基于多評(píng)價(jià)指標(biāo)的萎胃寧濃縮丸提取工藝研究

1、基于多評(píng)價(jià)指標(biāo)的萎胃寧濃縮丸提取工藝研究(1)                      作者：魏舒暢,武曉玉,金輝,李曙光【摘要】  目的 優(yōu)選萎胃寧濃縮丸制劑的最佳提取工藝。方法 以芍藥苷提取量、正丁醇浸出物、乙酸乙酯浸出物為指標(biāo),采用均勻設(shè)計(jì)法篩選最佳提取工藝。結(jié)果 乙醇濃度60%,提取次數(shù)2次,溶劑用量16倍,每次提取時(shí)間65 min為最佳提取工藝。結(jié)論 所得提取工藝穩(wěn)定性好,可

2、用于萎胃寧濃縮丸的制備。 【關(guān)鍵詞】  均勻設(shè)計(jì)；芍藥苷；萎胃寧濃縮丸；提取工藝    Abstract：Objective To find out the optimum extraction process for Weiweining pill. Methods The extraction process was studied by uniform design with the yield of extracted Paeoniflorin, n-butanol extract and ethyl acetate extract as mar

3、kers. Results The optimum extraction process was adding 16 times amont of 60% alcohol, refluxing and extracting for 2 times, 65 min for each time. Conclusion This extraction process shows good stability and is available for the production of Weiweining pill.    Key words：uniform desig

4、n；Paeoniflorin；Weiweining pill；extraction press     近數(shù)十年來,經(jīng)國內(nèi)學(xué)者的不懈努力,在慢性萎縮性胃炎(CAG)的治療方面打破了以往胃黏膜萎縮腺體不可逆轉(zhuǎn)的局面,并得出中醫(yī)治療優(yōu)于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療的結(jié)論1。萎胃寧以半夏瀉心湯為主、旋覆代赭湯為輔組方。為擴(kuò)大該處方的臨床使用面,減小服用劑量,擬將該方由蜜丸制成濃縮丸。本試驗(yàn)主要研究處方中需提取部分藥材的提取工藝,為濃縮丸的后續(xù)研究做好前期工作。1  儀器與試藥    高效液相色譜儀(Agileng1100化學(xué)工作站,Ag

5、ileng1100二元泵,Agileng1100柱溫箱,Agileng1100 DAD檢測(cè)器,安捷倫科技有限公司),電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司),真空抽濾泵(鄭州杜甫儀器廠),真空干燥箱(上海益恒實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)。    白芍、黨參、北山楂、黃芩、黃連等藥材購自蘭州黃河藥市,經(jīng)甘肅中醫(yī)學(xué)院生藥教研室鑒定均為中華人民共和國藥典品種；芍藥苷對(duì)照品由中國藥品生物制品鑒定所提供(批號(hào)110736-200617)。95%乙醇、正丁醇、乙酸乙酯均為分析純。2  方法與結(jié)果2.1  因素水平的選擇    以乙醇濃度

6、、提取次數(shù)、提取時(shí)間、溶劑用量為考察因素,各因素水平的取值見表1。表1  因素水平(略)2.2  提取樣品的制備    采用U7(76)均勻設(shè)計(jì)表安排試驗(yàn)2(見表2)。稱取處方量白芍、黨參、生山楂、黃芩、甘草等需提取藥材14份,每份96 g,用乙醇回流提取。每試驗(yàn)號(hào)作平行樣2份。將14份提取液低速離心(3 200 r/min),離心液水浴回收乙醇并用容量瓶定容到1 000 mL,備用。表2  試驗(yàn)安排表(略)2.3  正丁醇浸出樣品的制備    將“2.2”項(xiàng)下定容好的樣品液搖勻后精確量取50

