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文檔簡介

1、(生物科技行業(yè))細胞生物學習題與實驗2020年5月多年的企業(yè)咨洵顧問屋儂,經(jīng)過實戰(zhàn)驗證可以落地執(zhí)i亍的卓越管理方窠,值得您下我擁有細胞生物學綜合測試題(一)一、名詞解釋(每詞3分,共30分)1、細胞2、分子雜交3、核體4、初級溶酶體5、自由擴散6、橋粒7、膜骨架8、奢侈基因9、常染色質(zhì)10、基本顆粒(F1因子)二、填空(每空0.5分,共15分)1、原生質(zhì)體是指()。2、細胞的三要素是指()、()和0。3、被動運輸可分為兩類,即0和0。4、流動鑲嵌模型的三大特點是(),()和0。5、目前發(fā)現(xiàn)最小最簡單的細胞是(),直徑只有()。6、根據(jù)是否與消化物作用溶酶體可區(qū)分為()、()兩種形式。7、原核細

2、胞和真核細胞的核糖體的沉降系數(shù)分別是()和0。8、細胞內(nèi)的能量轉化細胞器是指()和()。9、細胞學說的內(nèi)容包括()、()和()。10、熒光顯微鏡以()為光源,電子顯微鏡則以()為光源。11、細胞有兩種膜結構具有分揀作用,一個是()另一個是()12、彈性蛋白的肽鏈之間通過()相互交連形成網(wǎng)絡。13、用()技術可以在電鏡下觀察膜蛋白的不對稱分布。14、在轉移酶I和T因子的作用下,催化P位上肽酰tRNA的()與處在A位上氨?;鵷RNA的()之間形成肽鍵。15、染色質(zhì)根據(jù)功能狀態(tài)不同可分為()和()兩種。三、簡答(每小題5分,共25分)1、糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能。2、真核細胞的主要特點是什么?3、染色體DNA

3、的三個功能元件是什么?4、細胞核的組成部分及功能。5、為什么說線粒體、葉綠體是半自主性細胞器?四、論述(每小題10分,共30分)1、試述動物細胞的連接方式2、試述蛋白質(zhì)糖基化的生理作用。3、試述細胞生物學的主要研究內(nèi)容。細胞生物學綜合測試題(二)一、名詞解釋(每詞3分,共30分)1、紡錘體2、無絲分裂3、肌動蛋白4、外植體5、微細胞6、愈傷組織7、傳遞細胞,轉移細胞8、類核、擬核9、細胞核移植10、體外受精二、是非判斷(每小題1分,共10分)1、酶標抗體法是利用酶與底物的特異性反應來檢測底物在組織細胞中的存在部位。2、真核細胞的mRNA轉錄產(chǎn)物在細胞核中合成后,再轉移到細胞質(zhì)中進行加工改造,才

4、能成為成熟的mRNA。3、用秋水仙素處理正在進行胞質(zhì)分離的動物細胞,結果導致分裂停止。4、中心粒普遍存在于真核細胞中,而原核細胞中沒有。5、編碼組蛋白、非組蛋白、膠原蛋白的基因?qū)儆谏莩藁颉?、細胞凍存及復蘇的基本原則是快凍慢融。7、著絲點是供動粒微管附著的部位,此處的染色質(zhì)是異染色質(zhì),而不是常染色質(zhì)。8、光反應過程是在葉綠體的內(nèi)膜上進行的,而暗反應是在葉綠體基質(zhì)中進行的9、大分子物質(zhì)及顆粒通常以膜泡方式運輸,而小分子及離子往往以穿膜方式運輸。10、培養(yǎng)細胞的生長過程中,細胞系和單個細胞所經(jīng)歷的過程是相同的三、填空(每空0.5分,共15分)1、根據(jù)結構與功能,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可分為兩種基本類型,即2、胚

