，以及體驗(yàn)科學(xué)研究的基本原則和基本程序，從而提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)研究能力和嚴(yán)密的科學(xué)思維方法。為了使各專業(yè)的學(xué)生能深入理解藥理學(xué)的基本理論和基本知識(shí)，特編寫了這本藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)選擇的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容經(jīng)典、實(shí)用，做到既與理論課有密切聯(lián)系，又有實(shí)驗(yàn)課的獨(dú)特體系；既有整體動(dòng)物（包括清醒動(dòng)物和麻醉動(dòng)物）實(shí)驗(yàn)，又有器官水平實(shí)驗(yàn)；既有驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，又有設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),還有綜合性實(shí)驗(yàn)。從而使學(xué)生初步具備對(duì)

2、客觀事物進(jìn)行觀察、比較、分析、綜合和解決問題的能力，并驗(yàn)證、鞏固和加深理解基本理論，從而初步掌握藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本方法。 為了達(dá)到上述目的，要求同學(xué)們做到下列事項(xiàng)：一、遵守紀(jì)律，提前5分鐘到達(dá)實(shí)驗(yàn)室，因故外出或早退應(yīng)向老師請(qǐng)假。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須身穿白大衣，不許穿拖鞋，衣著整潔干凈。實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)嚴(yán)肅認(rèn)真，不高聲談笑，不進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室無關(guān)的活動(dòng)。違者將給予一定的處罰。二、實(shí)驗(yàn)前：1.仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、方法和操作步驟，領(lǐng)會(huì)其設(shè)計(jì)原理；2.結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)藥理學(xué)和生理學(xué)、生化學(xué)等方面理論知識(shí)做到充分理解；3.預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)中各個(gè)步驟可能出現(xiàn)的情況；4.注意實(shí)驗(yàn)中可能發(fā)生的問題。三、實(shí)

3、驗(yàn)時(shí)：1.實(shí)驗(yàn)者必須先熟悉儀器的使用要點(diǎn)，而后運(yùn)用。儀器損壞或失靈，應(yīng)請(qǐng)老師修理或調(diào)換。違章操作使儀器損壞者，要進(jìn)行賠償。各小組實(shí)驗(yàn)器材不得調(diào)換。公用物品用完后放回原處。2.實(shí)驗(yàn)時(shí)將實(shí)驗(yàn)器材妥善安排好，正確裝置；嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的步驟進(jìn)行操作，準(zhǔn)確計(jì)算給藥量，防止出現(xiàn)差錯(cuò)意外；3.認(rèn)真仔細(xì)地觀察實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象，隨時(shí)記錄藥物反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間、表現(xiàn)以及最后轉(zhuǎn)歸，聯(lián)系課堂講授內(nèi)容進(jìn)行思考。4.注意節(jié)約實(shí)驗(yàn)材料。四、實(shí)驗(yàn)后：1.整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，經(jīng)過分析思考，寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告（.名、班級(jí)、組別、日期、操作者.題目、目的、簡(jiǎn)要方法(包括儀器，藥品等) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果是實(shí)驗(yàn)中最重要的部分，應(yīng)該忠實(shí)，正確地記述實(shí)驗(yàn)

4、過程中所觀察到的現(xiàn)象。一定隨時(shí)記錄，不可單憑記憶，否則容易發(fā)生錯(cuò)誤或遺漏）。時(shí)交給指導(dǎo)教師；2.整理實(shí)驗(yàn)器材，洗凈擦干，妥為安好，放回原處。將用過的動(dòng)物進(jìn)行處死動(dòng)物及其他廢物丟入指定處所。有班長(zhǎng)安排各組進(jìn)行輪流打掃清潔，做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作（桌、凳、地板、收拾干凈，擺放整齊），離開時(shí)關(guān)閉所有的水、電、氣關(guān)好門窗。 生物信息學(xué)院中藥學(xué)教學(xué)部 劉圣蓉 劉毅 編著 二0 0四年六月目 錄實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持法和給藥法 3.8實(shí)驗(yàn)二 不同給藥途徑對(duì)藥物作用的影響 8實(shí)驗(yàn)三 傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對(duì)麻醉兔血壓的作用 910實(shí)驗(yàn)四 氯丙嗪的安定和抗激怒反應(yīng)作用 11實(shí)驗(yàn)五 嗎啡的鎮(zhèn)痛作用 1213實(shí)驗(yàn)六

