生物化學(xué)糖酵解糖異生和戊糖磷酸途徑

1、.1糖酵解、糖異生和戊糖磷酸途徑糖酵解、糖異生和戊糖磷酸途徑 糖酵解糖酵解 糖酵解進(jìn)入途徑糖酵解進(jìn)入途徑 厭氧條件下的丙酮酸去路：發(fā)酵厭氧條件下的丙酮酸去路：發(fā)酵 糖異生糖異生 葡萄糖氧化的戊糖磷酸途徑葡萄糖氧化的戊糖磷酸途徑Glucose occupies a central position in metabolism: - relatively rich in potential energy ( Go = -2,840 kJ/mol) - remarkably versatile precursor (eg. E. coli)LW-1.2= 3C compoundMajor pathw

2、ays of glucose utilization(in plants & animals)P28-1部分自由能在糖酵部分自由能在糖酵解途徑中以解途徑中以ATP & NADH形式被保存形式被保存核糖核糖-5-磷酸磷酸丙酮酸丙酮酸R5P ( + NADPH)Although not the only possible fates for Glc, these 3 pathways are the most significant in terms of the amount of Glc that flows through them in most cells.(cf. Fi

3、g. 11-1).3 糖酵解糖酵解 Glycolysis 概述：糖酵解分為兩大階段概述：糖酵解分為兩大階段 準(zhǔn)備階段消耗準(zhǔn)備階段消耗ATP 收益階段獲得收益階段獲得ATP和和NADH 糖酵解可以嚴(yán)格調(diào)控糖酵解可以嚴(yán)格調(diào)控 (cf. courseware 12)(糖糖)酵解酵解 細(xì)胞質(zhì)中通過(guò)一系列細(xì)胞質(zhì)中通過(guò)一系列 酶促反應(yīng)將葡萄糖最酶促反應(yīng)將葡萄糖最 終降解為丙酮酸并伴終降解為丙酮酸并伴 有有ATP生成的全過(guò)程生成的全過(guò)程發(fā)酵發(fā)酵 無(wú)氧條件下無(wú)氧條件下由葡萄糖由葡萄糖 等降解而生成乳酸或等降解而生成乳酸或 乙醇乙醇(GlcPyr similar as in Glycolysis)LW-2Ott

4、o F. Meyerhof 1884-1951(shared 1922 NP in Phys./Med.)(Embden-Meyerhof-Parnas Pathway).4G19.1 兩階段十步反應(yīng)兩階段十步反應(yīng) - 前五步準(zhǔn)備前五步準(zhǔn)備 - 后五步收益后五步收益(oxidative/non-oxidative) 三種重要轉(zhuǎn)化類型三種重要轉(zhuǎn)化類型 - Glc碳鏈降解產(chǎn)生碳鏈降解產(chǎn)生 丙酮酸丙酮酸(6C3C) - 釋能形成高能磷酸釋能形成高能磷酸 化合物化合物(ADPATP) - 電子電子/:H轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移 (NAD+NADH)1. 概述：糖酵解概述：糖酵解 可分為兩大階段可分為兩大階段(cf.

5、Fig. 11-2).514-2a The two phases of glycolysis己己糖糖階階段段消耗消耗2 ATPContinue for 2nd phase.614-2b丙糖階段丙糖階段生成生成4 ATP &2 NADH發(fā)酵發(fā)酵還包還包括在無(wú)氧括在無(wú)氧條件下由條件下由丙酮酸繼丙酮酸繼續(xù)反應(yīng)并續(xù)反應(yīng)并最終生成最終生成乳酸乳酸/乙醇乙醇等等.7Overall equation for glycolysisGlc + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi 2 pyruvate + 2NADH + 2H+ + 2ATP + 2H2O 糖酵解的能量變化糖酵解的能量變化可分為可分為兩

6、段進(jìn)程兩段進(jìn)程： - Glc + 2NAD+ 2 pyruvate + 2NADH + 2H+ G= -146 kJ/mol - 2ADP + 2Pi 2ATP + 2H2O G= (2 x 30.5) = 61 kJ/mol Gtotal= -146 + 61 = -85 kJ/mol 在在細(xì)胞內(nèi)的實(shí)際細(xì)胞內(nèi)的實(shí)際ATP, ADP, Pi, Glc和和pyruvate條條件下，件下， 糖酵解糖酵解中釋出的能量中釋出的能量(with pyruvate as the end product) 以以ATP形式形式儲(chǔ)存的效率儲(chǔ)存的效率 60% Note: Glc的大部分能量仍保存在丙酮酸中：的大部分

7、能量仍保存在丙酮酸中： - Glc完完全氧化成全氧化成CO2 & H2O： G= -2,840 kJ/mol - 經(jīng)經(jīng)由糖酵解轉(zhuǎn)化成由糖酵解轉(zhuǎn)化成兩兩分子丙酮酸時(shí)分子丙酮酸時(shí) (G= -146 kJ/mol) 僅釋出其總能量的僅釋出其總能量的 5.2%P28-3細(xì)胞內(nèi)條件細(xì)胞內(nèi)條件下酵解過(guò)程下酵解過(guò)程基本不可逆基本不可逆.8 Glc磷酸化成磷酸化成G6P - 己己糖激酶糖激酶 - 1stATP被消被消耗：耗：不可逆不可逆 - 為為后續(xù)反應(yīng)后續(xù)反應(yīng)激活激活Glcp526- keeping some energy from ATPs breakdown- keeping Glc in ce

8、ll- 己糖激酶己糖激酶 IIII廣泛分布廣泛分布 于肝腎外所有組織中，于肝腎外所有組織中， KmGlc = 0.1 mmol， 專一性不強(qiáng)且為變構(gòu)酶：專一性不強(qiáng)且為變構(gòu)酶： G6P為其變構(gòu)抑制劑為其變構(gòu)抑制劑- Glc激酶激酶(glucokinase = hexokinase IV) 主要在肝細(xì)胞，主要在肝細(xì)胞，KmGlc = 510 mmol，專一性很強(qiáng)，專一性很強(qiáng) 且不受且不受G6P抑制抑制- 通常細(xì)胞內(nèi)的通常細(xì)胞內(nèi)的Glc 僅為僅為 4 mmol，故只有當(dāng)，故只有當(dāng)血糖血糖 很高時(shí)才能由很高時(shí)才能由Glc激酶在激酶在 肝臟活化肝臟活化Glc以合成糖原以合成糖原 (G6P G1P UDP

