艾滋病抗體檢測技術(免疫印跡法)及質量控制（課堂PPT）

1、南華大學附屬南華醫(yī)院南華大學附屬南華醫(yī)院艾滋病抗體檢測技術（免疫印跡法）及質量控制黎俊宏黎俊宏檢測檢驗中心檢測檢驗中心艾滋病確證實驗室艾滋病確證實驗室常 州 市 疾 病 預 防 控 制 中 心常 州 市 疾 病 預 防 控 制 中 心C h a n g z h o u C e n t e r f o r D i s e a s e C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n全國艾滋病檢測技術規(guī)范（全國艾滋病檢測技術規(guī)范（2015年修訂版）年修訂版）第六章第六章 艾滋病病毒感染實驗室檢測策略艾滋病病毒感染實驗室檢測策略 我國自上世紀我國自上世紀80年代發(fā)現(xiàn)第一

2、例艾滋病病例至今，各地市艾滋病感染者呈逐年增長趨年代發(fā)現(xiàn)第一例艾滋病病例至今，各地市艾滋病感染者呈逐年增長趨勢。勢。 4 臨床診斷相關的檢測策略及結果報告臨床診斷相關的檢測策略及結果報告 4.1 使用抗體檢測試劑的檢測流程：使用抗體檢測試劑的檢測流程：4.3 4.3 補充試驗檢測策略補充試驗檢測策略補充試驗分為補充試驗分為抗體確證抗體確證試驗和試驗和HIV-1核酸核酸試驗?？贵w確證試驗試驗?？贵w確證試驗包括免疫印跡試劑（包括免疫印跡試劑（WB）和條）和條帶帶/線性免疫試驗（線性免疫試驗（RIBA/LIA）， 特定條件下的替代檢測（三特定條件下的替代檢測（三種酶聯(lián)免疫試驗、三種快速試驗種酶聯(lián)免疫

3、試驗、三種快速試驗或者酶聯(lián)免疫加快速試驗），免或者酶聯(lián)免疫加快速試驗），免疫層析或免疫滲濾試驗。疫層析或免疫滲濾試驗。HIV-1核酸試驗包括定性和定量試驗。核酸試驗包括定性和定量試驗。 *兩種兩種試劑可試劑可以是原以是原有試劑有試劑加另一加另一種試劑，種試劑， 也可以也可以是兩種是兩種不同試不同試劑。劑。全國艾滋病檢測技術規(guī)范（全國艾滋病檢測技術規(guī)范（2015年修訂版）年修訂版）第六章第六章 艾滋病病毒感染實驗室檢測策略艾滋病病毒感染實驗室檢測策略全國艾滋病檢測技術規(guī)范（全國艾滋病檢測技術規(guī)范（2015年修訂版）年修訂版）第六章第六章 艾滋病病毒感染實驗室檢測策略艾滋病病毒感染實驗室檢測策略H

4、IV確證試驗的方法確證試驗的方法 2 3 1 4LIA 條帶免疫試驗條帶免疫試驗RIPA 放射免疫沉淀試驗放射免疫沉淀試驗IFA 免疫熒光試驗免疫熒光試驗WB 免疫印跡試驗免疫印跡試驗HIV抗體抗體WB試驗具試驗具有很高的敏感性和有很高的敏感性和特異性，是國內(nèi)特異性，是國內(nèi)HIV抗體確證的金標準。抗體確證的金標準。RIBA/LIA 條線條線/線性免疫試驗線性免疫試驗Western Blot與與Southern或或Northern雜交方法雜交方法類似，但類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳電泳 ，被檢測物是蛋白質，被檢測物是蛋白質，“探針探針”是抗體，

5、是抗體，“顯色顯色”用標記的二抗。經(jīng)過用標記的二抗。經(jīng)過PAGE分離的蛋白質分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如樣品，轉移到固相載體（例如NC膜）上，固相載膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的，經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目