5、有機(jī)磷藥物的中毒及其解救 1415實(shí)驗(yàn)七 強(qiáng)心苷對(duì)在體蛙心的作用 16附錄 常用生理溶液的成分和配制 1718實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持法和給藥法一、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持法1小鼠（1）雙手法：右手提鼠尾，放在鼠籠蓋或其他粗糙面上，向后方輕拉鼠尾，使小鼠前肢固定在粗糙面上。迅速用左手拇指和食指捏其雙耳間頸背部皮膚，無名指、小指和掌心夾其背部皮膚和尾部，便可將小鼠牢固捉持（圖1）。 圖1小鼠雙手捉持法（2）單手法：小鼠置于籠蓋上，先用左手食指和拇指抓住鼠尾，后手掌尺側(cè)和小指夾住鼠尾，然后左手拇指與食指捏住頸部皮膚（圖2）。圖2 小鼠單手捉持法2. 大鼠大鼠容易激怒咬人，捉持時(shí)應(yīng)戴防護(hù)手套。先用

6、右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住頭部，其余手指與掌部握住背部和腹部。注意不要捏其頸部，以防用力過大、過久，窒息死亡。3家兔一只手抓住兔頸背部皮膚，將兔輕輕提起，另一只手托住臀部，使兔呈蹲坐姿勢(shì)（圖3）。切不可用手握持雙耳提起兔子。圖3 家兔捉持法4豚鼠豚鼠性情溫和，不咬人，用手輕輕握住身體即可抓起。5. 貓應(yīng)戴好防護(hù)手套。輕聲呼喚，慢慢將手伸入貓籠，輕撫貓頭、頸和背部，一只手抓住頸背部皮膚，另一只手抓住腰背部。性情兇暴的貓可用布袋或網(wǎng)套捉持，操作中應(yīng)防其利爪和牙齒傷人。6. 狗馴服的狗可戴上特制嘴套，用繩帶固定于耳后頸部；兇暴的狗可用長(zhǎng)柄捕狗夾鉗住狗的頸部，然后套上嘴套。狗嘴也可用繩帶固定

7、，操作時(shí)先將繩帶繞過狗嘴的下頜打結(jié)，再繞到頸后部打結(jié)，以防繩帶滑落。狗麻醉后四肢固定于手術(shù)臺(tái)上，取下嘴套或繩帶，將一金屬棒經(jīng)兩側(cè)嘴角，穿過口腔壓于舌上，再用繩帶繞過金屬棒綁縛狗嘴，并固定于手術(shù)臺(tái)上。應(yīng)將狗舌拉出口腔，以防窒息。二、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥法1. 經(jīng)口給藥法 此法有口服與灌胃兩種方法。適用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等動(dòng)物?？诜蓪⑺幬锓湃腼暳匣蛉苡陲嬎辛顒?dòng)物自由攝取。若為保證劑量準(zhǔn)確，可應(yīng)用灌胃法。 （1）灌胃法小鼠：左手捉持小鼠，腹部朝上，右手持灌胃管經(jīng)口角插入口腔，使灌胃管與食管成一直線，再沿上顎壁緩慢插入食管，稍感有阻力時(shí)(大約灌胃管插入1/2)，如動(dòng)物安靜，呼吸無異常，即可注

8、入藥液。如遇阻力應(yīng)抽出灌胃管重新插入，若藥液誤注氣管，小鼠可立即死亡。一次灌注藥量0.10.3ml/10g體重。操作宜輕柔，防止損傷食管（圖4）。灌胃管可用粗大的注射針頭制作，磨鈍針尖制成，管長(zhǎng)4-5cm，直徑1mm，連接于1-2ml注射器上即成。 圖4 小鼠灌胃法大鼠：左手捉持大鼠，右手持灌胃器，灌胃方法與小鼠相同。若兩人合作時(shí)，可由助手協(xié)助固定后肢與尾巴。但灌胃管必須長(zhǎng)68cm，直徑1.2mm，尖端呈球狀，并安裝在510ml的注射器上。注藥前應(yīng)回抽注射器，證明未插入氣管（無空氣逆流）方可注入藥液。一次投藥量12ml100g體重。家兔：需兩人合作，一人坐好將兔軀體夾于兩腿之間，左手

