一、設(shè)備名稱、技術(shù)參數(shù)及功能要求

1、一、設(shè)備名稱、技術(shù)參數(shù)及功能要求： 設(shè)備名稱：單細(xì)胞Western分析系統(tǒng)統(tǒng)英文名稱：Single-Cell Western system1. 工作條件1) 工作溫度： 4°C35°C2) 相對濕度： 20%-95%,無冷凝水3) 儀器運行的持久性：儀器可連續(xù)正常運行。4) 工作條件及安全性要求符合中國及國際有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)定。2. 設(shè)備用途及功能1）可做到單細(xì)胞蛋白表達(dá)分析2）腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性、免疫學(xué)、干細(xì)胞異質(zhì)性及其分化發(fā)育、免疫反應(yīng)分化、免疫細(xì)胞極化、精子、卵子、胚胎等蛋白質(zhì)檢測和CTC研究等。 3. 技術(shù)規(guī)格3.1細(xì)胞大?。褐睆?-25um細(xì)胞 3.2樣本類型: 1000

2、0個左右的哺乳動物浮選細(xì)胞。3.3細(xì)胞類型: 神經(jīng)細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞，紅細(xì)胞等。3.4樣本捕獲數(shù)量：1000-2000個細(xì)胞3.5檢測蛋白大小范圍：15-175KD。3.6分子量分辨率：不同熒光10%分子差異，相同熒光30%分子量差異。3.7目標(biāo)蛋白個數(shù)：單次2-4個蛋白，可反復(fù)洗脫10次，再雜交。3.8芯片單元: 蛋白分離泳道長度不大于900 m。3.9泳道寬度: 30m。3.10裂解時間：10-15s3.11電泳時間：45-90s3.12UV蛋白捕獲時間：4mins3.13芯片規(guī)格：3種3.14實驗全程時間：4-6小時 。3.15抗體：用于WB的抗體及熒光二抗 。3.16電泳

3、電壓：240v3.17標(biāo)配532nm綠色激光和635nm紅色激光3.18焦深：64m3.19順序掃描，獨家非共焦設(shè)計，實時PMT增益調(diào)節(jié)，3.208位濾片輪3.21分辨率：5-100m3.22芯片可儲存9個月，在此期間可以不斷測試不同靶點3.23配備品牌電腦，主流配置4. 產(chǎn)品基本配置要求：系統(tǒng)主機一臺、掃描儀一臺、配套軟件分析系統(tǒng)一套、裝機試劑盒一套5. 技術(shù)及售后服務(wù) 1) 保修及維修：設(shè)備驗收合格后保修1年，終身維修。 2) 培訓(xùn)：安裝同時現(xiàn)場培訓(xùn)，掌握基本操作；免費兩人次參加每季度舉辦的進階培訓(xùn)。6.建設(shè)必要性 單細(xì)胞Western分析系統(tǒng)是當(dāng)前供的供研究人員深入探究腫瘤組織和分選的干

4、細(xì)胞亞群等樣本中腫瘤異質(zhì)性的必備工具平臺。本平臺主要的研究方向有:腫瘤學(xué)相關(guān)研究、干細(xì)胞及發(fā)育研究、免疫學(xué)研究和CTC等學(xué)科門類。Western blot技術(shù)自1979年問世以來，一直成為蛋白質(zhì)水平研究的必備工具，其技術(shù)平臺的優(yōu)勢和應(yīng)用范圍已不言而喻，但經(jīng)過幾十年的發(fā)展，該平臺的理論技術(shù)創(chuàng)新卻未得到長足發(fā)展和改進，科研人員仍停留在對總蛋白的樣本進行定量分析，無法實現(xiàn)單個細(xì)胞的蛋白樣口進行檢測。伴隨著后基因組時間的不斷發(fā)展和完善，以及精準(zhǔn)醫(yī)療的大力創(chuàng)新與突破，在單細(xì)胞檢測上成為無法跨越的鴻溝，諸多的異質(zhì)性的研究給western技術(shù)帶來新的問題和挑戰(zhàn)，當(dāng)前在腫瘤的研究中，無法回避對腫瘤異質(zhì)性的研究

5、，同時，也會相應(yīng)涉及免疫學(xué)和干細(xì)胞的深入發(fā)掘，相關(guān)研究方向有:1）不同腫瘤干細(xì)胞克隆產(chǎn)生的腫瘤細(xì)胞在基因組及蛋白質(zhì)組存在差異，腫瘤干細(xì)胞具有和正常干細(xì)胞類似的表面標(biāo)志物及使用類似的分化信號通路以及干細(xì)胞差異分化現(xiàn)象等。2）干細(xì)胞基因和蛋白的表達(dá)差異（尤其轉(zhuǎn)錄因子）對于干細(xì)胞的自我更新，分化成特定系細(xì)胞具有重要意義。3）在免疫系統(tǒng)研究中，機體在受到在微生物感染，腫瘤環(huán)境，自身免疫病，及其他炎癥情況下，機體免疫細(xì)胞受到不同因子刺激（不同細(xì)胞因子，趨化因子，神經(jīng)遞質(zhì)等），分化/極化為不同功能的免疫細(xì)胞，不同免疫細(xì)胞，分泌不同細(xì)胞因子等，具有促進炎癥/免疫，或抑制炎癥/免疫的功能，不同免疫細(xì)胞其表達(dá)的

6、基因，蛋白具有非常大的差異。分析不同生理/病理情況下免疫細(xì)胞的異質(zhì)性，極其蛋白表達(dá)，可以有助分析機體的免疫狀態(tài)，預(yù)測疾病轉(zhuǎn)歸，設(shè)計治療方案及開展藥物研發(fā)。4）干細(xì)胞能夠無限增殖且存在很大的異質(zhì)性，也可分化和發(fā)育為機體數(shù)百種不同的細(xì)胞類型。 干細(xì)胞基因和蛋白的表達(dá)差異（尤其轉(zhuǎn)錄因子）對于干細(xì)胞的自我更新，分化成特定系細(xì)胞具有重要意義。單細(xì)胞Western分析系統(tǒng)的問世完全迎合當(dāng)前精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展需要，可實現(xiàn)分析腫瘤細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的異質(zhì)性，分析腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性。巔履了傳統(tǒng)Western對總蛋白的樣測，無法細(xì)化到個體差異的局限，可實現(xiàn)研究人員深入洞察單個細(xì)胞的表達(dá)異質(zhì)差異問題，針對特點的靶點，物定藥物等因子處理后觀察靶點的修飾細(xì)微變化，且靈敏度高，自動化檢測，方便快捷，無論是科研還是臨床以及轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)平臺都將具有十分重要的意義，可實現(xiàn)科研與臨床的有效契合。目前國內(nèi)同類產(chǎn)品只有傳統(tǒng)的總蛋白定量免疫印跡系統(tǒng)，尚無可實現(xiàn)單個細(xì)胞的Western的檢測手段，缺乏對單個細(xì)胞的深入認(rèn)識，在精準(zhǔn)醫(yī)療研究上仍處于起步階段。而國內(nèi)省內(nèi)高校的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)等相關(guān)