畜禽血常規(guī)檢驗1-1204

1、畜禽血常規(guī)檢驗（一）臨床獸醫(yī)學教研室內診組臨床獸醫(yī)學教研室內診組20122012年年4 4月月西南大學榮昌校區(qū)內容實驗目的與要求1血樣的采取與抗凝2血細胞計數(shù)檢查3西南大學榮昌校區(qū)目的與要求v掌握動物血樣的采取與抗凝方法。掌握動物血樣的采取與抗凝方法。v掌握血紅蛋白測定、紅細胞及白細胞計數(shù)的操掌握血紅蛋白測定、紅細胞及白細胞計數(shù)的操作方法與注意事項。作方法與注意事項。西南大學榮昌校區(qū)一、血樣的采取與抗凝1、血樣的采取 采血前的準備：采血用應事先消毒滅菌、干燥處理。采血部位應剪毛按常規(guī)消毒。 少量用血，一般可在耳尖、冠頂及靜脈末梢等處進行采取。 多量用血，大動物可在頸靜脈處進行采?。回i可在前腔靜

2、脈處采取；禽類在翅內靜脈處采取，必要時可進行心臟穿刺采取。小動物一般采用心臟采血。西南大學榮昌校區(qū)各種動物的采血部位采血部位畜種采血部位畜種頸靜脈馬、牛、羊耳靜脈豬、羊、犬、貓、實驗動物前腔靜脈豬翼下肱靜脈家禽隱靜脈犬、貓、羊蹼間靜脈鴨、鵝前肢頭靜脈犬、貓、豬冠或肉髯雞心臟兔、家禽、豚鼠斷尾豬、實驗動物西南大學榮昌校區(qū)西南大學榮昌校區(qū)2、血樣的抗凝 獸醫(yī)臨床常用的抗凝劑、使用方法及用圖，見下表。抗凝劑抗 凝 機 制常用濃度使 用 方 法用 途肝 素阻止凝血酶元轉化為凝血酶而阻止血凝0.51%溶液配制后應及時使用，每10ml血液加入0.10.2ml。適用于多數(shù)血液實驗診斷檢驗，不宜用于血涂片檢查

3、。檸檬酸鈉（枸櫞酸鈉）與鈣離子形成非離子的可溶性化合物而阻止血凝3.8%溶液每10ml血液加入1ml。適用于紅細胞沉降率、輸血用抗凝，但不宜用于血液生化指標測定。EDTA-Na2螯合血中鈣離子而阻止血凝10%溶液每10ml血液加入0.10.2ml。適用與一般血液學檢查，不宜用于鈉、鈣的測定。草酸鹽合劑（草酸銨草酸鉀）與鈣離子結合，形成不溶解的草酸鈣而阻止血凝12%的草酸鹽溶液取此液先作抗凝瓶。1ml此液可抗凝10ml血樣（制作抗凝瓶應小于80）。有毒不能用于輸血的抗凝，不宜用于白細胞分類計數(shù)與血小板計數(shù)。肝素西南大學榮昌校區(qū)血液學檢查項目與采血后可保存的時間檢查項目保存時間（h）檢查項目保存時

4、間（h）白細胞計數(shù)23血紅蛋白含量48紅細胞計數(shù)24紅細胞壓積容量24血小板計數(shù)1紅細胞沉降速率23網(wǎng)織紅細胞計數(shù)23白細胞分類計數(shù)12西南大學榮昌校區(qū)二、紅細胞計數(shù)（RBC） ：顯微鏡計數(shù)法1、原理 血液經(jīng)200倍稀釋后，充入血細胞計數(shù)板，用顯微鏡觀察，計數(shù)一定容積內的紅細胞數(shù)并換算成每升血液中的紅細胞數(shù)。 2、器材與試劑 改良紐巴氏計數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計數(shù)器、0.85%氯化鈉稀釋液。西南大學榮昌校區(qū)3、方法 用5毫升吸管準確吸稀釋液2毫升于試管中，用沙利氏吸管吸取血樣10微升，用脫脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入試管底部，輕輕壓出血液于稀釋液