9、緊握雙耳固定頭部，右手抓住兩前肢固定前身，使兔頭稍向后仰；另一人將木或竹制開口器橫放于兔口中，將兔舌壓住，以8號(hào)導(dǎo)尿管經(jīng)開口器中央小孔，沿上顎壁慢慢插入食管1518cm。為避免誤入氣管，可將導(dǎo)尿管外口端放入清水杯中，無氣泡逸出方可注入藥液，并應(yīng)再注入少量清水以保證管內(nèi)藥液全部進(jìn)入胃內(nèi)。灌畢，慢慢拔出導(dǎo)尿管取出開口器（圖5）。圖5 家兔灌胃法豚鼠：如用灌胃器，灌胃法與大鼠相同。如用開口器和導(dǎo)尿管，操作方法與兔灌胃法相同。貓和狗：灌胃方法與兔相似，將導(dǎo)尿管從鼻腔或口腔經(jīng)食管插入胃內(nèi)給藥。操作時(shí)應(yīng)防止動(dòng)物咬傷與抓傷。（2）口服法 片劑藥物可在扒開動(dòng)物上下齒列后，用鑷子夾住藥物放在舌根部，迅速合起上下

10、頜即可咽下藥物。給藥前若先以水濕潤(rùn)口腔內(nèi)部，更易咽下。 液體藥物可在輕輕固定動(dòng)物頭部后，從口角齒列間注入藥液，動(dòng)物多能自動(dòng)咽下。溶于水的藥物也可加入飲水中口服，不溶于水的藥物可加入飼料中給藥。但這兩種給藥法必須是無味的藥物，且難以保證劑量準(zhǔn)確。2. 注射給藥法（1）皮下注射法：小鼠：一般需兩人合作，一人把小鼠頭與鼠尾牽向兩端并固定，另一人左手提起背部皮膚，右手持注射器刺入皮下，若針頭容易向左右擺動(dòng)即可注入藥液。拔針時(shí)左手捏住針刺部位，防止藥液外漏（圖6）。一人操作可把小鼠放在金屬網(wǎng)上，左手拉鼠尾，小鼠以其習(xí)性向前移動(dòng)，此時(shí)右手持注射器從頭端向尾部刺入背部皮下。注藥量0.10.3 ml/10g體

11、重。 圖6 小鼠皮下注射法大鼠：以捉持法握住大鼠，于背部或大腿拉起皮膚，將注射針刺入皮下。一次注射藥量小于1.0ml/100g體重。家兔：左手將兔背部皮膚提起，右手持注射器，針尖刺人皮下松開左手，進(jìn)行注射。豚鼠：注射部位可選用大腿內(nèi)側(cè)面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。通常為大腿內(nèi)側(cè)面注射。一般需兩人合作，一人固定豚鼠，一人進(jìn)行注射。貓：將臀部皮膚拉起，將注射針刺入皮膚與肌肉之間，注入藥液。犬：將犬的頸部或背部皮膚拉起，注射針刺入皮下進(jìn)行注射。（2）皮內(nèi)注射法：先將注射部位剪去毛。左手繃緊皮膚，右手持注射器，小于15°角刺入皮內(nèi)，注射藥液，注射處出現(xiàn)一白色小皮丘。（3）腹腔注

12、射法：小鼠：左手捉持小鼠，腹部向上，右手將注射器針頭刺入皮膚，其部位是距離下腹部腹白線稍向左或右的位置。向前推進(jìn)35mm，接著使注射器針頭與皮膚呈45°角刺入腹肌，繼續(xù)向前刺人，通過腹肌進(jìn)入腹腔后抵抗消失，這時(shí)即可輕輕注入藥液。小鼠的一次注射量為0.10.2m1/10g 體重（圖7）。圖7 小鼠腹腔注射法大鼠：腹腔注射與小鼠相同。注射量為12ml/100g體重。豚鼠、貓、免等：豚鼠、貓腹腔注射部位同小鼠。兔在下腹部近腹白線左右兩側(cè)約lcm處，犬在臍后腹白線側(cè)邊12cm處注射為宜。（4）靜脈注射法：大鼠和小鼠：一般采用尾靜脈注射，事先將小鼠和大鼠置于固定的筒內(nèi)或鐵絲罩內(nèi)，或扣于燒杯內(nèi)，