9、-Glc)親核攻擊親核攻擊2. 準(zhǔn)備階段消耗準(zhǔn)備階段消耗ATP (cf. p290).9G15.1 己糖激酶作用時(shí)會(huì)發(fā)生明顯的構(gòu)象變化己糖激酶作用時(shí)會(huì)發(fā)生明顯的構(gòu)象變化(誘導(dǎo)契合誘導(dǎo)契合)：與與Glc的結(jié)合引發(fā)兩個(gè)結(jié)構(gòu)域相對(duì)轉(zhuǎn)動(dòng)的結(jié)合引發(fā)兩個(gè)結(jié)構(gòu)域相對(duì)轉(zhuǎn)動(dòng)17而靠近而靠近(8)，使被結(jié)合的，使被結(jié)合的Glc與待結(jié)合的與待結(jié)合的Mg2+-ATP更為接近，并相應(yīng)阻斷更為接近，并相應(yīng)阻斷H2O進(jìn)入活性位點(diǎn)水解進(jìn)入活性位點(diǎn)水解ATP- 己糖激酶活性需要己糖激酶活性需要Mg2+： 屏蔽屏蔽ATP磷酰基的負(fù)電荷磷?；呢?fù)電荷 而使其末端而使其末端P更容易受到更容易受到 Glc等的等的OH親核攻擊親核攻擊(

10、cf. Fig. 11-3).10 G6P異構(gòu)化為異構(gòu)化為F6P - 磷磷酸己糖異構(gòu)酶酸己糖異構(gòu)酶 = 醛醛-酮糖酮糖可逆異構(gòu)可逆異構(gòu)反應(yīng)反應(yīng) (需要以需要以開(kāi)鏈形式開(kāi)鏈形式進(jìn)行進(jìn)行)p526 C1羰基羰基與與C2羥基羥基的重排是的重排是 后兩步反應(yīng)進(jìn)行的前提后兩步反應(yīng)進(jìn)行的前提- 磷酸化磷酸化需要需要C1的羰基先轉(zhuǎn)化的羰基先轉(zhuǎn)化 成醇成醇(形成形成OH攻擊攻擊ATP磷?；柞；?- C3C4的的斷裂斷裂則需要?jiǎng)t需要C2位位 有一羰基有一羰基(利于負(fù)碳離子形成利于負(fù)碳離子形成).11吡喃葡糖開(kāi)環(huán)吡喃葡糖開(kāi)環(huán)C2的的H+移除促進(jìn)移除促進(jìn)順順-烯二醇中間物烯二醇中間物的形成的形成C2OH的的H+移

11、除移除導(dǎo)致形成導(dǎo)致形成C=O雙鍵雙鍵呋喃果糖閉環(huán)呋喃果糖閉環(huán)G19.3 磷酸己糖異構(gòu)酶反應(yīng)機(jī)制磷酸己糖異構(gòu)酶反應(yīng)機(jī)制 (重排異構(gòu)重排異構(gòu) & E-堿性殘基的交替廣義酸堿性殘基的交替廣義酸-堿催化堿催化)酶活性位點(diǎn)酶活性位點(diǎn)堿性殘基堿性殘基- 人的人的磷酸葡糖磷酸葡糖 異構(gòu)酶異構(gòu)酶對(duì)對(duì)G6P 高度專一，且高度專一，且 活性需要活性需要Mg2+C1-OH可攻擊可攻擊ATP的磷?；牧柞；?cf. Fig. 11-4).12p526 F6P磷酸化成磷酸化成F-1,6-BP - 磷酸磷酸果糖激酶果糖激酶-1 (PFK-1) - 2ndATP被消被消耗：耗：不不可逆可逆 & 調(diào)調(diào)節(jié)點(diǎn)節(jié)點(diǎn)

12、 PFK-1是變構(gòu)酶，為酵解途徑是變構(gòu)酶，為酵解途徑 調(diào)節(jié)的關(guān)鍵反應(yīng)：調(diào)節(jié)的關(guān)鍵反應(yīng)：細(xì)胞能荷低細(xì)胞能荷低 可激活，能荷高則抑制可激活，能荷高則抑制 - ATP抑制而抑制而AMP解除抑制解除抑制 - 檸檬酸檸檬酸和和F-2,6-BP分別為分別為 變構(gòu)抑制劑和激活劑變構(gòu)抑制劑和激活劑1st調(diào)撥點(diǎn)調(diào)撥點(diǎn)F-1,6-BP只能只能進(jìn)入酵解進(jìn)入酵解親核攻擊親核攻擊.13 F-1,6-BP裂解成二羥丙酮磷酸和甘油醛裂解成二羥丙酮磷酸和甘油醛-3-P - 醛縮酶醛縮酶 = 可可逆羥逆羥-醛縮合反應(yīng)醛縮合反應(yīng) - C3C4斷斷開(kāi)開(kāi)p527C3C4連鍵裂解連鍵裂解盡管盡管Go意味著反應(yīng)意味著反應(yīng)傾向于逆行，但由

13、于傾向于逆行，但由于磷酸丙糖在后續(xù)反應(yīng)磷酸丙糖在后續(xù)反應(yīng)中不斷被消耗而促使中不斷被消耗而促使F-1,6-BP裂解裂解(DHAP)(G3P).1414-5class I aldolase reaction(animal & plant)中中C2羰羰基與基與E-Lys形形成帶正電的亞成帶正電的亞胺胺(-C=N-鍵鍵)，以穩(wěn)定以穩(wěn)定C3C4斷裂時(shí)暫時(shí)形斷裂時(shí)暫時(shí)形成的負(fù)碳離子成的負(fù)碳離子釋出釋出1st產(chǎn)物產(chǎn)物后形成烯胺后形成烯胺中間物中間物以和的以和的逆過(guò)程水解逆過(guò)程水解亞胺并釋出亞胺并釋出2nd產(chǎn)物產(chǎn)物自學(xué)自學(xué).1514-6磷酸丙糖互變異構(gòu)磷酸丙糖互變異構(gòu) - 丙糖磷酸異構(gòu)酶丙糖磷酸異構(gòu)酶

