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1、高二生物選修三第二章第三節(jié)細胞融合技術 班級: 姓名: 小組:【學習目標】1. 掌握動物細胞融合的概念、方法及單克隆抗體的制備與應用。2.掌握植物體細胞雜交的過程、原理。【知識梳理】一、動物細胞融合1.動物細胞融合也稱細胞雜交,指 。2.結果: 形成單核的雜交細胞。3.原理: 。 4.誘導方式:物理法: 。 化學法: 。 生物法: 。思考討論:為什么細胞融合過程中使用的病毒需要滅活?不滅活行嗎?5.過程: 6.動物細胞融合的意義:克服了遠緣雜交的不親和性,成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。 應用:成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段,特別是

2、利用雜交瘤技術制造單克隆抗體。二、單克隆抗體1.什么是抗體?由什么細胞分泌?2.單克隆抗體:由單一B淋巴細胞進行無性生殖形成的細胞所產(chǎn)生的化學性質單一、特異性強的抗體。3.B淋巴細胞與抗體的關系:(1)B淋巴細胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)生抗體。(2)動物體內的效應B淋巴細胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體,每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。(3)每一個淋巴細胞只能產(chǎn)生一種抗體。4.單克隆抗體制備設計方案: 。利用效應B淋巴細胞產(chǎn)生 的功能;利用腫瘤細胞 的特性;利用 的技術將兩種細胞融合獲得具有淋巴細胞和腫瘤細胞特性的雜交瘤細胞;利用 技術大量培養(yǎng)雜交瘤細胞。 制備過程:第一步:將 注射到小鼠體內進

3、行免疫;第二步:從該小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的細胞,與小鼠的細胞在,或聚乙二醇的誘導下融合;第三步:在特定的培養(yǎng)基中,篩選出細胞;第四步:培養(yǎng)雜交瘤細胞,從中挑選出 的細胞群,繼續(xù)培養(yǎng);第五步:將該雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠 內增殖,然后再分離純化單克隆抗體;思考:(1)本過程利用了哪些原理?(2)為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合?5.雜交瘤細胞的特點: 。單克隆抗體的特點: 。6.應用主要有: 作為診斷試劑:準確識別各種抗原物質的細微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結合,具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導彈”,

4、也有少量用于治療其它疾病。3. 植物體細胞雜交技術 1、定義:植物體細胞雜交就是將 的植物體細胞,在一定條件下融合成 ,并把雜種細胞培育成 技術。優(yōu)點是 2、方法: 物理法: 、 化學法: 3、與動物體細胞雜交不同的是在雜交之前需要先用 和 去除細胞壁,獲得具有活力的 ,此方法稱為 4.植物體細胞雜交過程示意圖:5.植物體細胞雜交的優(yōu)勢:打破不同種生物間的生殖隔離限制,在一定程度上克服遠緣雜交不親和的障礙,大大擴展了可用于雜交的親本組合范圍。4、 動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較:比較項目細胞融合的原理細胞融合的方法誘導手段用法植物體細胞雜交動物細胞融合課堂檢測:1.下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技

5、術的方法,設計的生產(chǎn)破傷風桿菌的實驗方案(1)該實驗方案的目的是 。(2)該方案能達到預期效果嗎?為什么?(3)A是從小鼠脾臟中取得 ,該細胞能產(chǎn)生 。(4)圖中B為_過程,常用_作為誘導劑,該細胞繼承_的遺傳特性,既能_,又能_(5)C過程指細胞培養(yǎng),該過程包括_培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個階段,其中_代以內的的細胞屬于細胞株。2下列不是細胞融合常用方法的是()A細胞培養(yǎng)B滅活的仙臺病毒誘導C電刺激 D聚乙二醇作為誘導劑3動物細胞融合的目的中,最重要的是( )A克服遠緣雜交不親和的障礙B制備單克隆抗體C培育新物種D生產(chǎn)雜交細胞4. 單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后,要用特定培養(yǎng)基篩

6、選出雜交瘤細胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是( ) 淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞雜交瘤細胞A BC D 5科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合,得到雜交細胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細胞融合的是()A經(jīng)過免疫的B淋巴細胞B不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞C經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 D不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 6用動物細胞工程獲得單克隆抗體,下列實驗步驟錯誤的是()A將抗原注入小鼠體內,獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞B用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞C用聚乙二醇作誘導劑,使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D篩選雜交瘤細胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體7單克隆抗體技術在疾病診斷和治療以及生命科學研究中具有廣

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