13、使尾巴露出，于4550溫水中浸泡、或用60-100瓦電燈泡烘烤、或用75酒精棉球擦之，使血管擴(kuò)張，選擇尾巴左右兩側(cè)靜脈注射，注射時(shí)若出現(xiàn)隆起的白色皮丘，說明未注入血管，應(yīng)重新向尾根部移動(dòng)注射。一次注射量小鼠為0.050.1ml/10g體重（圖8）。注射完畢后用棉球按壓止血。圖8小鼠尾靜脈注射法家兔：一般采用耳緣靜脈注射?？捎镁凭耷蛲坎炼窟吘夓o脈，或用電燈泡烘烤兔耳使血管擴(kuò)張。以左手指在兔耳下作墊，右手持注射器，針頭經(jīng)皮下進(jìn)入血管。注射時(shí)若無阻力或無發(fā)生隆起現(xiàn)象，說明針頭在血管內(nèi)，注射完畢，壓住針眼，拔去針頭，繼續(xù)壓迫數(shù)分鐘止血（圖9）。圖9 家兔耳緣靜脈注射法豚鼠：一般用前肢皮下頭靜脈注射

14、，后肢小隱靜脈注射也可以。接近下部比較容易刺入靜脈。注射量一般不超過2ml。貓：一般采用前肢皮下頭靜脈注射。注射前先將貓裝入固定袋或籠內(nèi)，左手抓住前肢，酒精棉球涂擦后，從前肢的末稍端將注射器針頭刺入靜脈。證實(shí)針在靜脈內(nèi)后，即可注射。犬：可選用前肢皮下頭靜脈或后肢小隱靜脈注射。以手或橡皮帶把靜脈向心端扎緊，使血管充血。酒精棉球涂檫后，針頭向近心端刺入靜脈，回抽針?biāo)?，倘有回血即可推注藥液（圖10）。 圖10 犬后肢外側(cè)小隱靜脈(左)和前肢背側(cè)皮下頭靜脈(右)注射法實(shí)驗(yàn)二 不同給藥途徑對(duì)藥物作用的影響目的 觀察不同給藥途徑對(duì)尼可剎米作用的影響。器材 注射器（1ml×l）、小鼠灌胃

15、器、玻璃鐘罩。藥品 5尼可剎米溶液。動(dòng)物 小鼠方法小鼠3只，稱重，編號(hào)甲、乙和丙。先觀察正?；顒?dòng)，如呼吸、活動(dòng)度和運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)程度等。然后將甲、乙、丙鼠以5尼可剎米溶液0.2m1/10g體重，分別灌胃、皮下和腹腔注射，觀察給藥后各鼠是否出現(xiàn)興奮、驚厥等癥狀，并記錄出現(xiàn)癥狀的時(shí)間和小鼠的最終結(jié)局。結(jié)果 將觀察結(jié)果列表比較。思考題不同給藥途徑為什么會(huì)影響藥物效應(yīng)？ 實(shí)驗(yàn)三 傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對(duì)麻醉兔血壓的作用 目的 觀察傳出神經(jīng)藥物對(duì)心血管系統(tǒng)的作用，并根據(jù)受體學(xué)說初步分析其作用機(jī)制。器材 RM6240信號(hào)采集系統(tǒng)、壓力換能器、手術(shù)臺(tái)、動(dòng)脈套管、動(dòng)脈夾、手術(shù)刀，小剪刀、普通剪刀、止血鉗、頭皮針

16、、紗布、彈簧夾、螺旋夾、三通管、lml注射器(2支)、20ml注射器(1支)。藥品 肝素、生理鹽水、3戊巴比妥鈉、腎上腺素、去甲腎上腺素、異丙腎上腺素、麻黃堿、酚妥拉明、普萘洛爾、氯化乙酰膽堿、阿托品。動(dòng)物 家兔方法與步驟1 儀器調(diào)試（1）將壓力換能器上連接的三通管用肝素充滿，并排除里面的空氣，關(guān)閉三通管與壓力換能器的連同。（2）壓力換能器輸出插頭接到RM6240生物信號(hào)采集系統(tǒng)的一通道上，如：三通道。2. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)步驟1. 取兔一只，稱重，以1m/kg的劑量靜脈注射3戊巴比妥鈉麻醉兔，并將兔仰縛于兔板上。2. 將壓力換能器上連接的三通管用肝素溶液充滿，并排除里面的空氣，關(guān)閉三通管與壓力換能器

