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文檔簡(jiǎn)介
1、現(xiàn)代生物科技專題訓(xùn)練(二)1.轉(zhuǎn)基因植物油是由轉(zhuǎn)基因植物通過(guò)壓榨或浸出法加工制得的,因其出油率高而被廣泛應(yīng)用。我國(guó)是植物油消費(fèi)大國(guó),每年都從國(guó)外進(jìn)口大量的轉(zhuǎn)基因植物油。 (1)在培育轉(zhuǎn)基因油料植物的過(guò)程中,基因操作需要的工具酶是 。在基因表達(dá)載體中,目的基因的首端必須含有 ,它是 識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)。 (2)請(qǐng)寫出一種將目的基因?qū)胗土现参锛?xì)胞可以采用的方法: 。若受體細(xì)胞為植物體細(xì)胞可采用 技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植物體,該技術(shù)所依據(jù)的原理是 。 (3)若要檢測(cè)中獲得的植物細(xì)胞染色體上是否含有目的基因,可采用 技術(shù)。 (4)若利用蛋白質(zhì)工程繼續(xù)提高油料植物的出油率,其設(shè)計(jì)流程應(yīng)從預(yù)期的 出發(fā),設(shè)計(jì)預(yù)期的
2、結(jié)構(gòu),推測(cè)出應(yīng)有的 序列,然后找到相對(duì)應(yīng)的_ 序列,再用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改變現(xiàn)有性狀。我國(guó)種植轉(zhuǎn)基因油料作物同時(shí)仍保留原來(lái)非轉(zhuǎn)基因的油料作物等其他原有作物這是依據(jù)生態(tài)工程中的 原理。2.水稻種子中70%的磷以植酸形式存在,植酸容易與蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外,是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子,而植酸酶可降解植酸??茖W(xué)家研究發(fā)現(xiàn)酵母菌中含有植酸酶,設(shè)想將酵母菌的植酸酶基因?qū)胨?,培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程,結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問(wèn)題:(1)圖中基因組文庫(kù) cDNA文庫(kù)(填“大于”或者“小于”),B過(guò)程需要的酶是 。(2)為獲得大量的目的基因,可以用 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,其原理是 ,該過(guò)程中
3、需要以圖中的 或 為模板,所用酶的顯著特點(diǎn)是 。(3)植酸酶基因能在水稻體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是 ,可以用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)??茖W(xué)家想獲得活性更高的植酸酶,首先要設(shè)計(jì)預(yù)期的 ,再推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列,最終對(duì) 進(jìn)行修飾,這是基因工程的延伸蛋白質(zhì)工程。(4)植物基因工程碩果累累,請(qǐng)列舉出兩方面的應(yīng)用 。3.20世紀(jì)以來(lái),生物工程迅猛發(fā)展,人們應(yīng)用生物工程技術(shù)已獲得了多種需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題: (1)圖中(I)是 ,在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中,保證(I)與質(zhì)粒具有相同黏性末端的是酶A、酶B中的 。 (2)在將(I)導(dǎo)入受體細(xì)胞之前需構(gòu)建基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒),其目的是使目的
4、基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能夠 。如果(II)受體細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞,最常用的轉(zhuǎn)化方法是:首先使用Ca2+處理菌體,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中 的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。 (3)(II)(III)的過(guò)程中要對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),目的是判斷目的基因是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳性狀。若要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,可用 技術(shù);若要檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出蛋白質(zhì),可用 技術(shù)。 (4)如果(I)是無(wú)限增殖調(diào)控基因prG(能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂),可通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體,此時(shí)(II)最可能是 細(xì)胞,(III)代表的細(xì)胞具有 特點(diǎn)。 (5