6、的基因表達的蛋白成分。特異性目的基因表達的蛋白成分。 WB的原理的原理WB檢測檢測HIV抗體的原理抗體的原理硝酸纖維試劑膜條上結合了天然滅活的硝酸纖維試劑膜條上結合了天然滅活的HIV-1型病型病毒蛋白的分離顆粒和特異性的毒蛋白的分離顆粒和特異性的HIV-2型合成多肽。型合成多肽。在膜條分別加入稀釋的血清或血漿樣本或對照，在膜條分別加入稀釋的血清或血漿樣本或對照，孵育。如果樣本中含有孵育。如果樣本中含有HIV-1和和HIV-2型的特異性型的特異性抗體，則抗體會與試劑膜條上的抗體，則抗體會與試劑膜條上的HIV-1蛋白和蛋白和HIV-2多肽結合，通過清洗去除試劑膜條上的未結合多肽結合，通過清洗去除試

7、劑膜條上的未結合物，與物，與HIV蛋白特異性結合的抗體再通過與帶有蛋白特異性結合的抗體再通過與帶有堿性磷酸酶的羊抗人堿性磷酸酶的羊抗人IgG抗體結合，加入抗體結合，加入BCIP/NBT底物等一系列反應即可顯色。底物等一系列反應即可顯色。全病毒裂解液電泳得到的膜條全病毒裂解液電泳得到的膜條 在在HIV顆粒中，外膜蛋白（顆粒中，外膜蛋白（env）基因編碼的）基因編碼的一個蛋白經(jīng)糖基化后形成包膜蛋白前體（一個蛋白經(jīng)糖基化后形成包膜蛋白前體（gp160），其在蛋白酶作用下裂解成外膜蛋白），其在蛋白酶作用下裂解成外膜蛋白（gp120）和跨膜蛋白（）和跨膜蛋白（gp41）；核心蛋白（）；核心蛋白（gag）

8、基因編碼的前體蛋白（）基因編碼的前體蛋白（p55）被蛋白酶裂）被蛋白酶裂解為衣殼蛋白（解為衣殼蛋白（p24）和內(nèi)膜蛋白（）和內(nèi)膜蛋白（p17），），p39為為p55的碎片；逆轉錄酶蛋白（的碎片；逆轉錄酶蛋白（pol）基因）基因編碼的逆轉錄酶（編碼的逆轉錄酶（p66、p51）和核酸內(nèi)切酶（）和核酸內(nèi)切酶（p31），而機體對上述），而機體對上述HIV蛋白產(chǎn)生相應的抗體蛋白產(chǎn)生相應的抗體，又在，又在WB中出現(xiàn)相應的不同組合的帶型。中出現(xiàn)相應的不同組合的帶型。 這既是確證這既是確證HIV抗體陽性的條件，又能作為抗體陽性的條件，又能作為HIV感染期和感染期和AIDS期的參考依據(jù)。期的參考依據(jù)。9HIV模

9、型圖模型圖脂雙層膜脂雙層膜gp120gp41包膜糖蛋白包膜糖蛋白p24衣殼蛋白衣殼蛋白p17內(nèi)膜蛋白內(nèi)膜蛋白p7核衣殼蛋白核衣殼蛋白逆轉錄酶逆轉錄酶蛋白酶蛋白酶整合酶整合酶10env編碼編碼 外膜蛋白外膜蛋白gp120 跨膜蛋白跨膜蛋白gp41（包膜蛋白前體（包膜蛋白前體gp160為為gp41聚合體）聚合體）env基因的結構及基因的結構及env蛋白蛋白11gag基因的結構及基因的結構及gag蛋白功能蛋白功能 gag基因編碼病毒核心蛋白基因編碼病毒核心蛋白 前體蛋白前體蛋白p55（p39為為p55的的碎片）碎片）、衣殼蛋白、衣殼蛋白p24、內(nèi)、內(nèi)膜蛋白膜蛋白p1712pol基因的結構及基因的結構