17、的連通。3. 分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，在動(dòng)脈下穿兩根線，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，近心端用動(dòng)脈夾夾住，用眼科剪在動(dòng)脈上剪一“V”形口，將連有壓力換能器的動(dòng)脈套管插入“V”形口中，用線結(jié)扎。檢查后，打開三通管與壓力換能器的連通，以備描記血壓。4. 兔耳緣靜脈置入頭皮針，固定以備給藥，每次給藥后用生理鹽水0.5ml將藥液沖入靜脈內(nèi)。描記一段正常血壓后，開始給藥。經(jīng)頭皮針到耳緣靜脈依次注射下列藥物，藥物反應(yīng)指標(biāo)：血壓變化（升至最高點(diǎn)或降至最低點(diǎn)的高度及其時(shí)間)，心率改變（心率增快或減慢及其時(shí)間）。待前面一個(gè)藥物作用基本消失后，再注射下一個(gè)藥物。(一) 作用于與受體的藥物(1) 腎上腺素 10g/kg (1:10,000

18、溶液，0.1ml/kg)(2) 去甲腎上腺素 10g/kg (1:10,000溶液，0.1ml/kg)(3) 麻黃堿 0.5mg/kg (1:200溶液，0.1ml/kg)(4) 酚妥拉明 0.5mg/kg (10mg/ml，0.05ml/kg)(5) 腎上腺素 10gkg (1:10,000溶液，0.1ml/kg)(二) 作用于受體藥物(著重觀察心率變化)(6) 異丙腎上腺素 1g/kg (1:100,000溶液，0.1ml/kg)(7) 普萘洛爾 0.2mg/kg (1mg/ml，0.2ml/kg)(8) 異丙腎上腺素 1g/kg (1:100,000溶液，0.1ml/kg)(三) 作用于

19、M受體藥物(9) 氯化乙酰膽堿 1g/kg (1:100,000溶液，0.1ml/kg)(10) 阿托品 0.5mg/kg (1:200溶液，0.1ml/kg)(11) 氯化乙酰膽堿 1g/kg (1:100,000溶液，0.1ml/kg)結(jié)果 多媒體描記血壓變化的曲線，注明所用藥物。思考題 從受體理論分析并解釋各藥對(duì)兔血壓的影響。實(shí)驗(yàn)四 氯丙嗪的安定和抗激怒反應(yīng)作用目的 觀察氯丙嗪的中樞安定作用。器材 藥理生理多用儀、電刺激盒、小鐘罩、瓷盤、lml注射器、粗天平、膠布少許。藥品 0.06鹽酸氯丙嗪注射液、生理鹽水。動(dòng)物雄性小鼠方法 1. 儀器準(zhǔn)備：將藥理生理多用儀前面板“刺激方式”置“連續(xù)B

20、”，“A頻率”置2或4HZ（即每次刺激持續(xù)時(shí)間為1/2或1/4秒），“B時(shí)間”置0.5或1秒（即每?jī)纱未碳らg的間隔時(shí)間為1/2或1秒)。將后面板開關(guān)撥向“電驚、激怒”側(cè)(切勿撥向“恒溫、光電”側(cè))。將后面板電壓調(diào)至適當(dāng)強(qiáng)度(140-160V)后，固定之。將與電刺激盒相連的導(dǎo)線插入“交流輸出”的兩孔插座內(nèi)。 2. 動(dòng)物準(zhǔn)備：將準(zhǔn)備好的4只雄性小鼠分別進(jìn)行稱重、編號(hào)。以體重相近兩只配對(duì)，分成對(duì)照組和用藥組。 3. 測(cè)定兩組小鼠產(chǎn)生斗咬對(duì)恃反應(yīng)所需的刺激次數(shù)。4. 對(duì)照組給生理鹽水0.1ml/10g體重ip；用藥組給0.075鹽酸氯丙嗪0.1ml/10g體重ip(7.50mg/kg體重)。15分鐘后

