執(zhí)業(yè)藥師考試-色譜法

1、色譜法色譜法 第六章第六章色譜法色譜法 利用各組分在固定相和流動(dòng)利用各組分在固定相和流動(dòng) 相之間分配系數(shù)的差異得到相之間分配系數(shù)的差異得到 分離，再逐個(gè)進(jìn)行分析分離，再逐個(gè)進(jìn)行分析是分離、分析同時(shí)進(jìn)行的一類(lèi)分析方法是分離、分析同時(shí)進(jìn)行的一類(lèi)分析方法高效液相色譜法高效液相色譜法（HPLC）氣相色譜法氣相色譜法（GC） 薄層色譜法薄層色譜法（TLC） 常用的色譜法常用的色譜法 1. 分配系數(shù)分配系數(shù)（K） 各組分在固定相和流動(dòng)相之間各組分在固定相和流動(dòng)相之間 達(dá)到平衡時(shí)的濃度之比達(dá)到平衡時(shí)的濃度之比msc/cK 2. 容量因子容量因子（k） （質(zhì)量分配系數(shù)）（質(zhì)量分配系數(shù)） 各組分在固定相和流動(dòng)相

2、之間各組分在固定相和流動(dòng)相之間 達(dá)到平衡時(shí)的質(zhì)量之比達(dá)到平衡時(shí)的質(zhì)量之比msmmssmsVVKVCVCWWk kkAkB 是分離的先決條件是分離的先決條件容量因子容量因子（k） （質(zhì)量分配系數(shù)）（質(zhì)量分配系數(shù)） 不僅與被測(cè)組分、固定相、流動(dòng)不僅與被測(cè)組分、固定相、流動(dòng)相及溫度有關(guān)，還與兩相體積有關(guān)。相及溫度有關(guān)，還與兩相體積有關(guān)。容量因子比分配系數(shù)更易測(cè)定。容量因子比分配系數(shù)更易測(cè)定。 3. 色譜過(guò)程方程色譜過(guò)程方程 保留時(shí)間與分配系數(shù)的關(guān)系保留時(shí)間與分配系數(shù)的關(guān)系）（）（k1tVmVsK1tt00R 第一節(jié)第一節(jié) 薄層色譜法薄層色譜法 薄層色譜法薄層色譜法（TLC法）法） 將固定相涂布在玻璃

3、、塑料或金將固定相涂布在玻璃、塑料或金 屬板上形成薄層，在此薄層上進(jìn)行色屬板上形成薄層，在此薄層上進(jìn)行色 譜分離的方法譜分離的方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、高選擇性、顯色方便簡(jiǎn)便、快速、靈敏、高選擇性、顯色方便1. 吸附薄層色譜的分離原理吸附薄層色譜的分離原理 點(diǎn)在薄層板上的樣品不斷點(diǎn)在薄層板上的樣品不斷 地被吸附劑吸附和被展開(kāi)劑溶解地被吸附劑吸附和被展開(kāi)劑溶解 而解吸，并隨展開(kāi)劑向前移動(dòng)，而解吸，并隨展開(kāi)劑向前移動(dòng)， 從而產(chǎn)生差速遷移得到分離從而產(chǎn)生差速遷移得到分離一、基本原理一、基本原理2. 比移值比移值0fllR 展開(kāi)劑遷移距離展開(kāi)劑遷移距離組分遷移距離組分遷移距離Rf 最佳范圍最佳范圍 0.

4、3 0. 5 可用范圍可用范圍 0. 2 0. 8 Oll03. 分離度分離度（分辨率）（分辨率）（R） 薄層板上薄層板上 兩相鄰斑點(diǎn)中心距離與兩相鄰斑點(diǎn)中心距離與 兩斑點(diǎn)平均寬度的比值兩斑點(diǎn)平均寬度的比值 21WWd2R 色譜圖上色譜圖上 兩色譜峰頂尖距離與兩兩色譜峰頂尖距離與兩 色譜峰的峰寬和之比色譜峰的峰寬和之比二、操作方法二、操作方法1. 吸附劑吸附劑活化活化 105110加熱加熱30 硅膠活性強(qiáng)弱與含水量有關(guān)，水硅膠活性強(qiáng)弱與含水量有關(guān)，水分越高活性越低，吸附力越小分越高活性越低，吸附力越小硅膠硅膠H、硅膠、硅膠HF254硅膠硅膠G、硅膠、硅膠GF254（一）吸附劑和展開(kāi)劑的選擇（一

