第6章芳酸類非甾體抗炎藥的分析

1、第6章芳酸類非甾體抗炎藥的分析藥物分析各論學(xué)習(xí)藥物分析各論學(xué)習(xí)（具體某類藥物）（具體某類藥物）各論的學(xué)習(xí)方法各論的學(xué)習(xí)方法學(xué)習(xí)是一種探索和習(xí)慣學(xué)習(xí)是一種探索和習(xí)慣: :理解記憶理解記憶 藥物藥物 結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu) 理化性質(zhì)理化性質(zhì) 鑒別鑒別 雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查 含量測(cè)定含量測(cè)定第六章第六章 芳酸類非甾體抗芳酸類非甾體抗炎藥物的分析炎藥物的分析 遵義醫(yī)學(xué)院遵義醫(yī)學(xué)院20112011級(jí)藥物制劑專業(yè)課程級(jí)藥物制劑專業(yè)課程學(xué)習(xí)要求學(xué)習(xí)要求1.典型芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)典型芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)2.鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)3.特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法4.含量測(cè)定方法含量測(cè)定方法非甾體抗炎藥

2、非甾體抗炎藥（Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）v非甾體抗炎藥（非甾體抗炎藥（Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）是一類不含有甾體骨架的抗炎）是一類不含有甾體骨架的抗炎 藥，多數(shù)具有芳酸基本結(jié)構(gòu)。藥，多數(shù)具有芳酸基本結(jié)構(gòu)。v本類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：本類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 水楊酸類水楊酸類 鄰氨基苯甲鄰氨基苯甲/ /乙酸類乙酸類 芳基丙酸類芳基丙酸類 吲哚乙酸類吲哚乙酸類 苯并噻嗪甲酸類苯并噻嗪甲酸類 其它非甾體抗炎藥其它非甾體抗炎藥第一節(jié)第一節(jié) 典型芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)典型芳酸類非甾體抗

3、炎藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)OOHORR(水楊酸類)OHOHO(水楊酸)(Salicylic Acid)OOHOCH3O(阿司匹林)(Aspirin)OOHOOOH(雙水楊酯)(Salsalate)FFOHOHO(二氟尼柳)(Difunisal) 水楊酸類水楊酸類( (鄰羥基苯甲酸類鄰羥基苯甲酸類) )酸性酸性光譜特性光譜特性O(shè)HNOCH3CH3甲芬那酸HMefenamic AcidOHNORH鄰氨基苯甲酸類酸性酸性酸性酸性光譜特性光譜特性 鄰氨基苯甲酸類鄰氨基苯甲酸類NROORH鄰氨基苯乙酸類NNaOOClClH雙氯芬酸鈉Diclofenac Sodium酸

4、性酸性酸性酸性光譜特性光譜特性基團(tuán)特性基團(tuán)特性 鄰氨基苯乙酸類鄰氨基苯乙酸類UV 276nmRRCH3HOO芳基丙酸類CH3HOOCH3CH3布洛芬IbuprofenCH3HOOO酮洛芬KetoprofenCH3HOOOCH3萘普生Naproxen酸性酸性 芳基丙酸類芳基丙酸類NOOH3CHOCH3ClO吲哚美辛 IndometacinNRRCH3OHO吲哚乙酸類酸性酸性光譜特性光譜特性 吲哚乙酸類吲哚乙酸類NSOHCH3NROOOH苯并噻嗪甲酸類NSOHCH3NOONOH吡羅昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam水解水解光譜特性光譜特性 苯并噻

5、嗪甲酸類苯并噻嗪甲酸類NO2HNSCH3OOO尼美利舒 NimesulideHONCH3OH對(duì)乙酰胺基酚 Paracetamol 其它非甾體類抗炎藥其它非甾體類抗炎藥水解水解光譜特性光譜特性二、本類藥物的主要理化性質(zhì)二、本類藥物的主要理化性質(zhì)n 酸性酸性 ：pKa 3pKa 36 6n 水解反應(yīng)：酯水解反應(yīng)：酯 酸酸 + + 醇（酚）醇（酚）n 光譜特性：含共軛體系，在一定波長處有光譜特性：含共軛體系，在一定波長處有UVUV吸收。吸收。 均有紅外吸收均有紅外吸收基團(tuán)或元素特征基團(tuán)或元素特征第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)一、與三氯化鐵反應(yīng)一、與三氯化鐵反應(yīng) 水楊酸反應(yīng)水楊酸反應(yīng)OHOHOOOOF