21、重復(fù)3步驟，獲用藥后產(chǎn)生斗咬對(duì)恃所需刺激次數(shù)。5. 對(duì)照組及用藥組小鼠的尾部貼上膠布并頭向下作懸垂?fàn)睿^察各鼠反應(yīng)。結(jié)果 將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表。表 氯丙嗪對(duì)電刺激小鼠激怒反應(yīng)的影響鼠號(hào)組別產(chǎn)生斗咬反應(yīng)所需刺激次數(shù)給藥前給藥后1鹽酸氯丙嗪組  23生理鹽水組  4思考題 氯丙嗪對(duì)小鼠產(chǎn)生安定作用的機(jī)理?有何臨床意義?實(shí)驗(yàn)五 嗎啡的鎮(zhèn)痛作用目的 觀察嗎啡的鎮(zhèn)痛效應(yīng)，掌握鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)方法（熱板法）。器材 熱板鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)儀、粗天平、平口鑷、1ml注射器、棉花少許。藥品 0.15鹽酸嗎啡、生理鹽水。動(dòng)物 雌性小鼠方法 1. 每組取雌性小鼠（18-22g）4只（全班分為十組

22、）依次測(cè)定其痛閾值。2. 調(diào)節(jié)熱板鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)儀的溫度，使之保持在55土1。3. 測(cè)定時(shí)，將小鼠分別放入盒內(nèi)，觀察并記錄小鼠自放入盒內(nèi)至出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間（秒），以此作為該鼠的痛閾值，將小鼠取出。如在30秒內(nèi)不出現(xiàn)添后足，或逃避跳躍者應(yīng)棄之不用。4. 將篩選合格的小鼠4只，稱重編號(hào)，隨機(jī)分成兩組，每隔3分鐘測(cè)定各鼠正常痛閾值共2次，取平均值作為給藥前的痛閾值。5. 給藥組2只小鼠腹腔注射0.15鹽酸嗎啡0.1ml/10g體重，對(duì)照組2只小鼠腹腔注射等容量生理鹽水。于給藥后5、10、20、40、80分鐘各測(cè)痛閾值2次，取平均值。如果60秒無反應(yīng)，應(yīng)立即將小鼠取出，以免時(shí)間太長(zhǎng)把足燙傷，痛閾值計(jì)為60

23、秒。結(jié)果1. 統(tǒng)計(jì)全班結(jié)果，填入下表，并計(jì)算痛閾提高百分率。 表 嗎啡的鎮(zhèn)痛作用（熱板法）記錄藥物編號(hào)劑量痛閾值痛閾值提高百分率給藥前給藥后給藥前給藥后5 10 20 40 605 10 20 40 60 嗎啡生理鹽水 2. 以時(shí)間為橫坐標(biāo)，痛閾提高百分率為縱坐標(biāo)畫出兩組時(shí)-效曲線，以分析藥物的作用強(qiáng)度，作用開始時(shí)間和維持時(shí)間。 注意事項(xiàng)1. 選用雌性小鼠較好，因雄性小鼠受熱后陰囊松馳，與熱板接觸易致反應(yīng)過敏。2. 室溫對(duì)此實(shí)驗(yàn)有一定影響，以15-20為宜，過低時(shí)小鼠反應(yīng)遲鈍，過高時(shí)則過于敏感，易引起跳躍，均影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。3. 正常小鼠一般放在熱板上10-15秒鐘內(nèi)出現(xiàn)不安、舉前肢、舔

24、前足、踢后肢、跳躍等現(xiàn)象，但這些動(dòng)作均不作為疼痛指標(biāo)，只有舔后足才作為疼痛的指標(biāo)。4.動(dòng)物的體重對(duì)結(jié)果有影響，一般用20克左右的體重為宜。思考題闡明嗎啡鎮(zhèn)痛作用原理及鎮(zhèn)痛的時(shí)-效關(guān)系。實(shí)驗(yàn)六 有機(jī)磷藥物的中毒及其解救 目的 觀察有機(jī)磷藥物中毒的癥狀及對(duì)血液膽堿脂酶的抑制情況，根據(jù)阿托品和解磷啶對(duì)有機(jī)磷中毒的解救效果，分析和比較兩藥解毒作用的特點(diǎn)和原理。 器材 1ml、2ml、5ml、10ml注射器、剪刀、試管架、恒溫水浴儀、15ml試管、1ml、2ml、5ml吸管、小燒杯、漏斗、濾紙等。 藥品 5敵百蟲、0.1硫酸阿托品、2.5解磷啶、磷酸緩沖液(PH7.2)，0.007M乙酰膽堿、14鹽酸羥

