無菌工藝模擬試驗指南(無菌制劑)

1、無菌工藝模擬試驗指南（無菌制劑）（征求意見稿）國家食品藥品監(jiān)督管理總局食品藥品審核查驗中心二一六年十月目錄1.目的12.定義13.范圍14.原則25.無菌制劑生產(chǎn)工藝及模擬范圍26.模擬試驗方案的設(shè)計及實施過程要求36.1. 無菌工藝模擬試驗的前提條件36.2. 基于風(fēng)險的方案設(shè)計46.3. 模擬介質(zhì)的選擇與評價46.4. 灌裝數(shù)量及模擬持續(xù)時間86.5. 容器裝量96.6. 模擬試驗方法的選擇96.7. 最差條件的選擇106.8. 干預(yù)126.9. 容器規(guī)格136.10. 培養(yǎng)與觀察146.11. 計數(shù)與數(shù)量平衡156.12. 環(huán)境（包括人員）監(jiān)控156.13. 人員因素166.14. 不同

2、劑型應(yīng)考慮的特殊因素166.15. 方案的實施197.可接受標(biāo)準(zhǔn)與結(jié)果評價208.污染調(diào)查及糾正措施219.模擬試驗的周期與再驗證2110.無菌工藝模擬試驗的局限性2211. 術(shù)語2312. 參考文獻(xiàn)24無菌工藝模擬試驗指南（無菌制劑）1. 目的 為指導(dǎo)和規(guī)范無菌制劑生產(chǎn)企業(yè)開展無菌工藝模擬試驗，充分評價無菌制劑產(chǎn)品生產(chǎn)過程的無菌保障水平，確保無菌制劑的安全性，依據(jù)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010版）及附錄，制定本指南。2. 定義 本指南所述的無菌工藝模擬試驗，是指采用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或其他介質(zhì)，模擬制劑生產(chǎn)中無菌操作的全過程，評價該工藝無菌保障水平的一系列活動。3. 范圍3.1. 本指南涵蓋了無菌

3、工藝模擬試驗的基本要求、不同工藝模式的相應(yīng)要求、試驗的基本流程等內(nèi)容，適用于無菌制劑的無菌工藝驗證。3.2. 本指南所述條款是在現(xiàn)有無菌工藝技術(shù)基礎(chǔ)上提出的相關(guān)要求，旨在規(guī)范企業(yè)開展無菌工藝模擬試驗活動。在科學(xué)的基礎(chǔ)上，鼓勵新技術(shù)、新設(shè)備的引入，進(jìn)一步提高無菌制劑的無菌保障水平。4. 原則 在對無菌生產(chǎn)工藝充分認(rèn)知和生產(chǎn)經(jīng)驗累積的基礎(chǔ)上，應(yīng)結(jié)合工藝、設(shè)備、人員和環(huán)境等要素定期開展無菌工藝模擬試驗，以確認(rèn)無菌生產(chǎn)過程的可靠性，同時也為企業(yè)及時識別風(fēng)險，進(jìn)而改進(jìn)無菌控制措施提供數(shù)據(jù)支持。開展無菌工藝模擬試驗應(yīng)遵循以下原則：4.1. 對無菌生產(chǎn)過程實施風(fēng)險評估，識別生產(chǎn)過程風(fēng)險點，評估結(jié)果應(yīng)在試驗方

4、案設(shè)計時給予考慮。4.2. 應(yīng)充分考慮硬件裝備水平與無菌風(fēng)險的關(guān)聯(lián)性，結(jié)合無菌生產(chǎn)過程所涉及到的工藝、設(shè)備、人員以及操作時限等因素針對性開展模擬試驗。盡可能模擬實際無菌生產(chǎn)全過程。應(yīng)特別關(guān)注“開放”操作、人工干預(yù)等高風(fēng)險過程。4.3. 如在同一生產(chǎn)線生產(chǎn)不同劑型和容器規(guī)格的產(chǎn)品，應(yīng)考慮模擬試驗方案對各產(chǎn)品無菌工藝過程的適用性。應(yīng)對有顯著差異的無菌工藝過程開展模擬試驗。5. 無菌制劑生產(chǎn)工藝及模擬范圍 無菌生產(chǎn)工藝通常包含：經(jīng)除菌過濾或其他方法獲取無菌藥液或無菌粉末，在無菌條件下進(jìn)行液體灌裝或粉末分裝，容器密封。凍干制劑在液體灌裝的基礎(chǔ)上增加了冷凍干燥過程。 無菌工藝模擬試驗應(yīng)從無菌操作的第一步

