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1、復(fù)方中藥對(duì)雞新城疫、禽流感抗體效價(jià)的影響張進(jìn)隆,王福厚,賀軍,田啟會(huì),車清明,劉根新(甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院,甘甫武威733006)摘要:為研究復(fù)方中藥對(duì)雞新城疫、禽流感抗體效價(jià)的影響,選擇120只試驗(yàn)雞,隨機(jī)分成4組,試驗(yàn)組I、U、III飼料中添加0.5%、1.0%、1.5%的復(fù)方中藥,對(duì)照組不添加任何藥物,分別于免疫后1O、2O、3O(I測(cè)定H1抗體效價(jià),并進(jìn)行,檢驗(yàn)。結(jié)果試驗(yàn)組11.1112種抗體效價(jià)與對(duì)照組差異顯著(P<0.05或PcO.Ol);試驗(yàn)組D與ID差異不顯著;試驗(yàn)組I與對(duì)照組差異不顯著表明復(fù)方中藥對(duì)雞新城疫、禽流感抗體效價(jià)的提高有明顯的促進(jìn)作用,經(jīng)篩選,1.0%為適
2、宜添加量。關(guān)鍵詞:復(fù)方中藥;雞新城疫;禽流感;抗體效價(jià)文章編號(hào):1000-6354(2013)05-0023-03文章編號(hào):1000-6354(2013)05-0023-03中圖分類號(hào):S853.74文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A一一賣境技木unaffectedexperimentalpigswerewithpositiveantibody.Itisconcludedthat3ABC-ELISAdetectiontimelinessisconfirmedonfoot-and-mouthdiseasevirus,andpathogensdiagnosisispreferredinthedetectionofFM
3、D,while3ABC-ELISAdetectioncanbeusedasaretrospectivesurveyofwildvirusinfection.Keywords:FMD;3ABC-ELISA;wildvirusantibody;timeliness禽流感、雞新城疫是危害養(yǎng)雞業(yè)的主要傳染病,發(fā)病急,死亡率高.國際獸疫局(OIE)將其列為A類疫病,我國將其列為一類動(dòng)物疫病。多年來.對(duì)于雞新城疫以預(yù)防接種和其他綜合性防制措施進(jìn)行防治,大大減少該病所造成的損失,典型雞新城疫發(fā)病明顯減少,提高了養(yǎng)雞的經(jīng)濟(jì)效益.但慢性、非典型性博新城疫發(fā)病有所增加,仍然是我國家禽的主要傳染病之一。近年來,在我
4、國雞群中出現(xiàn)了H9N2亞型禽流感毒株流行.雖然該毒株所造成的死亡率不及H5和H7兩亞型,但可使蛋雞產(chǎn)蛋量明顯下降,肉雞生K速度明顯減緩,故已構(gòu)成對(duì)我國養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的嚴(yán)幣:威脅山。筆者等收稿日期:2013-07-18基金項(xiàng)目:甘甫省星火計(jì)劃項(xiàng)目“河西地區(qū)養(yǎng)牌生物安全措施的建立及應(yīng)用(I006NCXH0II)”作者簡介:張進(jìn)?。↖966-).男.教授.主要從小動(dòng)物傳染病教學(xué)與研究。通訊作者:劉根新.E-mail:gsxmgrlgxC研究不同劑ht復(fù)方中藥對(duì)疫苗免疫后雞新城疫、禽流感抗體效價(jià)的影響.從而選擇能增強(qiáng)雞免疫性能的復(fù)方中藥,在蛋雞飼養(yǎng)中作為免疫增強(qiáng)劑,保證禽流感、雞新城疫免疫效果,進(jìn)而在一個(gè)
5、飼養(yǎng)周期內(nèi)減少免疫次數(shù),減少應(yīng)激因素,提高生產(chǎn)性能,1材料與方法1.1材料1.1.1試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)試驗(yàn)雞選自甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院畜禽養(yǎng)殖實(shí)訓(xùn)中心。采用籠養(yǎng)、常規(guī)飼養(yǎng)管理。1.1.2藥品和診斷液中藥購自武威市康泰藥業(yè)有限公司(批號(hào):100902);ND-Las«ta油乳劑滅活疫苗(黑龍江生物制品一廠,批號(hào):20120301);雞新城疫標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清及標(biāo)準(zhǔn)抗原(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所);禽流感油乳劑滅活疫苗(乾元浩生物股份有限公司鄭州生物藥廠,批號(hào):20121021);禽流感標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清空實(shí)驗(yàn)技木,檢驗(yàn)二曾十瓠瑋批新9例顧2013年第5期及標(biāo)準(zhǔn)抗原(青島易邦