10、及pol蛋白蛋白 pol基因編碼的酶類基因編碼的酶類p66和和p51蛋白為逆轉錄酶蛋白為逆轉錄酶p32蛋白則為整合酶蛋白則為整合酶P11蛋白為蛋白酶蛋白為蛋白酶嚴格遵守實驗室標準操作程序嚴格遵守實驗室標準操作程序(SOP)確證試驗的要點確證試驗的要點嚴格按照試劑盒說明書操作嚴格按照試劑盒說明書操作嚴格控制防止樣品間的交叉污染嚴格控制防止樣品間的交叉污染試劑試劑MP生物醫(yī)學亞太私人有限公司（生物醫(yī)學亞太私人有限公司（MP）HIV-1/2混合型試劑（混合型試劑（MP HIV BLOT 2.2）上海英旻泰生物技術有限公司（上海英旻泰生物技術有限公司（IMT）HIV-1/2混合型試劑（混合型試劑（IM

11、T HIV-1/2 Blot）實驗藍圖實驗藍圖實驗原始記錄實驗原始記錄結果的判定結果的判定首先要確定可見到標本質控帶首先要確定可見到標本質控帶.如果標本質如果標本質控帶是陰性控帶是陰性,則檢測無效則檢測無效;因為這表示技術上有因為這表示技術上有錯誤錯誤,如未加樣本如未加樣本,酶結合物或底物液。酶結合物或底物液。與強和與強和/或弱陽性對照試劑膜對照或弱陽性對照試劑膜對照,確定檢測確定檢測試劑膜上每一條帶的分子量。試劑膜上每一條帶的分子量。按照試劑盒說明書判定標準，判斷待測樣按照試劑盒說明書判定標準，判斷待測樣品為陽性、陰性或不確定。品為陽性、陰性或不確定。HIV-1抗體陽性抗體陽性 檢測出檢測出

12、2條條env帶（帶（gp160/gp41和和gp120）及）及gag（p17，p24，p55）或）或pol（p31，p51，p66）HIV抗體陰性抗體陰性 沒有病毒的特異性條帶或沒有病毒的特異性條帶或只檢測出只檢測出p17抗體抗體HIV抗體不確定抗體不確定 出現(xiàn)任何病毒特異條帶，但不足以判斷為陽性出現(xiàn)任何病毒特異條帶，但不足以判斷為陽性試劑盒說明書試劑盒說明書技術規(guī)范（技術規(guī)范（2009版）版）HIV-1抗體陽性抗體陽性 至少有至少有2條條env帶（帶（gp41和和gp160/gp120）出現(xiàn)，或至少）出現(xiàn)，或至少1條條env帶和帶和p24帶同時出現(xiàn)。帶同時出現(xiàn)。HIV抗體陰性抗體陰性 無無H

13、IV抗體特異帶出現(xiàn)。抗體特異帶出現(xiàn)。HIV抗體不確定抗體不確定 出現(xiàn)出現(xiàn)HIV抗體特異帶，但不足以判定陽性?？贵w特異帶，但不足以判定陽性。HIV-2抗體血清學陽性抗體血清學陽性出現(xiàn)出現(xiàn)HIV-2型特異性指示帶的樣品：如果同時呈型特異性指示帶的樣品：如果同時呈HIV-1 抗體抗體陽性反應，只需報告陽性反應，只需報告HIV-1 抗體陽性，不推薦進一步做抗體陽性，不推薦進一步做HIV-2 抗體確證試驗；如果同時呈抗體確證試驗；如果同時呈HIV-1抗體不確定或陰性抗體不確定或陰性反應，需用反應，需用HIV-2型確證試劑再做型確證試劑再做HIV-2的抗體確證試驗。的抗體確證試驗。同時符合以下二條標準，即

