現(xiàn)代技術(shù)檢測重點(diǎn)

1、樣品前處理（小結(jié)）1、樣品前處理的定義？指樣品的制備和對樣品中待測組分進(jìn)行提取、凈化、濃縮的過程2、樣品前處理的原則？u 樣品必須完全溶解，不能有待測組分的流失；u 不能污染，或引入待測組分、干擾物質(zhì)；u 方法簡單易行、快速、實(shí)惠、安全、污染小；u 所用器皿與樣品量相適3、樣品提取的方法有哪幾種？液-液萃取(LLE)、液-固萃取、柱色譜萃取4、凝膠滲透色譜的原理及洗脫順序？基于物質(zhì)分子大小不同來實(shí)現(xiàn)分離的一種色譜技術(shù)。樣品中的大分子先被洗脫下來，小分子后被洗脫下來。5、固相萃取的原理？固相萃?。?SPE）是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，與樣品的基體和干擾物分離，然后再用洗脫液洗脫

2、或加熱解吸附，從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。6、固相萃取的過程？（1） 吸附劑的預(yù)處理：為保證萃取良好的再現(xiàn)性，固相柱在使用前必須用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑?。?） 添加樣品（3） 固相柱的洗滌（4） 固相柱的干燥（5）分析物的洗脫液質(zhì)聯(lián)用（小結(jié)）1、質(zhì)譜儀有哪幾部分組成？進(jìn)樣系統(tǒng)離子源質(zhì)量分析器檢測器2、 離子源有哪幾種？（電子）EI電離源、（化學(xué)）API電離源3、大氣壓電離源有哪幾種及它們各自的適用范圍？APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子。ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。4、質(zhì)量分析器有哪幾種及適用范圍？四極桿分析器：多用于定量，最常用離子阱

3、質(zhì)量分析器：推斷結(jié)構(gòu)飛行時間析器：精確于分子量毛細(xì)管電泳（小結(jié)與上屆重點(diǎn)）1、什么是電泳？在電解質(zhì)溶液中，位于電場中的帶電離子在電場力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)象，稱之為電泳。2、什么是電滲流？電滲現(xiàn)象中整體移動著的液體叫電滲流（電滲現(xiàn)象：當(dāng)固體與液體接觸時，固體表面由于某種原因帶一種電荷，則因靜電引力使其周圍液體帶有相反電荷，在液-固界面形成雙電層，二者之間存在電位差。當(dāng)液體兩端施加電壓時，就會發(fā)生液體相對于固體表面的移動，這種液體相對于固體表面的移動的現(xiàn)象叫電滲現(xiàn)象。）3、什么是電泳淌度，電滲淌度和表觀淌度？電泳淌度：單位場強(qiáng)下，離子的電泳速率為電泳淌度(&#

4、181;ep )。電滲淌度：電滲流的遷移速率ueof和電場強(qiáng)度E成正比。單位電位梯度的電滲速率為電滲淌度µeof表觀淌度：單位場強(qiáng)下，離子在實(shí)際分離過程中的遷移速度（表觀遷移速度）4、各種電性離子在毛細(xì)管柱中的遷移速度是怎么樣的？（石英毛細(xì)管，帶負(fù)電）陽離子運(yùn)動方向與電滲流一致，最先流出中性粒子運(yùn)動方向與電滲流一致陰離子運(yùn)動方向與電滲流相反，在中性離子后流出；5、 改變電滲流方向的方法有哪些（1）毛細(xì)管改性（2）加電滲流反轉(zhuǎn)劑6、電滲流受哪些因素影響？電場強(qiáng)度的影響 電滲流速度和電場強(qiáng)度成正比，當(dāng)毛細(xì)管長度一定時，電滲流速度正比于工作電壓。毛細(xì)管材料的影響 不同材料毛細(xì)管的表面電荷特

5、性不同，產(chǎn)生的電滲流大小不同； 溶液PH的影響對于石英毛細(xì)管，溶液pH增高時，表面電離多，電荷密度增加，管壁zeta電勢增大，電滲流增大； pH<3，完全被氫離子中和，表面電中性，電滲流為零。分析時，采用緩沖溶液來保持pH穩(wěn)定。 溫度的影響毛細(xì)管內(nèi)溫度的升高，使溶液的黏度下降，電滲流增大。溫度每變化1，將引起背景電解質(zhì)溶液黏度變化2%3%； 添加劑的影響（1）加入濃度較大的中性鹽，如K2SO4，溶液離子強(qiáng)度增大，使溶液的黏度增大，電滲流減小。（2）加入表面活性劑，可改變電滲流的大小和方向； 加入不同陽離子表面活性劑來控制電滲流。 加入陰離子表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉（SDS），可以使壁

6、表面負(fù)電荷增加，zeta電勢增大，電滲流增大；（3）加入有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈，使電滲流增大。第8章薄層色譜法（上課知識點(diǎn)加上屆重點(diǎn)）1、對吸附劑的要求（1）、應(yīng)不溶于所使用的溶劑以及與所使用的溶劑和樣品中各組分不起化學(xué)反應(yīng)（2）、應(yīng)具有較大的吸附表面（吸附容量）和一定的吸附力，對被分離物質(zhì)應(yīng)有足夠的分辨力（3）、吸附劑顆粒大小要均勻，保持良好的重復(fù)性2、分離效率與什么有關(guān)：分離效率與其粒度、孔徑及表面積等有關(guān)3、常用溶劑的極性強(qiáng)弱順序：（大概記一下）水酸吡啶甲醇乙醇正丙醇石油醚4、混合溶劑1、先用單一的溶劑展開2、若Rf值太小，則加入一定量的極性強(qiáng)的溶劑，如乙醇、丙酮等3、如果Rf值太大，則加

7、入適量極性弱的溶劑，如環(huán)已烷、石油醚等，以降低極性4、可加入一定比例的酸或堿，使斑點(diǎn)集中5、薄層色譜操作方法制板（均勻）、點(diǎn)樣（集中）、展開（多種方式，預(yù)飽和）、顯色6、分配薄層色譜：利用被分離組分對固體表面活性吸附中心吸附能力的差別而實(shí)現(xiàn)分離7、吸附薄層色譜：利用被分離組分在固定相與流動相中的分配系數(shù)不同，各組分遷移速率不同而實(shí)現(xiàn)分離的方法8、比移值的概念：用來表征斑點(diǎn)位置的基本參數(shù)是保留因子，通常稱作比移值，用Rf表示。第9章紫外可見分光光度分析法（上課知識點(diǎn)，黑體字為上屆重點(diǎn)）1、紫外可見區(qū)：紫外區(qū)200400nm，可見區(qū)400760nm2、吸光定律：（我找不到答案）3、紫外可見分光光法

8、是一種電子躍遷光譜4、發(fā)色團(tuán)，助色團(tuán)，紅移，藍(lán)移，增色效應(yīng)，減色效應(yīng)5、分光光度計的組成：光源單色器樣品室檢測器顯示記錄系統(tǒng)6、檢測器有哪些：光電池、光電管、光電倍增管1、紫外可見分光光度法是一種分子吸收光譜，紫外-可見吸收光譜主要研究共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物2、光是一種電磁波，具有波粒二象性。光的波動性可用波長l、頻率n、光速c、波數(shù)（cm-1）等參數(shù)來描述: l n = c ； 波數(shù) = 1/ l = n /c粒子性則用能量描述,光是由光子流組成，光子的能量： E = h n = h c / l （Planck常數(shù)：h=6.626 × 10 -34 J · S ) 光的

9、波長越短（頻率越高），其能量越大。3、分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級和轉(zhuǎn)動能級， 三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng)的能量分子的內(nèi)能：電子能量Ee 、振動能量Ev 、轉(zhuǎn)動能量Er 即 EEe+Ev+Er e>v>r 4、生色團(tuán)，助色團(tuán)生色團(tuán)（和助色團(tuán)）是分子產(chǎn)生紫外-可見吸收的條件生色團(tuán) (chromophore)：能產(chǎn)生紫外-可見吸收的官能團(tuán)， 如一個或幾個不飽和鍵C=C, C=O, N=N, N=O等助色團(tuán) (auxochrome)：有一些含有n電子的基團(tuán)(如OH、OR、NH、NHR、X等)，它們本身沒有生色功能(不能吸收>200nm的光)，但當(dāng)它們與生色團(tuán)相

10、連時，就會發(fā)生n共軛作用，增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力(吸收波長向長波方向移動，且吸收強(qiáng)度增加)，這樣的基團(tuán)稱為助色團(tuán)。5、紅移，藍(lán)移由于化合物結(jié)構(gòu)變化（共軛、引入助色團(tuán)取代基）或采用不同溶劑后 吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移 吸收峰位置向短波方向移動，叫藍(lán)移增色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度增強(qiáng)的效應(yīng) 減色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度減小的效應(yīng)6、影響紫外-可見吸收光譜的因素（1）共軛效應(yīng)的影響p電子共軛體系增大，lmax紅移，e max增大空間阻礙使共軛體系破壞，lmax藍(lán)移，e max減小。 （2） 取代基的影響 給電子基：含未共用電子對的原子的基團(tuán)。如-NH2, -OH等。吸電子基：易吸引電子而使電子容易流動的基團(tuán)。

11、如：-NO2, -CO等a) 給電子基未共用電子對流動性大，形成p-p共軛，降低能量，lmax紅移。b) 吸電子基的存在產(chǎn)生p電子的永久性轉(zhuǎn)移，lmax紅移。c) p電子流動性增加，吸收光子的吸收分?jǐn)?shù)增加，吸收強(qiáng)度增加。d) 給電子基與吸電子基同時存在，產(chǎn)生分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移吸收，lmax紅移，e max增加。 （3） 溶劑的影響a) 溶劑極性增大，p®p*躍遷波長紅移b) 溶劑極性增大，n®p*躍遷波長藍(lán)移7、朗伯比爾定律（定量依據(jù)）朗伯比爾定律：在一定條件下，物質(zhì)的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。 A：吸光度；描述溶液對光的吸收程度； b：光程長度，單位cm； c

12、：溶液的量濃度，單位mol·L-；：摩爾吸光系數(shù)，單位L·mol-·cm-；c：溶液的濃度，單位g·L-a：吸光系數(shù)，單位L·g-·cm- a與的關(guān)系為： a =/M （M為摩爾質(zhì)量） 8、關(guān)于摩爾吸光系數(shù)的討論· 摩爾吸光系數(shù)在數(shù)值上等于濃度為1 mol·L-1、液層厚度為1cm時該溶液在某一波長下的吸光度；· 吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)· 不隨濃度c和光程長度b的改變而改變。在溫度和波長等條件一定時，僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；· 可作為定性鑒定的參

13、數(shù)；· 同一吸收物質(zhì)在不同波長下的值是不同的。在最大吸收波長max處的摩爾吸光系數(shù)，以max表示。· max表明了該物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。· max越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。>105：超高靈敏；=(610）×104 ：高靈敏；<2×104 ：低靈敏。9、單色器的作用將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出任一波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。 入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器； 準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束； 色散元件：將復(fù)合光分解成單色光；棱鏡

14、或光柵；聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫； 出射狹縫。10、顯色劑的類型（知道有哪幾類）無機(jī)顯色劑：硫氰酸鹽、鉬酸銨、過氧化氫等幾種。有機(jī)顯色劑：種類繁多偶氮類顯色劑：本身是有色物質(zhì)，生成配合物后，顏色發(fā)生明顯變化；具有性質(zhì)穩(wěn)定、顯色反應(yīng)靈敏度高、選擇性好、對比度大等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用最廣泛。偶氮胂、PAR等。 三苯甲烷類：鉻天青S、二甲酚橙等11、吸光度讀數(shù)范圍用儀器測定時應(yīng)盡量使溶液透光度值在T %=1565% (吸光度 A = 0.800.20)。12、雙波長分光光度法不需空白溶液參比；但需兩個單色器獲得兩束單色光(1和2)；以參比波長1處的吸光度A1作為參比，來消除

15、干擾。 AA2A1(21)bc優(yōu)勢：在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、測量精密度高第10章紅外吸收光譜（上屆重點(diǎn)）1、紅外吸收光譜概念：是利用物質(zhì)分子對紅外光的吸收，得到與分子結(jié)構(gòu)相應(yīng)的紅外光譜力，從而來鑒別分子結(jié)構(gòu)的方法。2、振動形式：雙原子分子只有一種振動形式，多原子分子引起偶極炬變化的振動，一般可分為兩大類，即伸縮振動、變形振動3、產(chǎn)生光譜的條件（1）紅外輻射的能量必須與分子的振動能級差相等（2）分子振動過程中其偶極矩必須發(fā)生變化。4、特征區(qū)域的概念：有機(jī)化合物的分子中一些主要官能團(tuán)的特征吸收多發(fā)生在紅外區(qū)域，40001333cm-1。該區(qū)域吸收峰比

16、較稀疏，容易辯論，幫通常把該區(qū)域叫特征譜帶區(qū)。5、指紋區(qū)的意義，概念概念：紅外吸收光譜上1333400cm-1的低頻區(qū)，該區(qū)域中出現(xiàn)的譜帶主要是C-X（X=C、N、O）單鍵的伸縮振動及各種彎曲振動，由于這些鍵的鍵強(qiáng)差別不大，原子質(zhì)量又相似，所以譜帶出現(xiàn)的區(qū)域也相近，互相間影響較大，加之各種彎曲振動能級差小，所以這一區(qū)域譜帶特別密集，猶如人的指紋，故稱指紋區(qū)。意義：各個化合物在結(jié)構(gòu)上的微小差異在指紋區(qū)都會得到反映，因此，在核對和確認(rèn)有機(jī)化合物時用處很大。6、兩種紅外光譜的優(yōu)缺點(diǎn)？（不知道問什么）色譜型紅外光譜儀：價格低，速度慢，分辨率低，一般采用雙光束，（與紫外不同的是色譜型的樣品是放在光源和單

17、色器之間）。傅立葉變換型紅外光譜儀：掃描速度快，適合食品聯(lián)用；不需要分光，信號強(qiáng)，靈敏度高；儀器小巧。7、紅外的樣品（可以是固、液、氣態(tài)）質(zhì)譜法（上屆重點(diǎn)）1、 質(zhì)譜法的主要組成（六部分）進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、質(zhì)量分析器、檢測器、真空系統(tǒng)和工作站2、 離子源有哪幾種電子轟擊源（EI）、化學(xué)電離源（CI）、場致電離源（FI）、光致電離源（PI）3、 質(zhì)量分析器有哪幾種，用于？四極桿分析器：多用于定量，最常用離子阱質(zhì)量分析器：推斷結(jié)構(gòu)飛行時間析器：精確于分子量4、 最常有的串聯(lián)質(zhì)譜（最常用的，掃描方法，多反應(yīng)監(jiān)測，是如何掃描的）氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已發(fā)展成為最完善，最成熟的色譜聯(lián)用技術(shù)。全掃描模式（Scan）