5、培養(yǎng)分為3、核小體的核心是由4種蛋白組成8聚體和環(huán)繞約長為bp的DNA組成。4、聯(lián)會復合體在期形成,在期解體。5、目前發(fā)現(xiàn)三種不同類型的有被小泡是、o6、YAC(酵母人工染色體)的構建成功說明:一個有功能的染色體至少有三個不可缺少的部分。7、根據(jù)分化階段的不同,干細胞分為T口,按分化潛能的大小,可將干細胞分為三種類型,:F口o8、細胞連接廣泛存在于多細胞生物體,動物的細胞連接按功能分為、:等三大類,而相鄰植物細胞是通過連接的。9、細胞表面受體分屬三大家族,即?口o10、第一個發(fā)現(xiàn)活細胞有機體的科學家是四、簡答(每小題5分,共25分)1、植物原生質(zhì)體融合的主要方法及各自的優(yōu)缺點2、核仁的超微結構

6、及功能?3、簡述培養(yǎng)細胞生長的主要特點4、細胞骨架包括哪些結構?其主要功能是什么?5、凋亡細胞的形態(tài)學特征和生化特征?五、論述(每小題10分,共20分)1、試述細胞工程的主要技術領域。2、試從細胞的蛋白質(zhì)生物合成,闡述細胞是一個統(tǒng)一整體?細胞生物學綜合測試題(三)、用漢語解釋下列名詞(每詞3分,共30分)1、mitoticapparatus2、secondaryconstrction3、molecularswitches4、PCD(programmedcelldeath5、ATPsynthetase6、MTOC(microtubuleorganizingcenter)7、NLS(nuclear

7、locolizationsingnal)8、Hayflicklimitation9、contractilering10、DNAladders二、填空(每空0.5分,共18分)1、組成細胞的最基礎的生物小分子是,它們卞成了、和v等重要的生物大分子。2、細胞遺傳學的核心是o3、生物膜的基本結構特征是T口o4、真核細胞中,質(zhì)子泵可以分為三種:口o5、信號分子是由產(chǎn)生的能夠被受體識別的各種類型的大、小分子物質(zhì)。6、口是NO的生成細胞,NO的生成由催化,以為底物,以作為電子供體,生成和L-瓜氨酸。7、從進化論的觀點,細胞學說的創(chuàng)立解決了這樣一個核心問題。8、磷脂酰肌醇信號通路中產(chǎn)生兩個第二信使的前體物質(zhì)

8、是9、核仁在超微結構上主要分為10、肌原纖維收縮的基本單位是11、葉綠體的發(fā)育是由分化而來12、著絲點結構域由內(nèi)向外依次可分為13、與微管、微絲不同,中間纖維的分布具有嚴格的o14、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中BiP蛋白的功能是o15、2004年的諾貝爾生理學或醫(yī)學獎獎給了(國家名)科學家理查德dAxel)和琳達?巴克L(ndaB.Buck),以表彰兩人在方面作出的杰出貢獻。三、簡答(每小題4分,共32分)1、簡述你對E.B.Wilson“一切生命的關鍵問題都要到細胞中尋找”觀點的理解。2、原核細胞與真核細胞的差別之一是后者有細胞器,那么真核生物細胞器結構的出現(xiàn)有什么優(yōu)點?(至少2點)3、簡述鈉鉀泵的工作原理及其

9、生物學意義。4、簡要說明由G蛋白偶聯(lián)的受體介導的信號通路的主要特點。5、簡述含信號肽的蛋白質(zhì)在細胞質(zhì)中合成后到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)所需的主要結構成分及過程。6、簡述核被膜的主要功能7、簡述細胞凋亡的過程及其特點8、線粒體、葉綠體的起源的內(nèi)共生起源學說的基本內(nèi)容四、論述(20分)用什么實驗方法可以證明NLS的存在細胞生物學綜合測試題(四)、請用漢語解釋下列名詞(每詞3分,共30分)1、cellline2、losscellkinesins4、leadpeptide5、NOR(nucleolarorganizingregion)6telomere7、PCC(prematurechromosomecondensat