5、）吸附劑和展開(kāi)劑的選擇（1）硅膠）硅膠2. 氧化鋁氧化鋁 酸性、中性和堿性酸性、中性和堿性 活性與含水量有關(guān)活性與含水量有關(guān)3. 聚酰胺聚酰胺 表面有酰胺基，可與酚、羧表面有酰胺基，可與酚、羧 酸、氨基酸等形成氫鍵酸、氨基酸等形成氫鍵 2. 展開(kāi)劑展開(kāi)劑極性較強(qiáng)組分極性較強(qiáng)組分 活性低的薄層板活性低的薄層板 極性較強(qiáng)的展開(kāi)劑極性較強(qiáng)的展開(kāi)劑極性較弱組分極性較弱組分 活性高的薄層板活性高的薄層板 極性較弱的展開(kāi)劑極性較弱的展開(kāi)劑（二）薄層板的制備（二）薄層板的制備（三）點(diǎn)樣與展開(kāi)（三）點(diǎn)樣與展開(kāi)（四）斑點(diǎn)的定位（四）斑點(diǎn)的定位普通板普通板 日光下（直接或顯色）日光下（直接或顯色） 紫外燈下（熒光

6、）紫外燈下（熒光）熒光板熒光板 熒光淬滅熒光淬滅三、應(yīng)用三、應(yīng)用（一）鑒別（一）鑒別 對(duì)照品法對(duì)照品法 比較供試品與對(duì)照品的比較供試品與對(duì)照品的Rf值值 及顏色是否一致及顏色是否一致 （二）檢查（二）檢查供試品供試品供試品溶液供試品溶液 雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品對(duì)照品溶液對(duì)照品溶液 1. 雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)對(duì)照品法 供供試試品品對(duì)對(duì)照照品品優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：同一物質(zhì)，同一同一物質(zhì)，同一Rf值比較，值比較， 準(zhǔn)確度高、直觀性強(qiáng)準(zhǔn)確度高、直觀性強(qiáng)缺點(diǎn)缺點(diǎn)：需要雜質(zhì)對(duì)照品需要雜質(zhì)對(duì)照品 2、高低濃度對(duì)比法、高低濃度對(duì)比法 以供試品溶液的稀溶液作為對(duì)照液以供試品溶液的稀溶液作為對(duì)照液A、供試品所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照液、

7、供試品所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照液 主斑點(diǎn)比較，不得更深主斑點(diǎn)比較，不得更深B、規(guī)定供試品雜質(zhì)斑點(diǎn)的個(gè)數(shù)、規(guī)定供試品雜質(zhì)斑點(diǎn)的個(gè)數(shù)供供試試品品對(duì)對(duì)照照品品缺點(diǎn)缺點(diǎn)：不同物質(zhì)，不同不同物質(zhì)，不同Rf值的比較，值的比較， 準(zhǔn)確度差、直觀性差準(zhǔn)確度差、直觀性差優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：以供試品的稀溶液作為對(duì)照液，以供試品的稀溶液作為對(duì)照液， 不需要雜質(zhì)對(duì)照品，簡(jiǎn)單、價(jià)不需要雜質(zhì)對(duì)照品，簡(jiǎn)單、價(jià) 廉，還可配成幾種限量的對(duì)照廉，還可配成幾種限量的對(duì)照 溶液溶液01：79. 以硅膠為固定相的薄層色譜以硅膠為固定相的薄層色譜 按作用機(jī)制屬于按作用機(jī)制屬于 A. 吸附色譜吸附色譜 B. 離子交換色譜離子交換色譜 C. 膠束色譜膠束色

8、譜 D. 分子排阻色譜分子排阻色譜 E. 親合色譜親合色譜例例1、TLC法中，各分離組分的法中，各分離組分的Rf值值 最佳范圍是最佳范圍是 A、 0.20.8 B、 0.30.5 C、 0.30.8 D、 0.50.8 E、 0.20.3第二節(jié)第二節(jié) 氣相色譜法和高效液相色譜法氣相色譜法和高效液相色譜法 一、氣相色譜法一、氣相色譜法（GC法）法） 以氣體為流動(dòng)相的色譜法以氣體為流動(dòng)相的色譜法 （一）基本原理（一）基本原理 各組分在固定相與載氣之間由各組分在固定相與載氣之間由 于分配系數(shù)不同而按不同順序被帶于分配系數(shù)不同而按不同順序被帶 出，分配系數(shù)小的組分先流出，分出，分配系數(shù)小的組分先流出，