5、開始，直至無菌產(chǎn)品完全密封結(jié)束。如果在產(chǎn)品制備階段采用了無菌工藝，此部分工藝也應(yīng)作為模擬驗證的一部分。對于全過程無菌生產(chǎn)（如配制后不能除菌過濾）的產(chǎn)品，無菌工藝模擬還應(yīng)涵蓋原液配制、半成品配制等無菌操作過程。企業(yè)應(yīng)根據(jù)風(fēng)險評估確定無菌工藝模擬試驗的起始工序。6. 模擬試驗方案的設(shè)計及實施過程要求 模擬試驗是一個系統(tǒng)性工程，通過模擬無菌生產(chǎn)工藝全過程，證實生產(chǎn)過程中無菌保障措施的有效性。應(yīng)從以下幾方面關(guān)注模擬試驗的設(shè)計與實施：6.1. 無菌工藝模擬試驗的前提條件 在無菌工藝模擬實驗之前應(yīng)確認(rèn)與無菌工藝相關(guān)的支持性系統(tǒng)和滅菌系統(tǒng)的驗證已完成，并達(dá)到了可接受的標(biāo)準(zhǔn)。6.1.1. 工藝設(shè)備、公用系統(tǒng)和

6、輔助設(shè)施已按照預(yù)期完成了安裝確認(rèn)、運行確認(rèn)及與無菌生產(chǎn)有關(guān)的性能確認(rèn)。6.1.2. 已對工藝設(shè)備、公用系統(tǒng)、輔助設(shè)施的滅菌方法完成了相應(yīng)的驗證。物料及廠房、設(shè)施所使用消毒劑及消毒方式完成了相關(guān)的驗證。6.1.3. 已經(jīng)完成了藥液及與產(chǎn)品接觸的氣體、設(shè)備組件及容器的滅菌（除菌）方法驗證。6.1.4. 無菌生產(chǎn)區(qū)域的氣流及環(huán)境達(dá)到了設(shè)計要求，并能穩(wěn)定運行。6.1.5. 根據(jù)無菌生產(chǎn)工藝要求建立了相關(guān)受控操作文件。6.1.6. 參與無菌工藝模擬試驗的人員接受了藥品GMP、無菌操作、微生物知識以及實施模擬試驗的培訓(xùn)。6.1.7. 進(jìn)入無菌潔凈區(qū)的全部人員通過了更衣程序的確認(rèn)，并采用文件或其他措施，確認(rèn)

7、了每位參與者可進(jìn)入的區(qū)域和其所允許的無菌操作項目。6.2. 基于風(fēng)險的方案設(shè)計 模擬試驗方案設(shè)計應(yīng)結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝，盡量與實際無菌操作過程保持一致，以求試驗結(jié)果真實反映生產(chǎn)過程的無菌保障水平。6.2.1. 無菌生產(chǎn)工藝的風(fēng)險評估 無菌生產(chǎn)工藝的設(shè)計基于對產(chǎn)品特性、工藝技術(shù)和無菌保證措施的認(rèn)知和經(jīng)驗的累積。設(shè)計模擬試驗方案前應(yīng)對無菌生產(chǎn)過程開展系統(tǒng)性風(fēng)險評估，以充分識別無菌生產(chǎn)過程中潛在風(fēng)險點。6.2.2. 模擬試驗方案設(shè)計時，應(yīng)重點考察和評估高風(fēng)險的無菌操作過程。無菌生產(chǎn)工藝的暴露操作是影響最終產(chǎn)品無菌特性的重要環(huán)節(jié)，如設(shè)備（或管道）的無菌連接、無菌容器的轉(zhuǎn)運和更換、灌裝等關(guān)鍵操作。模擬試驗方

8、案設(shè)計應(yīng)考察以上過程無菌保證措施的有效性。6.2.3. 證實無菌操作人員能滿足無菌生產(chǎn)要求，是實施模擬試驗的目的之一。進(jìn)行模擬試驗方案設(shè)計時，應(yīng)結(jié)合工藝過程中的“開放”環(huán)節(jié)，重點考察有人員參與的關(guān)鍵操作，評價人員無菌操作素養(yǎng)和防護(hù)措施的可靠性。6.3. 模擬介質(zhì)的選擇與評價6.3.1. 模擬介質(zhì)的選擇 應(yīng)結(jié)合被模擬產(chǎn)品的特點以及模擬介質(zhì)的可過濾性、澄清度、滅菌方式等選擇合適的模擬介質(zhì)。不應(yīng)選擇明顯具有抑菌性的模擬介質(zhì)，以確保模擬試驗結(jié)果的可信度。通?？刹捎玫哪M介質(zhì)包括促進(jìn)微生物生長的培養(yǎng)基和安慰劑。6.3.2 培養(yǎng)基的選擇6.3.2.1 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）是一種廣譜性培養(yǎng)基，特別

