試劑分析性能評(píng)估模板.doc

1、膽固醇測(cè)定試劑盒分析性能評(píng)估資料山東高密彩虹分析儀器有限公司目錄1概述2膽固醇測(cè)定試劑盒及相關(guān)信息3性能評(píng)估資料檢測(cè)限評(píng)估資料線性范圍評(píng)估資料可報(bào)告范圍評(píng)估資料準(zhǔn)確性（回收實(shí)驗(yàn)）評(píng)估資料準(zhǔn)確性（方法學(xué)比對(duì)）評(píng)估資料精密度評(píng)估資料干擾實(shí)驗(yàn)評(píng)估資料配對(duì)差異檢驗(yàn)劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn)以病人標(biāo)本評(píng)價(jià)干擾效果實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性評(píng)估資料參考值（參考區(qū)間）評(píng)估資料4.結(jié)論膽固醇測(cè)定試劑盒分析性能評(píng)估資料1概述本報(bào)告是根據(jù)體外診斷試劑分析性能評(píng)估系列指導(dǎo)原則（征求意見稿）的要 求，提交了膽固醇測(cè)定試劑盒的分析性能評(píng)估資料，對(duì)試劑盒涉及的性能指標(biāo)分別進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估其是否符合設(shè)計(jì)研究的要求。本報(bào)告對(duì)所有的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了總結(jié)，具體數(shù)據(jù)及

2、結(jié)論如下：2膽固醇測(cè)定試劑盒及相關(guān)信息膽固醇測(cè)定試劑盒批號(hào)和規(guī)格用于性能評(píng)估的膽固醇測(cè)定試劑盒批號(hào)分別為* , *, *。本產(chǎn)品設(shè) 計(jì)了兩種包裝規(guī)格，只是大小包裝不同，對(duì)性能評(píng)估結(jié)果沒(méi)有影響。因此只對(duì)其中一 種規(guī)格進(jìn)行了測(cè)定，規(guī)格為：*。校準(zhǔn)品和質(zhì)控品用于性能評(píng)估的校準(zhǔn)品為*;質(zhì)控品為*試驗(yàn)儀器用于性能評(píng)估的儀器為*生化分析儀。3性能評(píng)估資料檢測(cè)限評(píng)估資料實(shí)驗(yàn)要求實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟悉檢測(cè)方法與儀器操作；采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀 器處于正常狀態(tài)；用于實(shí)驗(yàn)的試劑應(yīng)為同一批號(hào)，且在有效期內(nèi)。實(shí)驗(yàn)材料和方法采用5%牛血清白蛋白溶液作為空白樣本，空白樣本應(yīng)不含被測(cè)物。在生化 分析儀上連續(xù)檢測(cè)20次，記

3、錄檢測(cè)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果*生化分析儀測(cè)定值：批號(hào)1：批號(hào)2：批號(hào)3：結(jié)果:計(jì)算20次結(jié)果的均值X與標(biāo)準(zhǔn)差SDo以空白均值加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差作為報(bào)告方法的檢測(cè)限。（X+2SD）平均值1SD2SD檢測(cè)限批號(hào)1:批號(hào)2：批號(hào)3：結(jié)論:三批試劑在*生化分析儀上的檢測(cè)限為：XXXXXX范圍之間，滿足產(chǎn)品設(shè)計(jì)要求。線性范圍評(píng)估資料實(shí)驗(yàn)要求（1）實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)熟悉方法原理與操作，能對(duì)樣本進(jìn)行正確處理，確保儀 器工作狀態(tài)正常，采用適當(dāng)?shù)男?zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。（2）儀器的各項(xiàng)性能指標(biāo)（如精密度）應(yīng)與標(biāo)稱值相符，不存在明顯的攜帶 污染等。（3）應(yīng)使用同批號(hào)試劑及校準(zhǔn)品。（4）樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)驗(yàn)樣本相似，但不可采用含有對(duì)測(cè)