9、分 配系數(shù)大的后流出配系數(shù)大的后流出優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 靈敏度高、樣品用量少靈敏度高、樣品用量少 分離效能高，分離速度快分離效能高，分離速度快缺點(diǎn)缺點(diǎn) 受樣品蒸氣壓的限制受樣品蒸氣壓的限制 不適于難氣化和熱穩(wěn)定性差不適于難氣化和熱穩(wěn)定性差 的藥物的藥物1. 基本概念基本概念峰高峰高峰面積峰面積峰位（保留值）峰位（保留值）用于定性用于定性峰寬峰寬 用于衡量柱效用于衡量柱效用于定量用于定量保留值保留值 可用時(shí)間或體積表示可用時(shí)間或體積表示（1）保留時(shí)間）保留時(shí)間（tR）（2）死時(shí)間）死時(shí)間（t0）（3）調(diào)整保留時(shí)間）調(diào)整保留時(shí)間（tR）（4）相對(duì)保留值）相對(duì)保留值（r）tR1 / tR2色譜區(qū)域?qū)挾壬V區(qū)域

10、寬度（1）標(biāo)準(zhǔn)差）標(biāo)準(zhǔn)差（） 0.607h的的W/2（2）半峰寬）半峰寬（Wh/2）（3）峰寬）峰寬（W）2. 塔板理論塔板理論基本假設(shè)基本假設(shè) 色譜柱中有無(wú)數(shù)塔板，色譜柱中有無(wú)數(shù)塔板， 樣品在每個(gè)塔板內(nèi)的樣品在每個(gè)塔板內(nèi)的 氣、液兩相進(jìn)行分配氣、液兩相進(jìn)行分配理論塔板數(shù)理論塔板數(shù)22545 hRWt.n塔板數(shù)越多，塔板高度越小，柱效越高塔板數(shù)越多，塔板高度越小，柱效越高3. 速率理論速率理論 Van Deemter方程方程uCu/BAH 塔板高度塔板高度渦流擴(kuò)散渦流擴(kuò)散縱向擴(kuò)散縱向擴(kuò)散載氣速度載氣速度傳質(zhì)阻抗傳質(zhì)阻抗（二）氣相色譜法分類(lèi)（二）氣相色譜法分類(lèi)填充柱色譜法填充柱色譜法（粗）（粗）

11、毛細(xì)管柱色譜法毛細(xì)管柱色譜法（細(xì)）（細(xì)）分離機(jī)制分離機(jī)制吸附色譜吸附色譜分配色譜分配色譜氣氣 固色譜法固色譜法（吸附柱）（吸附柱）氣氣 液色譜法液色譜法（分配柱）（分配柱）（三）常用固定液與載體（三）常用固定液與載體1. 固定液固定液 鯊魚(yú)烷、鯊魚(yú)烷、SE-30、OV-17、 聚乙二醇聚乙二醇2. 載體載體 硅藻土型載體硅藻土型載體（紅色、白色）（紅色、白色） 3. 毛細(xì)管色譜柱毛細(xì)管色譜柱 開(kāi)管型毛細(xì)管柱開(kāi)管型毛細(xì)管柱（WCOT、SCOT） 填充型毛細(xì)管柱填充型毛細(xì)管柱（四）氣相色譜儀（四）氣相色譜儀 氣源氣源 進(jìn)樣及氣化系統(tǒng)進(jìn)樣及氣化系統(tǒng) 色譜柱和柱溫箱色譜柱和柱溫箱 檢測(cè)器檢測(cè)器 熱導(dǎo)檢