10、ion)8lampbrushchromosome9、treadmilling10、checkpoint二、選擇(每小題3分,共18分)1、Inwhichtissuedoestightjunctionplayamajorrole?()A、stomachandkidneysB、smoothmuscleCheartmuscleDintestinalepithelialtissue2、ThefollowingstagesoccurinprophaseI.Whatisthefirststage?()AdiakinesisDiploteneBleptoteneCpachyteneDzygotene3Int

11、hefollowingcomponents,WhichfirstbindstotheERforproteinsynthesis?()AGrowingpolypeptideBRibosomesubunitsCSignalsequenceDSRPTheabilityofthecellmembranetoallowhydrophilicmoleculespassintoacellisdeterminedby()AperipheralmembraneproteinsBintegralmembraneproteinsCperipheralmembranecarbohydratesDperipheralm

12、embranelipids5、Co-transportofnutrientsacrosstheintestinalcellmembranesisanactiveprocessthatcanmoveglucoseagainstaconcentrationgradient.Theenergyrequiringstepforco-transportis()A、TheNa+K+ATPasethatpumpsNa+fromthecellintothelumenoftheintestineB、ThepermeasethatallowsglucoseandNa+intothecellrequiresATPC

13、、ThepermeasethatpumpsglucosefromthecellintothebloodrequiresATPD、TheNa+K+ATPasethatpumpsNa+fromthecellintotheblood,maintaininglowNa+levelsinthecell6、ThetransportrateofasubstanceintoacellisdrasticallyreducedwhentheformationofATPisblocked.Thetransportsystemmustbeaformof()A、activetransportB、facilitatedd

14、iffusionC、simplediffusionD、bothactivetransportandfacilitateddiffusion三、簡答(每小題4分,共32分)1、細胞學說及其意義。2、簡述三種質(zhì)子泵的基本特點3、試述溶酶體酶在高爾基復合體中被準確分揀的M6P途徑4、細胞通過哪些途徑使受體失活,對刺激產(chǎn)生適應?5、簡述NO的作用機理。2種方法)6、舉出兩種人工細胞同步化的方法,并說明優(yōu)缺點。(任意7、穿膜運輸一般有哪幾種方式,其各自的主要特點是什么?8、細胞外基質(zhì)的成分主要有哪幾類?其各自最主要的生物學功能是什么?四、實驗設計(20分)細胞凋亡是一個主動的由基因決定的自動結束生命的過

15、程,受到嚴格的遺傳機制的調(diào)控,它與細胞壞死有截然不同的細胞學現(xiàn)象。試設計1-2個實驗方案來檢測凋亡細胞,要求寫明實驗原理、主要實驗儀器、主要方法步驟。小鼠骨髓細胞染色體標本的制備【目的要求】掌握小鼠骨髓細胞染色體的制備方法,識別小鼠染色體的數(shù)目及特點【基本原理】骨髓細胞具有高度的分裂活性,經(jīng)秋水仙素或秋水酰胺處理后,使分裂細胞阻斷在有絲分裂中期,再經(jīng)低滲處理、固定、滴片、染色等步驟,可制作較好的骨髓細胞的染色體標本。【實驗用品】.器材:解剖器具、注射器、離心機、離心管、恒溫水浴箱、載玻片、酒精燈等;.試劑0.1%秋水仙素溶液、Carnoy固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、0.075mol/LKC