25、胺、14氫氧化鈉、4N鹽酸、10三氯化鐵溶液、肝素(300u/ml)。 動(dòng)物 家兔 方法1. 家兔兩只，以甲、乙編號(hào)，稱體重后分別觀察下列各項(xiàng)指標(biāo)；活動(dòng)情況、呼吸、瞳孔、唾液、大小便、以及有無肌震顫等，分別記錄于表1內(nèi)。2. 將兔頭固定，用酒精棉球反復(fù)擦耳殼，使血管擴(kuò)張，當(dāng)充血明顯時(shí)， 甲、乙兩兔耳靜脈注射5敵百蟲溶液2ml/Kg（100mg/Kg），密切觀察表1中的各項(xiàng)指標(biāo)，并作記錄，待中毒癥狀明顯時(shí)，然后甲兔靜脈注0.1硫酸阿托品1ml/Kg，乙兔靜脈注射解磷啶 100mg/Kg，密切注意甲、乙兔中毒癥狀的改變，直至中毒癥狀明顯消失時(shí)，加以記錄。注意事項(xiàng)1. 靜脈給敵百蟲后，應(yīng)將阿托品溶液

26、吸好，并作好隨時(shí)注射準(zhǔn)備。2. 個(gè)別家兔靜脈給解磷啶后癥狀加重（藥效慢），嚴(yán)重者可給阿托品控制癥狀。表1 有機(jī)磷農(nóng)藥中毒癥狀及解救觀察指標(biāo)兔號(hào)體重觀察階段活動(dòng)情況瞳孔唾液大小便肌張力肌震顫血膽堿酯酶活力甲 用藥前       敵百蟲后       阿托品后       乙 用藥前       敵百蟲

27、后       解磷啶后        思考題簡(jiǎn)述有機(jī)磷農(nóng)藥的中毒原理、中毒癥狀、解毒原理。實(shí)驗(yàn)六 強(qiáng)心苷對(duì)在體蛙心的作用 目的 學(xué)習(xí)在體蛙心的制備，觀察強(qiáng)心苷對(duì)在體蛙心的作用。 器材 計(jì)算機(jī)多媒體記錄儀、蛙板、張力換能器、探針、普通剪刀、眼科剪、眼科鑷、鐵支架、雙凹夾、燒杯、滴管、蛙心夾、蛙釘、棉線。 藥品 任氏液、無鈣任氏液，1：8000毒毛旋花子甙K，1氯化鈣溶液。動(dòng)物 蛙或蟾蜍方法1. 取蟾蜍搗毀腦和脊髓后，仰位固定于蛙板上，剪開胸腹部皮

28、膚，打開腹腔和胸腔，充分暴露出腹壁靜脈和心臟，將蛙心夾夾在心尖上，有線端小心垂直系在張力換能器上。蛙心表面每隔10分鐘用滴管滴加任氏液以保護(hù)蛙心。2. 描記一段正常心肌收縮曲線，記錄正常心收縮幅度和頻率(次/分)，然后依次從腹壁靜脈加入下列藥物,觀察收縮曲線有何變化。（1）生理鹽水0.4ml（2）洋地黃1：1000，0.4ml（3）洋地黃1：5000，0.4ml（4）1%氯化鈣，0.4ml（5）2%氯化鈣，0.4ml結(jié)果 描繪曲線，記錄每次給藥后心肌收縮強(qiáng)度、心率、節(jié)律的變化。思考題1. 試述強(qiáng)心苷對(duì)心臟的作用特點(diǎn)及原理。2. 為什么應(yīng)用強(qiáng)心苷時(shí)要禁用鈣劑（iv）?附錄 常用生理溶液的成分和配制一、配制生理溶液的要求 1. 滲