12、測(cè)器熱導(dǎo)檢測(cè)器 氫火焰離子化檢測(cè)器氫火焰離子化檢測(cè)器 電子捕獲檢測(cè)器電子捕獲檢測(cè)器ChP（2000）對(duì)氣相色譜儀的一般要求）對(duì)氣相色譜儀的一般要求 色譜柱色譜柱 填充柱或毛細(xì)管柱（空心柱填充柱或毛細(xì)管柱（空心柱) 固定液固定液 高沸點(diǎn)液體高沸點(diǎn)液體 載氣載氣 氮?dú)獾獨(dú)?檢測(cè)器檢測(cè)器 氫火焰離子化檢測(cè)器氫火焰離子化檢測(cè)器（FID） 檢測(cè)溫度高于柱溫檢測(cè)溫度高于柱溫 一般一般 250 35096：128、在氣相色譜法中，與含量成、在氣相色譜法中，與含量成 正比的是色譜峰的正比的是色譜峰的 A、保留體積、保留體積 B、保留時(shí)間、保留時(shí)間 C、相對(duì)保留值、相對(duì)保留值 D、峰高、峰高 E、峰面積、峰面積

13、00：75. 在色譜分離中，組分達(dá)到平衡時(shí)，在色譜分離中，組分達(dá)到平衡時(shí)，在固定相中的質(zhì)量為在固定相中的質(zhì)量為Ws，濃度為，濃度為Cs，在，在流動(dòng)相中的質(zhì)量為流動(dòng)相中的質(zhì)量為Wm，濃度為，濃度為Cm，則，則此組分的容量因子為此組分的容量因子為 A、Cs/Cm B、Cm/Ws C、Ws/Wm D、Wm/Ws E、WsCs/WmCm例例1、氣相色譜法可測(cè)定的藥物為、氣相色譜法可測(cè)定的藥物為 A、沸點(diǎn)低于、沸點(diǎn)低于450 B、沸點(diǎn)低于、沸點(diǎn)低于550 C、沸點(diǎn)在、沸點(diǎn)在450以上以上 D、無(wú)機(jī)藥物、無(wú)機(jī)藥物 E、熱不穩(wěn)定藥物、熱不穩(wěn)定藥物例例2、氣相色譜儀組成部分應(yīng)有、氣相色譜儀組成部分應(yīng)有 A、氣

14、路系統(tǒng)、氣路系統(tǒng) B、進(jìn)樣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng) C、分離系統(tǒng)、分離系統(tǒng) D、檢測(cè)系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng) E、記錄系統(tǒng)、記錄系統(tǒng) 二、高效液相色譜法二、高效液相色譜法（HPLC法）法） 以液體為流動(dòng)相的色譜法以液體為流動(dòng)相的色譜法（一）（一）HPLC的速率理論的速率理論uCAH 與氣相色譜法的差別與氣相色譜法的差別 GC法法 高溫高溫（ChP 50 265） 縱向擴(kuò)散項(xiàng)大縱向擴(kuò)散項(xiàng)大（B/u） HPLC法法 室溫室溫 傳質(zhì)阻抗項(xiàng)大傳質(zhì)阻抗項(xiàng)大（Cu）uCAH 1. 液液-固吸附色譜法固吸附色譜法 固定相固定相 常用硅膠常用硅膠 流動(dòng)相流動(dòng)相 烷烴烷烴+極性調(diào)整劑極性調(diào)整劑（二）各類(lèi)（二）各類(lèi)HPLC法法2.

15、液液-液分配色譜法液分配色譜法 固定相固定相 目前大多是用化學(xué)方法將目前大多是用化學(xué)方法將 固定液鍵合在載體（硅膠）上所形固定液鍵合在載體（硅膠）上所形 成，即成，即化學(xué)鍵合相化學(xué)鍵合相（1）正相色譜法）正相色譜法 流動(dòng)相極性固定相極性流動(dòng)相極性固定相極性 分析親脂性的極性及中等極分析親脂性的極性及中等極 性的分子型藥物性的分子型藥物 極性弱的組分先流出色譜柱極性弱的組分先流出色譜柱（2）反相色譜法）反相色譜法（RP-HPLC） 流動(dòng)相極性固定相極性流動(dòng)相極性固定相極性 分析非極性、中等極性藥物分析非極性、中等極性藥物 極性強(qiáng)的組分先流出色譜柱極性強(qiáng)的組分先流出色譜柱 固定相固定相 ODS（C

16、18） 辛烷基（辛烷基（C8） 流動(dòng)相流動(dòng)相 甲醇甲醇-水，乙腈水，乙腈-水水（3）反相離子對(duì)色譜法）反相離子對(duì)色譜法（PIC） 如樣品在極性流動(dòng)相中可解離如樣品在極性流動(dòng)相中可解離 為離子，若將離子對(duì)試劑加入流動(dòng)為離子，若將離子對(duì)試劑加入流動(dòng) 相，相， 與被分析離子生成中性離子，與被分析離子生成中性離子， 即可增大樣品在非極性固定相中的即可增大樣品在非極性固定相中的 溶解度溶解度（4）離子抑制色譜法）離子抑制色譜法（ISC） 測(cè)定弱酸、弱堿類(lèi)藥物時(shí)，通測(cè)定弱酸、弱堿類(lèi)藥物時(shí)，通 過(guò)調(diào)整流動(dòng)相過(guò)調(diào)整流動(dòng)相pH值，抑制樣品的解值，抑制樣品的解 離，以增大樣品在非極性固定相中離，以增大樣品在非極性

17、固定相中 的溶解度的溶解度 適用于弱酸（適用于弱酸（3.0pKa7.0） 弱堿（弱堿（7.0pKb8.0） （三）常用固定相（三）常用固定相1. 硅膠硅膠 用于吸附色譜用于吸附色譜2. 化學(xué)鍵合相化學(xué)鍵合相 非極性非極性 ODS（十八烷基鍵合相）（十八烷基鍵合相） 極性極性 氨基、氰基鍵合相氨基、氰基鍵合相3. 鍵合型離子交換劑鍵合型離子交換劑（四）高效液相色譜儀（四）高效液相色譜儀 高壓輸液泵高壓輸液泵 色譜柱色譜柱 柱管柱管+固定相固定相 進(jìn)樣閥進(jìn)樣閥 六通閥（有定量環(huán)）六通閥（有定量環(huán)） 檢測(cè)器檢測(cè)器 紫外吸收檢測(cè)器紫外吸收檢測(cè)器 熒光檢測(cè)器熒光檢測(cè)器 差示折光檢測(cè)器差示折光檢測(cè)器 電化

18、學(xué)檢測(cè)器電化學(xué)檢測(cè)器中國(guó)藥典規(guī)定中國(guó)藥典規(guī)定正文各品種項(xiàng)下的正文各品種項(xiàng)下的HPLC條件條件不得任意改變不得任意改變 固定相種類(lèi)、固定相種類(lèi)、 流動(dòng)相組分、檢測(cè)器類(lèi)型流動(dòng)相組分、檢測(cè)器類(lèi)型可適當(dāng)改變可適當(dāng)改變 色譜柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度、色譜柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度、固定相牌號(hào)、載體粒度、流動(dòng)相流速固定相牌號(hào)、載體粒度、流動(dòng)相流速和比例、柱溫、進(jìn)樣量、靈敏度和比例、柱溫、進(jìn)樣量、靈敏度三、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)三、系統(tǒng)適用性試驗(yàn) ChP 每次檢測(cè)前，應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)每次檢測(cè)前，應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)適用性試驗(yàn)，應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求適用性試驗(yàn)，應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求 理論板數(shù)理論板數(shù)（n） 分離度分離度（R） 重復(fù)性重復(fù)性（RSD） 拖尾因子拖尾因子（T）

19、（一）理論板數(shù)（一）理論板數(shù)（n） 如測(cè)得如測(cè)得n低于規(guī)定，應(yīng)改變柱長(zhǎng)低于規(guī)定，應(yīng)改變柱長(zhǎng) 或載體性能、重填色譜柱等以求達(dá)到或載體性能、重填色譜柱等以求達(dá)到22545 hRWt.n（二）分離度（二）分離度（R） 除另有規(guī)定外，除另有規(guī)定外，R1.5 21122WWttRRR 12RRtt （三）重復(fù)性（三）重復(fù)性（RSD） 15 33RSD2.0%（四）拖尾因子（四）拖尾因子（T） 除另有規(guī)定外，除另有規(guī)定外，T應(yīng)應(yīng)0.95 1.0510502dWTh. 四、四、GC和和HPLC在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用 1. 鑒別鑒別 在相同的色譜條件下，分別取在相同的色譜條件下，分別取 供試品溶