9、對無菌工藝環(huán)境中源自人體的細(xì)菌、芽孢和真菌有良好的促生長效果，是無菌工藝模擬試驗常用的培養(yǎng)基。6.3.2.2 如果產(chǎn)品需充入惰性氣體、儲存在無氧條件，無菌操作在嚴(yán)格的厭氧環(huán)境中進(jìn)行時（即氧氣濃度低于0.1%），應(yīng)考慮采用厭氧培養(yǎng)基，如硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基（FTM）。在厭氧的無菌工藝環(huán)境監(jiān)控中反復(fù)發(fā)現(xiàn)厭氧微生物或在產(chǎn)品無菌檢查中發(fā)現(xiàn)厭氧微生物時，需評估增加厭氧培養(yǎng)基。6.3.2.3 用于模擬抑菌性產(chǎn)品的培養(yǎng)基，需評估抑菌性產(chǎn)品殘存對其促生長能力及模擬試驗結(jié)果的影響。6.3.2.4 對于包含動物來源成分的培養(yǎng)基，應(yīng)考慮培養(yǎng)基引入外源性病毒污染的風(fēng)險。如BSE（可傳染性海綿腦?。?TSE（瘋牛病）的

10、風(fēng)險。6.3.3 培養(yǎng)基的配制6.3.3.1. 模擬試驗的培養(yǎng)基應(yīng)在控制區(qū)域進(jìn)行準(zhǔn)備。需注意培養(yǎng)基粉塵在環(huán)境中的擴(kuò)散，以及設(shè)備表面的殘留引發(fā)的微生物滋生。通常按照最終培養(yǎng)濃度3%的要求配制培養(yǎng)基。配制后的培養(yǎng)基應(yīng)盡快滅菌或除菌過濾。6.3.3.2. 培養(yǎng)基在模擬試驗前應(yīng)恢復(fù)至室溫，即用型無菌液體培養(yǎng)基儲存條件和使用條件可遵循生產(chǎn)商要求。6.3.4. 培養(yǎng)基的除菌與滅菌6.3.4.1. 除菌過濾 在培養(yǎng)基選擇階段應(yīng)考慮其過濾性。由于培養(yǎng)基的特性與藥液有差異，培養(yǎng)基除菌過濾的濾器型號可與產(chǎn)品使用的過濾器不同。如因顆?；蛏镓?fù)載較大等原因引起除菌過濾器的堵塞時，可增加預(yù)過濾步驟。 需考慮降低非無菌培

11、養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌生長的風(fēng)險，以避免微生物生長導(dǎo)致培養(yǎng)基過濾性能降低。針對以上情況應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險評估并采取合理應(yīng)對措施。6.3.4.2. 濕熱滅菌6.3.4.2.1. 采用在線滅菌或滅菌釜濕熱滅菌方式時，應(yīng)考慮避免受熱不均勻或滅菌不充分現(xiàn)象。應(yīng)對該滅菌方式進(jìn)行風(fēng)險評估和驗證。6.3.4.2.2. 滅菌過程應(yīng)遵循生產(chǎn)商推薦的滅菌時間和溫度的建議，并對滅菌過程予以確認(rèn)。確保滅菌后培養(yǎng)基的促生長能力，避免過度滅菌使培養(yǎng)基碳化造成其促生長性能的降低。為避免過度加熱可采用濕熱滅菌與除菌過濾聯(lián)合使用的方式，但均應(yīng)進(jìn)行促生長能力試驗。6.3.4.3. 輻照滅菌 使用輻照滅菌的培養(yǎng)基粉末，應(yīng)在無菌環(huán)境下進(jìn)行無菌配制