4、定方法具有明確 干擾作用物質(zhì)的樣本，如溶血、脂血、黃疸或含有某些特定藥物的樣本。（5）所選用的濃度水平應(yīng)可覆蓋整個(gè)預(yù)期測(cè)定范圍并包括與臨床有關(guān)的重 要評(píng)價(jià)濃度，如最小測(cè)定濃度或線性范圍的最低限、不同的醫(yī)學(xué)決定水平、最大 測(cè)定濃度或線性范圍的高限等。實(shí)驗(yàn)材料和方法采用5%牛血清白蛋白基質(zhì)溶液制備高值線性樣本，進(jìn)行 11個(gè)等濃度間隔稀 釋，用編碼代表每個(gè)樣本的相對(duì)濃度。用連續(xù)整數(shù)（1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11）代表連續(xù)樣本。數(shù)據(jù)處理時(shí)用樣本號(hào)代替 X值。在同一天內(nèi)用同一批號(hào) 和樣本進(jìn)行線性實(shí)驗(yàn)，對(duì)所有樣本測(cè)定 4次，取其均值進(jìn)行結(jié)果計(jì)算和判斷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果批號(hào)1：線性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表（

5、11個(gè)濃度水平，重復(fù)測(cè)定4次）項(xiàng)目：試劑：樣品：儀器：試劑批號(hào)：校準(zhǔn)品/批號(hào)：樣本號(hào)測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4均值1234567891011操作者:審核者:測(cè)定日期:結(jié)果計(jì)算:數(shù)據(jù)經(jīng)可用性檢查和精密度檢驗(yàn)后，進(jìn)行多項(xiàng)式回歸分析，在檢測(cè)范圍內(nèi), 本試劑結(jié)果為線性，其直線回歸方程：Y = bO + blXr 值二 2。批號(hào)2：線性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表（11個(gè)濃度水平，重復(fù)測(cè)定4次）項(xiàng)目：試劑：樣品：儀器：試劑批號(hào)：校準(zhǔn)品/批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：樣本號(hào)測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4均值1234567891011結(jié)果計(jì)算:數(shù)據(jù)經(jīng)可用性檢查和精密度檢驗(yàn)后，進(jìn)行多項(xiàng)式回歸分析，在檢測(cè)范圍內(nèi), 本試劑結(jié)果為線性

6、，其直線回歸方程：Y = bO + blXr 值二 2。批號(hào)3：線性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表（11個(gè)濃度水平，重復(fù)測(cè)定4次）項(xiàng)目：試齊!J：樣品：儀器：試劑批號(hào)：校準(zhǔn)品/批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：樣本號(hào)測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4均值1234567891011結(jié)果計(jì)算:數(shù)據(jù)經(jīng)可用性檢查和精密度檢驗(yàn)后，進(jìn)行多項(xiàng)式回歸分析，在檢測(cè)范圍內(nèi), 本試劑結(jié)果為線性，其直線回歸方程：Y = bO + blXr 值二 。結(jié)論:結(jié)論：三個(gè)批號(hào)的檢定試劑盒在*分析儀器上進(jìn)行的線性性能評(píng)估，實(shí)驗(yàn)結(jié) 果表明試劑檢測(cè)一級(jí)線性范圍為：噂*之間，符合設(shè)計(jì)要求。可報(bào)告范圍評(píng)估資料 實(shí)驗(yàn)要求（1）實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟悉測(cè)定方法與儀器操作。（2

7、）采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。（3）用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的試劑應(yīng)為同一批號(hào)，并在有效期內(nèi)。實(shí)驗(yàn)材料和方法采用經(jīng)準(zhǔn)確度、精密度和線性實(shí)驗(yàn)合格的同一批試劑，評(píng)估5個(gè)低濃度水平樣本和3個(gè)高濃度水平樣本。（1）低值樣本：將待測(cè)樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物濃度 水平較低）或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋，產(chǎn)生接近于方法線性范圍 低限濃度水平的樣本，要求為5個(gè)濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的 10%o（2）高值樣本：選取含被測(cè)物的高值樣本。使用混合血清或5%牛血清白蛋白 生理鹽水溶液或測(cè)定方法要求的稀釋液對(duì)高值待測(cè)樣本進(jìn)行稀釋，使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，

8、并記錄稀釋倍數(shù)。至少選用三個(gè)高濃度樣本，稀釋倍數(shù) 應(yīng)為方法性能標(biāo)明的最大稀釋倍數(shù)、并適當(dāng)增加或減小稀釋比例。在一次運(yùn)行中將低值樣本重復(fù)測(cè)定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測(cè)定3次。實(shí)驗(yàn)結(jié)果試劑批號(hào)1:可報(bào)告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV%濃度2 濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對(duì)偏差（%）濃度1可報(bào)告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄試劑批號(hào)2：可報(bào)告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV%可報(bào)告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對(duì)偏差（）試劑批號(hào)3：可報(bào)