5、)如果(I)是抗蟲基因,在抗蟲棉的培育過(guò)程中,采用愈傷組織細(xì)胞作為受體細(xì)胞與采用葉肉細(xì)胞相比較,其優(yōu)點(diǎn)是 ,轉(zhuǎn)基因棉花受體細(xì)胞形成抗蟲棉的過(guò)程中采用的技術(shù)是 。4.據(jù)報(bào)道,科學(xué)家把帶有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因片段,整合到羊的乳腺上皮細(xì)胞DNA中,再將帶有轉(zhuǎn)基因的乳腺上皮細(xì)胞移植到去核卵細(xì)胞中,培育出了一只克隆羊,其乳汁中可以提煉出含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的物質(zhì)。請(qǐng)據(jù)此回答下列問(wèn)題: (1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),所用的工具酶是 ,人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因片段應(yīng)插入到 之間。 (2)將基因表達(dá)載體導(dǎo)人乳腺上皮細(xì)胞常用的方法是 。 (3)將帶有轉(zhuǎn)基因的乳腺上皮細(xì)胞移植到受體卵細(xì)胞前先要去掉受體卵
6、細(xì)胞核的原因是: 。 (4)目前使用的供體細(xì)胞一般都選擇傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,原因是傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞 。 (5)為了更多地生產(chǎn)出含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的物質(zhì),有人構(gòu)思采用胚胎分割技術(shù)。進(jìn)行胚胎分割時(shí),應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的 胚或囊胚。在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將 進(jìn)行均等分割。 5.目前,科學(xué)家正致力于應(yīng)用生物技術(shù)進(jìn)行一些疾病的治療,如器官移植、基因治療等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題: (1)人體器官移植面臨的主要問(wèn)題有_和免疫排斥,目前臨床通過(guò)使用_抑制_的增殖來(lái)提高器官移桿的成活率。 (2)EK細(xì)胞來(lái)源于囊胚期的_細(xì)胞或胎兒的原始性腺,也可以通過(guò)_技術(shù)得到重組細(xì)胞后再進(jìn)行相應(yīng)處理獲
7、得。通過(guò)對(duì)患者的EK細(xì)胞進(jìn)行_,可培育出人造組織器官,進(jìn)而解決免疫排斥問(wèn)題。 (3)人們發(fā)現(xiàn)小型豬的器官可用來(lái)替代人體器官進(jìn)行移植,但小型豬器官表面的某些抗原決定簇仍可引起免疫排斥。目前,科學(xué)正試圖利用基因工程對(duì)小型豬的器官進(jìn)行改造,在改造中導(dǎo)入小型豬基因組中的一些調(diào)節(jié)因子屬于基因工程中的_,作用是_。 (4)基因工程技術(shù)還可用于基因治療。在進(jìn)行體外基因治療時(shí),最有效的轉(zhuǎn)化方法是_;在進(jìn)行體內(nèi)基因治療時(shí),采用的載體應(yīng)該是_。6.干擾素常用于治療病毒感染引起的疾病,現(xiàn)在可以通過(guò)基因工程大量獲得。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。 (1)已知干擾素的氨基酸序列,則獲取目的基因的較簡(jiǎn)單方法是 ,目的基因還可以從cDN
8、A文庫(kù)獲取,但cDNA文庫(kù)只含某種生物的部分基因,原因是 。 (2)基因表達(dá)載體除含有干擾素基因外,還必須有 、 和 等。 (3)如果受體細(xì)胞為受精卵,則此過(guò)程還涉及到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件包括 、營(yíng)養(yǎng)、 、氣體環(huán)境,提供氣體中CO2的主要作用是 。 (4)轉(zhuǎn)基因技術(shù)是否成功,需要對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行分子水平的檢測(cè),首先是檢測(cè)受體細(xì)胞 上是否插入目的基因,這是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的頭鍵,檢測(cè)的方法是 。最后還要檢測(cè)目的基因是否翻譯成了相應(yīng)蛋白質(zhì),利用的技術(shù)是 。7.下圖表示高等動(dòng)、植物細(xì)胞融合的部分過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答: (1)若上圖表示植物體細(xì)胞雜交的部分過(guò)程,欲將丁細(xì)胞培育
9、成植株,可選用 技術(shù),這一技術(shù)的兩個(gè)關(guān)鍵步驟是 和 。 (2)若上圖表示制備單克隆抗體的部分過(guò)程,甲細(xì)胞為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞,則乙細(xì)胞為 。在分離乙細(xì)胞之前,應(yīng)對(duì)小鼠進(jìn)行的處理是 。過(guò)程區(qū)別于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)劑是 ,過(guò)程可利用 培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,篩選得到的丁細(xì)胞還需進(jìn)行 和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。上述制備過(guò)程涉及到的生物技術(shù)有 。8.下圖表示從蘇云金芽孢桿菌分離出來(lái)的殺蟲晶體蛋白質(zhì)基因(簡(jiǎn)稱Bt基因)及形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的圖解。請(qǐng)回答: (1)圖中a過(guò)程要用到的酶是 。 (2)在進(jìn)行圖中b過(guò)程時(shí)由我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的十分簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)的方法是 ,此 外,也經(jīng)常采用 法。
