抗菌藥誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放作用

1、抗菌藥誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放作用    論文關(guān)鍵詞: 抗菌藥內(nèi)毒素青霉素結(jié)合蛋白論文摘要: 一些實(shí)驗(yàn)研究及臨床資料證明,有些抗菌藥尤其是-內(nèi)酰胺類抗生素在治療革蘭氏陰性菌感染時(shí),有誘導(dǎo)大量內(nèi)毒素釋放的副作用,在臨床上可能引起或加重內(nèi)毒素血癥。不同類型抗菌藥誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放的程度與其對(duì)不同類型青霉素結(jié)合蛋白(PBP)的親和性有關(guān),抗菌藥與PBP3或PBP2結(jié)合所造成的內(nèi)毒素釋放的量較高。因此在抗菌藥的研究設(shè)計(jì)中,除了要考慮其殺菌效力外,還應(yīng)考慮可能誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放的問題。在敗血癥治療中也應(yīng)采取合理的治療方案,以防止或減輕內(nèi)毒素血癥的發(fā)生。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外

2、膜中的脂多糖成分,具有廣泛的生物活性。內(nèi)毒素對(duì)機(jī)體造成雙重影響:少量內(nèi)毒素刺激機(jī)體時(shí),能增強(qiáng)特異性及非特異性免疫力,誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素等;而大量內(nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體循環(huán)時(shí),可造成廣泛而強(qiáng)烈的病理反應(yīng),如彌漫性血管內(nèi)凝血、多器官功能衰竭及休克等。內(nèi)毒素在革蘭氏陰性桿菌引起的感染性休克中起著關(guān)鍵作用13。對(duì)于革蘭氏陰性菌敗血癥病人,有些廣譜抗菌藥能有效地控制菌血癥,但是臨床資料證明病人的死亡率仍然很高,其原因可能與抗菌藥誘導(dǎo)細(xì)菌釋放內(nèi)毒素有關(guān)4,5。由于在抗菌藥治療的過程中,隨著細(xì)菌的裂解,內(nèi)毒素從細(xì)菌的細(xì)胞壁外膜釋放后進(jìn)入血液循環(huán),因而可能加重內(nèi)毒素血癥,從而促進(jìn)一系列的炎癥反應(yīng),造成機(jī)體嚴(yán)重而廣泛的病理

3、損傷。1 抗菌藥誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放在體外細(xì)菌培養(yǎng)系統(tǒng)中,已發(fā)現(xiàn)多種抗菌藥如-內(nèi)酰胺類68、氨基糖苷類9、氟喹諾酮類藥物10等均能引起不同程度的內(nèi)毒素釋放,其中-內(nèi)酰胺類抗生素(如氨芐西林,頭孢噻肟,頭孢他啶,氨曲南等)能誘導(dǎo)多種細(xì)菌包括野生菌和突變菌(如大腸埃希氏菌,銅綠假單胞菌68,肺炎克雷伯氏菌11,流感嗜血菌12等)釋放大量的內(nèi)毒素,在這些抗菌藥處理的細(xì)菌培養(yǎng)上清液中能檢測到內(nèi)毒素含量比無抗菌藥處理者高幾倍甚至幾十倍。-內(nèi)酰胺類抗生素誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放常常與其造成的細(xì)菌溶解伴隨發(fā)生,并與細(xì)菌溶解程度有一定關(guān)系。內(nèi)毒素-細(xì)胞因子級(jí)聯(lián)反應(yīng)所造成的全身炎癥過程是發(fā)生內(nèi)毒素休克的重要環(huán)節(jié)?？咕幾饔?/p>

4、于細(xì)菌后,由于細(xì)菌裂解及伴隨的內(nèi)毒素釋放到培養(yǎng)上清液中,其上清液可刺激巨噬細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生大量的腫瘤壞死因子(TNF)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)1315,這些炎性因子的大量產(chǎn)生可促進(jìn)內(nèi)毒素休克的發(fā)生。有些動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)可觀察到與體外實(shí)驗(yàn)一致的結(jié)果。給大腸埃希氏菌性腹膜炎家兔注射慶大霉素后,動(dòng)物血液中細(xì)菌數(shù)量急劇減少,但血漿中內(nèi)毒素含量較未治療者明顯增高9。用氨芐西林治療幼年大鼠流感嗜血菌性腹膜炎,造成較多的內(nèi)毒素釋放入血液循環(huán)12。燒傷后感染肺炎克雷伯氏菌的敗血癥小鼠,經(jīng)頭孢他啶、氨曲南、亞胺培南治療后,小鼠血液中內(nèi)毒素含量明顯增高,同時(shí)內(nèi)毒素激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量的IL-616。大腸埃