6、eOH+FeCl3+ H2O+ 3HCl紫堇色pH46阿司匹林：紫堇色阿司匹林：紫堇色雙水楊酯：紫色雙水楊酯：紫色二氟尼柳：深紫色二氟尼柳：深紫色均通過產(chǎn)生水楊酸與三氯化鐵反應(yīng)顯色均通過產(chǎn)生水楊酸與三氯化鐵反應(yīng)顯色 酚羥基反應(yīng)酚羥基反應(yīng) 對(duì)乙酰氨基酚與三氯化鐵顯藍(lán)紫色對(duì)乙酰氨基酚與三氯化鐵顯藍(lán)紫色HONCH3OH對(duì)乙酰胺基酚 ParacetamolFeCl3+Fe1/3ONCH3OH+HCl藍(lán)紫色NSOHCH3NOONOH吡羅昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam顯玫瑰紅色顯玫瑰紅色顯淡紫色顯淡紫色二、縮合反應(yīng)顯色二、縮合反應(yīng)顯色CH3HOOO酮

7、洛芬+NHNO2NO2NH2CH3HOONNO2NNO2橙紅色H2SO4-H2OH三、重氮化三、重氮化- -偶合反應(yīng)（芳伯胺基）偶合反應(yīng)（芳伯胺基）NH2H+, HNO2N2+Cl-NNOHCOOHRCOOHROHOH-RCOOH芳伯胺芳伯胺 or 水解產(chǎn)生芳伯胺水解產(chǎn)生芳伯胺紅色偶氮化合物紅色偶氮化合物H H+ +，亞硝酸鈉，亞硝酸鈉OHOH- -，b b- -萘酚萘酚OCOCH3COONHCOCH3+3H2OHCl貝諾酯HONH2HCl+OHCOOHNaNO2,2HClHON2+Cl-OHNaOHOHNNOH橙紅色四、四、氧化反應(yīng)氧化反應(yīng)甲芬那酸甲芬那酸 H2SO4 深藍(lán)色深藍(lán)色(O)K2

8、Cr2O7并產(chǎn)生綠色熒光并產(chǎn)生綠色熒光隨即變?yōu)樽鼐G色隨即變?yōu)樽鼐G色五、五、水解反應(yīng)水解反應(yīng)白色沉淀白色沉淀 +醋酸臭氣醋酸臭氣 酯鍵酯鍵 or or 酰胺鍵酰胺鍵 特征現(xiàn)象特征現(xiàn)象阿司匹林阿司匹林D DCOOHOCOCH3COONaOHCOOHOHNa CO23H2SO4六、特征元素反應(yīng)六、特征元素反應(yīng) Cl Cl- AgCl（雙氯酚酸鈉）（雙氯酚酸鈉） S S2- PbS （美洛昔康）（美洛昔康）OHOH- -D DAg+高溫高溫Pb2+七、七、 光譜法光譜法 UV、IR max， min-A-吸收系數(shù)吸收系數(shù)A 1 /A 2UV八、色譜法八、色譜法供試品保留時(shí)間供試品保留時(shí)間對(duì)照品保留時(shí)間