12、等操作。輻照滅菌過程應(yīng)經(jīng)驗證，并在產(chǎn)品質(zhì)量報告中體現(xiàn)驗證中所用的菌種和劑量等信息。6.3.5. 培養(yǎng)基促生長能力試驗6.3.5.1. 應(yīng)在無菌工藝模擬試驗前及14天培養(yǎng)后按照現(xiàn)行中國藥典方法對培養(yǎng)基進(jìn)行促生長能力試驗。6.3.5.2. 促生長能力試驗使用的菌種包括：白色念珠菌（CMCC98001）、黑曲霉（CMCC98003）、枯草芽孢桿菌（CMCC63501）、金黃色葡萄球菌（CMCC26003）、銅綠假單胞菌（CMCC10104）和生孢梭菌（CMCC64941）等。除標(biāo)準(zhǔn)菌株之外，還應(yīng)考慮加入環(huán)境和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。促生長試驗接種量應(yīng)不大于100CFU，按照中國藥典要求培養(yǎng)，以證

13、明培養(yǎng)基能夠支持微生物的生長。6.3.6. 其它模擬介質(zhì)的選擇及評價6.3.6.1. 其它模擬介質(zhì)的選擇 無菌粉末產(chǎn)品及特殊劑型產(chǎn)品，如懸濁液、軟膏/乳膏/乳液/凝膠等，在無菌工藝模擬試驗中會使用其它模擬介質(zhì)，如安慰劑、賦形劑等。應(yīng)根據(jù)劑型特點、生產(chǎn)工藝及設(shè)備選擇適當(dāng)?shù)哪M介質(zhì)。 模擬介質(zhì)的流動性應(yīng)類似于被模擬產(chǎn)品，易于進(jìn)行灌裝/分裝等工藝操作。模擬介質(zhì)還應(yīng)具有易于滅菌，無抑菌性，易溶解等特性。常用模擬介質(zhì)有聚乙二醇、乳糖、甘露醇、氯化鈉、凡士林等。模擬介質(zhì)的滅菌過程應(yīng)經(jīng)驗證并提供相關(guān)報告，其內(nèi)容包括滅菌方式對模擬介質(zhì)特性有無不良影響，滅菌后的無菌性。模擬介質(zhì)的包裝形式應(yīng)與被模擬物的包裝形式一

14、致。6.3.6.2. 其它模擬介質(zhì)的評價 在使用模擬介質(zhì)前應(yīng)對其適用性進(jìn)行確認(rèn)，包括無菌試驗、抑菌試驗、溶解度試驗等。抑菌試驗通常使用枯草芽孢桿菌（CMCC63501）和白色念珠菌（CMCC98001）。除此之外，還應(yīng)考慮加入環(huán)境和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。無菌模擬介質(zhì)由無菌注射用水分散，然后加入到無菌培養(yǎng)基中，達(dá)到模擬工藝選用的濃度范圍。然后在每份培養(yǎng)基中接種10-100CFU。陽性對照接種到不含無菌模擬介質(zhì)的試管中，在20-25培養(yǎng)7天所有試管應(yīng)明顯渾濁。6.4. 灌裝數(shù)量及模擬持續(xù)時間6.4.1. 無菌工藝模擬灌裝數(shù)量應(yīng)足以保證評價的有效性及完成模擬方案中設(shè)計的各種干預(yù)活動。應(yīng)通過風(fēng)險

15、評估對所設(shè)計的灌裝數(shù)量、持續(xù)時間、模擬方式、預(yù)期收率作出合理說明。6.4.2. 生產(chǎn)批量小于5000支，模擬灌裝批量至少與生產(chǎn)批量相同；產(chǎn)品的生產(chǎn)批量在5000支至10000支，模擬灌裝數(shù)量應(yīng)與產(chǎn)品實際的生產(chǎn)批量相當(dāng)；大規(guī)模生產(chǎn)，即產(chǎn)品的生產(chǎn)批量大于10000支，最低模擬灌裝數(shù)量應(yīng)不得低于10000支，且一般不低于產(chǎn)品實際生產(chǎn)批量的10%。如采用密封性生產(chǎn)設(shè)備，經(jīng)評估可適當(dāng)降低模擬數(shù)量。6.5. 容器裝量 容器中培養(yǎng)基灌裝量應(yīng)考慮適宜微生物生長的需要和容器內(nèi)表面覆蓋的要求，灌裝量不必與產(chǎn)品相同，通常應(yīng)能達(dá)到容器體積的1/31/2，即可保證產(chǎn)品通過倒置和旋轉(zhuǎn)接觸到所有內(nèi)表面并有足夠的氧氣支持微生