14、出現(xiàn)至少同時符合以下二條標準，即出現(xiàn)至少2條條env 帶（帶（gp36和和gp140/ gp105），和試劑盒提供的陽性判定標準，可判為），和試劑盒提供的陽性判定標準，可判為HIV-2抗體陽性?？贵w陽性。HIV基因組基因組ENV區(qū)區(qū) gp160:gp41的聚合體的聚合體 寬的擴散糖蛋白帶寬的擴散糖蛋白帶 gp120:外膜蛋白外膜蛋白 擴散糖蛋白帶擴散糖蛋白帶 gp41:跨膜蛋白跨膜蛋白 擴散糖蛋白帶擴散糖蛋白帶POL區(qū)區(qū) p66:逆轉錄酶逆轉錄酶 細窄條帶細窄條帶 p51:逆轉錄酶逆轉錄酶 細窄條帶細窄條帶 p31:核酸內(nèi)切酶核酸內(nèi)切酶 雙重條帶雙重條帶GAG區(qū)區(qū) p55:前體蛋白前體蛋白 細

15、窄條帶細窄條帶 p39:p55的碎片的碎片 細窄條帶細窄條帶 p24:核心蛋白核心蛋白 寬闊條帶寬闊條帶 p17:核心蛋白核心蛋白 寬闊條帶寬闊條帶條帶條帶確證陽性確證陽性首次確證不確定首次確證不確定孕婦第一次確證孕婦第一次確證MSM第一次確證第一次確證再次確證陰性再次確證陰性孕婦孕婦4周后隨訪確證結果周后隨訪確證結果MSM4周后隨訪確證結果周后隨訪確證結果From不確定不確定to陽性陽性送檢時間：送檢時間：2011年年1月月送檢時間：送檢時間：2011年年2月月質量控制質量控制第二章第二章 HIV抗體檢測抗體檢測7 7 質量控制質量控制 7.1 7.1 酶免或發(fā)光法抗體檢測的室內(nèi)質量控制酶免

16、或發(fā)光法抗體檢測的室內(nèi)質量控制7.2 7.2 快速法抗體檢測質控快速法抗體檢測質控WBWB法法HIVHIV抗體確證實驗質控抗體確證實驗質控7.1 7.1 酶免或發(fā)光法抗體檢測的室內(nèi)質量控制酶免或發(fā)光法抗體檢測的室內(nèi)質量控制7.1.1 7.1.1 試劑盒內(nèi)部對照試劑盒內(nèi)部對照7.1.2 7.1.2 室內(nèi)質控品室內(nèi)質控品7.1.3 Levey-Jennings7.1.3 Levey-Jennings質控圖質控圖7.1.4 7.1.4 室內(nèi)質控其他方式室內(nèi)質控其他方式“即刻法即刻法”質控質控試劑盒內(nèi)提供的陽性陽性和陰性對照：判陰性對照：判斷每次實驗的斷每次實驗的有效性有效性，不能作為室內(nèi)不能作為室內(nèi)

17、質控品質控品使用；每次須有，且只能同批使用；每次須有，且只能同批號試劑盒用；如無效，須重做。號試劑盒用；如無效，須重做。非試劑盒組份的外部外部質控品：監(jiān)控檢測的重復性，且須為弱陽性；判斷該批臨床樣品檢測的可信性；每每次須有次須有；失控須重做須重做。可買或自制：穩(wěn)定穩(wěn)定、無菌無菌、不含影響試劑反應不含影響試劑反應的防腐劑防腐劑。第二章第二章 HIV抗體檢測抗體檢測7.1.3 Levey-Jennings7.1.3 Levey-Jennings質控圖質控圖7.1.3.1 質控圖參數(shù) 外部質控品的均值均值和標準差標準差應建立在實驗室常規(guī)使用方法對外部質控外部質控品品重復測定重復測定的基礎上。一般采用