18、：掃描的質(zhì)量范圍覆蓋被測化合物的分子離子和碎片離子的質(zhì)量是化合物的全譜可用于譜庫檢索選擇離子監(jiān)測模式（SIM）：跳躍式地掃描某幾個選定的質(zhì)荷比，獲得的質(zhì)譜圖不是化合物的全譜子離子掃描：-掃描指定母離子的子離子碎片，所得到的質(zhì)譜圖只能是由指定的母離子經(jīng)碰撞產(chǎn)生的母離子掃描：掃描能丟失指定質(zhì)譜碎片的母離子，所得到的母離子質(zhì)譜峰一定是能丟失指定質(zhì)譜碎片的母離子。多反應(yīng)監(jiān)測（Multiple Reaction Monitor, LC/MS/MS)：監(jiān)測特定母離子產(chǎn)生特定子離子碎片的化合物，目標(biāo)化合物的跟蹤，提高采集靈敏度，是靈敏度最高的定量采集方式上屆氣相色譜法重點(diǎn)R=1.5是兩個相鄰色譜峰完全分離的

19、標(biāo)志。峰形的擴(kuò)張。碳有機(jī)化合物射線載氣（N2或Ar）電離電場恒定基流。電負(fù)性組分倒峰氮?dú)夥蛛x效能主要受固定相的性質(zhì)的影響基本原則指載氣、色譜柱、溫度以及進(jìn)樣操作（對于同系物，f可消去）即1、 外標(biāo)法用組分的純品為對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和試樣中待測組分的響應(yīng)信號相比較進(jìn)行定量的方法。 外標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)： 簡便，不用校正因子，不必加內(nèi)標(biāo)物只需待測組分出峰。外標(biāo)法的缺點(diǎn)： 結(jié)果的準(zhǔn)確度與進(jìn)樣量的重復(fù)性和操作條件的穩(wěn)定性有關(guān)。2、 內(nèi)標(biāo)法以一定量的純物質(zhì)（內(nèi)標(biāo)物），加入到準(zhǔn)確稱定的試樣中再進(jìn)樣分析，根據(jù)試樣和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量及峰面積和相對校正因子，求出某組分的百分含量。（可以看看薄的那本復(fù)印本的206頁的計算題

20、幫助理解）優(yōu)點(diǎn)：1、只需內(nèi)標(biāo)物及目標(biāo)組分出峰;2、 操作條件變化而引起的誤差小3、適合于復(fù)雜樣品和微量組分的定量分析缺點(diǎn)： 1、 內(nèi)標(biāo)物選擇難 2、 需要準(zhǔn)確計量樣品和內(nèi)標(biāo)的量內(nèi)標(biāo)物的選擇：（1）試樣中不存在的純物質(zhì)，與樣品中的組分完全分離； （2）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)與待測組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相近（3）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)為純物質(zhì)或含量已知（4）內(nèi)標(biāo)物與樣品互溶，不發(fā)生不可逆化學(xué)反應(yīng)內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法：先將待測組分的純物質(zhì)配成不同濃度的系列的系列標(biāo)準(zhǔn)試樣，分別加入等量的內(nèi)標(biāo)物，進(jìn)樣分析，測得Ai和As,以Ai/As對Xi作圖得到一直線即內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法。液質(zhì)聯(lián)用 APCI（大氣壓化學(xué)電離 ）和ESI（電噴霧電離）的不同點(diǎn)（主

21、要看一下應(yīng)用范圍）¨ 離子產(chǎn)生的方式 APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。 ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化。¨ 能被分析的化合物類型不同 APCI弱極性，小分子化合物，且具有一定的揮發(fā)性 ESI極性化合物和生物大分子。¨ 流速 ESI0.001到0.25 ml/min。 APCI0.2到2 ml/min。¨ 多電荷 APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子。 ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。正相色譜法：流動相極性小于固定相極性的稱為正相色譜法。用于分離在有機(jī)溶劑中有較高溶解度的化合物，如脂溶性維生素等。反相色譜法：流動相極性大于固定相極性的稱為反相色譜法。主要用于分離非極性至中等極性的各類分子型化合物。高效液相色譜的組成高壓輸液系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測系統(tǒng)數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)質(zhì)譜法質(zhì)譜圖（大概了解一下，下面的