16、物的生長，以利于對培養(yǎng)基的觀察。6.6. 模擬試驗方法的選擇 大規(guī)模生產(chǎn)時，模擬試驗方法可采用以下幾種方式：6.6.1. 培養(yǎng)基與空瓶切換 模擬試驗的持續(xù)時間和實際生產(chǎn)相當(dāng)，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實際批量，模擬試驗在培養(yǎng)基灌裝和空瓶運行間切換。在正常生產(chǎn)條件下應(yīng)模擬灌裝足夠數(shù)量的培養(yǎng)基瓶子，以保證能夠準(zhǔn)確反映實際生產(chǎn)的污染風(fēng)險。在灌裝培養(yǎng)基期間應(yīng)模擬所有類型和規(guī)定數(shù)量的干預(yù)。模擬試驗應(yīng)包含生產(chǎn)的初始、結(jié)束階段和干預(yù)發(fā)生的時刻。在不灌裝培養(yǎng)基期間，灌裝線穿插運行空容器。該方式能全面評估人員、操作和生產(chǎn)環(huán)境。6.6.2. 培養(yǎng)基與無菌注射用水切換 模擬試驗的持續(xù)時間和實際生產(chǎn)相當(dāng)，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實

17、際批量，模擬驗證在培養(yǎng)基灌裝和注射用水灌裝間切換。此種方式比實際生產(chǎn)更復(fù)雜，同時存在注射用水稀釋部分培養(yǎng)基導(dǎo)致促生長性能下降的風(fēng)險，應(yīng)通過促生長試驗證明其有效性。6.6.3. 培養(yǎng)基灌裝與設(shè)備空轉(zhuǎn)的切換 模擬試驗的持續(xù)時間和實際生產(chǎn)相當(dāng)，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實際批量，模擬試驗在培養(yǎng)基灌裝和設(shè)備空轉(zhuǎn)運行間切換。應(yīng)模擬足夠數(shù)量的培養(yǎng)基產(chǎn)品，以保證能夠準(zhǔn)確反映實際生產(chǎn)的污染風(fēng)險。在灌裝培養(yǎng)基期間應(yīng)模擬所有類型和規(guī)定數(shù)量的干預(yù)。模擬試驗應(yīng)包含生產(chǎn)的初始、結(jié)束階段和干預(yù)發(fā)生的時刻，在不灌裝培養(yǎng)基期間灌裝線繼續(xù)空轉(zhuǎn)運行，模擬正常生產(chǎn)操作狀態(tài)。該方式也能全面評估人員、操作和生產(chǎn)環(huán)境。6.6.4. 生產(chǎn)結(jié)束后模

18、擬 在一批產(chǎn)品生產(chǎn)結(jié)束后，不經(jīng)拆卸、清潔、消毒、滅菌等工作，直接進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝。此方式仍應(yīng)對設(shè)備組裝、啟動和開始灌裝進(jìn)行模擬，并有足量的培養(yǎng)基沖洗產(chǎn)品管路以除去殘留的產(chǎn)品，并通過足夠的試驗證明培養(yǎng)基的促生長特性。對微生物生長有抑制性的產(chǎn)品，應(yīng)對接觸產(chǎn)品表面的所有部件進(jìn)行更換。6.7. 最差條件的選擇 最差條件并不是指人為創(chuàng)造的超出允許范圍的生產(chǎn)狀況和環(huán)境。為了確認(rèn)無菌工藝風(fēng)險控制的有效性，應(yīng)通過風(fēng)險評估并結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝、設(shè)備裝備水平、人員數(shù)量和干預(yù)等因素來設(shè)計模擬試驗最差條件。包括但不限于以下方面：6.7.1. 人員 應(yīng)充分考慮人員及其活動對無菌生產(chǎn)工藝帶來的風(fēng)險，如模擬生產(chǎn)過程的最多人數(shù)，

19、當(dāng)操作人員數(shù)量減少可能導(dǎo)致其它方面污染風(fēng)險增加時，則此類條件也視為最差條件之一。參與人員應(yīng)包括日常參與到無菌生產(chǎn)的全部人員，如生產(chǎn)操作、取樣、環(huán)境監(jiān)測和設(shè)備設(shè)施維護(hù)人員，同時應(yīng)考慮以上人員交叉作業(yè)、班次輪換、更衣、夜班疲勞狀態(tài)等因素。6.7.2. 工藝時間 應(yīng)適當(dāng)考慮模擬實際生產(chǎn)操作過程中房間、設(shè)備、物料消毒或滅菌后放置的最長時間及最長的工藝保留時限等，如設(shè)備設(shè)施、分裝容器、無菌器具滅菌后最長的放置時間等。6.7.3. 灌裝速度 模擬試驗應(yīng)涵蓋產(chǎn)品實際灌裝速度范圍，基于無菌風(fēng)險的角度分析評價灌裝速度對工藝過程及其他方面的影響程度，如采用最慢的灌裝速度、最大的容器用以模擬最長暴露時間；也應(yīng)考慮采