6、生物程有限公司,批號(hào):20120707)01.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)將60日齡試驗(yàn)雞120只隨機(jī)分成4組,1組為對(duì)照組,另外3組為試驗(yàn)組:其中試驗(yàn)組I、11、III雞飼料中添加自擬復(fù)方中藥制劑0.5%、1.0%、1.5%;對(duì)照組飼料中不添加中藥,在原仃免疫基礎(chǔ)上,分別注射禽流感滅活疫苗0.5mL.NI)疫苗0.5mL在相應(yīng)的時(shí)間采血,用血凝抑制試驗(yàn)測(cè)定抗體效價(jià)。1.3血凝抑制效價(jià)測(cè)定分別于免疫前1d及免疫后10.2()J0<1對(duì)試驗(yàn)組黑進(jìn)行翅下靜脈采血.0.5mL/只,凝固后分離血清,于-20Y凍在備用。對(duì)健康公雞翅靜脈采血,儲(chǔ)存于阿氏液中.2000r/min離心5min,棄上清,去掉白細(xì)胞;PBS
7、洗滌3次,2000r/min離心5min,讀取紅細(xì)胞體積.配制成1%格紅細(xì)胞懸液按照高致病性禽流感防治技術(shù)規(guī)范、新城疫診斷技術(shù)XGB/T16550-2008)規(guī)定方法蹌,對(duì)血清樣品進(jìn)行血凝抑制效價(jià)測(cè)定,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,2結(jié)果2.1不同添加劑量中藥對(duì)禽流感抗體效價(jià)的影響添加不同劑量中藥的試驗(yàn)組I、II、III,免疫10d后禽流感抗體效價(jià)分別為5.8、6.5、6.8;20(I后抗體效價(jià)分別為5.9、6.7、7.0;30(I后分別為5.8.6.7.7.0;試驗(yàn)組U與對(duì)照組比較差異顯著,說明復(fù)方中藥能夠顯著提高禽流感特異性抗體效價(jià),結(jié)果見表Io表1復(fù)方中藥制劑對(duì)禽流感抗體效價(jià)的影響Tab.lDetec
8、tionandanalysisofAlantibodytiter組別響只蜘體雪誓%,檢驗(yàn)注:“*”表示與對(duì)照組比較差異顯際P<0.05)試驗(yàn)組I305.5±0.45.8±0.355.9±0.335.8±0.30試臆組u305.5±0.46.5±0.356.7±0.346.7±0.4()*試驗(yàn)組u305.5±0.46.8±0.357.0±0.307.010.35*對(duì)照組305.5±0.45.5±0.355.4±0.405.4±0.40Note
9、s:nu*antsigniGcant(liilfnuirrcoinpan*(lwiththecontmKP<0.05).從表1結(jié)果町以看出,免疫10d后試驗(yàn)雞禽流感抗體效價(jià)達(dá)到峰值,試驗(yàn)組與對(duì)照組抗體效價(jià)比較.試驗(yàn)組m比對(duì)照組高1.6個(gè)滴度,試驗(yàn)組II比對(duì)照組高1.3個(gè)滴度:2.2不同添加劑量中藥對(duì)雞新城疫抗體效價(jià)的影響添加不同劑量中藥的試驗(yàn)I、ii、in組,免疫10(I后ND抗體分別為7.0、8.0、8.8;20(I后分別為7.0、8.0、8.6,30d后分別為6.8、7.5,8.5。試驗(yàn)組II、m與對(duì)照組比較差異極顯著,說明應(yīng)用夏方中藥能夠顯蓍提高焙新城疫特異性抗體效價(jià),并目特異性抗
10、體的效價(jià)隨中藥添加劑ht的增加而增加,結(jié)果見表2。表2復(fù)方中藥制劑對(duì)雞新城疫抗體效價(jià)的影響Tab.2DetectionandanalysisofNDantibodytiter試我組I306.2±0.47.0±0.357.0±0.336.8±0.30試粉組u306.2±0.48.0±0.358.0±0346.0±0.40試mm306.2±().48.8±0.358.6±0.308.5±0.35對(duì)照組306.2±0.46.2±0.356.1±0.40
11、6.0±0.40組別雞數(shù)/只基礎(chǔ)抗體H1抗體效價(jià)(平均數(shù))IFd20d30d注:“*”表示與對(duì)照組比較差異極顯育(/><0.01),Noles:,*,m<,anlwrysignificantdiflerrncecomparedwiththecontrol(P<0.01).從表2結(jié)果可以看出,免疫1()d后雞新城疫抗體效價(jià)達(dá)到峰值.試驗(yàn)組與對(duì)照組抗體效價(jià)比較.試驗(yàn)組III比對(duì)照組高2.5個(gè)滴度,試驗(yàn)組I比對(duì)照組高0.8個(gè)滴度。3討論3.1雞飼料中添加夏方中藥能明顯提高抗禽流感抗體效價(jià):楊松等叫試驗(yàn)表明,APS在AI疫苗的免疫過程中具有促進(jìn)肉雞生長性能和提高肉雞免