5、希氏菌性腦膜炎家兔,經(jīng)美羅培南和頭孢噻肟治療后,在腦脊液中可檢測到高含量的內(nèi)毒素,同時(shí)腦脊液中TNF濃度也增高17。不同類型的抗菌藥所誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放水平有所不同,如拉氧頭孢對(duì)菌血癥的清除作用與慶大霉素相似,但其誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放的量比慶大霉素高20倍18。用D-半乳糖胺處理小鼠后,再造成大腸埃希氏菌性腹膜炎模型,發(fā)現(xiàn)用頭孢他啶治療比用亞胺培南治療引起更多的小鼠死亡,推測頭孢他啶誘導(dǎo)更多的內(nèi)毒素釋放19。雖然動(dòng)物體內(nèi)的研究結(jié)果不能外推到人,但這些研究證據(jù)提示了抗菌藥促進(jìn)內(nèi)毒素釋放,加重內(nèi)毒素血癥的可能性。有些革蘭氏陰性菌敗血癥患者在接受抗菌藥治療后,盡管血液中細(xì)菌數(shù)減少或消失,但大部分病人呈現(xiàn)血漿

6、中游離及總內(nèi)毒素含量增高(游離內(nèi)毒素含量升高250倍)5,20。流感嗜血菌感染的腦膜炎患兒,在接受頭孢他啶治療后,所有患兒腦脊液中游離內(nèi)毒素含量均增高,同時(shí)腦脊液中乳酸鹽及乳酸脫氫酶增高及葡萄糖下降,提示內(nèi)毒素增高導(dǎo)致炎癥加重21。用抗菌藥治療泌尿系感染后,尿液培養(yǎng)顯示細(xì)菌數(shù)下降,但尿中內(nèi)毒素含量卻明顯增高。內(nèi)毒素釋放的程度與所用的抗菌藥種類有關(guān),其中-內(nèi)酰胺類抗生素所造成的內(nèi)毒素增高更為明顯22。這些臨床資料表明,革蘭氏陰性菌敗血癥患者經(jīng)有些抗菌藥治療后,病人的菌血癥減輕,但內(nèi)毒素血癥改善不明顯或反而加重,這可能是病人高死亡率的原因之一。2 青霉素結(jié)合蛋白與抗菌藥誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放青霉素結(jié)合蛋

7、白(PBP)是存在于革蘭氏陰性桿菌細(xì)胞漿膜外周間隙中的一類酶蛋白質(zhì)。有些抗菌藥如-內(nèi)酰胺類抗生素的抑菌作用機(jī)制就在于與PBP結(jié)合,使其活性受到抑制,從而引起細(xì)胞壁肽聚糖的合成受阻及細(xì)菌內(nèi)溶解酶的激活,因而造成菌體裂解和死亡。但與此同時(shí),細(xì)胞壁外膜上的內(nèi)毒素可能被釋放出來23,24。不同類型的抗菌藥誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放的能力與其對(duì)不同PBP的親和力有關(guān)?？咕幣cPBP1結(jié)合可造成細(xì)菌快速溶解;而抑制PBP2則使桿菌生長成球形體;抑制PBP3則使細(xì)菌生長成長絲狀。主要結(jié)合于PBP2和PBP1的抗菌藥(如亞胺培南)作用于革蘭氏陰性桿菌后,能很快引起內(nèi)毒素釋放(與細(xì)菌作用后12h);而主要結(jié)合于PBP3的抗