9、對(duì)照品保留時(shí)間-COOH-OH-COOHPh-C鄰位取代鄰位取代Ph第三節(jié)第三節(jié): : 特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法表表6-3 典型非甾體抗炎藥物的主要有關(guān)物質(zhì)典型非甾體抗炎藥物的主要有關(guān)物質(zhì)藥物名稱藥物名稱有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式代碼代碼/名稱名稱藥物藥物名稱名稱有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式代碼代碼/名稱名稱阿司匹林阿司匹林雙水楊酯雙水楊酯游離游離水楊酸水楊酸萘普生萘普生I 6-甲氧基甲氧基-2-萘乙酮萘乙酮甲芬那酸甲芬那酸2,3-二甲基二甲基苯胺苯胺對(duì)乙酰對(duì)乙酰氨基酚氨基酚氨基酚氨基酚對(duì)氯苯乙酰對(duì)氯苯乙酰胺胺一、阿司匹林中游離水楊酸與有關(guān)物質(zhì)的檢查一、阿司匹林中游離水楊酸與有關(guān)

10、物質(zhì)的檢查1. 游離水楊酸游離水楊酸來源：生產(chǎn)中乙?；煌耆珌碓矗荷a(chǎn)中乙酰化不完全 貯藏中水解產(chǎn)生貯藏中水解產(chǎn)生ONaCO2加壓，ONaCOONaOHCOOHH+COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,7075 C。ASP水楊酸COOHOOOH雙水楊酯雙水楊酯OH-CO2副產(chǎn)物危害性：危害性：1.對(duì)胃腸道的強(qiáng)烈刺激性對(duì)胃腸道的強(qiáng)烈刺激性 2. 被氧化生成有色醌型化合物，使阿司匹林變色被氧化生成有色醌型化合物，使阿司匹林變色COOHOHCOOHOHHOOOCOOHOOHOOHCOOHCOOHHOOOCOOHHOCOOHOO+COOHOOOCOOH-+ 檢查原理檢查原理- ChP be

11、fore 2010 用水楊酸與用水楊酸與 Fe3+ 生成紫堇色配生成紫堇色配離子的原理離子的原理, 用稀硫酸鐵銨溶液顯色法檢查用稀硫酸鐵銨溶液顯色法檢查 供試品溶液制備過程中阿司匹林水解供試品溶液制備過程中阿司匹林水解- ChP2010（HPLC） 制備供試品溶液：制備供試品溶液：1%冰醋酸甲醇溶液（防水解）冰醋酸甲醇溶液（防水解） 外標(biāo)法；不得超過外標(biāo)法；不得超過0.1%- 原料、制劑限量不同原料、制劑限量不同原料：原料： 0.1%片：片： 0.3%腸溶片：腸溶片： 1.5%腸溶膠囊：腸溶膠囊： 1.0%泡騰片：泡騰片： 3.0%栓劑：栓劑： 3.0%2.2.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)OH(CH3CO

12、)2OOCOCH3+OCOCH3COOHOCOCH3COO+OHCOOHOHCOO醋酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯HPLC法法有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)原料苯酚原料苯酚 + 副產(chǎn)物副產(chǎn)物 HPLC（圖（圖6-2）阿司匹林阿司匹林 水楊酸水楊酸 乙酰水楊酰水楊酸乙酰水楊酰水楊酸a:阿司匹林供試品阿司匹林供試品(10mg/ml)；b:0.5%自身對(duì)照自身對(duì)照(50 g/ml)；c: 0.05%自身對(duì)照自身對(duì)照(靈敏度試驗(yàn)靈敏度試驗(yàn)5 g/ml)；d:水楊酸對(duì)照水楊酸對(duì)照(10 g/ml)；e:空白空白阿司匹林的檢查阿司匹林的檢查五、對(duì)乙酰氨基酚中氨基酚和對(duì)氯苯乙酰胺HPLCClNO2NH2HOHONO2HO

13、NHCOCH3水解還原酰化ClNHCOCH3限量要求：對(duì)氨基酚不得過限量要求：對(duì)氨基酚不得過0.005%0.005%； 對(duì)氯苯乙酰胺不得超過對(duì)氯苯乙酰胺不得超過0.005%0.005%第四節(jié)第四節(jié) 含量測(cè)定含量測(cè)定 羧基：酸堿滴定、非水滴定羧基：酸堿滴定、非水滴定 酯基：剩余酸堿滴定酯基：剩余酸堿滴定 苯環(huán)：紫外分光光度法、苯環(huán)：紫外分光光度法、HPLCORCOOH原料藥：酸堿滴定法原料藥：酸堿滴定法制劑：制劑： UV 、HPLC一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法酸堿酸堿滴定法滴定法水解后剩余量滴定法水解后剩余量滴定法阿司匹林阿司匹林 USP, BP, JP非水溶液滴定法非水溶液滴定法吡羅昔康吡羅昔

14、康吡啶環(huán)顯堿性吡啶環(huán)顯堿性, 可在可在冰醋酸溶液中用高冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定氯酸滴定液滴定 剩余量滴定法剩余量滴定法美洛昔康美洛昔康水及與水混溶的有水及與水混溶的有機(jī)溶劑中難溶機(jī)溶劑中難溶,溶于溶于氫氧化鈉滴定液后氫氧化鈉滴定液后鹽酸回滴定鹽酸回滴定 直接滴定法直接滴定法水楊酸水楊酸,阿司匹林阿司匹林,雙雙水楊酯水楊酯,二氟尼柳二氟尼柳,甲甲芬那酸芬那酸,布洛芬布洛芬,酮洛酮洛芬芬,萘普生萘普生,尼美舒利尼美舒利以以ASP及其制劑為例及其制劑為例( (一一) ) 直接滴定法直接滴定法 苯甲酸苯甲酸 水楊酸水楊酸酸性較強(qiáng)酸性較強(qiáng)COHOHO直接滴定直接滴定AspirinAspirin、雙

15、水楊酯、二氟尼柳、甲芬那酸、布洛芬、尼美、雙水楊酯、二氟尼柳、甲芬那酸、布洛芬、尼美舒利等均采用本法測(cè)定含量。舒利等均采用本法測(cè)定含量。p pKa 36 的藥物溶于中性醇的藥物溶于中性醇,可直接用可直接用NaOH滴定滴定p pKa 69 的藥物要用非水溶液滴定法的藥物要用非水溶液滴定法中性乙醇COOHOCOCH3NaOH20以下COONaOCOCH3H2O1. 測(cè)定法測(cè)定法 本品約本品約0.4g, 精密稱定精密稱定, 加中性乙醇加中性乙醇20ml溶解后溶解后,加加酚酞指示液酚酞指示液3滴滴, 用氫氧化鈉滴定液用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定滴定2. 討論討論乙醇：溶解乙醇：溶解Asp，

16、防止，防止Asp水解水解;中性乙醇：對(duì)酚酞指示液顯中性，消除滴定誤差中性乙醇：對(duì)酚酞指示液顯中性，消除滴定誤差滴定在不斷振搖下稍快進(jìn)行滴定在不斷振搖下稍快進(jìn)行, 防阿司匹林水解防阿司匹林水解受阿司匹林的水解產(chǎn)物水楊酸及醋酸的干擾受阿司匹林的水解產(chǎn)物水楊酸及醋酸的干擾只能用于合格原料藥的測(cè)定。只能用于合格原料藥的測(cè)定。本法特點(diǎn)：簡(jiǎn)單本法特點(diǎn)：簡(jiǎn)單( (二二) ) 剩余量滴定法剩余量滴定法NSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾乎不溶，在丙酮中微溶。所以乎不溶，在丙酮中微溶。所以ChP使用使用定量過量的氫氧化

17、鈉滴定液溶解后，再定量過量的氫氧化鈉滴定液溶解后，再用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。烯醇式結(jié)烯醇式結(jié)構(gòu)構(gòu):酸性酸性為什么氫氧為什么氫氧化鈉能溶解化鈉能溶解之？之？(三三) 水解后剩余量滴定法水解后剩余量滴定法OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O取本品約，精密稱定，準(zhǔn)確加取本品約，精密稱定，準(zhǔn)確加NaOH液，緩緩煮沸液，緩緩煮沸10min，放冷，放冷，以酚酞為指示劑，用以酚酞為指示劑，用H2SO4液液(0.25mol/L)滴定剩余的滴定剩余的NaOH，并，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每將滴

18、定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的的NaOH液液(0.5ml/L)相當(dāng)于相當(dāng)于的的C9H9O4USP32-NF271、水解后剩余量滴定法、水解后剩余量滴定法含量% = ( V0-V) FTW 100%T = 0.5 12180.16 = 45.04 (mg/ml)滴定度滴定度2、 兩步滴定法兩步滴定法水解后剩余量滴定法的改進(jìn)水解后剩余量滴定法的改進(jìn) 用于用于Aspirin片測(cè)定片測(cè)定片劑中有穩(wěn)定劑片劑中有穩(wěn)定劑HOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸櫞酸Citric acidHOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸Trataric acid水解產(chǎn)物水解產(chǎn)物水楊酸水楊酸SAHAc第一步：第一步：

19、NaOH滴定所有的酸：滴定所有的酸：ASP，CA，TA， SA，HAc第二步：水解后剩余滴定第二步：水解后剩余滴定取本品取本品1010片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量( (約相當(dāng)于阿司約相當(dāng)于阿司匹林匹林0.3g)0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇，置錐形瓶中，加中性乙醇( (對(duì)酚酞指示劑顯中對(duì)酚酞指示劑顯中性性)20ml)20ml，振搖使，振搖使ASPASP溶解，加酚酞指示液溶解，加酚酞指示液3 3滴，滴加滴，滴加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)至顯粉紅色，再精密加至顯粉紅色，再精密加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)40ml

20、(0.1mol/L)40ml，置，置水浴上加熱水浴上加熱15min15min，并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用，并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用H H2 2SOSO4 4液液(0.05mol/L)(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml1ml的的NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相當(dāng)于的相當(dāng)于的C C9 9H H8 8OO4 4COONaOCOCH3NaOHCOONaOHNaAc H2O2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O阿司匹林片含量測(cè)定方法阿司匹林片含量測(cè)定方法(ChP2005)如下如下: l

21、含量計(jì)算含量計(jì)算供試品中阿司匹林的含量供試品中阿司匹林的含量,由水解時(shí)消耗的堿量計(jì)算由水解時(shí)消耗的堿量計(jì)算第第1步步: 中和時(shí)中和時(shí), 阿司匹林的游離羧酸中和阿司匹林的游離羧酸中和第第2步步: 水解后剩余量滴定法時(shí)阿司匹林與氫氧化鈉反水解后剩余量滴定法時(shí)阿司匹林與氫氧化鈉反應(yīng)的摩爾比為應(yīng)的摩爾比為1:1滴定度滴定度: T = 0.1(1/1) 180.16=18.02(mg/m1)片劑含量片劑含量: 標(biāo)示量%=WW標(biāo)示量100%(V0-V)FT空白消耗空白消耗樣測(cè)消耗樣測(cè)消耗校正因數(shù)校正因數(shù)滴定度滴定度片劑規(guī)格片劑規(guī)格平均片重平均片重游游離離S SA A偏偏高高時(shí)時(shí)結(jié)結(jié)果果偏偏高高不不能能完完全全排排出出干干擾擾缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)操操作作簡(jiǎn)簡(jiǎn)便便水水楊楊酸酸干干擾擾少少結(jié)結(jié)果果準(zhǔn)準(zhǔn)確確，避避免免游游離離S SA A及及片片劑劑中中穩(wěn)穩(wěn)定定直接滴定法水解后剩余滴定法兩步滴定法(四四) 非水溶液滴定法（自學(xué)）非水溶液滴定法（自學(xué)）1. 原理原理吡羅昔康具有吡啶環(huán)吡羅昔康具有吡啶環(huán), 顯堿性顯堿性, 可在冰醋酸溶液可在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定中用高氯酸滴定液滴定 2. 測(cè)定法測(cè)定法本品約本品約0.2g, 精密稱定精密稱定, 加冰醋酸加冰醋酸20ml使溶解使溶解, 加加結(jié)晶紫指示液結(jié)晶紫指示液1滴滴, 用高氯酸滴定液用高氯酸滴定液(0.