醫(yī)療器械微生物實驗室裝修建設(shè)方案

1、醫(yī)療器械微生物實驗室裝修建設(shè)方案- 喜格隨著醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的實施，對無菌和植入類醫(yī)療器械的微生物實驗室已做出相應(yīng)要求，其中醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范無菌醫(yī)療器械實施細則和醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范植入性醫(yī)療器械實施細則中第八章監(jiān)視和測量規(guī)定：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當建立符合要求并與生產(chǎn)產(chǎn)品相適應(yīng)的無菌檢驗室。但實際還包括陽性對照室、微生物限度檢查室等，總體稱之為微生物實驗室更加符合實際。目前醫(yī)療器械微生物實驗室法規(guī)要求起步晚，依據(jù)不夠細化，加之產(chǎn)品的復(fù)雜性，因此微生物實驗室的規(guī)范化設(shè)計并不成熟，SICOLAB對微生物實驗室的設(shè)計和布局進行初步探討。(1) 微生物實驗室功能醫(yī)療器械的檢驗通常分為物理性

2、能、化學(xué)性能、生物性能檢驗。理化檢驗需要設(shè)置理化檢驗室或在相應(yīng)工位設(shè)檢驗裝置；生物性能檢驗，對其中的生物學(xué)評價檢驗，企業(yè)一般不設(shè)檢驗室，而是委托檢測機構(gòu)進行檢測，而微生物檢測按法規(guī)要求需自行建立微生物檢驗室。微生物實驗室應(yīng)實現(xiàn)以下功能：(1)按照該產(chǎn)品的標準要求(引用GB/方法或藥典方法)，對產(chǎn)品進行無菌檢驗；(2) 對潔凈環(huán)境( 空氣、水、工藝用氣、臺面、手) 進行微生物檢驗；(3) 對原材料、半成品、成品的初始污染菌檢測；(4) 部分含藥的醫(yī)療器械還需滿足藥品檢驗需要( 無菌、微生物限度、抗生素效價的微生物檢定 ) ，如含藥敷料、含有慶大霉素的骨水泥、藥物涂層產(chǎn)品等；此外，部分產(chǎn)品標準規(guī)定

3、需要進行細菌內(nèi)毒素檢查( 如注射器、輸液器等一次性使用無菌醫(yī)療器械產(chǎn)品，氧合器、血液透析器、冠脈支架系統(tǒng)等部分人工器官和植入物產(chǎn)品) 該類檢查雖不是微生物檢查，但對檢查環(huán)境有較高的要求的，操作間應(yīng)設(shè)有紫外線燈，并有控制溫度、濕度的設(shè)備。應(yīng)有書面操作規(guī)程，并有防止污染的措施。2. 微生物實驗室設(shè)計要求SICOLAB微生物實驗室設(shè)計包括以下幾個方面：人員，培養(yǎng)基，菌種，設(shè)備，實驗室的布局和運行，器具及工作服洗滌、存放要求，更衣流程。人員從事微生物實驗工作的人員應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識的教育背景。檢驗人員數(shù)量和素質(zhì)應(yīng)能滿足檢驗工作的需要。檢驗人員必須熟悉相關(guān)檢測方法、程序、 檢測目的和結(jié)果評價。

4、 保證人員在上崗前接受勝任工作所必須的設(shè)備操作、微生物檢驗技術(shù)和實驗室生物安全等方面的培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后方可上崗。培養(yǎng)基培養(yǎng)基質(zhì)量穩(wěn)定可靠，有良好的促菌生長能力，具備適宜的滅菌方式，在規(guī)定的條件和環(huán)境下貯藏，通過不同菌種的接種試驗并觀察生長狀態(tài)，進行靈敏度試驗。菌種標準菌株的復(fù)活和傳代應(yīng)當滿足藥典要求。試驗過程中，生物樣本是最敏感的，它們的活性依賴于合適的試驗操作和存儲條件。實驗室菌種的處理和保藏的程序應(yīng)標準化，盡可能減少菌種污染和生長特性的改變。工作菌株的傳代次數(shù)應(yīng)當嚴格控制，不得超過5 代 （從菌種保藏機構(gòu)獲得的標準菌株為第0 代 ） ，防止過度的傳代增加菌種變異的風(fēng)險。設(shè)備完成相應(yīng)的檢定

5、、校準、驗證、確認其性能。對于一些容易造成微生物污染的儀器設(shè)備如水浴鍋、培養(yǎng)箱、冰箱和生物安全柜等應(yīng)定期清潔和消毒。無菌檢查室如果企業(yè)標準引用藥典要求，企業(yè)應(yīng)當按照2010版藥典中（附錄XI H）無菌檢查法要求設(shè)置潔凈間，無菌檢查應(yīng)在潔凈度10000 級下的局部潔凈度100 級的單向流空區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進行，其全部過程應(yīng)當嚴格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影響供試品微生物的檢出。單向流空氣區(qū)、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（ 區(qū) ）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。如企業(yè)標準中引用的GB/T 的無菌試驗方法，還應(yīng)滿足以下要求：無菌室操作臺

6、或超凈工作臺局部應(yīng)符合潔凈度100 級單向流空氣區(qū)域要求。無菌室在消毒處理完畢后，應(yīng)檢查空氣中的菌落數(shù)，方法如下：取直徑約 90m舟養(yǎng)皿，無菌操作注入融化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約20 mL在30 C35 C培養(yǎng) 48h 證明無菌后，取 3 只培養(yǎng)皿在無菌室操作臺或超凈工作臺平均位置打開上蓋，暴露30 min后蓋好置30 C35 C培養(yǎng)48h后取出檢查。3只培養(yǎng)皿上生長的菌落數(shù)平均應(yīng)不超過1 個。微生物限度檢查室微生物限度檢查法（附錄XI J）應(yīng)在潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行。檢驗室單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室 （ 區(qū) ） 懸浮粒子、浮游菌和沉

7、降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。陽性對照（接種）室微生物檢驗需要對標準菌種、檢測菌種進行各種操作。如用于培養(yǎng)基的靈敏度檢查、無菌檢查和微生物限度檢查方法的驗證、陽性對照、抗生素效價的微生物檢定時需要的菌種及菌懸液制備、傳代轉(zhuǎn)接種。這些操作要處理微生物菌種，部分菌種為條件致病菌，特殊情況要用到病原菌。如培養(yǎng)基靈敏度檢查和無菌檢查方法驗證試驗用到菌種為：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉。無抑菌作用供試品陽性對照試驗菌種為金黃色葡萄球菌，有抑菌作用供試品對照試驗菌種為大腸埃希菌、生孢梭菌、白色念珠菌。（ 其實驗室安全級別見表1） 雖然醫(yī)療器械陽性對

8、照（ 接種 ） 室設(shè)計沒有專門的國家或行業(yè)標準，但參考上述衛(wèi)生部文件要求，并根據(jù)實驗室生物安全通用要求GB19489- 2008規(guī)定，危害等級為n定義為能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴重危害的病原體，實驗室感染不導(dǎo)致嚴重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險有限。對應(yīng)危害等級n應(yīng)采用BS 2實驗室，并配備生物安全柜。一般情況（對應(yīng)大部分醫(yī)療器械品種）： 鑒于常規(guī)陽性對照（接種 ）， 部分種類菌種在人體抵抗力低下 （ 非健康狀態(tài)） 時有致病性，微生物實驗室有一定的生物安全風(fēng)險，建議有條件的企業(yè)盡可能使用生物安全柜，避免對操作者造成危害。特殊情況（ 對應(yīng)

9、少部分醫(yī)療器械品種） ： 屬于如下情況時應(yīng)遵循不低于BSL- 2實驗室設(shè)置，須有相應(yīng)級別生物安全柜：（1） 某些含藥類醫(yī)療器械，尤其是具有抗菌、抑菌功能的，其陽性對照（ 試驗 ） 操作可能產(chǎn)生耐藥性菌種的；（2） 對含藥 （ 尤其是抗生素） 類醫(yī)療器械滅菌能力進行效能驗證需致病性、感染性菌株的；（3） 陽性對照（ 試驗 ）菌種操作中有噴灑、或半流體進行搖動、傾注或攪拌操作時，瓊脂板劃線接種、用吸管接種細胞培養(yǎng)瓶規(guī)定。參考生物安全實驗室建筑規(guī)范根據(jù)需要設(shè)置帶循環(huán)回風(fēng)的空調(diào)凈化系統(tǒng)。溢出、 甩濺可能的。容易產(chǎn)生氣溶膠的行為（對液體將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時，在對） 。對陽性對照（ 試驗

10、 ） 室環(huán)境背景，藥典未作具體，二級生物安全實驗室可不設(shè)空調(diào)凈化系統(tǒng)，也可但為了保護實驗環(huán)境，延長生物安全柜的使用壽命，建議采用機械通風(fēng)，并加裝過濾裝置。排風(fēng)應(yīng)經(jīng)過處理后直排。陽性對照室應(yīng)保持相對負壓，這里需要強調(diào)的是“相對”二字，如陽性間相對臨室為負壓，但對大氣可能實為正壓或負壓。在正壓的情況下，與非潔凈區(qū)或室外大氣間的靜壓差不宜過大，以避免陽性間密閉性意外遭破壞時污染物迅速擴散。培養(yǎng)室用于放置微生物生長的細菌培養(yǎng)箱、真菌培養(yǎng)箱和菌種保存的冰箱。室內(nèi)應(yīng)保持清潔，不得堆放雜物。大多數(shù)企業(yè)將其設(shè)置為一般環(huán)境，但應(yīng)保持潔凈，注意避免使用強效、揮發(fā)性、噴霧型的消毒劑，防止影響微生物的生長。表1. 序

11、號菌種名稱危害程度分類用于樣本檢測用于非感染性材料的實驗1 金黃色葡萄球菌第三類1BSL-2 BSL-12 銅綠假單胞菌第三類 1BSL-2 BSL-13 白色念珠菌第三類BSL-2 BSL-14 大腸埃希菌第三類BSL-2 BSL-15 枯草芽孢桿菌第四類2BSL-1 BSL-16 生孢梭菌第四類3BSL-1 BSL-17 黑曲霉第四類BSL-1BSL-1 注解：1、 BSL-2， BSL-1 代表不同生物安全級別的實驗室12、樣本檢測的定義為：包括樣本的病原菌分離純化、藥物敏感性實驗、生化鑒定、免疫學(xué)實驗、PCRK酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測活動。3、非感染性材料的實驗：如不含致病性活

12、菌材料的分子生物學(xué)、免疫學(xué)等實驗。準備室準備室即試液及培養(yǎng)基配制、滅菌區(qū)域，陽性對照室器皿洗滌、烘干、滅菌、實驗室用品準備等沒有特殊要求的功能間，可為一般清潔環(huán)境。細菌內(nèi)毒素檢查室適用于一次性使用無菌醫(yī)療器械及產(chǎn)品標準中要求進行熱原檢查的產(chǎn)品（ 一次性使用注射器、輸液器、輸液泵等） 。利用鱟試劑與細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機理，以判定供試品中細菌內(nèi)毒素限量是否符合規(guī)定。由于此種方法不能檢定材料致熱，對于非革蘭陰性菌不敏感，故熱原試驗的仲裁法應(yīng)為家兔法。進行細菌內(nèi)毒素含量測定實驗所需的器皿需經(jīng)處理，去除可能存在的外源性干擾，耐熱器皿常用干熱滅菌法（250 C、 30 分鐘以上）去除， 也可采用其他

13、確認不干擾細菌內(nèi)毒素檢查的適宜方法。若使用塑料器械，應(yīng)選用標明無內(nèi)毒素并且對試驗無干擾的器械。試驗過程應(yīng)能防止微生物和內(nèi)毒素污染，目前GB/T 標準中細菌內(nèi)毒素試驗要求需超凈工作臺，醫(yī)療器械法規(guī)和藥典未對背景環(huán)境要求做明確規(guī)定。實驗室的布局和運行SICOLAB（1） 總體原則實驗室布局設(shè)計的基本原則是既要最大可能防止微生物的交叉污染，又要防止檢驗過程對環(huán)境和人員造成危害。應(yīng)充分考慮到微生物實驗室操作規(guī)范和試驗室安全的要求。通常，實驗室劃分成潔凈或無菌操作區(qū)域和活菌操作區(qū)域，同時根據(jù)試驗?zāi)康牟煌诳臻g或時間上有效分隔不相容或相互產(chǎn)生干擾的試驗活動，將交叉污染的風(fēng)險降到最低。根據(jù)相應(yīng)功能，無菌檢

14、查室和微生物限度檢查室在設(shè)計上應(yīng)遵循醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計規(guī)范GB50457-2008， 而陽性對照（試驗 ）室還應(yīng)部分參考生物安全實驗室建筑規(guī)范GB50346-2011規(guī)定。（2） 國家局規(guī)范性文件要求醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)的無菌檢測實驗室原則上應(yīng)設(shè)3 間萬級下的局部百級潔凈室，用作無菌室、陽性對照室和微生物限度室。無菌檢測實驗室原則上應(yīng)當和潔凈生產(chǎn)區(qū)分開設(shè)置，有獨立的區(qū)域、單獨的空調(diào)送風(fēng)系統(tǒng)和專用的人流物流通道及實驗準備區(qū)等。（3） 三地省局具體規(guī)定（ 見表2） 以上為三地省局對醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（ 試行 ） 的三室設(shè)置的進一步解釋和說明，比較三者同異，相同的是三室空調(diào)系統(tǒng)與產(chǎn)品生產(chǎn)區(qū)分開， 無菌檢驗室與微生物限度室的環(huán)境背景，陽性對照室不應(yīng)利用回風(fēng)，陽性室不作背景的硬性要求。1、對于新建實驗室的：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)分別建立萬級下局部百級的無菌檢驗室、微生物限度室和陽性對照室（ 包括人流、物流相對獨立）2、對于實驗室改造的：有較大難度的，無菌檢驗室、微生物限度室可共用（ 但應(yīng)進行清場）8陽性對照室應(yīng)配備百級潔凈工作臺；如陽性對照室如處于非受控環(huán)境，應(yīng)提供驗證資料，并配備生物安全柜8 上海陽性對照、無菌檢查、微生物限度檢查等實