14、 - 只有只有G3P直直接進(jìn)入酵解后續(xù)反應(yīng)接進(jìn)入酵解后續(xù)反應(yīng) - 有效移除有效移除G3P可確保反應(yīng)平衡可確保反應(yīng)平衡 有有利于正向進(jìn)行利于正向進(jìn)行最復(fù)雜的功能團(tuán)最復(fù)雜的功能團(tuán)(羰基羰基)規(guī)定為規(guī)定為C1Review for 1st phase反應(yīng)機(jī)制類似于反應(yīng)機(jī)制類似于磷酸己糖異構(gòu)酶磷酸己糖異構(gòu)酶oxidizedreduced提高代謝效率提高代謝效率(cf. Fig. 11-5)化學(xué)意義化學(xué)意義無(wú)區(qū)分無(wú)區(qū)分.16 G3P氧化生成氧化生成1,3-BPG以以:H形式移除形式移除并加載于并加載于NAD+以以H+形式游形式游離于溶液中離于溶液中- 醛基氧化產(chǎn)生的自由能以醛基氧化產(chǎn)生的自由能以混合混合

15、酸酐酸酐(Go = -49.3 kJ/mol)形式形式 儲(chǔ)存在儲(chǔ)存在C1上，可以轉(zhuǎn)移至上，可以轉(zhuǎn)移至ADP 生成生成ATPp529G3P氧化氧化放能放能： G= -43 kJ/mol磷酸酐鍵形成磷酸酐鍵形成吸能吸能： G= 49.3 kJ/mol - G3P脫脫氫酶氫酶(as homotetramer) - 1st步步儲(chǔ)能反應(yīng)儲(chǔ)能反應(yīng)= 醛醛脫氫成脫氫成 混合酸酐混合酸酐3. 收益階段產(chǎn)生收益階段產(chǎn)生ATP和和NADH (cf. p294).1714-7G3P dehydrogenase reaction硫半縮醛硫半縮醛硫酯硫酯SH對(duì)底物的親核攻對(duì)底物的親核攻擊得到擊得到His的廣義酸的廣義酸

16、-堿催化促進(jìn)堿催化促進(jìn)必須取代必須取代NADH以避免酵解終止以避免酵解終止( :B)(cf. Fig. 11-6)磷酸解磷酸解(as OH from H2O)(e sink).18- 碘乙酸碘乙酸(烷化劑烷化劑)可抑制可抑制G3P脫氫酶：與酶活性脫氫酶：與酶活性部位的部位的Cys-SH形成共價(jià)衍生物而使酶失活形成共價(jià)衍生物而使酶失活(as DIPFP for Ser-OH)p536 (3rd)H11.2 (Box)- 砷砷酸酸能替代磷酸參與能替代磷酸參與 反應(yīng)而生成反應(yīng)而生成1-砷酸砷酸-3- 磷酸甘油酸磷酸甘油酸，后者很，后者很 不穩(wěn)定而迅速水解，不穩(wěn)定而迅速水解， 使使G3P的氧化與的氧化

17、與ADP 的磷酸化解偶聯(lián)的磷酸化解偶聯(lián) (潛在的致死反應(yīng)潛在的致死反應(yīng))(as with heavy metal ions eg. Hg2+).19- 磷酸磷酸甘油酸激酶甘油酸激酶 (以逆反應(yīng)命名以逆反應(yīng)命名)= 1st步步底物水平磷酸化底物水平磷酸化底物分子的底物分子的高能磷酰基高能磷?；苯愚D(zhuǎn)移直接轉(zhuǎn)移到到ADP/GDP而生成而生成ATP/GTP，反應(yīng)僅，反應(yīng)僅涉及可溶性酶和化學(xué)中間物涉及可溶性酶和化學(xué)中間物 和為能量偶聯(lián)過(guò)程和為能量偶聯(lián)過(guò)程 (共同中間物為共同中間物為1,3-BPG) - G3P (醛醛)氧化為氧化為3-PG (酸酸) - NAD+還原成還原成NADH - ADP磷酸化為

18、磷酸化為ATP即：即：G3P + ADP + Pi + NAD+ 3-PG + ATP + NADH + H+ Go = -12.2 kJ/molp531 磷酰基從磷?；鶑?,3-BPG轉(zhuǎn)移給轉(zhuǎn)移給ADP3-PG.20 3-磷酸甘油酸磷酸甘油酸(3-PG)轉(zhuǎn)化成轉(zhuǎn)化成2-磷酸甘油酸磷酸甘油酸(2-PG) - 磷酸磷酸甘油酸變位酶甘油酸變位酶 = 磷磷?；邗；贑3 & C2 之間可逆換位之間可逆換位p531單磷酸甘油單磷酸甘油(酸酸)的標(biāo)準(zhǔn)水解自由能變化的標(biāo)準(zhǔn)水解自由能變化(Go)均不足以生成核苷三磷酸均不足以生成核苷三磷酸.2114-8phosphoglycerate mutase

19、 reaction(animal & yeast)- 在大多數(shù)細(xì)胞中，在大多數(shù)細(xì)胞中， 該酶該酶活性部位的活性部位的His 殘基在反應(yīng)前均需殘基在反應(yīng)前均需 先被少量先被少量2,3-BPG (引物引物)磷酸化磷酸化- 紅細(xì)胞紅細(xì)胞的的2,3-BPG 高達(dá)高達(dá)5 mM，可調(diào)節(jié)，可調(diào)節(jié) Hb對(duì)對(duì)O2的親和性的親和性- 該酶在該酶在植物植物中無(wú)需中無(wú)需 2,3-BPG中繼：由中繼：由 3-PG直接將磷?；苯訉⒘柞；?轉(zhuǎn)移到酶上，后者轉(zhuǎn)移到酶上，后者 再將其轉(zhuǎn)回再將其轉(zhuǎn)回C2生成生成 2-PG(cf. Fig. 11-7).22 2-PG脫水變位成磷酸烯醇式丙酮酸脫水變位成磷酸烯醇式丙酮酸(

20、PEP) - 烯醇化酶烯醇化酶 - 2-PG的的脫水脫水導(dǎo)導(dǎo)致致分子內(nèi)能量分子內(nèi)能量重新分布重新分布 2-PG和和PEP的磷?；獾牧柞；釭o具具有很大差值：有很大差值： 2-PG: -17.6 kJ/mol (glycerate, as for 3-PG) PEP: -61.9 kJ/mol足以在下步反應(yīng)足以在下步反應(yīng)中合成中合成ATPp532C2 oxidizedC3 reduced.23Two-step reaction catalyzed by enolaseLys345堿催化移除堿催化移除H+烯醇化中間物由烯醇化中間物由Mg2+穩(wěn)定穩(wěn)定Glu211酸催化促進(jìn)移除酸催化促進(jìn)移除O