20、用最快的灌裝速度、最小的容器，用以模擬最大操作強(qiáng)度/難度。6.7.4. 環(huán)境 模擬試驗挑戰(zhàn)的最差環(huán)境應(yīng)考慮選擇單批產(chǎn)品無菌生產(chǎn)周期末端、間歇式生產(chǎn)的空調(diào)系統(tǒng)重新開啟后或連續(xù)生產(chǎn)期間周期性滅菌最長的時間間隔。無菌工藝模擬試驗期間的環(huán)境及器具的消毒處理應(yīng)依據(jù)正常生產(chǎn)期間的消毒方法進(jìn)行，避免消毒劑的過度使用。6.7.5. 如是再驗證，應(yīng)考慮挑戰(zhàn)無菌生產(chǎn)周期的末端。日常生產(chǎn)中，針對微生物污染事件而制定了糾正措施。在模擬試驗時，可對糾正措施的有效性給予確認(rèn)。6.8. 干預(yù)6.8.1. 概念 干預(yù)是指由操作人員按照相關(guān)規(guī)定參與無菌工藝生產(chǎn)的所有操作活動。干預(yù)可分為固有的干預(yù)和糾正性干預(yù)。固有干預(yù)是指常規(guī)和

21、有計劃的無菌操作，如裝載膠塞，環(huán)境監(jiān)控，設(shè)備安裝等；糾正性干預(yù)則是指對無菌生產(chǎn)過程的糾正或調(diào)整，如生產(chǎn)過程中清除破碎的瓶子，排除卡住的膠塞，更換部件、設(shè)備故障排除、手工加塞等。6.8.2. 原則 應(yīng)對無菌生產(chǎn)過程中各種允許的干預(yù)活動進(jìn)行文件化管理，明確規(guī)定正常生產(chǎn)中允許的干預(yù)活動。模擬試驗中干預(yù)設(shè)計應(yīng)與實際的生產(chǎn)活動保持一致，模擬試驗不應(yīng)挑戰(zhàn)不合理的干預(yù)，以證明其合理性。在模擬試驗方案中應(yīng)制定干預(yù)清單和實施計劃，模擬試驗時逐一實施并記錄。6.8.3. 模擬類型及頻次6.8.3.1. 無菌模擬試驗方案中應(yīng)明確規(guī)定固有干預(yù)、糾正性干預(yù)（如維修、故障停機(jī)、設(shè)備調(diào)試）的頻次、類型及復(fù)雜程度（如簡單干預(yù)

22、：倒瓶剔除等；復(fù)雜干預(yù)：灌裝機(jī)泵及針頭裝配、設(shè)備故障維修等）。6.8.3.2. 固有干預(yù)及經(jīng)常發(fā)生的糾正性干預(yù)一般應(yīng)在每次模擬中都實施，偶發(fā)性的干預(yù)可周期性地模擬，如無菌生產(chǎn)過程意外暫?；蛑貑?、無菌狀態(tài)下設(shè)備、設(shè)施偶發(fā)故障排除等。6.8.3.3. 模擬試驗應(yīng)設(shè)計并實施足夠數(shù)量的糾正性干預(yù)，干預(yù)頻次的設(shè)計應(yīng)考慮生產(chǎn)過程按比例覆蓋模擬試驗的全過程。6.8.3.4. 對于無菌取樣、調(diào)整裝量和重復(fù)密封過程，均應(yīng)考慮在分裝的前、中、后階段進(jìn)行。6.8.4. 人員 實施干預(yù)的人員（應(yīng)包括操作、維修人員等）應(yīng)經(jīng)過相關(guān)的培訓(xùn)和考核，并能按規(guī)定的程序?qū)嵤└鞣N干預(yù)。標(biāo)準(zhǔn)化的、簡單的固有干預(yù)可由部分操作人員實施并據(jù)

23、此評價其他人。對于復(fù)雜操作，如裝配灌裝機(jī)等，每個從事人員都應(yīng)在驗證過程中模擬，操作條件不應(yīng)優(yōu)于日常生產(chǎn)的操作條件。6.8.5. 干預(yù)后產(chǎn)品（容器）的處理 實際工藝中如明確規(guī)定受干預(yù)影響的產(chǎn)品（容器）應(yīng)從生產(chