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文檔簡(jiǎn)介

1、實(shí)驗(yàn)一 生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定教案一、實(shí)驗(yàn)原理(1)鑒定實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的理念:某些化學(xué)試劑 + 生物組織中有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。(2)具體原理:可溶性還原糖+ 斐林試劑磚紅色沉淀。脂肪小顆粒 + 蘇丹染液橘黃色小顆粒。蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑紫色反應(yīng)。二、目標(biāo)要求初步掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。三、重點(diǎn)、難點(diǎn)1.重點(diǎn)初步掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。通過(guò)實(shí)驗(yàn)的操作和設(shè)計(jì)培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力,掌握探索實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)技巧,從而培養(yǎng)創(chuàng)新思維能力。2.難點(diǎn)根據(jù)此實(shí)驗(yàn)方法、原理,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來(lái)鑒定常見(jiàn)食物的成分。四、實(shí)驗(yàn)材料1.可溶性還原糖的鑒

2、定實(shí)驗(yàn):選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織,以蘋果、梨為最好。2.脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實(shí)驗(yàn)前浸泡3h4h)。3.蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子(或用豆?jié){、或用雞蛋蛋白)。五、儀器、試劑1.儀器:剪刀,解剖刀,雙面刀片,試管,試管架,試管夾,大小燒杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精燈,三腳架,石棉網(wǎng),火柴,研缽,石英砂,紗布,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡。2.試劑:斐林試劑(0.1g/L的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液);蘇丹染液;雙縮脲試劑; 體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液;蒸餾水。六、方法步驟(演示教學(xué)課件) 1.

3、制備試劑。2.可溶性還原糖的鑒定、方法、步驟。3.脂肪的鑒定、方法、步驟。4.蛋白質(zhì)的鑒定、方法、步驟。七、教學(xué)過(guò)程 新課引入:我們?cè)诨瘜W(xué)中學(xué)習(xí)過(guò)物質(zhì)的鑒定,其原理是被鑒定的物質(zhì)與所用的化學(xué)試劑要么發(fā)生顏色反應(yīng),要么產(chǎn)生沉淀,我們生物學(xué)上也采用此原理,在生物學(xué)中物質(zhì)鑒定的理念是:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。新課教學(xué):(具體原理)可溶性還原糖+ 斐林試劑磚紅色沉淀。(水浴加熱)脂肪小顆粒 + 蘇丹染液橘黃色小顆粒。(要顯微鏡觀察)蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑紫色反應(yīng)。(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液)教師提問(wèn):在我們高中生物中還學(xué)習(xí)過(guò)那些利用顏色反

4、應(yīng)鑒定物質(zhì)的?用到了那些化學(xué)試劑?由產(chǎn)生了那些特定的顏色呢?學(xué)生回答:略。如果回答不全教師補(bǔ)充:染色(質(zhì))體+ 醋酸洋紅(或龍膽紫) 紅色(或紫色)淀粉+碘液藍(lán)色DNA+二苯胺試劑藍(lán)色(水浴加熱)大腸桿菌+伊紅-美藍(lán)產(chǎn)生紫色,略帶金屬光澤今天,我們學(xué)習(xí)鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。(一)、還原糖的鑒定1、還原糖的鑒定步驟: 選材: 蘋果:洗凈、去皮、切塊,取5g放如研缽中制備組織樣液 研磨成漿:加石英砂,加5 ml水研磨注入組織樣液2ml 過(guò)濾:將玻璃漏斗插入試管中,漏斗上墊一層紗布加斐林試劑:2ml(由斐林試劑甲液和乙液充分混合而成,不能分別加入)水浴加熱:煮沸2min觀察溶

5、液顏色變化:淺藍(lán)色棕色磚紅色。結(jié)論:還原糖與斐林試劑在加熱煮沸的過(guò)程中生成磚紅色沉淀無(wú)色藍(lán)色磚紅色加熱2min剛配制斐林試劑2ml組織樣液2ml開(kāi)水 2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn):還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織,以蘋果、梨為最好。斐林試劑要兩液混合均勻且現(xiàn)配現(xiàn)用。斐林試劑的配制過(guò)程示意:斐林試劑按一定比例混合均勻斐林試劑甲液( 0.1 g/ml的 NaOH 溶液)斐林試劑乙液( 0.05 g/ml的 CuSO4 溶液)在鑒定尿液中是否含有葡萄糖時(shí)還能用其他那些鑒定方法?學(xué)生回答:還可以用斑氏試劑產(chǎn)生磚紅色沉淀;及糖尿試紙據(jù)糖的由少到多產(chǎn)生淺藍(lán)、淺綠、棕或深棕色。(二)、脂

6、肪的鑒定1、脂肪的鑒定步驟: 取材:花生種子(浸泡3-4h),將子葉削成薄片 取理想薄片制片在薄片上滴2-3滴蘇丹染液去浮色制成臨時(shí)裝片觀察:先在低倍鏡下,找到材料的脂肪滴,然后,轉(zhuǎn)為高倍鏡觀察。結(jié)論:細(xì)胞中的圓形脂肪小顆粒已經(jīng)被染成橘黃色。2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn):.脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實(shí)驗(yàn)前浸泡3h4h)。該試驗(yàn)成功的關(guān)鍵是獲得只含有單層細(xì)胞理想薄片。滴蘇丹染液染液染色2-3min,時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以防細(xì)胞的其他部分被染色。(三)、蛋白質(zhì)的鑒定1、 蛋白質(zhì)的鑒定步驟:呈色反應(yīng)選材:卵清稀釋液或黃豆(浸泡1-2d) 豆?jié){ 濾液雙縮脲試劑B液4 5滴雙縮脲試劑A液2m

7、l組織樣液 (或蛋白稀釋液)2ml 無(wú)顏色變化紫色結(jié)論:蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)。2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn):蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子(或用豆?jié){、或用雞蛋蛋白稀釋液)。雙縮脲試劑的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入雙縮脲試劑B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。還可設(shè)計(jì)一只加底物的試管,不加雙縮脲試劑,進(jìn)行空白對(duì)照,說(shuō)明顏色反應(yīng)的引起是蛋白質(zhì)的存在與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng),而不是空氣的氧化引起。教學(xué)小結(jié):1、斐林試劑和雙縮脲試劑的比較相同點(diǎn):都由NaOH溶液和CuSO4溶液構(gòu)成;斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mL NaOH

8、溶液。不同點(diǎn):CuSO4溶液濃度不一樣:斐林試劑乙液為 0.05 g/mLCuSO4溶液,雙縮脲試劑 B為 0.01g/mLCuSO4溶液。配制比例不一樣。使用方法不一樣:斐林試劑是甲、乙液一起混合后再使用,雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻后,再加入試劑B。鑒定的對(duì)象不一樣:斐林試劑鑒定的是還原糖,雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì)。反應(yīng)本質(zhì)及顏色反應(yīng)不一樣。2、還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定之比較還原糖的鑒定脂肪的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定材料的選?。焊缓?,顏色為白色或近于白色富含脂肪富含蛋白質(zhì)材料的處理:去皮、研磨浸泡試劑的使用:甲液與乙液混合均勻后使用染色和洗浮色不宜過(guò)長(zhǎng)先加A液再滴加B液反應(yīng)的本質(zhì):

9、新制的Cu(OH)2溶液與CHO(還原糖的醛基)反應(yīng)堿性條件下Cu2+ 與肽鍵反應(yīng)3、蘇丹染液與蘇丹染液的比較都是用來(lái)鑒定脂肪。蘇丹染液更易溶于脂肪,所以染色更深,同時(shí)要求染色時(shí)間更短課后作業(yè):基礎(chǔ)檢測(cè)1.可用于鑒定生物組織中還原糖的試劑是( )A.斐林試劑 B.雙縮脲試劑 C.蘇丹染液 D.蘇丹染液2.下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡( )A.還原糖的鑒定 B.蛋白質(zhì)的鑒定C.脂肪的鑒定 D.淀粉的鑒定3.下列哪組試劑在使用過(guò)程中,必須經(jīng)過(guò)加熱( ) A.斐林試劑鑒定還原糖的過(guò)程中B.蘇丹和蘇丹染液在鑒定動(dòng)物組織中的脂肪時(shí)C.雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時(shí)4.用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶

10、液顏色的變化過(guò)程為( )A.無(wú)色一磚紅色(沉淀) B.淺藍(lán)色一磚紅色(沉淀)C.淺藍(lán)色一藍(lán)色一磚紅色(沉淀) D.淺藍(lán)色一棕色一磚紅色(沉淀)5、用蘇丹染液對(duì)脂肪組織進(jìn)行染色時(shí),可用來(lái)沖洗浮色的藥品是( ) A.吸水紙 B.H C.50%的酒精 D.無(wú)水酒精6.用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),必須注意以下幾點(diǎn):(1)被鑒定材料應(yīng)選擇含 較高,顏色為 的植物組織,以 為最好。(2)斐林試劑很不 ,必須 時(shí)再配制并立即使用。配制的方法是將4 5滴 滴入2m1 中。(3)鑒定反應(yīng)必須在 中進(jìn)行。7.在鑒定花生種子細(xì)胞內(nèi)含脂肪的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)先將花生子葉薄片用 染色,然后用 洗去 ,再制成 最后,鏡檢結(jié)果是

11、.8.鑒定豆?jié){中的蛋白質(zhì)時(shí),應(yīng)先加入2m1 ,搖蕩均勻后,再加入34滴 ,再搖蕩均勻后,顏色變化是 .能力素質(zhì)提高9.下列物質(zhì)中,能被蘇丹IV染液染成紅色的是( )A.馬鈴薯塊莖 B.浸軟的蓖麻種子C.蛋清液 D.蘋果10下列可用于鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)材料是( )A.蘋果 B.梨 C.卵白 D.花生種子11.對(duì)斐林試劑和雙縮脲試劑的配方,敘述不正確的是( )A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液B.斐林試劑的配制是將45滴0.05g/ml的CuSO4溶液滴入2ml 0.1gml的 NaOH溶液中即成C.雙縮脲試劑是將34滴0.01g/ml的CuSO4溶液滴入2ML0.1g/ml的 NaOH溶液中混合

12、而成的D.雙縮脲試劑含有兩種試劑:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.O1g/ml的CuSO4溶液12鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑的正確做法是( )A. 先加A液,混合后再加B液搖勻觀察 B. 先加B液,混合后再加A液搖勻觀察C.A、B液混合后加入,搖勻后觀察D.A、B液同時(shí)加入樣液,搖勻后觀察遷移與擴(kuò)展13與硫酸銅溶液在堿性環(huán)境中反應(yīng),生成紫色物質(zhì)的是( )A.淀粉 B.脂肪C.蛋白質(zhì) D.核酸14將面團(tuán)包在紗布中在清水中搓洗,鑒定黏留在紗布上的黏稠物質(zhì)和洗出的白漿用的試劑分別是( )A.碘液、蘇丹溶液 B.雙縮脲試劑、碘液C.亞甲基藍(lán)溶液、蘇丹 D.碘液、斐林試劑15下列實(shí)驗(yàn)中所用試劑錯(cuò)誤的是( )A在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中,使用醋酸洋紅溶液使染色體著色B在提取葉綠體色素實(shí)驗(yàn)

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