自動血細胞分析儀復檢規(guī)則

1、第一頁，共33頁幻燈片p制定血細胞復檢規(guī)則的必要性p血涂片復檢的國際和國內現(xiàn)狀pISO15189的要求p血涂片復檢規(guī)則制定的原則p血涂片復檢規(guī)則的制定 第二頁，共33頁幻燈片 血細胞分析主要包括血細胞數量和質量的分析；既白細胞、紅細胞、血小板計數和三種細胞形態(tài)學檢查。如果僅靠儀器法進行血細胞分析，不復檢可能會造成以下問題：漏診：白血病、傳單及寄生蟲感染等誤診：貧血、血小板減少性紫癜等 不能反映血細胞形態(tài)學病理改變醫(yī)療糾紛時缺乏自我防護機制第三頁，共33頁幻燈片第四頁，共33頁幻燈片 血細胞分析儀的作用主要是血細胞數量和形態(tài)大致正常時，儀器檢測結果可直接報告,這樣就可以使白細胞數量和形態(tài)正常的標

2、本免予鏡檢,減少了工作壓力。 當血細胞分析儀檢測提示細胞數量和形態(tài)異常時，需進一步鏡檢予以確認。第五頁，共33頁幻燈片 制定一套適合本實驗室的血細胞復檢規(guī)則，制定一套適合本實驗室的血細胞復檢規(guī)則，當儀器分析的結果未觸發(fā)制定的復檢規(guī)則當儀器分析的結果未觸發(fā)制定的復檢規(guī)則時，可視為儀器所得白細胞分群（類）結時，可視為儀器所得白細胞分群（類）結果能客觀反映血象狀況無須鏡檢反之，果能客觀反映血象狀況無須鏡檢反之，當儀器分析的結果觸發(fā)制定的復檢規(guī)則時，當儀器分析的結果觸發(fā)制定的復檢規(guī)則時，則需要涂片鏡檢因此，合理的篩選標準則需要涂片鏡檢因此，合理的篩選標準的制定是正確使用儀器，保證結果質量的的制定是正確

3、使用儀器，保證結果質量的重要因素重要因素第六頁，共33頁幻燈片lCAP問卷調查：263個實驗室，涂片復檢率中位數為26.7%。l國內：復檢率在0-15.0%，大部分醫(yī)院血涂片復檢率低于5.0%，或者未實施顯微鏡觀察。有些實驗室過分依賴自動血細胞分析儀分析結果而未做或極少做血涂片復檢，導致發(fā)生較高的漏診率，影響臨床診治療效。 第七頁，共33頁幻燈片 2005年國際血液學復檢專家組通過對13298份血液標本進行詳細分析后，制定了“41條自動血細胞分析和分類復檢規(guī)則”，結果表明，真陽性率為11.2%，假陽性率為18.6%，真陰性率為67.3%，假陰性率為2.9%，血涂片的復檢率為29.8%。第八頁，

4、共33頁幻燈片 血液學檢查部門需制定如下標準/程序并形成文件（不僅限于如下標準/程序）： 1、血細胞分析的顯微鏡復檢標準（檢測結果出現(xiàn)異常計數、警示標志、異常散點圖等情況時結果的確認方法和程序）；血涂片制備和檢驗的書面程序/過程； 2、血液計數結果超出儀器線性范圍時宜規(guī)定識別和解決方法（如對血樣進行適當稀釋和重復檢驗）；對于檢測樣本存在一些影響因素（如有核紅細胞、紅細胞凝集、小紅細胞、紅細胞有內容物或瘧原蟲、血小板凝塊、巨型血小板等）時，對儀器檢測結果可靠性的判定和糾正措施需有書面規(guī)定。第九頁，共33頁幻燈片 1、根據所用儀器對細胞形態(tài)的識別能力的差異，建立復檢規(guī)則； 2、篩選標準所涉及的參數

5、，所用儀器能夠提供； 3、在保證關鍵病理細胞不漏檢的原則下，盡量減少涂片復檢率； 4、具有診斷意義的重要參數不能出現(xiàn)假陰性，其他參數的整體假陰性率也應低于5.0%，國際血液學復檢專家組認為5.0%是保證患者檢測結果安全性的最大可接受的假陰性率；第十頁，共33頁幻燈片 5、在較低假陰性率的前提下降低假陽性率，假陽性率過高會無意義地增加工作量，延遲檢驗報告的發(fā)放時間。 6、血液病或臨床醫(yī)師提出閱片時必須涂片鏡檢。第十一頁，共33頁幻燈片第十二頁，共33頁幻燈片l根據衛(wèi)生部醫(yī)政司頒布的根據衛(wèi)生部醫(yī)政司頒布的全國臨床檢全國臨床檢驗操作規(guī)程驗操作規(guī)程和國家衛(wèi)生行業(yè)標準和國家衛(wèi)生行業(yè)標準白細白細胞分類計數