18、在不同批次檢測取得至少20個數(shù)據(jù)；如果僅做少量批次的檢測，也至少做5個批次的檢測，每個批次中不少于4個質控血清測定結果，以建立一個臨時性的均值和標準差，當達到20批次數(shù)據(jù)后，替代臨時性的均值和標準差。 （1）算術平均值算術平均值（ ）：代表一組質控品測定S/CO值的均值。為了統(tǒng)計學上有顯著性意義，應該采用至少20次（天）測得的外部對照質控品的S/CO值計算平均值。 （2）標準差標準差（s）：是描述樣品與均數(shù)之間離散離散程度的一個指標，是與質控品S/CO值均值有關的預期范圍。一組S/CO值的標準差以s表示。 （3）變異系數(shù)變異系數(shù)（cv）：是反映各次S/CO值相對于均值離散離散程度的一個指標，可

19、以用來衡量檢測的重復性重復性或精密度精密度。 （4）控制限控制限：由實驗室根據(jù)對外部質控品檢測結果的均值和標準差來確定。例如，按照12S質控規(guī)則，控制限為外部質控品S/CO均值加減2個標準差；按照13S質控規(guī)則，控制限為外部質控品S/CO均值加減3個標準差。7.1.3 Levey-Jennings7.1.3 Levey-Jennings質控圖質控圖7.1.3.2 質控規(guī)則 實驗室在報告結果之前必須評價質控數(shù)據(jù)，可通過圖形記錄的檢查或由計算機審核結果來決定。目前有許多質控規(guī)則，常用的是12S和13S規(guī)則。（1）告警告警（12S）：當外部質控品的S/CO值超出 +2s范圍時，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應予

20、注意，是否可以繼續(xù)檢測需要進一步觀察。若將12S做失控標準，有較高的假失控概率，所以一般不采用。（2）失控失控（13S）：當外部質控品的S/CO值超出 +3s范圍時，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，本次實驗結果不能被接受，可能是系統(tǒng)誤差、隨機誤差或外部質控品 穩(wěn)定性下降所致。7.1.3.3 質控圖的分析分析及失控處理失控處理 實驗室應建立質控圖分析及失控情況處理的程序。當出現(xiàn)失控時，必須找出發(fā)生問題的原因，找出解除問題的方法，并消除原因。外部質控品？實驗操作？不同人員？儀器？（如加樣槍？洗板機堵孔？酶標儀未每年校準？）繪制質控圖錯誤？7.1.4 7.1.4 室內(nèi)質控其他方式室內(nèi)質控其他方式“即刻法即刻法”質

21、控質控7.1.4 7.1.4 室內(nèi)質控其他方式室內(nèi)質控其他方式“即刻法即刻法”質控質控（1）當SI上限和SI下限 n3s值時說明該值已在3s范圍之外，屬“失失控控”?！凹纯谭ā敝荒茉谇?0次內(nèi)使用，超出即可采用L-J質控圖方法。 第二章第二章 HIV抗體檢測抗體檢測7.2 7.2 快速法抗體檢測質控快速法抗體檢測質控7.2.1 7.2.1 試劑內(nèi)對照試劑內(nèi)對照7.2.2 7.2.2 室內(nèi)質控品對照室內(nèi)質控品對照7.2.3 7.2.3 開展抗體相關檢測的實驗室須參加開展抗體相關檢測的實驗室須參加有有資質機構資質機構組織的組織的能力驗證能力驗證，或，或室間比對室間比對。質控窗口內(nèi)的質控帶，試劑自帶

22、內(nèi)部過程質控：實驗操作全部完成且實驗所用材料處于工作狀態(tài)；清潔的檢測區(qū)背景是內(nèi)部陰性過程質控；如未有紅色質控帶：試劑盒內(nèi)質控無效，該結果無效，須重做。外部外部質控品可商用或自制質控品：抗體陽性和陰性樣品；下列情況需做質控：更換試劑批號、檢測人員、包裝、試劑廠家。除此之外，建議每個檢測日檢測一次陽性和陰性質控品；如果日檢測量大于50份樣品，至少應作2次質控。出現(xiàn)以下問題，提示存在質量隱患，應引起重視：運輸包裝、內(nèi)盒或試劑盒的物理損傷；在單包裝內(nèi)存在混雜物質；標簽出現(xiàn)錯誤、缺失或字跡模糊 （特別是產(chǎn)品名稱或出產(chǎn)廠家名稱，批號和貨號，失效期或/和生產(chǎn)日期）；缺失目錄；泄漏或污染；不適宜的存放條件；保