12、疫功能的作用,AI抗體效價(jià)在二免后顯若增加。3.2雞飼料中添加復(fù)方中藥能明顯提高抗雞新城疫抗體效價(jià)1%添加組雞新城疫特異性抗體效價(jià)高于0.5%添加組。侯凱儷等經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí),雞口服黃芷水煎劑組抗體效價(jià)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)o孫惠玲等用黃茂作為免疫增強(qiáng)劑,添加劑量為10mg/只,能顯著提高新城疫血凝抑制抗體水平。中藥具有免疫促進(jìn)作用的成分是中藥多糖等.可增強(qiáng)機(jī)體免疫力,促進(jìn)抗體產(chǎn)生。3.3試驗(yàn)結(jié)果表明.免疫10d后歡雞抗體效價(jià)達(dá)到峰值.3周后抗體效價(jià)與免疫后1周沒有明顯差異,并且特異性抗體效價(jià)的增加與復(fù)方中藥的添加劑量呈正相關(guān),劑量越大、抗體效價(jià)越高。這與胡庭俊等的試股結(jié)果基本一致。羅
13、燕等I"研究表明.黃芷多糖均能提高AI-HI和ND-HI抗體效價(jià),其中中劑ht組抗體高峰期持續(xù)時(shí)間長免疫后期有延長抗體存在的趨勢(shì),具有較好的免疫輔助效果。3.4該夏方中藥主要以補(bǔ)益類藥物為主.其免疫作用主要是通過改善雞體狀況、增強(qiáng)免疫器官的機(jī)能來實(shí)現(xiàn)成方中藥可以明顯提高抗禽流感、雞新城疫抗體效價(jià),在禽流感、雞新城疫的免疫預(yù)防中可以作為免疫增強(qiáng)劑,在養(yǎng)雞生產(chǎn)中合理應(yīng)用,既可以提高免疫效果,提高疫苗的保護(hù)率,延K免疫期,又具有無副作用、無殘留等優(yōu)點(diǎn),符合綠色環(huán)保的要求.對(duì)人類健康不會(huì)產(chǎn)生不良影響,符合市場(chǎng)的需求,有著廣闊的應(yīng)用前景。參考文獻(xiàn):|1趙坤坤,仲書官,趙國,等.2009-201
14、0年華東地區(qū)家禽低致病性禽流感病毒的流行病學(xué)調(diào)查與分析J中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),2012.32(3):345-349.|2劉華雷,吳艷濤,王志亮,等.新城疫診斷技術(shù)(GB/T16550-2008)S|.北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008.3 國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).高致病性禽流感防治技術(shù)規(guī)范S.北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2007.4 楊松,王長月,何悅.黃芷多糖對(duì)肉雞禽流感免疫效果的影響J.飼料研究.2012(8):39,48.5|侯凱麗,翟利始,葛佳靜,等.黃芷白術(shù)水煎劑對(duì)雞新城疫疫苗免疫效果的影響J.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2012.31(5):25-26.6孫惠玲,苗得園,龔玉梅,等.黃芷、巖藻和油菜3種植物提取多
15、糖對(duì)新城疫弱毒疫苗免疫效果的影響IJ.中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2005,27(3):205-208.|7|胡庭俊,高艷艷,陳靈然,等.黃茂多糖對(duì)雞新城疫疫苗免疫抗體水平的影響|J|.廣西畜牧獸醫(yī),2008,24(3):150-151.|8|羅燕,邵永斌.谷新利.等.黃筷多糖佐劑對(duì)雞禽流感-新城疫重組二聯(lián)苗免疫效果的影響J|.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2008,27(5):1315.EffectsofcompoundChinesemedicinepreparationonNDandAlantibodytiterofvaccinatedchickensZHANGJin-long,WANGFu-hou,HEJun,
16、TIANQi-hui,CHEQing-ming,LIUGen-xin(GansuPolytechnicCollegeofAnimalHusbandryandEngineering,WuweiGansu733006,China)Abstract:TostudytheeffectsofcompoundChinesemedicinepreparationonNewcastlediseaseandavianinfluenzaantibodytiter,120chickenswererandomlydividedintofourgroups,thethreeexperimentaldietscontaining0.5%,1%and1.5%ofcompoundpreparation,andgroupIVwasascontrol.ThentheHIantibodytitersweredetectedon10*,20*and30*aftervaccination,andttestwasusedtoanalyzethedata.TheresultsshowedthatNDandAlHIantibodytitersingroupHIhadsignificantdifferencewiththatofcontrolgroup(
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