8、菌藥(如頭孢噻肟,頭孢他啶,氨曲南等)誘導(dǎo)內(nèi)毒素的釋放較晚(作用后4h左右)7。實(shí)驗(yàn)證明PBP3抑制劑比PBP2抑制劑所造成的內(nèi)毒素釋放量要高得多6,這是由于與PBP3結(jié)合抑制了細(xì)菌隔膜的形成,從而使細(xì)菌生長成長絲狀,因此細(xì)菌的質(zhì)量變大及內(nèi)毒素的合成不斷增高8。一般來說,每種-內(nèi)酰胺類抗生素不僅僅作用于一種PBP,與何種PBP結(jié)合與所用劑量有關(guān)。例如,所謂的PBP3抑制劑(如頭孢噻肟,頭孢他啶)在較低濃度(最低抑菌濃度)時(shí),主要與PBP3結(jié)合,誘導(dǎo)細(xì)菌長絲形成;而在較高濃度時(shí),則對(duì)PBP1有較高的親和力,因而造成細(xì)菌快速溶解。主要作用于PBP3的抗菌藥在低于最低抑菌濃度時(shí),仍能誘導(dǎo)大量的內(nèi)毒素

9、釋放而不伴有明顯的細(xì)菌溶解,此時(shí)內(nèi)毒素的釋放產(chǎn)生于長絲形成時(shí)非溶解性細(xì)胞壁損傷7。3 防止抗菌藥誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放菌血癥和內(nèi)毒素血癥是革蘭氏陰性菌敗血癥的兩大致死狀態(tài)。除了要用強(qiáng)力、高效抗菌藥控制菌血癥外,防止治療過程中的內(nèi)毒素釋放是降低病人死亡率的重要一環(huán)。研究表明,抗菌藥引起的細(xì)菌裂解與其誘導(dǎo)的內(nèi)毒素釋放有明顯的關(guān)系,由于釋放出的可溶性內(nèi)毒素的活性比其固著于菌體時(shí)的活性要高得多,一旦大量的內(nèi)毒素從菌體釋放到血液或體液中,將會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈的毒性反應(yīng)。有些殺菌性抗菌藥(如-內(nèi)酰胺類抗生素)的殺菌作用就是通過影響細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,從而造成細(xì)胞壁缺陷,隨之導(dǎo)致細(xì)菌裂解而實(shí)現(xiàn)的。因此,對(duì)于這些抗菌藥來說,

10、清除菌血癥和可能誘導(dǎo)的內(nèi)毒素血癥成為治療敗血癥過程中的矛盾。只有將這對(duì)矛盾合理地解決,才能降低病人的死亡率。內(nèi)毒素是具有多價(jià)陰離子特性的大分子物質(zhì),有些陽離子多肽能與之結(jié)合,并降低其毒性2527。近年的研究發(fā)現(xiàn),在傳統(tǒng)中藥中有著藥用歷史的雞蛋清中含有一種多肽蛋清溶菌酶,是一種富含陽離子的白質(zhì),這種蛋白質(zhì)與-內(nèi)酰胺類抗生素聯(lián)合應(yīng)用于大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌等細(xì)菌培養(yǎng)時(shí),可明顯阻止抗菌藥誘導(dǎo)的細(xì)菌溶解,并使釋放到培養(yǎng)上清液中的內(nèi)毒素含量明顯降低,且同時(shí)對(duì)抗菌藥的殺菌效力無明顯影響。細(xì)菌經(jīng)蛋清溶菌酶與抗菌藥共同作用后,其培養(yǎng)上清液對(duì)動(dòng)物的致炎活性明顯減弱,在動(dòng)物體內(nèi)誘導(dǎo)的TNF和IL-6生成明顯減

11、少。蛋清溶菌酶與抗菌藥聯(lián)合治療粒細(xì)胞減少癥合并大腸埃希氏菌J5腹膜感染的小鼠,動(dòng)物存活率較單獨(dú)用抗菌藥治療時(shí)增高26,27。這種殺菌與溶菌及內(nèi)毒素釋放明顯分離的作用,對(duì)于敗血癥的治療有益處。    內(nèi)毒素的生物活性廣泛而強(qiáng)烈,對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重的損害。由于不同的抗菌藥誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放的量不同,因此在抗菌藥的研究設(shè)計(jì)中除了考慮到殺菌效力外,還應(yīng)考慮到可能誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放的問題。對(duì)于敗血癥病人,由于菌血癥也是一個(gè)致死因素,抗菌藥仍然是必不可少的治療手段,因此,在治療中應(yīng)采取合理的治療方案以防止或減輕內(nèi)毒素血癥。參考文獻(xiàn)1 Rietschel ET, Brade L,

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