23、護包裝紙破損或污染；未達到質量控制標準 （陽性/陰性控制結果以及質控條帶出現(xiàn)與否等標志）；試劑質量問題須報告省確證中心實驗室。WBWB法法HIVHIV抗體確證實驗質控抗體確證實驗質控一、一、室內(nèi)室內(nèi)質控質控: 儀器質控：儀器是否運轉正常，管路是否堵塞；儀器質控：儀器是否運轉正常，管路是否堵塞； 過程質控：過程質控： 1、試劑質控，強陽、弱陽、陰性對照；、試劑質控，強陽、弱陽、陰性對照； 2、樣品質控，有無交叉污染，相鄰的槽道是否、樣品質控，有無交叉污染，相鄰的槽道是否出現(xiàn)完全一樣的條帶；出現(xiàn)完全一樣的條帶； 3、數(shù)據(jù)質控，室溫、數(shù)據(jù)質控，室溫253（ 20 需開空調(diào)需開空調(diào)），結果判讀需兩名判

24、讀人和一名審核人。），結果判讀需兩名判讀人和一名審核人。二、二、外部外部質控：參加有資質機構組織的能力驗證，即室質控：參加有資質機構組織的能力驗證，即室間比對，如全國艾滋病檢測實驗室間比對，如全國艾滋病檢測實驗室HIV抗體血清學能力驗抗體血清學能力驗證。證。條帶位置條帶位置 試劑批號不同甚至同一批號不同盒子，同一條帶試劑批號不同甚至同一批號不同盒子，同一條帶的位置并不是相同的的位置并不是相同的早期感染帶型？（疑似）早期感染帶型？（疑似） Gp160+p24 gp120很弱或者沒有或還有其他很弱或者沒有或還有其他早期感染帶型？（疑似）早期感染帶型？（疑似）早期感染帶型？（疑似）早期感染帶型？（疑

25、似）進展帶型？進展帶型？AIDS（晚）期帶型？（晚）期帶型？ ENV帶強度保持恒定，帶強度保持恒定，p24缺失或強度明顯降低缺失或強度明顯降低AIDS（晚）期帶型？（晚）期帶型？第二章第二章 HIV抗體檢測抗體檢測6.2 確證報告確證報告6.2.1 WB及及 RIBA/LIA報告報告急性期急性期無癥狀期無癥狀期窗口期窗口期HIV抗原、抗體變化圖抗原、抗體變化圖Anti-P24Anti-gp41/120(anti-gp36)HIV RNAAnti-Ag1周周 2周周.1月月 2月月.1年年 2年年 3年年.10年年.艾滋病期艾滋病期Anti-Ab獻血員中一例陽性獻血員中一例陽性送檢時間：送檢時間

26、：2010年年12月月備注：備注：9.13獻血，酶免陰性，核酸陽性。獻血，酶免陰性，核酸陽性。12.18檢測，酶免陽性，核酸陽性。檢測，酶免陽性，核酸陽性。建議仔細詢問發(fā)生高危行為的時間。建議仔細詢問發(fā)生高危行為的時間。工欲善其事工欲善其事必先利其器必先利其器加樣器的使用加樣器的使用準備準備設定移液量設定移液量安裝吸頭安裝吸頭按壓至第一停點位置按壓至第一停點位置吸液吸液貼貼壁壁輕輕按壓放液輕輕按壓放液貼貼壁壁按壓至第一停點后，再按壓第二停點，按壓至第一停點后，再按壓第二停點，排盡吸頭殘余液體排盡吸頭殘余液體松開按鈕，彈回至原來的位置松開按鈕，彈回至原來的位置按壓吸頭推頂，退除吸頭按壓吸頭推頂，