21、HF為烯醇化酶的強(qiáng)抑制劑：為烯醇化酶的強(qiáng)抑制劑：可在活性位點(diǎn)形成可在活性位點(diǎn)形成FPO32Mg2+復(fù)合物而使酶失活復(fù)合物而使酶失活6-23.24 磷?；鶑牧柞；鶑腜EP轉(zhuǎn)移給轉(zhuǎn)移給ADP - 丙酮酸丙酮酸激酶激酶 = 2nd步步底底物水平磷酸化物水平磷酸化 - 丙丙酮酸先形成酮酸先形成烯醇式烯醇式，隨即快速，隨即快速 互變異構(gòu)成更為穩(wěn)定的互變異構(gòu)成更為穩(wěn)定的酮式酮式 - 不不可逆可逆 調(diào)節(jié)點(diǎn)調(diào)節(jié)點(diǎn)PEP磷?；D(zhuǎn)移磷酰基轉(zhuǎn)移放能放能： Go = -61.9 kJ/mol ATP生成生成吸能吸能： Go = 30.5 kJ/mol非酶促異構(gòu)非酶促異構(gòu) G= -41.8 kJ/molp532.25m

22、echanism for pyruvate kinase reaction(cf. Fig. 11-8 & Fig. 11-9).26總總輸入：輸入： Glc + 2ATP + 2NAD+ + 4ADP + 2Pi總總輸出：輸出： 2 pyruvate + 2ADP + 2NADH + 2H+ + 4ATP + 2H2O總總反應(yīng)：反應(yīng)： Glc + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi 2 pyruvate + 2NADH + 2H+ + 2ATP + 2H2O- 碳骨碳骨架轉(zhuǎn)化：架轉(zhuǎn)化： 1 Glc 2 pyruvate- 磷磷酰基轉(zhuǎn)移：?；D(zhuǎn)移：2 ADP + 2Pi 2 ATP-

23、 e轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移：4e (as 2 :H)從從 2 G3P轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)移至 2 NAD+凈凈ATP生成生成來(lái)自來(lái)自- 底物水平磷酸化底物水平磷酸化 (- NADH在在有氧條件下可經(jīng)由呼吸鏈再氧化而獲能有氧條件下可經(jīng)由呼吸鏈再氧化而獲能)P28-17 Pasteur effect: Glc消耗率消耗率/總量在無(wú)氧條件下均要總量在無(wú)氧條件下均要 明顯高于有氧時(shí)的明顯高于有氧時(shí)的(氧對(duì)發(fā)酵作用的抑制氧對(duì)發(fā)酵作用的抑制) (cf. p303)4. 酵解反應(yīng)總平衡有酵解反應(yīng)總平衡有ATP凈盈利凈盈利 (cf. p298).27小結(jié)：糖酵解小結(jié)：糖酵解- 糖酵解是一種廣泛存在于生物界的糖酵解是一種廣泛存在于生物界

24、的Glc降解途徑降解途徑， 可以將可以將Glc氧化成兩分子丙酮酸，并將釋出的能量氧化成兩分子丙酮酸，并將釋出的能量 儲(chǔ)存在儲(chǔ)存在ATP和和NADH中中- 10種酵解酶全都分布在種酵解酶全都分布在胞液中胞液中，所有中間物均為，所有中間物均為 3C/6C的磷酸鹽化合物的磷酸鹽化合物L(fēng)W-3.28- 準(zhǔn)備階段準(zhǔn)備階段消耗消耗 2 ATP將將 Glc轉(zhuǎn)化成轉(zhuǎn)化成F-1,6-BP， 隨后隨后C3C4連鍵被斷裂而連鍵被斷裂而 生成兩分子磷酸丙糖生成兩分子磷酸丙糖- 收益階段收益階段兩分子兩分子G3P于于C1 位氧化，釋出的能量被儲(chǔ)存位氧化，釋出的能量被儲(chǔ)存 在在 2 NADH和和 2 ATP中中- 催化大

25、而負(fù)標(biāo)準(zhǔn)自由能變化催化大而負(fù)標(biāo)準(zhǔn)自由能變化 的的三種激酶三種激酶可經(jīng)由別構(gòu)調(diào)節(jié)可經(jīng)由別構(gòu)調(diào)節(jié) 控制該途徑的碳流量、保證控制該途徑的碳流量、保證 適宜的適宜的ATP供應(yīng)以及維持各供應(yīng)以及維持各 中間代謝物濃度的穩(wěn)定中間代謝物濃度的穩(wěn)定.2914-9 糖酵解進(jìn)入途糖酵解進(jìn)入途徑徑海藻糖海藻糖Glc (11)乳糖乳糖半乳糖半乳糖蔗糖蔗糖甘露糖甘露糖- 其他單糖其他單糖可通過(guò)若干位點(diǎn)可通過(guò)若干位點(diǎn) 進(jìn)入糖酵解進(jìn)入糖酵解- 寡糖寡糖/二糖二糖被水解成單糖被水解成單糖- 糖元糖元/淀粉淀粉主要主要經(jīng)由磷酸解經(jīng)由磷酸解糖糖元元/淀粉淀粉Amylase均為均為 -糖苷酶糖苷酶 -型型為為內(nèi)切，內(nèi)切， -型型為

26、外切為外切(cf. p302).3014-10 糖元糖元/淀粉淀粉磷酸化酶磷酸化酶催化的磷酸解反應(yīng)催化的磷酸解反應(yīng) - 催化催化Pi對(duì)連接對(duì)連接 非還原端非還原端最后最后 兩個(gè)兩個(gè)Glc殘基的殘基的 ( 14)糖苷鍵糖苷鍵 進(jìn)行親核攻擊進(jìn)行親核攻擊- 通過(guò)通過(guò)磷酸解磷酸解將將 糖苷鍵中的部分糖苷鍵中的部分 能量保存在能量保存在G1P 的的磷酸酯鍵磷酸酯鍵中中- 磷酸化酶磷酸化酶可反復(fù)可反復(fù) 作用至接近某個(gè)作用至接近某個(gè) ( 16)分支點(diǎn)分支點(diǎn) 而停止催化，再而停止催化，再 由由脫支酶脫支酶移除其移除其 分支分支(cf. Fig. 14-10)(+ PLP)C1 +.31Catabolic fa

27、tes of pyruvate formed in glycolysis14-3 厭氧厭氧條件下的丙酮酸去路：條件下的丙酮酸去路：發(fā)酵發(fā)酵再生出繼續(xù)酵解所再生出繼續(xù)酵解所必需的必需的NAD+Fermentationcarrying out energy-yielding oxidative reactions without using oxygen as an electron acceptor(cf. Fig. 11-10).32 Examples of FermentationIn fermentations, NADH is produced by the oxidation of a

28、n organic molecule (ie. G3P), and then is used up by donating electrons to a different organic molecule such as pyruvate (a) or acetaldehyde (b).乳乳酸脫氫酶酸脫氫酶丙酮酸丙酮酸脫羧酶脫羧酶乙醇脫氫酶乙醇脫氫酶.33p538a 丙酮酸是丙酮酸是乳酸發(fā)酵乳酸發(fā)酵中的最終電子受體中的最終電子受體- 劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)骨骼肌骨骼肌/紅細(xì)胞紅細(xì)胞 生成的乳酸在運(yùn)動(dòng)后恢復(fù)生成的乳酸在運(yùn)動(dòng)后恢復(fù) 期間可經(jīng)由血液進(jìn)入肝臟期間可經(jīng)由血液進(jìn)入肝臟 而轉(zhuǎn)化成而轉(zhuǎn)化成Gl

29、c (Cori cycle)- 雖然雖然Glc的乳酸發(fā)酵的乳酸發(fā)酵 沒(méi)有沒(méi)有NAD+/NADH的的 凈變化凈變化，但仍可在，但仍可在 不消耗不消耗O2的情況下的情況下 凈得凈得 2 ATP乳乳酸脫氫酶酸脫氫酶to keep glycolysis going(cf. p299)自學(xué)自學(xué).34p538b 乙醇是酵母等微生物發(fā)酵的乙醇是酵母等微生物發(fā)酵的還原產(chǎn)物還原產(chǎn)物脊椎動(dòng)物和一些能進(jìn)脊椎動(dòng)物和一些能進(jìn)行乳酸發(fā)酵的微生物行乳酸發(fā)酵的微生物均缺乏該酶均缺乏該酶硫胺素焦磷酸硫胺素焦磷酸t(yī)hiazoles C2 as a nucleophile(非共價(jià)緊密結(jié)合，非共價(jià)緊密結(jié)合，cf. Fig. 11-1

30、2)乙醇脫氫酶乙醇脫氫酶(Zn2+)- 在所有發(fā)酵反應(yīng)中，在所有發(fā)酵反應(yīng)中， 反應(yīng)物和產(chǎn)物的反應(yīng)物和產(chǎn)物的H:C 比值均保持不變比值均保持不變丙酮酸脫羧酶丙酮酸脫羧酶僅獲取能量而不消耗氧或改變僅獲取能量而不消耗氧或改變NAD+/NADH的代謝過(guò)程的代謝過(guò)程(cf. Fig. 11-11)自學(xué)自學(xué).35LW-4 糖異生糖異生 GluconeogenesisA pathway converting pyruvate and related 3C & 4C compounds to Glc 維持機(jī)體血糖穩(wěn)態(tài)所必需維持機(jī)體血糖穩(wěn)態(tài)所必需- 人體空腹血糖人體空腹血糖70110 mg/dl (體液

31、僅載有體液僅載有20g Glc) 正常成人消耗：正常成人消耗：160g/d 糖原儲(chǔ)存總量糖原儲(chǔ)存總量(肝腎肝腎+肌肉肌肉)：180200g- 某些組織器官以某些組織器官以Glc為惟一或主要能源為惟一或主要能源 紅細(xì)胞紅細(xì)胞(無(wú)線粒體無(wú)線粒體)、腦、腎髓質(zhì)、睪丸、眼晶狀體等、腦、腎髓質(zhì)、睪丸、眼晶狀體等 心臟輸出總血量的心臟輸出總血量的1/51/4進(jìn)入腦，后者每天需消耗進(jìn)入腦，后者每天需消耗 約約120 g Glc (75%)廣義廣義指以簡(jiǎn)單前體為原料合成碳水指以簡(jiǎn)單前體為原料合成碳水化合物，廣泛存在于生物界；但通化合物，廣泛存在于生物界；但通常常特指特指動(dòng)物組織尤其是肝臟發(fā)生的動(dòng)物組織尤其是肝

32、臟發(fā)生的從非己糖前體合成葡萄糖的全過(guò)程從非己糖前體合成葡萄糖的全過(guò)程- 糖異生糖異生主要發(fā)生在肝、腎主要發(fā)生在肝、腎- 激素調(diào)節(jié)激素調(diào)節(jié) 降血糖：胰島素降血糖：胰島素 升血糖：胰高血糖素、糖皮質(zhì)激素和腎上腺素等升血糖：胰高血糖素、糖皮質(zhì)激素和腎上腺素等.3614-15- 無(wú)論動(dòng)物還是植物，無(wú)論動(dòng)物還是植物， PEPG6P均為不同均為不同 前體生物合成糖類的前體生物合成糖類的 通用途徑通用途徑- 只有植物和光合只有植物和光合 細(xì)菌能夠?qū)⒓?xì)菌能夠?qū)O2 轉(zhuǎn)化成糖類轉(zhuǎn)化成糖類 用簡(jiǎn)單前體用簡(jiǎn)單前體 合成糖類合成糖類raw materials for gluconeogenesis.3714-16O

33、pposing pathways of glycolysis and gluconeogenesis in rat liver糖異生糖異生糖酵解糖酵解繞行繞行 2繞行繞行 3繞行繞行 1- 糖酵解糖酵解和和糖異生糖異生 途徑中的大多數(shù)途徑中的大多數(shù) 反應(yīng)都基本可逆反應(yīng)都基本可逆- 繞開(kāi)繞開(kāi)激酶激酶催化的催化的 三個(gè)能障三個(gè)能障就能使就能使 非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化成非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化成 糖類糖類(哺乳類肝、腎哺乳類肝、腎)(cf. Fig. 14-1).38- 這這兩步連續(xù)發(fā)生的兩步連續(xù)發(fā)生的羧化羧化-脫羧脫羧 反應(yīng)是丙酮酸的反應(yīng)是丙酮酸的活化機(jī)制：活化機(jī)制： 草酰乙酸的脫羧可促進(jìn)草酰乙酸的脫羧可促進(jìn)PEP生成

34、生成線粒體線粒體胞液胞液繞行繞行 1丙酮酸羧化支路丙酮酸羧化支路- 丙酮酸丙酮酸羧化羧化為草酰乙酸為草酰乙酸(反應(yīng)機(jī)制反應(yīng)機(jī)制)P36-11- 草酰乙酸草酰乙酸脫羧脫羧并磷酸化成并磷酸化成PEP(蘋果酸穿梭蘋果酸穿梭)羧羧化化脫脫羧羧- 總總反應(yīng)為：反應(yīng)為： 丙丙酮酸酮酸 + ATP + GTP PEP + ADP + GDP + PiPEP羧激酶羧激酶磷?；w磷?；w生物素生物素(輔基輔基)丙丙酮酮酸酸轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)運(yùn)運(yùn)酶酶+H+丙酮酸羧化酶丙酮酸羧化酶(乙酰乙酰-CoA激活激活).39 EnzRole of biotin in pyruvate carboxylase reaction14-18

35、- 輔基生物素經(jīng)由酰胺鍵輔基生物素經(jīng)由酰胺鍵共價(jià)共價(jià) 結(jié)合于結(jié)合于羧化酶羧化酶Lys- -NH2- 在在ATP參與下，參與下，HCO3(CO2 活化形式活化形式)于于活性位點(diǎn)活性位點(diǎn)1與生物與生物 素環(huán)素環(huán)N1結(jié)合成羧基生物素結(jié)合成羧基生物素- 由由Lys側(cè)鏈和生物素形成的側(cè)鏈和生物素形成的 長(zhǎng)臂將活化羧基移動(dòng)到長(zhǎng)臂將活化羧基移動(dòng)到活性活性 位點(diǎn)位點(diǎn)2并釋出并釋出CO2，隨即與，隨即與 丙酮酸反應(yīng)生成草酰乙酸丙酮酸反應(yīng)生成草酰乙酸- 蛋清中的蛋清中的avidin對(duì)生物素有對(duì)生物素有 很高的親和性，是含生物素很高的親和性，是含生物素 酶的特異性抑制劑酶的特異性抑制劑磷酰基供體磷酰基供體(cf.

36、Fig. 14-2)不穩(wěn)定的烯醇式不穩(wěn)定的烯醇式(甲基負(fù)碳離子甲基負(fù)碳離子)urea +thiophene.40mechanism for pyruvate carboxylase(cf. Fig. 14-2).4114-19 Alternative paths from pyruvate to PEP同工酶同工酶同工酶同工酶105 lower than in mitoch. (used for 1,3-BPG G3P)- 以以丙酮酸丙酮酸為原料進(jìn)行糖異為原料進(jìn)行糖異 生時(shí)需要采用生時(shí)需要采用蘋果酸穿梭蘋果酸穿梭 方式繞行，并維持胞液中方式繞行，并維持胞液中 NADH合成與消耗之平衡合成與消耗

37、之平衡- 以以乳酸乳酸為原料進(jìn)行糖異生為原料進(jìn)行糖異生 時(shí)，因其在胞液中轉(zhuǎn)化為時(shí)，因其在胞液中轉(zhuǎn)化為 丙酮酸即可生成丙酮酸即可生成NADH， 故無(wú)需經(jīng)由蘋果酸中介而故無(wú)需經(jīng)由蘋果酸中介而 直接輸出直接輸出PEP- 由不同基因編碼的由不同基因編碼的同工酶同工酶 可催化同一反應(yīng)，但其細(xì)可催化同一反應(yīng)，但其細(xì) 胞內(nèi)分布或代謝作用不同胞內(nèi)分布或代謝作用不同 (eg. LDH)Lactate(cf. Fig. 14-3).42繞行繞行2和和3均為磷酯鍵水解均為磷酯鍵水解14-16aG6P酶酶Go = -13.8 kJ/mol- 腦腦/肌細(xì)胞肌細(xì)胞無(wú)該酶！無(wú)該酶！F-1,6-BP酶酶Go = -16.3

38、kJ/mol.43 Cori cycle (cf. Fig. 14-4)G23.10生理意義：生理意義：- 利用乳酸分子利用乳酸分子 的能量以避免的能量以避免 其損失其損失- 及時(shí)將乳酸轉(zhuǎn)及時(shí)將乳酸轉(zhuǎn) 化以防止其在化以防止其在 組織中堆積而組織中堆積而 引發(fā)酸中毒引發(fā)酸中毒以以乳酸乳酸形式將酵解產(chǎn)生的形式將酵解產(chǎn)生的丙酮酸丙酮酸和和還原當(dāng)量還原當(dāng)量從肌肉從肌肉轉(zhuǎn)移到肝臟以進(jìn)行糖異生轉(zhuǎn)移到肝臟以進(jìn)行糖異生Carl F. Cori 1896-1984Gerty T. Cori 1896-19571947 NP inPhys./Med.stress loaded from muscle.44 糖異生

39、是必需的耗能反應(yīng)糖異生是必需的耗能反應(yīng)如此高的能量投入顯然意味著如此高的能量投入顯然意味著糖異生糖異生并非并非糖酵解糖酵解的簡(jiǎn)單逆轉(zhuǎn)的簡(jiǎn)單逆轉(zhuǎn)T14-3.45G28.2Substrate cycles are usually prevented by reciprocal regulatory controls. (cf. p371) Reciprocal regulation of gluconeogenesis & glycolysis繞行繞行 2糖酵解糖酵解糖異生糖異生(cf. Fig. 14-7).46- What was the rationale for comparing

40、 the activities of these two enzymes?- The data show the activities of both enzymes for a variety of bumblebee species. Do these results support the notion that bumblebees use futile cycles to generate heat?- In which species might futile cycling take place? Why?- Do these results prove that futile

41、cycling does not participate in heat generation?自學(xué)自學(xué).47LW-5小結(jié)：糖異生小結(jié)：糖異生糖異生為糖異生為普遍存在于生物界的多反應(yīng)途徑，可以將丙普遍存在于生物界的多反應(yīng)途徑，可以將丙酮酸或相應(yīng)的酮酸或相應(yīng)的3C化合物如乳酸和化合物如乳酸和Ala等轉(zhuǎn)化成等轉(zhuǎn)化成Glc，糖糖酵解的酵解的三步不可逆反應(yīng)三步不可逆反應(yīng)需由相應(yīng)的特殊酶催化需由相應(yīng)的特殊酶催化繞行繞行以以丙酮酸丙酮酸為前體合成為前體合成Glc需消耗需消耗4ATP、2GTP和和2NADH肝、腎肝、腎進(jìn)行的糖異生為大腦、肌肉和紅細(xì)胞等提供血糖進(jìn)行的糖異生為大腦、肌肉和紅細(xì)胞等提供血糖丙酮酸

42、羧化酶丙酮酸羧化酶能被乙酰能被乙酰-CoA激活，因而在細(xì)胞有充足激活，因而在細(xì)胞有充足的其他產(chǎn)能底物如的其他產(chǎn)能底物如FA供應(yīng)時(shí)可加速糖異生的進(jìn)行供應(yīng)時(shí)可加速糖異生的進(jìn)行糖酵解和糖異生可經(jīng)由糖酵解和糖異生可經(jīng)由反向調(diào)節(jié)反向調(diào)節(jié)以避免同時(shí)高速運(yùn)行以避免同時(shí)高速運(yùn)行 .48 葡萄糖氧化的戊糖磷酸途徑葡萄糖氧化的戊糖磷酸途徑 (pentose phosphate pathway)PPP途徑途徑 (or HMP/HMS)場(chǎng)所：胞液場(chǎng)所：胞液氧化特征：輔酶氧化特征：輔酶NADP+重要產(chǎn)物：重要產(chǎn)物： - NADPH 不進(jìn)入呼吸鏈不進(jìn)入呼吸鏈 產(chǎn)能，良好的還原劑產(chǎn)能，良好的還原劑 - R5P 參與核苷酸合

43、成參與核苷酸合成LW-6- 組織勻漿中加入碘乙酸組織勻漿中加入碘乙酸/ 氟化鈉后仍有氟化鈉后仍有Glc消耗消耗- 14C標(biāo)記發(fā)現(xiàn)標(biāo)記發(fā)現(xiàn)Glc的的C1 比比C6更容易被氧化更容易被氧化(1015%Glucose).4914-20 PPP途徑可分為兩大階段途徑可分為兩大階段- 氧化階段氧化階段G6P + 2 NADP+ + H2O R5P + 2 NADPH + 2H+ + CO2- 非氧化階段非氧化階段3 R5P 2 F6P + G3P- 生成的生成的NADPH可用于可用于 還原還原谷胱甘肽谷胱甘肽及參與及參與 還原性生物合成還原性生物合成- R5P為核苷酸和重為核苷酸和重 要輔酶的構(gòu)建組分要

44、輔酶的構(gòu)建組分- 核酸合成需求減少核酸合成需求減少 時(shí)可經(jīng)由該階段再時(shí)可經(jīng)由該階段再 生生G6P以循環(huán)利用以循環(huán)利用(cf. Fig. 11-19).501. G6P脫氫脫氫 - G6P脫脫氫酶氫酶(G6PD) - C1氧化氧化 - NADP+ = e受受體體 - 產(chǎn)產(chǎn)物物 = 6-P-葡糖酸葡糖酸- -內(nèi)酯內(nèi)酯 (C1-C5的分的分子內(nèi)酯子內(nèi)酯) - 可可被被NADPH別構(gòu)別構(gòu)抑制抑制2. 內(nèi)內(nèi)酯水解酯水解 - 內(nèi)酯內(nèi)酯酶酶 - 產(chǎn)產(chǎn)物物 = 6-P-葡糖酸葡糖酸(游離酸游離酸)P29-11Pentose phosphate pathway(oxidative stage)限速且限速且不可逆

45、不可逆.513. 6-P-葡葡糖酸的脫氫及脫羧糖酸的脫氫及脫羧 - 6-P-葡葡糖酸脫氫酶糖酸脫氫酶 先脫氫成先脫氫成3-keto-6-P葡糖酸葡糖酸 (NADP+ = e受體受體) C1的的COO隨即被移除隨即被移除 - 產(chǎn)產(chǎn)物物 = D-核酮糖核酮糖-5-P 4. 核酮糖核酮糖-5-P異構(gòu)化異構(gòu)化 - 磷酸磷酸戊糖異構(gòu)酶戊糖異構(gòu)酶 - 產(chǎn)產(chǎn)物物 = D-核糖核糖-5-P (R5P) (酮酮戊糖戊糖轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化為為醛戊糖醛戊糖)- PPP途徑途徑可以就此結(jié)束，但在可以就此結(jié)束，但在 急需急需NADPH而而不是不是R5P時(shí)時(shí)， 后者即可經(jīng)由一系列后者即可經(jīng)由一系列碳架重排碳架重排 反應(yīng)再生成反應(yīng)再

46、生成G6P以以循環(huán)利用循環(huán)利用P29-12Pentose phosphate pathway(oxidative stage)C3脫氫脫氫引入羰基引入羰基.5214-22aPentose phosphate pathway(nonoxidative stage)木酮糖木酮糖赤蘚糖赤蘚糖轉(zhuǎn)酮酶轉(zhuǎn)酮酶轉(zhuǎn)醛酶轉(zhuǎn)醛酶- 轉(zhuǎn)酮酶轉(zhuǎn)酮酶 2C unit 轉(zhuǎn)醛酶轉(zhuǎn)醛酶 3C unit 供體供體 ketose 受體受體 aldoseG3PG6PR5P異構(gòu)酶異構(gòu)酶差差向向異異構(gòu)構(gòu)酶酶C3景天庚酮糖景天庚酮糖F6P核酮糖核酮糖-5-Pglycolysis, etcoxidative stage(cf. Fig.

47、11-20 & 11-21).5314-22b- 從從6個(gè)個(gè)戊糖戊糖(5C)轉(zhuǎn)化成轉(zhuǎn)化成 5個(gè)個(gè)己糖己糖(6C)- 每步反應(yīng)均可逆每步反應(yīng)均可逆 (as in photosynthesis)生理意義：生理意義：通過(guò)一系列分子重排和通過(guò)一系列分子重排和基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng)將氧化階基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng)將氧化階段生成的多余核糖經(jīng)由段生成的多余核糖經(jīng)由 F6P和和G3P等再生等再生G6P以避免核糖堆積以避免核糖堆積Pentose phosphate pathway(nonoxidative stage).54 G6P可在糖酵解和戊糖磷酸途徑之間分流可在糖酵解和戊糖磷酸途徑之間分流14-27G6P主要進(jìn)入哪條途

48、主要進(jìn)入哪條途徑要取決于細(xì)胞當(dāng)時(shí)徑要取決于細(xì)胞當(dāng)時(shí)的需求以及胞液中的的需求以及胞液中的NADP+/NDAPH 抑制抑制G6PD- 還原性合成反應(yīng)加速時(shí)還原性合成反應(yīng)加速時(shí) NADP+升高，激活升高，激活 G6PD、使、使G6P主要主要 進(jìn)入進(jìn)入PPP途徑途徑- NADPH富余時(shí)將抑制富余時(shí)將抑制 G6PD，使，使G6P主要主要 進(jìn)入糖酵解途徑進(jìn)入糖酵解途徑 (for ATP & C-skeleton)(cf. Fig. 11-24).55反應(yīng)速率受反應(yīng)速率受NADPH的別構(gòu)抑制的別構(gòu)抑制，調(diào)節(jié)酶是，調(diào)節(jié)酶是G6PD,轉(zhuǎn)酮酶和轉(zhuǎn)醛酶反應(yīng)均可逆，因而不需要轉(zhuǎn)酮酶和轉(zhuǎn)醛酶反應(yīng)均可逆，因而不需

49、要R5P時(shí)可時(shí)可將其轉(zhuǎn)化為酵解中間物，需要時(shí)則可由后者再生將其轉(zhuǎn)化為酵解中間物，需要時(shí)則可由后者再生LW-7小結(jié)：戊糖磷酸途徑小結(jié)：戊糖磷酸途徑主要產(chǎn)物為主要產(chǎn)物為R5P和和NADPH，前者是核苷酸等重要，前者是核苷酸等重要生物分子的構(gòu)建組分；后者可為多種生物同化反應(yīng)生物分子的構(gòu)建組分；后者可為多種生物同化反應(yīng)如如FA合成提供還原力，故該途徑在脂肪、乳腺和腎合成提供還原力，故該途徑在脂肪、乳腺和腎上腺皮質(zhì)等組織和生長(zhǎng)中的細(xì)胞非?；钴S上腺皮質(zhì)等組織和生長(zhǎng)中的細(xì)胞非?；钴S主要反應(yīng)分為兩個(gè)階段：主要反應(yīng)分為兩個(gè)階段：氧化階段氧化階段G6P氧化脫羧轉(zhuǎn)化為氧化脫羧轉(zhuǎn)化為R5P并產(chǎn)生并產(chǎn)生 2 NADPH

50、非氧化階段非氧化階段6 R5P經(jīng)由分子重排和基團(tuán)轉(zhuǎn)移經(jīng)由分子重排和基團(tuán)轉(zhuǎn)移 再生出再生出5 G6P.561. 若以若以14C標(biāo)記葡萄糖的標(biāo)記葡萄糖的C-3作為酵母的底物，經(jīng)發(fā)酵作為酵母的底物，經(jīng)發(fā)酵 產(chǎn)生產(chǎn)生CO2和乙醇，試問(wèn)和乙醇，試問(wèn)14C將在何處發(fā)現(xiàn)？將在何處發(fā)現(xiàn)？2. 試總結(jié)磷酸基團(tuán)在糖酵解過(guò)程中參與了哪些反應(yīng)？試總結(jié)磷酸基團(tuán)在糖酵解過(guò)程中參與了哪些反應(yīng)？ 這些反應(yīng)分別有何意義？這些反應(yīng)分別有何意義？3. 為什么說(shuō)砷酸是糖酵解作用的毒物？氟化物和為什么說(shuō)砷酸是糖酵解作用的毒物？氟化物和 碘乙酸對(duì)糖酵解過(guò)程有何作用？碘乙酸對(duì)糖酵解過(guò)程有何作用？4. 試計(jì)算從丙酮酸合成葡萄糖需要提供多少個(gè)

51、高能試計(jì)算從丙酮酸合成葡萄糖需要提供多少個(gè)高能 磷酸鍵？磷酸鍵？(需要給出具體反應(yīng)需要給出具體反應(yīng))5. 在以下兩種條件下，試分析在以下兩種條件下，試分析Glc-6-P經(jīng)由戊糖磷酸經(jīng)由戊糖磷酸 途徑的運(yùn)行方式：途徑的運(yùn)行方式： (a) 同時(shí)需要同時(shí)需要NADPH和和R-5-P (b) NADPH的需求量遠(yuǎn)高于的需求量遠(yuǎn)高于R-5-P作作 業(yè)業(yè).57復(fù)習(xí)題復(fù)習(xí)題 (p120127)一、選擇一、選擇 1, 3, 5, 9, 12, 14, 15, 18, 19, 2224, 37, 39, 45, 50, 53, 54二、名詞解釋二、名詞解釋 14, 610, 19, 21, 22, 26三、判斷三、判斷 13, 7, 1115, 1921, 24, 25, 27, 29, 30, 36四、問(wèn)答四、問(wèn)答 1, 4, 5, 911, 14, 17, 20, 24, 26, 30.58法國(guó)微生物學(xué)及化學(xué)家，近代微生物學(xué)奠基人；法國(guó)微生物學(xué)及化學(xué)家，近代微生物學(xué)奠基人；畢生進(jìn)行了多項(xiàng)探索性研究并均取得重大成果，是畢生進(jìn)行了多項(xiàng)探索性研究并均取得重大成果，是19世紀(jì)最有成就的科學(xué)家之一世紀(jì)最有成就的科學(xué)家之一先后證明了三大科學(xué)問(wèn)題：先后證明了三大科學(xué)問(wèn)題： 每種發(fā)酵作用都是由于某種微菌的發(fā)展所致，每種發(fā)酵作用都是由于某種微菌的發(fā)展所致， 而適當(dāng)加熱即可殺