5、中，再用上清液吸、吹數(shù)次，以洗出沙利氏管內黏附的血細胞，充分混勻后備用。 將稀釋后的血樣用小玻棒取一滴，置于計數(shù)板與蓋玻片交界的邊緣，讓其自然浸入，使稀釋血樣擴散入計數(shù)室內，靜置23分鐘，鏡檢。 計數(shù)時用低倍鏡，依次計數(shù)中央大方格內的四角和正中5個中方格，共80個小方格的紅細胞數(shù)。為避免重復和遺漏，計數(shù)時應按一定順序進行。注意壓在雙線上的紅細胞，遵守“數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下”計數(shù)法則。西南大學榮昌校區(qū)4、計算方法 每每mm3mm3血液內紅細胞總數(shù)血液內紅細胞總數(shù) = 5個中方格內紅細胞數(shù)510200106 = 5個中方格內紅細胞數(shù)1010 單位：單位：個個/ /升升式中式中5 5個中方格換算成

6、1個大方格 10 1個大方格容積為0.1微升，換算成1.0微升 200 血液的稀釋倍數(shù) 106 由微升換算成升注意 防凝、防溶、取樣正確。西南大學榮昌校區(qū)5、正常參考值 健康動物除山羊的紅細胞數(shù)較多外，其他動物的紅細胞數(shù)約為6.010128.01012/L。6、臨床意義 相對增多：脫水、急性胃腸炎、腸便秘、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎、某些傳染病； 絕對增多：紅細胞增多癥，見于代償性機能不全的心臟病及慢性肺部疾病； 減少：各種貧血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性貧血、營養(yǎng)不良性貧血、繼發(fā)性貧血。西南大學榮昌校區(qū)三、白細胞計數(shù)（WBC） ：顯微鏡計數(shù)法1、原理： 用白細胞稀釋液破壞紅細胞后，混

7、勻充入計數(shù)池中，在顯微鏡下計數(shù)一定容積中的白細胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中的白細胞總數(shù)。2、試劑與設備： 改良紐巴氏計數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計數(shù)器、白細胞稀釋液（2%冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液）。西南大學榮昌校區(qū)3、方法： 用1毫升移液管吸取白細胞稀釋液0.4毫升于小試管中，再用沙利氏吸管吸取血樣至20微升處，用脫脂棉擦去吸管周圍多余血液，然后將吸管插入小試管底部，緩慢放出血液后用上清液反復吹洗數(shù)次，以洗凈管內所粘附的血液，充分混勻振蕩，備用。取樣與計數(shù)方法與紅細胞計數(shù)方法相同，計數(shù)在計數(shù)室四角的四個大方格內的白細胞數(shù)。西南大學榮昌校區(qū)4、計算方法： 每升每升

8、血液內白細胞總數(shù)白細胞總數(shù)= 四個大方格白細胞數(shù)41020106 單位：單位：個個/ /升升5、注意事項：初學者容易把塵埃異物與白細胞混淆，可用高倍鏡觀察，白細胞有細胞核的結構，而塵埃異物的形狀不規(guī)則，無細胞結構。西南大學榮昌校區(qū)5、正常參考值（附后表）6、臨床意義 增多：細菌性感染、炎癥、白血病、惡性腫瘤、中毒性疾病。 減少：病毒性傳染病、犬瘟熱、貓泛白血病減少癥、各種疾病晚期;再生障礙性貧血;藥物性降低：磺胺類、氯霉素、青霉素、鏈霉素、氨基比林、水楊酸鈉等;血液原蟲病、血液孢子病。西南大學榮昌校區(qū)各種健康動物血紅蛋白數(shù)、紅細胞數(shù)及白細胞數(shù)參考值動物Hb/(gL-1)RBC/(1012L-1

9、)WBC/(109L-1)水牛123.016.65.910.988.040.30黃牛95.510.07.241.578.432.08乳牛83.77.05.970.869.412.13綿羊92.65.18.421.208.451.90山羊118.010.315.231.0312.470.90豬112.313.75.510.3114.020.93犬133.613.56.570.3410.931.29雞84.930.43.040.28/資料見：安麗英編著.獸醫(yī)實驗診斷.中國農(nóng)業(yè)大學出版社.2000年:25.西南大學榮昌校區(qū)西南大學榮昌校區(qū)西南大學榮昌校區(qū)全自動血液細胞分析儀v 檢驗動物種類多 有12

10、種動物檢測模式，如狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠，并有四種用戶自定義模式。v 適用范圍 寵物醫(yī)院 動物檢疫部門 畜牧獸醫(yī)院 動物園 科研院校實驗中心西南大學榮昌校區(qū)v 操作方便 嵌入式標本處理和測量單元 全新高精度血液處理技術，抗凝全血9.6l 試劑自動加入，能直接感應試劑余量 排堵方便v 20項檢測結果及WBC、RBC、PLT直方圖同屏顯示 9.6l抗凝血只需按“計數(shù)“健即被吸取分析v 結果可靠 界面鼠標操作，參數(shù)支持人工調整 提供配套的動物血檢測專用試劑v 有報告打印功能西南大學榮昌校區(qū)v 主要技術參數(shù) 工作原理：電阻抗法，氰化高鐵血紅蛋白法及無氰化物的SFT法 檢測參數(shù)：白細胞三分群，23項

11、參數(shù)（含WBC、RBC、PLT彩色直方圖） 標準用量：9.6l（全血模式）20l（預稀釋模式） 檢測速度：40樣本/小時，可24小時開機有自動休眠及喚醒功能 結果存儲：主機自動存儲12000份樣本的全部參數(shù)包括直方圖、歷史數(shù)據(jù)的管理查詢更便捷 操作語言：全中文 動物種類：狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠等八種和四種用戶自定義模式 質控方式：X-B、L-J、 、SD、CV 標準方式：自動校準和人工校準 顯示屏：大屏幕彩色液晶顯示，640 480分辨率 信息：支持多種快速中文輸入 接口：一個并行打印機接口，兩個USB接口，兩個PS/2接口，兩個RS232接口（支持聯(lián)網(wǎng)） 電源：AC220V 50HZ西南

12、大學榮昌校區(qū)血常規(guī)化驗單 v“血常規(guī)”檢查主要有四項指標：白細胞數(shù)（WBC計數(shù)）、紅細胞數(shù)（RBC計數(shù)）、血紅蛋白（HB）和血小板數(shù)（PLT計數(shù)）。 白細胞數(shù)（WBC），它的多少反映身體抵御、殺滅致病微生物能力的強弱。如果減少通常是由于病毒感染、再生障礙性貧血、傷寒或瘧疾、營養(yǎng)不良、極度衰竭，以及脾功能亢進和自身免疫性疾病等。增多主要是急性化膿感染、炎癥存在、嚴重的組織損傷及大量的血細胞破壞、急性大出血和溶血、白血病及某些腫瘤等。 RBC、HB分別是紅細胞和血紅蛋白，是反映貧血的兩個指標。當發(fā)生貧血、白血病、失血等時，會減少；當發(fā)生嘔吐、腹瀉、缺氧和心肺疾病時增多。 紅細胞（RBC）計數(shù)，增多

13、的病理性原因有嚴重的肺氣腫、肺原性心臟病、真性紅細胞增多癥、慢性一氧化碳（CO）中毒等。減少的病理性原因有缺鐵性貧血、溶血性貧血、營養(yǎng)不良性貧血、再生障礙性貧血、失血性貧血等。 血紅蛋白（HB），其病理性原因與“紅細胞數(shù)”相同，但在各種貧血時，由于紅細胞與血紅蛋白含量不同，二者的減少程度可以不一致。因此，同時測定紅細胞和血紅蛋白，對貧血類型的鑒別有重要意義。 血小板數(shù)（PLT），它在止血、凝血過程中起著十分重要的作用。正常畜禽每天血小板數(shù)有一定的波動，午后較早晨高，高原地區(qū)較平原地區(qū)高，妊娠中晚期升高，分娩后12天降低；劇烈活動和飼喂后升高，休息后又恢復到原來水平。如果低于正常值，就要引起重視

14、，因減少常見于急性白血病、難治性貧血、脾功能亢進、彌漫性血管內凝血等；如果大于正常值，也不能馬虎，因在慢性粒細胞白血病、溶血性貧血及急性化膿性感染時，是增多的。 西南大學榮昌校區(qū)v 當血常規(guī)化驗檢查的這些指標偏離（指標或高、或低）正常值范圍時，說明受檢者的身體存在某一方面的病變。如果HGB值低于正常值，就說明有貧血存在，應該進一步檢查是什么性質的貧血。如果HGB值高于正常值，可能是因為患有血紅蛋白增高癥或者血液被濃縮的緣故。白細胞代表的機體的防御系統(tǒng)功能，其總數(shù)增高時，多表明有炎癥、感染存在。此時患病動物多有發(fā)熱癥狀，如果WBC值過高，并伴有嚴重的貧血，需進一步做骨髓穿刺檢查，排除白血病的可能

15、。WBC值低于正常值，可由接受放射線、病毒感染藥物及化學物質中毒等引起。PLT減少時，可能會有出血，如血小板減少性紫癜等；增高時，說明血液呈高凝狀態(tài)，易發(fā)生血栓。其他檢查項目發(fā)生異常時，同樣提示機體出現(xiàn)了某一病變。西南大學榮昌校區(qū)v血細胞直方圖一、WBC直方圖：v是反映WBC體積大小的頻率分布圖。正常人WBC直方圖可見兩個明顯分離的峰，左峰為小細胞群（以淋巴細胞為主），右峰為大細胞群（以中性粒細胞為主），兩峰之間為中間細胞群（包括嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞）。小細胞群峰又高又陡，大細胞群較高較寬，中間細胞群一般為有一定寬度的平坦區(qū)。小細胞群峰越高，淋巴細胞比率越大；大細胞群峰越高，中

16、性粒細胞比率越大；而嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞增多或出現(xiàn)病理性細胞時，中間細胞群峰值增高。例如白血病時外周血中出現(xiàn)大量幼稚細胞，多分布于中間細胞群及其附近，使峰尖增高，不同白血病類型出現(xiàn)特異性直方圖。v二、RBC直方圖：v是反映RBC體積大小或任何相當于RBC體積大小范圍內粒子的分布圖。正常RBC直方圖為偏態(tài)分布曲線圖，峰值表示一定數(shù)量的RBC體積的平均值，與RBC平均體積基本一致，正常人峰值一般在82-94fl之間。直方圖峰值變低，基底部增寬，說明RBC體積大小不一，與紅細胞分布增大一致。直方圖左移，提示RBC體積較小，如缺鐵性貧血病人的RBC直方圖明顯左移，基底部顯著增寬。直方圖

17、右移，提示RBC體積較大，見于巨幼紅細胞性貧血和新生兒。RBC直方圖有時出現(xiàn)雙峰，是貧血治療有效的證據(jù)，多見于缺鐵性貧血、巨幼紅細胞性貧血病人治療后。v三、PLT直方圖: v是反映PLT體積大小分布頻率的分布圖，正常PLT直方圖呈左偏態(tài)分布，峰值一般在6-10fl之間，直方圖左移，提示PLT體積偏小，直方圖右移，提示PLT體積偏大。直方圖尾部抬高或在20-30fl處出現(xiàn)另一個波峰，提示血液中可能存在較多的小紅細胞、紅細胞碎片、巨大血小板、血小板凝集及纖維蛋白等。缺鐵性貧血病人的PLT直方圖尾部明顯抬高、PLT減少及其治療過程中的直方圖多呈波浪狀。西南大學榮昌校區(qū)DiagramThemeGall

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