27、退除吸頭加樣器的使用加樣器的使用正向加樣法正向加樣法反向加樣法反向加樣法加樣器加樣器-注意事項注意事項 根據(jù)所需取液量選擇相應的移液器及吸頭，使用根據(jù)所需取液量選擇相應的移液器及吸頭，使用帶濾芯帶濾芯的的吸頭，可吸頭，可防止交叉污染防止交叉污染。日本日本W(wǎng)ATSON ：低吸附、高精度、無：低吸附、高精度、無RNA酶、酶、無無DNA酶、無熱源、加長吸頭酶、無熱源、加長吸頭 、帶濾芯已消毒、帶濾芯已消毒吸取液體時應緩慢勻速吸取，避免液體濺到移液吸取液體時應緩慢勻速吸取，避免液體濺到移液器頭上；打出液體后拇指不應松開按鈕，將吸液器頭上；打出液體后拇指不應松開按鈕，將吸液嘴壓掉后再將拇指松開，嘴壓掉后

28、再將拇指松開，避免液體回吸避免液體回吸。在調(diào)整取液量的旋鈕時，在調(diào)整取液量的旋鈕時，不要用力過猛不要用力過猛，并應注，并應注意計數(shù)器顯示的數(shù)值意計數(shù)器顯示的數(shù)值不要超過其可調(diào)范圍不要超過其可調(diào)范圍。連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時使用，吸頭連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時使用，吸頭有有液體液體時時不可平放或倒置不可平放或倒置。加樣器加樣器-注意事項注意事項 操作時要操作時要慢慢和和穩(wěn)穩(wěn)，吸嘴，吸嘴浸入液體深度浸入液體深度要要合適合適，吸液過程盡，吸液過程盡量保持不變；量保持不變；改吸不同液體、樣品或試劑改吸不同液體、樣品或試劑前要前要換新?lián)Q新吸嘴；吸嘴；發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)吸嘴內(nèi)有殘液吸嘴內(nèi)有殘液時必須更時必

29、須更換換；新吸嘴使用前應先預測。；新吸嘴使用前應先預測。為防止液體進入移液器套筒內(nèi)，注意以下幾點：壓放按鈕為防止液體進入移液器套筒內(nèi)，注意以下幾點：壓放按鈕時保持平穩(wěn)；移液器不得倒轉；吸嘴中有液體時不可將移時保持平穩(wěn)；移液器不得倒轉；吸嘴中有液體時不可將移液器平放；液器平放；5ML及及10ML移液器一定要加移液器一定要加濾芯濾芯。切勿用油脂等潤滑活塞或密封圈。切勿用油脂等潤滑活塞或密封圈。使用了酸性或有腐蝕蒸氣的溶液后，最好拆下套筒，用蒸使用了酸性或有腐蝕蒸氣的溶液后，最好拆下套筒，用蒸餾水清洗活塞及密封圈。餾水清洗活塞及密封圈。加樣器加樣器-注意事項注意事項 連續(xù)可調(diào)式移液器在取樣加樣過程中

30、應注意移液嘴不能連續(xù)可調(diào)式移液器在取樣加樣過程中應注意移液嘴不能觸及其他物品，以免被污染；移液嘴盒（架子）、廢液觸及其他物品，以免被污染；移液嘴盒（架子）、廢液瓶、所取試劑及加樣的樣品管應瓶、所取試劑及加樣的樣品管應擺放合理擺放合理，以方便操作，以方便操作過程、過程、避免污染避免污染為原則。為原則。連續(xù)可調(diào)式連續(xù)可調(diào)式移液器移液器在使用完畢后應置于移液器架上，在使用完畢后應置于移液器架上，遠遠離潮濕及腐蝕性物質離潮濕及腐蝕性物質。在取液之前，所取在取液之前，所取液體液體應在應在室溫室溫（15-25 C）平衡平衡；液體；液體溫度與室溫有異時，將吸嘴預洗多次再用；移液溫度不溫度與室溫有異時，將吸嘴預洗多