7、mL,共14份,水浴揮去乙醇后用水飽和的正丁醇萃取,每次20 mL,萃取4次,合并萃取液,回收正丁醇,殘?jiān)煤嫦渲?0 烘至恒重,取出,冷卻至室溫后精密稱量,結(jié)果見表3。2.4  乙酸乙酯浸出樣品的制備   將“2.2”項(xiàng)下定容好的樣品液搖勻后精確量取50 mL,共14份,水浴揮去乙醇后用水飽和的乙酸乙酯萃取,每次20 mL,萃取4次,合并萃取液,回收乙酸乙酯,殘?jiān)煤嫦渲?0 烘至恒重,取出,冷卻至室溫后精密稱量,結(jié)果見表3。本篇論文由網(wǎng)友投稿，讀書人只給大家提供一個(gè)交流平臺(tái)，請(qǐng)大家參考，如有版權(quán)問題請(qǐng)聯(lián)系我們盡快處理。2.5  芍藥苷提取量的測(cè)定3采

8、用HPLC法,色譜柱：Hypersil-ODS C18 (250 mm×4.6 mm, 5 m),流動(dòng)相：乙腈-水-磷酸(15850.02),檢測(cè)波長：230 nm,柱溫：25 ,流速：1.0 mL/min。2.6  數(shù)據(jù)處理    將所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS10.0采用向后剔除法進(jìn)行多元線性回歸,可信限95%。分析結(jié)構(gòu)如下：以正丁醇萃出物量為Y,得方程Y0.4211.60×10-2C1.068×10-3D,以乙酸乙酯萃出物量為Y,得方程Y0.1425.244×10-3C5.17×10-4D,以芍藥苷提取量

9、為Y,得方程Y0.3591.176×10-2C1.857×10-3D。    從數(shù)據(jù)處理結(jié)果可知,溶劑用量與提取時(shí)間在選定的取值范圍內(nèi)對(duì)提取的結(jié)果無顯著影響,而乙醇濃度、提取次數(shù)對(duì)3個(gè)考察指標(biāo)均有顯著影響。綜合3種結(jié)果,提取工藝最后確定為：16倍量60%乙醇,提取次數(shù)2次,每次65 min。3  優(yōu)化工藝復(fù)核    按處方比例稱取藥材5份,每份96 g,回流提取,分別制備正丁醇萃出物、乙酸乙酯萃出物并稱重,測(cè)定芍藥苷提取量,結(jié)果見表4。表4  提取工藝復(fù)核結(jié)果(略)  

10、60; 經(jīng)5次復(fù)核試驗(yàn),正丁醇萃出物量、乙酸乙酯萃出物量、芍藥苷提取量的平均值均高于工藝優(yōu)化時(shí)的各試驗(yàn),顯示所得工藝基本穩(wěn)定,芍藥苷平均轉(zhuǎn)移率為78.44%。4  討論    中藥復(fù)方成分復(fù)雜,在工藝篩選過程中如選用一種物質(zhì)作為評(píng)價(jià)指標(biāo)可能會(huì)由于評(píng)價(jià)指標(biāo)的代表性差而導(dǎo)致所得工藝缺乏嚴(yán)謹(jǐn)性。本試驗(yàn)根據(jù)處方藥材中皂苷類、黃酮類成分較多的實(shí)際情況,采用不同溶劑浸出物和單一化合物同時(shí)作為評(píng)價(jià)指標(biāo),代表性強(qiáng),所得工藝更加合理。    均勻設(shè)計(jì)與正交設(shè)計(jì)相比雖然舍棄了“整齊可比”的特點(diǎn),但試驗(yàn)點(diǎn)均勻分散,具有試驗(yàn)次數(shù)少、容納水平數(shù)多的優(yōu)點(diǎn),由于在不增加試驗(yàn)次數(shù)的同時(shí)可對(duì)考察因素設(shè)置較多的取值,因此,能降低試驗(yàn)設(shè)計(jì)中確定考察因素取值范圍時(shí)的難度。本試驗(yàn)采用均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化提取工藝,擴(kuò)大了乙醇濃度、溶劑用量、提取時(shí)間的取值范圍,可使所得工藝更加合理。    由于溶劑用量與提取時(shí)間對(duì)提取的結(jié)果無顯著影響,結(jié)合藥材對(duì)溶劑的吸收量和處方中成分性質(zhì),溶劑用量選16倍,提取時(shí)間選130 min?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】