20、液和對(duì)照品溶液進(jìn)樣，記供試品溶液和對(duì)照品溶液進(jìn)樣，記 錄色譜圖，供試品溶液主峰的保留錄色譜圖，供試品溶液主峰的保留 時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液一致時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液一致2. 雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查 內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法（加校正因子）（加校正因子） 外標(biāo)法外標(biāo)法 主成分自身對(duì)照法主成分自身對(duì)照法（加校正因子）（加校正因子） 主成分自身對(duì)照法主成分自身對(duì)照法（無(wú)校正因子）（無(wú)校正因子） 面積歸一化法面積歸一化法（1）內(nèi)標(biāo)法）內(nèi)標(biāo)法 + 校正因子校正因子內(nèi)標(biāo)內(nèi)標(biāo)+雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品計(jì)算校正因子計(jì)算校正因子 內(nèi)標(biāo)內(nèi)標(biāo)+樣品樣品計(jì)算雜質(zhì)含量計(jì)算雜質(zhì)含量 RRssCACAf ）校校正正因因子子（ssxxCAAfC ）含量（含

21、量（優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 準(zhǔn)確準(zhǔn)確內(nèi)標(biāo)物內(nèi)標(biāo)物+雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品校正因子校正因子內(nèi)標(biāo)物內(nèi)標(biāo)物+樣品樣品雜質(zhì)含量雜質(zhì)含量（2）外標(biāo)法）外標(biāo)法供試品供試品供試品溶液供試品溶液 雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品對(duì)照品溶液對(duì)照品溶液RxRxAACC ）含含量量（缺點(diǎn)缺點(diǎn) 不易控制進(jìn)樣量不易控制進(jìn)樣量 宜用定量環(huán)宜用定量環(huán)（3）加校正因子的主成分自身對(duì)照法）加校正因子的主成分自身對(duì)照法待測(cè)成份對(duì)照品待測(cè)成份對(duì)照品+雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品 計(jì)算校正因子計(jì)算校正因子 供試品供試品供試品溶液供試品溶液 供試品的稀釋液供試品的稀釋液對(duì)照品溶液對(duì)照品溶液 測(cè)量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)測(cè)量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積，分別乘以相應(yīng)的

22、校正因子的峰面積，分別乘以相應(yīng)的校正因子后與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較，后與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較，依法計(jì)算各雜質(zhì)含量依法計(jì)算各雜質(zhì)含量?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 準(zhǔn)確度高準(zhǔn)確度高（4）不加校正因子主成分自身對(duì)照法）不加校正因子主成分自身對(duì)照法供試品供試品供試品溶液供試品溶液 供試品的稀釋液供試品的稀釋液對(duì)照品溶液對(duì)照品溶液 測(cè)定供試品溶液中各雜質(zhì)峰面積，測(cè)定供試品溶液中各雜質(zhì)峰面積，與對(duì)照溶液主成分峰面積比較，控制與對(duì)照溶液主成分峰面積比較，控制雜質(zhì)的量雜質(zhì)的量缺點(diǎn)缺點(diǎn) 檢測(cè)波長(zhǎng)處，各雜質(zhì)和藥物的檢測(cè)波長(zhǎng)處，各雜質(zhì)和藥物的 吸收強(qiáng)度可能有差異，準(zhǔn)確度吸收強(qiáng)度可能有差異，準(zhǔn)確度 差差 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 不需雜質(zhì)對(duì)照

23、品，可同時(shí)控制不需雜質(zhì)對(duì)照品，可同時(shí)控制 各個(gè)雜質(zhì)及其總量限度各個(gè)雜質(zhì)及其總量限度 （5）面積歸一化法）面積歸一化法 取一定量供試品溶液進(jìn)樣，測(cè)取一定量供試品溶液進(jìn)樣，測(cè)定各雜質(zhì)的峰面積和色譜圖上除溶定各雜質(zhì)的峰面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計(jì)算各劑峰以外的總色譜峰面積，計(jì)算各雜質(zhì)峰面積占總峰面積的百分率，雜質(zhì)峰面積占總峰面積的百分率，應(yīng)符合規(guī)定。應(yīng)符合規(guī)定。優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 不需雜質(zhì)對(duì)照品，簡(jiǎn)便易行不需雜質(zhì)對(duì)照品，簡(jiǎn)便易行 缺點(diǎn)缺點(diǎn) 檢測(cè)波長(zhǎng)處，各雜質(zhì)和藥物檢測(cè)波長(zhǎng)處，各雜質(zhì)和藥物 的吸收強(qiáng)度可能有差異，控制的吸收強(qiáng)度可能有差異，控制 雜質(zhì)峰面積百分率不一定就是雜質(zhì)峰面積百分率不一定就是

