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1、教學(xué)目標:1、簡述哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。2、簡述哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)方法。3、認同體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。教學(xué)重點1、體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。2、哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。教學(xué)難點1、卵母細胞的采集和培養(yǎng)。2、精子的采集和獲能。教學(xué)過程一、 從試管牛說起閱讀P69,思考討論:體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。我國奶牛的產(chǎn)量較低,有什么方法可以提高產(chǎn)量?“試管?!惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖采集良種母牛的卵母細胞 采集良種公牛精子 卵母細胞的體外培養(yǎng) 精子體外獲能 體外受精 良種牛體外受精胚胎 胚胎移植 受體牛 良種犢牛 成熟期牛 采集卵巢中的卵母細
2、胞 屠宰加工廠 市場試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。二、 體外受精1、卵母細胞的采集和培養(yǎng)仔細閱讀P70,思考討論:(1)卵母細胞的采集和培養(yǎng)的主要方法是什么?(2)其它方法如何?(3)有什么方法可以獲得更多的卵母細胞?1)主要方法是:用促性腺激素處理,使其排除更多的卵子,然后,從輸卵管中沖取卵子,直接與或能的精子在體外受精。2)第二種方法:從剛屠宰的母畜的卵巢中采集卵母細胞;第三種方法是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞,叫活體采卵。需借助超聲波探測儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡等工具。采集的卵母細胞,都要在體外經(jīng)經(jīng)人工
3、培養(yǎng)后成熟,才能與或能的精子受精。3)促性腺激素、收集屠宰場母畜的卵巢。2.精子的收集和獲能仔細閱讀P71,思考討論:(1)收集精子的方法有幾種?各有什么具體要求?(2)精子的獲能方法通常包括哪幾種?具體操作如何?1)收集的方法:假陰道法,手握法和電刺激等。A:假陰道法,采用仿生學(xué)的方法,模仿發(fā)情雌性動物陰道環(huán)境設(shè)計的裝置,它能夠滿足雄性動物交配時對壓力、溫度和潤滑度的要求,同時配有與采精動物相適應(yīng)的活臺畜或假臺畜。B:手握法,只適用于豬和犬等體型較小,易于控制的家畜。C:電刺激,這種方法多用于野生或經(jīng)濟動物。2)在體外受精前,要對精子進行獲能處理。對于嚙齒動物、家兔和豬等動物的精子,一般采用
4、培養(yǎng)法,即將取自附睪的精子,放入人工配制的或能夜中,培養(yǎng)一段時間后,精子就可獲能;對于牛、羊等家畜的精子常采用化學(xué)法,即將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中,用化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子或能。3、受精仔細閱讀P72圖3-14,思考受精過程。在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程三、 胚胎的早期培養(yǎng)仔細閱讀P72-73,思考討論:1、早期胚胎培養(yǎng)要提供哪些營養(yǎng)物質(zhì)?還需要其他什么條件?2、牛體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)流程圖3、思考討論:比較哺乳動物體內(nèi)胚胎的形成、體外胚胎的發(fā)育各需要完成哪些環(huán)節(jié)?1)精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除無機鹽和有機鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸等營養(yǎng)成分,以及血清等物質(zhì)。當胚胎發(fā)育到適宜的階段時,可將其取出向受體移植或冷凍保存。不同動物胚胎移植的時間不同。2)繪制流程圖:3、體內(nèi)胚胎形成需要經(jīng)過:桑椹胚、囊胚和原腸胚;體外胚胎的發(fā)育需要完成:卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能及受精(體外進行)。小結(jié):1、哺乳動物體外受精的主要步驟:1)卵母細胞的
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