6、參考方法胞分類計數參考方法制定的血涂片檢制定的血涂片檢測操作程序，對參加實驗的人員進行培測操作程序，對參加實驗的人員進行培訓訓, ,統(tǒng)一判斷標準，并研討可能出現(xiàn)的問統(tǒng)一判斷標準，并研討可能出現(xiàn)的問題和解決的措施。題和解決的措施。第十三頁，共33頁幻燈片包括校準、靈敏度調節(jié)和報警信息系統(tǒng)參數設置。評估前，由供應商工程師用全血校準物對所用的儀器進行校準，并將儀器的靈敏度調整到合適水平，使其性能評價符合制造廠家的標準。實驗室用全血質控物進行嚴格的室內質量控制,保證結果的準確性和穩(wěn)定性。 第十四頁，共33頁幻燈片l國際血液學復審協(xié)作組要求各研究單位完國際血液學復審協(xié)作組要求各研究單位完成的標本量至少成

7、的標本量至少10001000例，其中包括例，其中包括80%80%首首檢標本、檢標本、20%20%復檢標本，用于驗證復檢標本，用于驗證DeltaDelta規(guī)規(guī)則。這些標本從日常檢測中隨機抽取則。這些標本從日常檢測中隨機抽取, ,而且而且要有一定數量標本中含有幼稚細胞。國內要有一定數量標本中含有幼稚細胞。國內實驗室研究時抽取的病例應包括門診、急實驗室研究時抽取的病例應包括門診、急診和住院患者。診和住院患者。第十五頁，共33頁幻燈片 (1)新生兒首次檢測標本； (2)WBC, RBC, HGB, PLT, Retics超過儀器線性范圍：稀釋標本，重新檢測； (3)WBC, PLT低于實驗室驗證的儀器

8、線性范圍：按照實驗室SOP進行檢測； (4)WBC, RBC, HGB, PLT未檢測出結果：檢查標本是否血凝，重新檢測標本，如果仍然無結果，應用其他方法檢測；第十六頁，共33頁幻燈片 (5)WBC 30.0，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (6)WBC 30.0，三天內DELTA CHECK未通過：涂片鏡檢； (7)PLT 1000，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (8)PLT為任意值，DELTA CHECK未通過：涂片鏡檢； (9)HGB 7g/dl 或高于不同年齡和性別參考區(qū)間上限 2g/dl ，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢，必要時檢測標本的完整性；第十七頁，共33頁幻燈片(10)MCV

9、 105fl (成人)，同時為首次檢測標本，而且標本采集時間小于24小時：涂片鏡檢； (11) MCV 105fl (成人) 而且標本采集時間大于24小時：涂片檢查RBC是否有大細胞相關的改變，如無大細胞相關的改變，通知臨床重新抽新鮮血標本；如無新鮮全血，則必須在報告中備注標本采集時間超過24小時；(12) MCV為任意值，DELTA CHECK未通過，同時標本采集時間小于24小時：檢測標本的完整性及是否標本信息錯誤；(13) MCHC=生物參考區(qū)間上限2 0g/L：檢查標本是否存在高脂血癥、溶血、RBC聚集及球形紅細胞； (14) MCHC22同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (16)未分類或

10、分類不完整：涂片鏡檢，手工分類； (17) Neut # 20.0同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (18)Lymph # 5.0 (成人) 或7.0 (1.5 (成人) 或 3.0 (2.0同時為首次檢測標本：涂片鏡檢；第十九頁，共33頁幻燈片 (21) Baso # 0.5同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (22) NRBC #為任意值，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (23) Retic Absolute # 0.100，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (24)懷疑性報警（幼稚粒細胞/桿狀核細胞報警除外），成人同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (25) 懷疑性報警，兒童同時為首次檢測標本：涂片

11、鏡檢 ；第二十頁，共33頁幻燈片 (26)WBC不可信報警：檢查標本的完整性，重新檢測，必要時涂片鏡檢； (27)RBC碎片：涂片鏡檢； (28)雙相RBC同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (29)阻抗RBC：檢查白細胞直方圖/散點圖是否異常，涂片鏡檢是否存在RBC形態(tài)異常； (30)PLT聚集報警，任意值：檢查標本是否血凝，涂片鏡檢評估血小板數量，如果發(fā)現(xiàn)血小板明顯聚集，按照實驗室SOP執(zhí)行；第二十一頁，共33頁幻燈片 (31)PLT報警（包括PLT & MPV 報警，但除外血小板聚集）：涂片鏡檢； (32)未成熟粒細胞報警，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； (33) 未成熟粒細胞報警：

12、歷史數據顯示也存在未成熟粒細胞, 涂片鏡檢； (34)核左移：按照實驗室SOP執(zhí)行； (35)不典型/變異淋巴細胞報警，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢； 第二十二頁，共33頁幻燈片(36) 不典型/變異淋巴細胞報警: 歷史數據顯示也存在不典型/變異淋巴細胞, 涂片鏡檢；(37)原始細胞報警，同時為首次檢測標本：涂片鏡檢；(38) 原始細胞報警:3-7天內的歷史數據顯示不存在原始細胞, 按照實驗室SOP執(zhí)行；(39) 原始細胞報警: 歷史數據顯示也存在原始細胞, 涂片鏡檢；(40)有核紅細胞報警：涂片鏡檢，如發(fā)現(xiàn)有核紅細胞，計數其數量，必要時更正WBC計數結果；(41) Retics圖形異常：檢查

13、儀器的輸出，如果是儀器吸樣時出現(xiàn)問題，重新進行檢測，如果問題持續(xù)存在，涂片鏡檢；第二十三頁，共33頁幻燈片-涂片鏡檢陽性判斷標準(The International Consensus Group for Hematology Review)：（1）Morphologya. RBC morphology at either 2+ / Moderate or greater. The only exception is Malaria, where any finding will be considered a positive finding.b. PLT morphology (giant

14、 platelets) at either 2+ / Moderate or greater.c. Platelet Clumps at rare / occasionald. Dohle bodies at either 2+ / Moderate or greatere. Toxic granulation at either 2+ / Moderate or greaterf. Vacuoles at either 2+ / Moderate or greater第二十四頁，共33頁幻燈片 （2） Abnormal Cell Types a. Blast 1b. Meta 2 c. My

15、elo / Promyelocyte 1d. Atypical Lymphs 5 e. NRBC 1f. Plasma Cells 1第二十五頁，共33頁幻燈片 （1）紅細胞明顯大小不均（指紅細胞大小相差1倍以上）；中空淡染（指1/2淡染區(qū)的紅細胞多于30%），且只要發(fā)現(xiàn)瘧原蟲均認為是陽性； （2）巨大血小板多于15%； （3）見到血小板聚集； （4）Dohle小體的粒細胞10%； （5）中毒顆粒中性粒細胞10%； （6）空泡變性粒細胞10%；第二十六頁，共33頁幻燈片 （7）原始和幼稚細胞1%； （8）早幼粒細胞和中幼粒細胞1%； （9）晚幼粒細胞2%； （10）異形淋巴細胞5%； （11）

16、有核紅細胞1%； （12）漿細胞1%。第二十七頁，共33頁幻燈片 以雙盲法分別進行儀器分析和血涂片鏡檢。鏡檢內容包括：WBC分類計數：計數200個WBC，計算各類細胞的百分比，并進行形態(tài)觀察;WBC和PLT數量評估; RBC和PLT的大小、染色及形態(tài)； 有無巨大PLT及PLT聚集; 其他異常:NRBC、RBC冷凝集及寄生蟲等。第二十八頁，共33頁幻燈片 涂片鏡檢為陽性判斷標準，將擬定的初步復檢規(guī)則進行評估，計算出真陽性（TP）、真陰性（TN）、假陽性（FP）、假陰性（FN）和血涂片復檢的比率。真陽性為至少觸發(fā)1條血細胞復檢規(guī)則且鏡檢符合涂片鏡檢陽性判斷標準，鏡檢形態(tài)學異常與所觸發(fā)的規(guī)則不需要一

17、一對應；真陰性為未觸發(fā)復檢規(guī)則且鏡檢陰性；假陽性為觸發(fā)復檢規(guī)則而鏡檢無形態(tài)學異常發(fā)現(xiàn)；假陰性為未觸發(fā)復檢規(guī)則而鏡檢符合涂片鏡檢陽性判斷標準，涂片復檢率=真陽性比率+假陽性比率。第二十九頁，共33頁幻燈片實驗室可根據所用血細胞分析儀的性能特點、實驗室可根據所用血細胞分析儀的性能特點、醫(yī)院規(guī)模、病種差異和實驗室常規(guī)工作的醫(yī)院規(guī)模、病種差異和實驗室常規(guī)工作的質量管理要求等，制定相應的自動血細胞質量管理要求等，制定相應的自動血細胞分析和白細胞分類涂片復檢預期指標分析和白細胞分類涂片復檢預期指標, ,如假如假陽性率陽性率20%20%、假陰性率、假陰性率5%5%、復檢率、復檢率30%30%等。等。第三十頁，共33頁幻燈片 根據初步復檢規(guī)則的評估結果和臨床實際工作需要，在保證具有診斷意義的重要參數如各種白血病細胞不能出現(xiàn)漏檢，其他參數整體假陰性率不超過5.0%的前