24、 雜質(zhì)限量，準(zhǔn)確度差雜質(zhì)限量，準(zhǔn)確度差 3. 在含量測(cè)定中的應(yīng)用在含量測(cè)定中的應(yīng)用（1）外標(biāo)法）外標(biāo)法（2）內(nèi)標(biāo)法）內(nèi)標(biāo)法96：75、測(cè)得兩色譜峰的保留時(shí)間、測(cè)得兩色譜峰的保留時(shí)間 tR1=6.5min，tR2=8.3min，峰寬，峰寬 W1=1.0min，W2=1.4min，則兩，則兩 峰分離度峰分離度R為為 A、0.22 B、1.2 C、2.5 D、0.75 E、1.5 21RRWWtt2R12 99：135、HPLC法與法與GC法用于藥物法用于藥物 復(fù)方制劑的分析時(shí)，其系統(tǒng)適用復(fù)方制劑的分析時(shí)，其系統(tǒng)適用 性試驗(yàn)系指性試驗(yàn)系指 A、測(cè)定拖尾因子、測(cè)定拖尾因子 B、測(cè)定回收率、測(cè)定回收率

25、C、測(cè)定保留體積、測(cè)定保留體積 D、測(cè)定分離度、測(cè)定分離度 E、測(cè)定柱的理論板數(shù)、測(cè)定柱的理論板數(shù) 99m:91-95相關(guān)方法為相關(guān)方法為 A、紫外分光光度法、紫外分光光度法 B、紅外分光光度法、紅外分光光度法 C、氣相色譜法、氣相色譜法 D、高效液相色譜法、高效液相色譜法 E、熒光分光光度法、熒光分光光度法91、由第一電子激發(fā)態(tài)的最低能級(jí)躍遷回基態(tài)的、由第一電子激發(fā)態(tài)的最低能級(jí)躍遷回基態(tài)的 各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí)各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí)92、低能級(jí)的價(jià)電子吸收一定的能量后，躍遷到、低能級(jí)的價(jià)電子吸收一定的能量后，躍遷到 較高能級(jí)較高能級(jí)93、使用氫火焰離子化檢測(cè)器、使用氫火焰離子化檢測(cè)器94、分子中振動(dòng)和

26、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷、分子中振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷95、可以忽略流動(dòng)相中的縱向擴(kuò)散項(xiàng)、可以忽略流動(dòng)相中的縱向擴(kuò)散項(xiàng)EACBD00：132、中國(guó)藥典（、中國(guó)藥典（2000年版）規(guī)定年版）規(guī)定 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)應(yīng)包括系統(tǒng)適用性試驗(yàn)應(yīng)包括 A、色譜柱的理論塔板數(shù)、色譜柱的理論塔板數(shù) B、分離度、分離度 C、重復(fù)性、重復(fù)性 D、中間精密度、中間精密度 E、拖尾因子、拖尾因子00：133. 中國(guó)藥典（中國(guó)藥典（2000年版）正文各年版）正文各 品種項(xiàng)下規(guī)定的品種項(xiàng)下規(guī)定的HPLC條件中，條件中， 不得任意改變的是不得任意改變的是 A. 固定相種類(lèi)固定相種類(lèi) B. 固定相牌號(hào)固定相牌號(hào) C. 流動(dòng)相組成流動(dòng)相組成

27、D. 混合流動(dòng)相各組分的比例混合流動(dòng)相各組分的比例 E. 檢測(cè)器類(lèi)型檢測(cè)器類(lèi)型01：80. 用用HPLC測(cè)得兩組分的保留時(shí)間測(cè)得兩組分的保留時(shí)間 分別為分別為8.0和和10.0min，峰寬分別為，峰寬分別為2.8和和 3.2mm，記錄紙速為，記錄紙速為5.0mm/min，則兩，則兩 峰的分離度為峰的分離度為 A. 3.4 B. 3.3 C. 4.0 D. 0.7 E. 6.8 21RRWWtt2R12 01：121-125以下情況所適用的方法以下情況所適用的方法 A. 高效液相色譜法高效液相色譜法 B. 氣相色譜法氣相色譜法 C. 兩者均可兩者均可 D. 兩者均不可兩者均不可121. 可用于測(cè)