16、I溶液、Giemsa染液等。1 .材料:小鼠1 【方法與步驟】.前處理取材前34h,向腹腔內(nèi)注射秋水仙素。注射濃度隨動物種類不同而異,一般每克體重注射26ag,注射總量不宜超過2ml(例如一只體重50g的蟾蛛,若按4ag/g注射,需注射濃度為0.1%的秋水仙素溶液0.2ml)。秋水仙素的主要作用是使分裂細胞阻斷在有絲分裂中期,增加中期分裂相的比例。.取骨髓細胞處死動物,用裝有生理鹽水的注射器反復沖洗出骨髓細胞,并用注射器筒輕輕吹打,使細胞團塊分散,靜置片刻、待大組織團塊沉淀后,用吸管將骨髓細胞懸浮液移至離心管中,以1000r/min離心510min,棄去上清液。.低滲根據(jù)骨髓細胞液的多少,力口

17、0.075mol/L的KCI液56ml,在37C水浴箱中或室溫下低滲2030min。低滲時間過長,易造成細胞破裂;時間過短,則染色體難以分散。.預固定低滲完畢,立即加入1ml新配制的預冷Carnoy's固定液,用吸管將細胞輕輕吹打均勻,進行預固定。然后以1000r/min離心8min。.固定棄去上清液,力口56mlCarnoy'液,輕輕吹打細胞,靜置固定20min。離心棄去上清液,再加56mlCarnoy'液,固定20min。.制備細胞懸液離心棄去上清液,再加少許新鮮Carnoy's固定液,用吸管將固定后的細胞吹散,并反復吹打混勻,制成濃集的細胞懸濁液。.準備載

18、玻片滴片前12h,將潔凈的載玻片放在04c冰水中,使其表面附有一層水膜。這樣在滴片時,細胞懸液遇到載玻片上的冷水,染色體會迅速分散開來。滴片法制備染色體標本(引自王宗仁等).滴片取出預冷的載玻片,將其傾斜約30°放置。吸取細胞懸液,從距離載玻片40cm以上高度處滴至載玻片上23滴;滴片后立即用嘴或洗耳球?qū)实纹庉p微吹氣;也可用鐐子夾住載玻片、在酒精燈火焰上迅速過幾下(見圖),這樣都有助于染色體分散和展開。2 .干燥使滴片在室溫下自然干燥,或在酒精燈火焰上烤干,也可用吹風機冷風吹干。.染色待滴片充分干燥后,用pH6.8的磷酸鹽緩沖液稀釋的Giemsa染液(Giemsa原液:緩沖液=1

19、:10)染色30min。然后自來水沖洗,空氣干燥。鏡檢。酸性磷酸酶的顯示(金屬沉淀法)1 【目的要求】.熟悉酸性磷酸酶顯示方法的原理及操作步驟.觀察酸性磷酸酶在細胞中的分布【基本原理】酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP)主要存在于巨噬細胞,定位于溶酶體內(nèi)。在溶酶體膜穩(wěn)定完整時,底物不易滲入,ACP活力微弱或無活性,經(jīng)固定,在合適pH條件下,膜本身變?yōu)椴环€(wěn)定,逐漸改變其滲透性,底物可以滲入,酶活力被顯示。ACP在酸性條件下(pH4.7)可使作用液中的底物B-甘油磷酸鈉的磷酸根解離出來,進而與溶液中硝酸鉛結合形成磷酸鉛沉淀,因其是難溶解的無色沉淀物,需要與黃色的硫化鏤作用,生成棕黑

20、色PbS沉淀而被顯示出來。B-甘油磷酸鈉一->甘油+PO3-PO4+Pb(NO3)2>Pb2PO4)2Pb2(PO4)4+(NH4)2S>PbS1 【實驗用品】.器材:注射器、解剖用具、恒溫水浴鍋、載玻片、蓋玻片.試劑:(1) 3%淀粉溶液(2) ACP作用液:1)B-甘油磷酸鈉140mg溶于25ml蒸播水中。2)醋酸緩沖液12ml3)重蒸水90ml4)3.3%硝酸鉛10mlB-甘油磷酸鈉。然配制時,先將醋酸緩沖液與蒸儲水混合,然后分成兩等份,分別加入硝酸鉛和后將兩液體混合,調(diào)pH4.74.8,存冰箱中備用.3.材料:小鼠腹腔液涂片【方法與步驟】.免疫動物:實驗前46天用無菌

21、注射器取已滅菌的3%淀粉溶液1ml注射于小鼠腹腔內(nèi),每天一次。1 .頸椎脫臼處死小鼠,剖開腹腔,吸取腹腔液制備涂片。2 .入37C作用液30min。3 .蒸鐳水漂洗。4 .10%甲醛鈣溶液后固定5min。5 .蒸鐳水洗。6 .2%硫化胺溶液23min。7 .蒸儲水漂洗,脫水,透明,樹膠封固,鏡檢。對照實驗:對照組的作用液中不加I甘油磷酸鈉,而以蒸儲水代替;或入作用液前先用高溫(50)處理30min,使酶失去活性,作好標記,然后同時進行上述實驗。小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬實驗1 【目的要求】.了解小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的原理.熟悉細胞吞噬作用的基本過程【基本原理】細胞的吞噬作用在單細胞動物是攝取營

22、養(yǎng)物質(zhì)的方式,在高等動物內(nèi)的巨噬細胞、單核細胞和中性粒細胞等具有吞噬功能,是機體非特異性免疫功能的重要組成部分。巨噬細胞是由骨髓干細胞分化生成,當病原微生物或其他異物侵入機體時,巨噬細胞由于具有趨化性,變向異物處聚集,巨噬細胞可將之內(nèi)吞入胞質(zhì),形成吞噬泡,然后在胞內(nèi)與溶酶體融合,將異物消化分解。吞噬泡的形成需要有微絲及其結合蛋白的幫助,如果用降解微絲的藥物細胞松弛素B處理細胞,則可阻斷吞噬泡的形成;免疫抑制劑環(huán)磷酰胺(CYP)對巨噬細胞的吞噬作用也有影響。1 【實驗用品】.器材:顯微鏡、解剖盤、剪刀、鐐子、注射器、載玻片、蓋玻片、吸管等.試劑:(1)0.85%生理鹽水、(2)阿氏(Alseve

23、r)血液保存液檸檬酸鈉0.8g檸檬酸0.5g葡萄糖18.7g氯化鈉4.2g加蒸播水至1000ml溶解后用濾紙過濾,分裝,8-10磅滅菌20分鐘,置冰箱保存。(3)4%臺盼蘭染液(用生理鹽水配制)(4)可溶性淀粉6.0g加水100ml煮沸備用。3.材料:(1)小白鼠(2)1%雞紅細胞懸液自雞翼下靜脈取血1ml,注入含滅菌阿氏液4ml的瓶中,混勻置于冰箱保存?zhèn)溆谩J褂脮r用生理鹽水洗滌,離心,傾去上清,如此反復洗滌三次,最后用生理鹽水配制成1%的雞紅細胞懸液。1 【方法與步驟】.實驗前3天,水浴融化淀粉溶液,加入適量4%的臺盼蘭染液,使呈藍色。每天給小鼠腹腔注射可溶性淀粉1ml,以誘導腹腔內(nèi)產(chǎn)生較多

24、的巨噬細胞。小鼠腹腔注射給藥的方法:先用右手抓住鼠尾提起,稍稍旋轉后,放在解剖盤上,用左手的拇指和食指捏住小鼠兩耳及頭頸皮膚,將鼠體置于左手心中,把后肢拉直,用左手的無名指和小指按住尾巴及后肢,即可在腹部后1/2處的一側注射,進針勿過深,不超過1cm為宜,進針后將藥物緩慢推入,稍停頓一會拔出針頭,輕按小鼠腹部使藥物分散。2 .第一次注射24小時后,每只小鼠再腹腔注射1%雞紅細胞懸液1ml。隨即輕輕按摩小鼠腹部。3 .注射雞紅細胞30min后,用頸椎脫臼法處死小鼠。.將小鼠置于解剖盤中,剪開腹部,用吸管吸取腹腔液,滴一滴于載玻片上,用蓋玻片涂開后,蓋上即可觀察。.高倍鏡下分辨雞紅細胞和巨噬細胞:

25、雞紅細胞是一些淡黃色、橢圓形及圓形有核的細胞;而數(shù)量較多、較大的圓形或不規(guī)則的細胞,其表面具有許多似刺毛狀的小突起(偽足),有的細胞質(zhì)中含有數(shù)量不等的藍色顆粒(為吞入含臺盼蘭的淀粉形成的吞噬泡),即為巨噬細胞。4 .計算吞噬百分數(shù)和吞噬指數(shù):吞噬百分數(shù)=100個巨噬細胞中吞噬了雞紅細胞的細胞數(shù)/100吞噬指數(shù)=100個巨噬細胞吞噬的雞紅細胞總數(shù)/100實驗記錄:記錄巨噬細胞的吞噬情況糖原的顯示PAS反應(periodicacidschiffreaction)【目的要求】通過PAS反應,了解糖原顯示的基本原理、方法以及糖原在細胞中的分布?!净驹怼刻窃蒁-葡萄糖的分支或直鏈組成,在肝和肌肉最

26、豐富。過碘酸是一種強氧化劑,能將葡萄糖中乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成二個游離醛基(一CHO),游離醛基與Schiff試劑反應生成紫紅色產(chǎn)物,顏色深淺與多糖含量成正比。由于單糖在固定、脫水和包埋等組織化學操作過程中被抽提掉,故一般組織標本上所能顯示的糖類主要是多糖,包括糖原、粘多糖、粘蛋白、糖蛋白糖原可被唾液淀粉酶水解,和糖脂等。因此要確定此紅色物質(zhì)是否糖原還需要同時進行對照實驗先用唾液淀粉酶作用再進行PAS顯色,若反應為陰性,則表明是糖原,反之則為其他多糖。1 【實驗用品】.器材:石蠟切片機,蓋玻片、載玻片、染色缸等.2 .試劑(100.5%過碘酸溶液(PeriodicAcidSolu

27、tion)3 (2)希夫試劑(Schiff'sReagent)見實驗.材料:甘薯塊根,馬鈴薯塊莖和小鼠肝石蠟切片【方法與步驟】1.切片染色(1)小鼠肝或馬鈴薯石蠟切片在二甲苯中脫臘10分鐘。(2)用梯度酒精按照從高到低的的順序復水,每級酒精停留2-5分鐘,直至蒸鐳水。(3)入0.5%過碘酸溶液作用515分鐘。(4)蒸鐳水沖洗。(5)入Schiff試齊用1530分鐘。(6)新配制的亞硫酸溶液洗3次,每次12分鐘,以除去多余的無色品紅(7)自來水沖洗直到切片變紅色。(8)用95%和100%酒精脫水。二甲苯透明,封片,鏡檢。對照實驗:淀粉酶水解對照法。實驗結果:糖原、粘多糖、粘蛋白均顯PAS陽性紅色;糖原對照實驗PAS反應為陰性。Feulgen反應【目的要求】學習Feulgen反應的原理及操作步驟,了解細胞中DNA的分布。【基本原理】Feulgen反應是系列反應,包括DNA水解、顯色兩個主要反應步驟。DNA經(jīng)弱酸(1mol/LHCL)60oC條件下水解,DNA分子中喋吟堿基和與脫氧核糖間的糖背鍵斷裂,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基,這些醛基在原位與Schiff'試劑(無色品紅亞硫酸溶液)反應,形成紫紅色的化合物,因此,細胞內(nèi)含有DNA的部位會呈現(xiàn)紫紅色陽性反應。孚爾根反應對組織中的DNA高度專一。組織中除DNA外還有多糖、RNA和其它自由醛基(fr

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