9、告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV%可報(bào)告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對(duì)偏差（）結(jié)果判定：（1）可報(bào)告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的 CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選 取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報(bào)告范圍低限。（2）可報(bào)告范圍高限：選取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法 標(biāo)示CV值時(shí)的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍數(shù)，方法線性范圍的上限與 最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報(bào)告范圍的高限。結(jié)論：本試劑可報(bào)告范圍為：之間。準(zhǔn)確性(回收實(shí)驗(yàn))評(píng)估資料實(shí)驗(yàn)要求(1)實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)

10、熟悉測(cè)定方法與儀器操作。(2)采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)材料和方法(1)選擇合適濃度的常規(guī)檢測(cè)樣本，分為體積相同的3-4份。(2)在其中2-3份樣本中加入不同量的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)，制成 2-3個(gè)不同加入濃 度的回收樣本，計(jì)算加入的待測(cè)物的濃度。(3)在另一份樣本中加入同樣量的無(wú)被測(cè)物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。采用本試劑待評(píng)價(jià)方法對(duì)回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行2-3次重復(fù)測(cè)定分析，取其均值進(jìn)行計(jì)算。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：批號(hào)1：測(cè)定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%基礎(chǔ)樣本分析樣本1分析樣本2批號(hào)2：測(cè)定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%

11、基礎(chǔ)樣本分析樣本1分析樣本2批號(hào)3：測(cè)定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%基礎(chǔ)樣本分析樣本1分析樣本2結(jié)論:平均回收率：比例系統(tǒng)誤差：-TEa = 5%lTEa 5%>1%,準(zhǔn)確度（回收試驗(yàn)）可接受，符合試劑盒設(shè)計(jì)2O要求。準(zhǔn)確性（方法學(xué)比對(duì)）評(píng)估資料實(shí)驗(yàn)要求（1）按照實(shí)驗(yàn)對(duì)樣品的要求收集處理病人樣品，樣本貯存時(shí)間及條件由被測(cè) 組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣品。（2）樣品應(yīng)來(lái)自于許多病人，并且此病人的疾病對(duì)于被測(cè)組成的影響應(yīng)該是 已知的，不要使用含有干擾此方法的組分或條件（如溶血）樣品。（3）在具有臨床意義范圍內(nèi)即醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)，評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)樣品方

12、法，通 常基本從低于參考范圍的低限到高于參考范圍的高限。分析濃度盡可能在報(bào)告的 濃度范圍內(nèi)均勻分布。商品質(zhì)控物或者校準(zhǔn)物可能存在基質(zhì)效應(yīng)，應(yīng)避免使用。實(shí)驗(yàn)材料和方法（1）每天選擇8個(gè)臨床病人樣本，按1到8的順序編號(hào)。用兩種方法同時(shí)進(jìn)行 實(shí)驗(yàn)，按照1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1的樣本順序進(jìn)行 測(cè)定。（2）以上實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)5天，即至少分析40個(gè)不同的臨床病人樣本。每天實(shí) 驗(yàn)必須進(jìn)行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控。只有在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當(dāng)天的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)才 有效。實(shí)驗(yàn)結(jié)果批號(hào)1：比對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表日期：項(xiàng)目：實(shí)驗(yàn)方法：比較方法：1樣本實(shí)驗(yàn)方法（丫）比

13、較方法（X）編號(hào)結(jié)果1結(jié)果2均值差值結(jié)果1結(jié)果2均值差值12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940批號(hào)2：比對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表日期：項(xiàng)目：實(shí)驗(yàn)方法：比較方法：樣本編號(hào)實(shí)驗(yàn)方法（Y）比較方法（X）結(jié)果1結(jié)果2均值差值結(jié)果1結(jié)果2均值差值12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940批號(hào)3：比對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表日期：項(xiàng)目：實(shí)驗(yàn)方法：比較方法：樣本編號(hào)實(shí)驗(yàn)方法（Y）比較方法（X）結(jié)果1結(jié)果2均值差值結(jié)果1結(jié)果2

14、均值差值12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940數(shù)據(jù)處理（1）以五對(duì)工作散點(diǎn)圖，同時(shí)作一條通過(guò)原點(diǎn)，斜率為1的直線。（2）以（五-痰）對(duì)（%"+4）/2做偏倚圖，此圖的水平中心線為零。（3）以（Yj -又）對(duì)（%+Xi ） /2做偏倚圖。通過(guò)散點(diǎn)圖觀察X （比較方法）和Y （實(shí)驗(yàn)方法）是否呈線性關(guān)系。（4）相關(guān)系數(shù)計(jì)算：利用所有樣本雙份測(cè)定值進(jìn)行相關(guān)系數(shù)計(jì)算，如果（或2力），則認(rèn)為X范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。X的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給以適當(dāng) 補(bǔ)償，并且簡(jiǎn)單的線性回歸可以用來(lái)評(píng)價(jià)斜率和截距

15、。（5）回歸計(jì)算：利所有樣本雙份測(cè)定的有效數(shù)據(jù)，計(jì)算兩個(gè)方法間的線性回 歸方程：Y=a+bXo（6）偏差估計(jì)：在醫(yī)學(xué)決定水平，利用回歸方程計(jì)算預(yù)期偏差，預(yù)期偏差Bx=a+（b-l）X ,相對(duì)偏差二Bx/X。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：根據(jù)試劑設(shè)計(jì)要求，預(yù)期偏差、相對(duì)偏差均在規(guī)定的可接受范圍之內(nèi)。精密度評(píng)估資料實(shí)驗(yàn)要求（1）操作者必須熟悉方法和/或儀器工作原理，了解并掌握儀器的操作步驟 和各項(xiàng)注意事項(xiàng)，能在評(píng)估階段維持儀器的可靠和穩(wěn)定。（2）用于評(píng)估試驗(yàn)的樣品一般常采用臨床實(shí)驗(yàn)室收集的穩(wěn)定和冷凍貯存的 血清（漿）庫(kù)；當(dāng)實(shí)驗(yàn)室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時(shí)，也可考慮使用穩(wěn)定 的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的商品物質(zhì)，如校準(zhǔn)品或質(zhì)

16、控品。（3）評(píng)估精密度時(shí)，應(yīng)至少評(píng)估二個(gè)濃度水平樣本的精密度。當(dāng)二個(gè)濃度的 精密度有顯著差異時(shí)，可增加為三個(gè)濃度。所選樣本濃度應(yīng)在測(cè)量范圍內(nèi)有醫(yī)學(xué) 意義，即至少有一個(gè)濃度在醫(yī)學(xué)決定水平左右。再根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的性質(zhì)在線性區(qū) 間內(nèi)選擇另一個(gè)值。實(shí)驗(yàn)材料和方法由同一個(gè)或一組操作者在同一臺(tái)儀器上進(jìn)行，使用相同的校準(zhǔn)品、相同種類和批 號(hào)的試劑。每天做2個(gè)批次的測(cè)試，每批測(cè)試時(shí)，對(duì)同一樣品作雙份測(cè)量，共做20 天。評(píng)估結(jié)束時(shí)共有40對(duì)，即80個(gè)測(cè)試結(jié)果。從40批次測(cè)量中雙份結(jié)果的差值求 出批內(nèi)精密度。從所有80個(gè)數(shù)據(jù)計(jì)算出批間精密度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 試劑批號(hào)1：表1：精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)日期批次1批次2結(jié)果

17、1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值1234567891011121314151617181920批內(nèi)精密度：表2：批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)計(jì)算測(cè)定日批次1批次2土里土里、2（結(jié)果1-箝米1）-< “口一口 刁、L1-21234567891011121314151617181920求和Si2)*0利用表2中的結(jié)果可計(jì)算出批內(nèi)精密度 Sr：Sr V 41式中I =檢驗(yàn)日數(shù)表3：批間精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)日期第一批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）結(jié)果1（均值-結(jié)果1）:結(jié)果2（均值結(jié)果2）:123456789101112批間精密度Srr ：1314151617181920合計(jì)(1)

18、(5)(2)(6)(3)(7)(4)(8)求出均值，公式為：X ZX/n從上表 3 中得出：(1) (2) (3) (4)/n求出批間精密度，公式為：Srr (均值結(jié)果1)2(均值等果2)2 /( n 1)從上表3中得出Srr V(5) (7) (6) (8)/(n 1)式中n =檢驗(yàn)總數(shù)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間:批內(nèi)變異系數(shù)：批間標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間:批間變異系數(shù)：試劑批號(hào)2：表1：精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)日期批次1批次2結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值1234567891011121314151617181920批內(nèi)精密度：表2：批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)計(jì)算測(cè)定日批次1批次2（結(jié)里