28、定藥物的含量可用于測(cè)定藥物的含量122. 以氣體為流動(dòng)相以氣體為流動(dòng)相123. 以液體為流動(dòng)相以液體為流動(dòng)相124. 使用氫火焰離子化檢測(cè)器使用氫火焰離子化檢測(cè)器125. 不適用于熱不穩(wěn)定化合物的分析不適用于熱不穩(wěn)定化合物的分析CBABB01：140. 色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的項(xiàng)目有色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的項(xiàng)目有 A、拖尾因子、拖尾因子 B、理論板數(shù)、理論板數(shù) C、檢測(cè)限、檢測(cè)限 D、定量限、定量限 E、分離度、分離度例例1、色譜法定量測(cè)定的方法有、色譜法定量測(cè)定的方法有 A、面積歸一化法、面積歸一化法 B、主成分自身對(duì)照法、主成分自身對(duì)照法 C、內(nèi)標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法 D、外標(biāo)法、外標(biāo)法 E、反相法、反相法

29、例例2、色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)一般包括、色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)一般包括 A、測(cè)試色譜柱理論塔板數(shù)（、測(cè)試色譜柱理論塔板數(shù)（n） B、測(cè)量峰高、測(cè)量峰高 C、測(cè)試分離度（、測(cè)試分離度（R） D、測(cè)試拖尾因子（、測(cè)試拖尾因子（T） E、測(cè)定保留體積、測(cè)定保留體積例例3、色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求分離度、色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求分離度 A、應(yīng)大于、應(yīng)大于1.5 B、應(yīng)小于、應(yīng)小于1.5 C、應(yīng)大于、應(yīng)大于2.5 D、應(yīng)小于、應(yīng)小于2.5 E、應(yīng)大于、應(yīng)大于3.0例例4、中國(guó)藥典（、中國(guó)藥典（2000年版）規(guī)定，除年版）規(guī)定，除 另有規(guī)定外，色譜系統(tǒng)適用性試另有規(guī)定外，色譜系統(tǒng)適用性試 驗(yàn)中的拖尾因子（驗(yàn)中的拖尾因

30、子（T）應(yīng)在）應(yīng)在 A、0.506.5 B、6.57.5 C、7.508.50 D、8.509.50 E、0.951.05例例5、色譜法鑒別被分離物各組分時(shí)，、色譜法鑒別被分離物各組分時(shí)， 應(yīng)該用應(yīng)該用 A、峰高、峰高 B、峰寬、峰寬 C、保留值、保留值 D、分配系數(shù)、分配系數(shù) E、塔板數(shù)、塔板數(shù)例例6、衡量色譜系統(tǒng)好壞的參數(shù)是、衡量色譜系統(tǒng)好壞的參數(shù)是 A、分散度、分散度 B、Rf 值值 C、分離度、分離度 D、保留時(shí)間、保留時(shí)間 E、斑點(diǎn)面積、斑點(diǎn)面積例例7、衡量色譜峰是否正常的參數(shù)應(yīng)是、衡量色譜峰是否正常的參數(shù)應(yīng)是 A、校正因子、校正因子 B、峰寬、峰寬 C、峰高、峰高 D、拖尾因子、拖

31、尾因子 E、拖尾峰、拖尾峰例例8、RP-HPLC固定相與流動(dòng)相極性固定相與流動(dòng)相極性 關(guān)系是關(guān)系是 A、兩者極性相同、兩者極性相同 B、前者極性大于后者、前者極性大于后者 C、后者極性大于前者、后者極性大于前者 D、兩者是同一液體、兩者是同一液體 E、兩者均為惰性、兩者均為惰性例例9、色譜峰高（或面積）可用于、色譜峰高（或面積）可用于 A、鑒別、鑒別 B、計(jì)算保留值、計(jì)算保留值 C、含量測(cè)定、含量測(cè)定 D、測(cè)試被分離物的療效、測(cè)試被分離物的療效 E、判定被分離物組成、判定被分離物組成例例10. HPLC檢查藥物中雜質(zhì)的方法有檢查藥物中雜質(zhì)的方法有A面積歸一化法面積歸一化法B加校正因子的主成分自身對(duì)照法加校正因子的主成分自身對(duì)照法C不加校正因子的主成分自身對(duì)照法不加校正因子的主成分自身對(duì)照法D外標(biāo)法外標(biāo)法E內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定法內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定法例例1115 A、Vis B、IR C、UV D、pH E、HPLC 14、紅外分光光度法、紅外分光光度法 15