10、若耍培育轉(zhuǎn)基因綿羊,則此過(guò)程要用 的方法。 (3)為確定抗蟲棉是否培育成功,既要用放射性同位索標(biāo)記的 作探針進(jìn)行分子雜交測(cè)試,又要在個(gè)體水平上鑒定,后者具體過(guò)程是 。 (4)活化的毒性物質(zhì)應(yīng)是一種 分子,可以全部或部分嵌合于昆蟲的細(xì)胞 膜上,使細(xì)胞膜產(chǎn)生孔道,導(dǎo)致細(xì)胞由于滲透平衡的破壞而破裂。 (5)我國(guó)在“863”計(jì)劃資助下開展Bt抗蟲棉、抗蟲水稻等研究,可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用。這將對(duì) 起到重要作用。9.為了解基因結(jié)構(gòu),通常選取一特定長(zhǎng)度的線性DNA分子,先用一種限制酶切割,通過(guò)電泳技術(shù)將單酶水解片段分離,計(jì)算相對(duì)大小;然后再用另一種限制酶對(duì)單酶水解片段進(jìn)行降解,分析片段大小。下表是某小
11、組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。已知一線性DNA序列共有5000bp(bp為堿基對(duì))第一步水解產(chǎn)物(單位bp)第二步水解產(chǎn)物(單位bp)A酶切割2100將第一步水解產(chǎn)物分離后,分別用B酶切割1900 2001400 800 60010001000500500B酶切割2500將第一步水解產(chǎn)物分離后,分別用A酶切割1900 6001300800 50012001000 200經(jīng)A酶和B酶同時(shí)切割1900 1000 800 600 500 200該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要體現(xiàn)了 原則。由實(shí)驗(yàn)可知,在這段已知序列上,A酶與B酶的識(shí)別序列分別為 個(gè)和 個(gè)。根據(jù)表中數(shù)據(jù),請(qǐng)?jiān)谙聢D中標(biāo)出相應(yīng)限制酶的酶切位點(diǎn)。已知Bam H與Bgl的
12、識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如右圖所示,用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)一段含有數(shù)個(gè)Bam H和Bgl識(shí)別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作,若干循環(huán)后 和 序列明顯增多,該過(guò)程中DNA連接酶催化 鍵的形成。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成除了目的基因外,還必須有 、 及標(biāo)記基因。10.下圖是我國(guó)南方開始嘗試的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)模式圖,其中利用植物秸稈中的原料生產(chǎn)的燃料乙醇,是一種“綠色能源”,可減少對(duì)石油資源的依賴。請(qǐng)據(jù)圖回答: (1)生態(tài)系統(tǒng)的主要功能是物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng),從生態(tài)學(xué)角度分析,人們建立圖示的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的主要目的是 。建立該生態(tài)工程所遵循的基本原理主要是 (至少答兩個(gè))等。 (2)植物秸稈經(jīng)預(yù)處
13、理后,應(yīng)該利用微生物A所產(chǎn)生的纖維素酶進(jìn)行水解,使之轉(zhuǎn)化成發(fā)酵所需的葡萄糖。若從土壤中分離獲取微生物A,應(yīng)采用具有選擇功能的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中的碳源為 。 (3)為了提高植物秸稈的利用率,可以利用基因工程對(duì)微生物A進(jìn)行改造,其基本方法是:先用_同時(shí)切割_和_,然后用DNA連接酶將上述切割產(chǎn)物連接,構(gòu)成_并將其導(dǎo)入到受體菌中。11.請(qǐng)分析回答下列有關(guān)現(xiàn)代生物科技方面的問(wèn)題: (1)糖尿病在現(xiàn)代社會(huì)中的發(fā)病率越來(lái)越高,主要是由于患者胰島B細(xì)胞受損,胰島素分泌不足引起的。對(duì)此,某同學(xué)根據(jù)所學(xué)知識(shí)提出了用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)胰島素的治療方法?;境绦颍韩@取目的基因基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞目的基