19、 結(jié)果 ）2片果1 結(jié)果2廠1-21234567891011121314151617181920求和2)利用表2中的結(jié)果可計(jì)算出批內(nèi)精密度 Sr：式中I =檢驗(yàn)日數(shù)序號(hào)日期第一批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）結(jié)果1（均值-結(jié)果1）:結(jié)果2（均值結(jié)果2）:1234567891011121314151617181920合計(jì)(1)(5)(2)(6)(3)(7)(4)(8)批間精密度Srr ：求出均值，公式為：X ZX/n從上表 3 中得出：(1) (2) (3) (4)/n求出批間精密度，公式為：Srr (均值結(jié)果1)2(均值等果2)2 /( n 1)從上表3中得出Srr V(5)

20、 (7) (6) (8)/(n 1)式中n =檢驗(yàn)總數(shù)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批內(nèi)變異系數(shù)：批間標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批間變異系數(shù)：試劑批號(hào)3：表1：精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)日期批次1批次2結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值1234567891011121314151617181920批內(nèi)精密度: 表2：批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)計(jì)算測(cè)定日批次1批次2（結(jié)果 結(jié)里 ）2（如果1 - 如果2）1-21234567891011121314151617181920求和2)*0利用表2中的結(jié)果可計(jì)算出批內(nèi)精密度 Sr：I17S,/ 41式中I二檢驗(yàn)日數(shù)表3：批間精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)日期第一

21、批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）結(jié)果1（均值-結(jié)果1）:結(jié)果2（均值結(jié)果2）:1234567891011121314151617181920合計(jì)(1)(5)(2)(6)(3)(7)(4)(8)批間精密度Srr ：求出均值，公式為：X ZX/n從上表 3 中得出：(1) (2) (3) (4)/n求出批間精密度，公式為：Srr (均值結(jié)果1)2(均值等果2)2 /( n 1)從上表3中得出Srr V(5) (7) (6) (8)/(n 1)式中n =檢驗(yàn)總數(shù)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批內(nèi)變異系數(shù)：批間標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批間變異系數(shù)：實(shí)驗(yàn)結(jié)論：三批膽固醇測(cè)定試劑在*分

22、析儀器上測(cè)定的批內(nèi)和批間精密度均符合設(shè)計(jì)要求。干擾實(shí)驗(yàn)評(píng)估資料對(duì)被評(píng)估試劑設(shè)計(jì)兩種實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行抗干擾性能評(píng)估，即“干擾篩查”和“利 用患者標(biāo)本作偏移分析”的方法。(1)干擾篩查評(píng)價(jià)很多可疑干擾物質(zhì)在相對(duì)較高濃度下所產(chǎn)生的干擾，稱為“干擾篩查”。將可疑干擾物質(zhì)加入基礎(chǔ)樣本池,計(jì)算實(shí)驗(yàn)樣本相對(duì)于對(duì)照樣本測(cè)量結(jié)果所產(chǎn)生偏倚，稱為“配對(duì)差異檢驗(yàn)” O如果可以觀察到臨床顯著性影響，可以認(rèn)為此種 物質(zhì)為干擾物質(zhì)，需要進(jìn)一步評(píng)估干擾物質(zhì)濃度與干擾程度的關(guān)系。(2)利用患者標(biāo)本作偏移分析干擾篩查存在著明顯的局限性，不管篩查實(shí)驗(yàn)如何廣泛，在病人標(biāo)本中都可 能遇到未考慮到的干擾，所以分析相關(guān)病人群體的標(biāo)本，評(píng)價(jià)標(biāo)

23、本間內(nèi)在的變異 性，可以減少這種情況發(fā)生。采用參考方法或具有低干擾性和高特異性的比較方法，以確定在比較研究中的“真值”。如果某個(gè)標(biāo)本中出現(xiàn)一個(gè)可重復(fù)的“離群 值”，則說(shuō)明該標(biāo)本中存在潛在的干擾物質(zhì)。病人標(biāo)本的測(cè)量結(jié)果也可用于證實(shí)干擾現(xiàn) 象。配對(duì)差異檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)要求評(píng)估g/L血紅蛋白和 mg/dl膽紅素對(duì)本試劑的干擾。測(cè)試組和對(duì)照組都以相同方式進(jìn)行檢測(cè)，為避免偶然誤差，進(jìn)行多次重復(fù)測(cè) 定，且在一個(gè)分析批內(nèi)完成。每個(gè)標(biāo)本的重測(cè)次數(shù)依賴于三個(gè)因素：有臨床意義 的最小偏移、批內(nèi)精密度和統(tǒng)計(jì)學(xué)要求的檢驗(yàn)水準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)材料和方法(1 )基礎(chǔ)樣本：選取兩個(gè)膽固醇濃度，5mmol/L和12mmol/L的新鮮血清(無(wú)溶

24、血、黃疸)，各重復(fù)測(cè)試10次，計(jì)算各濃度的均值廠方1標(biāo)準(zhǔn)差s；確定兩濃度水平的最大允許干擾值dmax,根據(jù)下表查出各濃度95%置信限時(shí)檢測(cè)不同的干擾效應(yīng)所需的重復(fù)次數(shù)。d.nax/S與重測(cè)次數(shù)對(duì)應(yīng)表d /smax重測(cè)次數(shù)d /smax重測(cè)次數(shù)41122610228187165143(2)測(cè)試樣本和對(duì)照樣本：(3)按交互順序檢測(cè)測(cè)試樣本和對(duì)照樣本。實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)定次數(shù)Hb干擾評(píng)價(jià)低濃度樣本對(duì)照高濃度樣本對(duì)照12345n測(cè)定次數(shù)膽紅素干擾評(píng)價(jià)低濃度樣本對(duì)照高濃度樣本對(duì)照12345n均值配對(duì)差異實(shí)驗(yàn)結(jié)果干擾物L(fēng)樣本L樣本dobsdcdobsdcHb膽紅素均值均值obs testcontrolI(X X

25、)t ”dobc 的 95% 可信區(qū)間 test control 0.975, n 1 "d sZdc 4二 ,dnul. = 0 (無(wú)效假設(shè)規(guī)定的值)結(jié)果解釋和結(jié)論：如果dobsWdc,說(shuō)明干擾物引起的偏移小于d當(dāng)dobs小于或等于de時(shí)，不拒絕無(wú)效假設(shè)，認(rèn)為檢測(cè)物質(zhì)不是干擾物質(zhì)；1 dobs大于de時(shí)，拒絕無(wú)效假設(shè)，認(rèn)為檢測(cè)物質(zhì)是干擾物質(zhì)。95%當(dāng)95%可信區(qū)間的下限小于或等于d,nax,認(rèn)為檢測(cè)物質(zhì)不是干擾物質(zhì)；當(dāng) 可信區(qū)間的下限大于d.nax,可認(rèn)為檢測(cè)物質(zhì)是干擾物質(zhì)。結(jié)論:劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn)如果在一個(gè)或多個(gè)分析物質(zhì)濃度發(fā)現(xiàn)干擾，則可進(jìn)行劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn)以確定干 擾物質(zhì)濃度與干擾程度的

26、關(guān)系。實(shí)驗(yàn)要求：制備5個(gè)系列濃度的干擾測(cè)試樣本,確定劑量效應(yīng)關(guān)系,每個(gè)濃度水平重測(cè)3次。評(píng)估g/L血紅蛋白和mg/dl膽紅素對(duì)本試劑干擾的劑量效應(yīng)。（1）可疑干擾物質(zhì)的最高濃度和最低濃度分別為: （2）根據(jù)配對(duì)差異實(shí)驗(yàn)，確定有臨床意義的偏移，即:實(shí)驗(yàn)材料和方法：（1）基礎(chǔ)樣本池同配對(duì)差異實(shí)驗(yàn)；（2）干擾物儲(chǔ)存溶液；（3）高值樣本池：用基礎(chǔ)樣本池稀釋干擾物儲(chǔ)存溶液以達(dá)到所需濃度;（4）低值樣本池：其干擾物質(zhì)濃度接近臨床標(biāo)本的平均濃度；（5）按下圖制備中值樣本池、25%濃度樣本池和75%濃度樣本池：（6）在同一批測(cè)定中分析所有標(biāo)本，先按濃度升高順序測(cè)定標(biāo)本，再按降低順序測(cè)定標(biāo)本，再按升高順序測(cè)定標(biāo)

27、本;實(shí)驗(yàn)結(jié)果5個(gè)系列濃度干擾劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果序號(hào)干擾物濃度；干擾效應(yīng)第1次第2次第3次12345以干擾物質(zhì)濃度為X軸，觀察效果為Y軸，繪制劑量反應(yīng)圖，檢查圖的形狀。結(jié)果解釋和結(jié)論：當(dāng)數(shù)據(jù)呈線性分布時(shí)，可應(yīng)用線性最小二乘法回歸分析，計(jì)算斜率、截距及剩 余標(biāo)準(zhǔn)差（Sy.x）。在圖上畫出回歸線，可證實(shí)它適合此數(shù)據(jù)并且此效應(yīng)為線性。 當(dāng)數(shù)據(jù)呈非線性分布時(shí)，任一干擾物質(zhì)濃度下的干擾程度可通過(guò)圖直接得到，還可 利用非線性回歸分析的二次多項(xiàng)式模型計(jì)算得出。當(dāng)數(shù)據(jù)呈線性分布時(shí)，回歸線的斜率代表每單位干擾物產(chǎn)生的偏倚，Y軸的截距代表內(nèi)源性干擾物質(zhì)的濃度?？赏ㄟ^(guò)回歸方程式或劑量反應(yīng)圖，估計(jì)任一干擾物質(zhì) 濃度下的干

28、擾程度，而不管線性或是非線性關(guān)系。結(jié)論:以病人標(biāo)本評(píng)價(jià)干擾效果實(shí)驗(yàn)用被評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)方法與比較方法共同分析兩組病人標(biāo)本（實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組），從 中尋找不準(zhǔn)確的結(jié)果，以確定是否有干擾及干擾程度。本實(shí)驗(yàn)提供了一種在患者實(shí)際樣 本中證實(shí)干擾存在的方法。實(shí)驗(yàn)要求（1）實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的選擇原則：來(lái)自具有相關(guān)疾病的病人標(biāo)本；服用相關(guān)藥物的 病人標(biāo)本；尿毒癥患者的標(biāo)本；具有其他成分的標(biāo)本等。（2）對(duì)照標(biāo)本的選擇原則：未服用相關(guān)藥物的病人標(biāo)本；具有可疑干擾物質(zhì) 正常濃度的標(biāo)本；具有相同或相似診斷的病人標(biāo)本；分析物濃度分布與實(shí)驗(yàn)標(biāo)本 相似的標(biāo)本等。（3）比較方法的選擇原則：用對(duì)干擾物有低敏感性，具有良好特異性的比較 方法來(lái)

29、確定“無(wú)干擾”值。實(shí)驗(yàn)材料和方法（1）根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇實(shí)驗(yàn)標(biāo)本、對(duì)照標(biāo)本，和比較方法；（2）在盡可能短的時(shí)間里（通常2小時(shí)），使用兩種方法分析每一個(gè)標(biāo)本3 次，實(shí)驗(yàn)及對(duì)照組的標(biāo)本數(shù)一般都是1020個(gè)。（3）若觀察到偏倚，則測(cè)量藥物或其他可疑的干擾物質(zhì)的濃度，應(yīng)根據(jù)劑量 效應(yīng)實(shí)驗(yàn)”建立偏倚與干擾物質(zhì)濃度的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果樣本實(shí)驗(yàn)方法比較方法XI X2測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3XI測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3X2號(hào)1234567891011121314151617181920對(duì)照標(biāo)本測(cè)定結(jié)果樣本號(hào)實(shí)驗(yàn)方法比較方法X3 X4測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3X3測(cè)幾: 1測(cè)定2測(cè)定3X4123結(jié)果比較，評(píng)價(jià)它們之間是否

30、存在系統(tǒng)偏倚，如果存在系統(tǒng)偏倚，計(jì)算實(shí)驗(yàn)組偏 倚的上限與對(duì)照組的平均偏倚的差值，此值與干擾標(biāo)準(zhǔn)相比較，以評(píng)價(jià)是否存在 有臨床意義的干擾。如果可以測(cè)量干擾物質(zhì)的濃度，繪制偏倚相對(duì)于可疑干擾物質(zhì)濃度圖，以觀 察可疑干擾物質(zhì)的濃度是否與偏倚相關(guān)。結(jié)論:穩(wěn)定性評(píng)估資料實(shí)驗(yàn)要求實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)熟練檢測(cè)儀器系統(tǒng)。應(yīng)采用與評(píng)價(jià)試劑配套的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。穩(wěn)定性評(píng)價(jià)所采用的試劑應(yīng)是有效期范圍之內(nèi)的同批號(hào)試劑。采用經(jīng)準(zhǔn)確度、精密度和線性實(shí)驗(yàn)合格的新配制試劑和穩(wěn)定期末的試劑，在 同次實(shí)驗(yàn)中評(píng)估兩個(gè)在醫(yī)學(xué)決定水平濃度范圍內(nèi)的樣本。實(shí)驗(yàn)方法對(duì)兩個(gè)水平的質(zhì)控樣本或新鮮人血清樣本，用兩種不同穩(wěn)定期的試劑在*分析 儀器上同次測(cè)

31、定6遍，檢驗(yàn)兩組平均值之間的一致性；同時(shí)測(cè)定試劑的空白吸光度值 和試劑空白值。記錄結(jié)果并進(jìn)行計(jì)算和判斷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果試劑批號(hào)1:穩(wěn)定性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表試劑盒名稱：樣本名稱：試劑盒批號(hào)：樣本批號(hào)：實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：樣本采集日期：儀器：試劑保存溫度：試劑廠家：校準(zhǔn)品：校準(zhǔn)品批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：新配制的工作液穩(wěn)定期末的工作液樣本1樣本2樣本1樣本2測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4測(cè)定5測(cè)定6均值空白吸光度空白測(cè)定值試劑批號(hào)2：穩(wěn)定性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表試劑盒名稱：樣本名稱：試劑盒批號(hào)：樣本批號(hào)：實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：樣本采集日期：儀器：試劑保存溫度：試劑廠家：校準(zhǔn)品：校準(zhǔn)品批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：新配制的工作液穩(wěn)定期末

32、的工作液樣本1樣本2樣本1樣本2測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4測(cè)定5測(cè)定6均值空白吸光度空白測(cè)定值試劑批號(hào)3：穩(wěn)定性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)記錄表試劑盒名稱：樣本名稱：試劑盒批號(hào)：樣本批號(hào)：實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：樣本采集日期：儀器：試劑保存溫度：試劑廠家：校準(zhǔn)品：校準(zhǔn)品批號(hào)：操作者：審核者：測(cè)定日期：新配制的工作液穩(wěn)定期末的工作液樣本1樣本2樣本1樣本2測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3測(cè)定4測(cè)定5測(cè)定6均值空白吸光度空白測(cè)定值結(jié)果計(jì)算和判斷:（1）兩組平均值之間的一致性（t檢驗(yàn)法）按下式計(jì)算t值：加 l）s/ （112 1）S2、ni 112ni n2 2 ni n2式中：XI新配制試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的平均值X2穩(wěn)定期末試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的

33、平均值S1新配制試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差S2穩(wěn)定期末試劑工作液測(cè)量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差m新配制試劑工作液測(cè)量次數(shù)n2穩(wěn)定期末試劑工作液測(cè)量次數(shù)注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度， ni和0均，6若tV顯著性水平& （通常a =）,自由度為ni + n2-2的臨界值t（ni n 2 2）, 則兩個(gè)平均值之間無(wú)顯著性差異。（2）試劑空白吸光度和空白測(cè)定值：三批被檢試劑的工作液在穩(wěn)定期末均達(dá)到說(shuō)明書規(guī)定的指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)論三批被檢試劑的穩(wěn)定性檢測(cè)均達(dá)到設(shè)計(jì)要求。參考值（參考區(qū)間）評(píng)估資料根據(jù)體外診斷試劑分析性能評(píng)估系列指導(dǎo)原則（征求意見稿）的要求，對(duì) 已有的分析物質(zhì)或分析方法可采用參考值（參考區(qū)間）轉(zhuǎn)移。有三種方法可用于參考值（參考區(qū)間）轉(zhuǎn)移可接收性的評(píng)價(jià)。（1）參考值（參考區(qū)間）轉(zhuǎn)移可接收性可以通過(guò)對(duì)首次適宜參考值研究的相關(guān)要素的檢查來(lái)進(jìn)行評(píng)估，包