14、因的檢測(cè)與鑒定。其中和的操作中需要相同的工具酶是_,該酶的作朋是_,暴露出相同的黏性末端。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中,目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合,在_酶的作用下延伸形成DNA。 (2)蛋白質(zhì)工程的基本途徑是:預(yù)期_設(shè)計(jì)預(yù)期的_推測(cè)應(yīng)有_找到相對(duì)應(yīng)的_序列。 (3)胚胎工程中的胚胎移植實(shí)際上是生產(chǎn)胚胎的_和孕育胚胎的_共同繁殖后代的過(guò)程。其生理學(xué)基礎(chǔ)主要有_ (4)單克隆抗體的制備過(guò)程中,經(jīng)人工誘導(dǎo)后,骨髓瘤細(xì)胞和產(chǎn)生免疫反應(yīng)的動(dòng)物脾臟中的B淋巴細(xì)胞融合。由于可能產(chǎn)生多種融合細(xì)胞,因此還需對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行_次篩選,目的是_。12.我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場(chǎng)
15、自然分娩產(chǎn)出,這標(biāo)志著我國(guó)在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答: (1)過(guò)程和必需用到的酶分別是 。 (2)過(guò)程將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí),采用最多也最有效的方法是 。然后還要通過(guò) 技術(shù)來(lái)檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上。如果導(dǎo)入到植物細(xì)胞通常采用的方法則是 。 (3)為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞,可通過(guò)對(duì)母豬注射 ,做超數(shù)排卵處理,并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到 期即可通過(guò)顯微操作將其細(xì)胞核去除。 (4)在培養(yǎng)得到的重組細(xì)胞時(shí),一般需要提供 條件。(至少說(shuō)出3點(diǎn))13.我國(guó)科學(xué)工作者
16、經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金芽孢桿菌能分泌一種毒蛋白使棉 鈴蟲致死,而此毒蛋白對(duì)人畜無(wú)害。通過(guò)科技攻關(guān),我國(guó)科學(xué)工作者已成功地將該毒蛋白基因?qū)朊藁ㄖ仓牦w內(nèi)并實(shí)現(xiàn)了表達(dá)。由于棉鈴蟲吃了新品種“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”植株后就會(huì)死亡,所以該棉花新品種在近年推廣后,已收到了很好的經(jīng)濟(jì)效益,請(qǐng)據(jù)以上所給材料回答下列問(wèn)題:(1)害蟲抗藥性的增強(qiáng)是 的結(jié)果。(2)在培育抗蟲棉新品種過(guò)程中,所用的基因的“剪刀”是 ,基因的“運(yùn)輸工具”是 。我國(guó)科學(xué)工作者采用了獨(dú)創(chuàng)的 法,將毒蛋白基因?qū)朊藁ǖ捏w細(xì)胞,再利用 技術(shù)獲得“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”。如圖所示為人類“治療性克隆”的大概過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖作答。(3)人類“治療
17、性克隆”屬于生物工程中的 工程。(4)“治療性克隆”的結(jié)果說(shuō)明高度分化的體細(xì)胞的核仍然具有 。胚胎干細(xì)胞是從動(dòng)物胚胎發(fā)育至 期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或胎兒的 中分離得到的一類細(xì)胞。(5)相同的胚胎干細(xì)胞,“克隆”的結(jié)果各種各樣,如有的是胰島細(xì)胞,有的是血細(xì)胞,有的是心肌細(xì)胞,究其本質(zhì)原因是基因 的結(jié)果。上述“克隆”過(guò)程是建立在胚胎干細(xì)胞的 和 的基礎(chǔ)上的。(6)按上述方法克隆的器官在移植方面的主要優(yōu)點(diǎn)是 。14.干擾素在人體中是由免疫細(xì)胞合成并分泌的一種糖蛋白,幾乎能抵御所有病毒引起的感染。傳統(tǒng)生產(chǎn)方法成本高、產(chǎn)量低,獲得的干擾素在體外不易保存。用生物技術(shù)手段可以解決這些問(wèn)題。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。(1)利用基
18、因工程生產(chǎn)干擾素,過(guò)程是: 從健康人體外周靜脈血分離能合成干擾素的免疫細(xì)胞,從中提取 ,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲取目的基因,此過(guò)程需要的原料是 。 用限制酶處理載體和目的基因后,用 酶處理,形成重組載體,該載體的化學(xué)本質(zhì)是 。 若選擇大腸桿菌作為受體細(xì)胞,常用的轉(zhuǎn)化方法是用 處理,使其成為_,一定溫度作用下,完成轉(zhuǎn)化。 在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后,離心后取 (上清液/菌體),經(jīng)進(jìn)一步處理獲得產(chǎn)物,進(jìn)行產(chǎn)物鑒定時(shí)可采用 技術(shù)。(2)利用蛋白質(zhì)工程對(duì)干擾素進(jìn)行改造,基本途徑是:預(yù)期蛋白質(zhì)功能_找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。(3)利用細(xì)胞工程生產(chǎn)干擾素,思路是:將相應(yīng)免疫細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合,篩選_細(xì)胞,經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量干擾素。15.德國(guó)科學(xué)家最近培育出一種可以
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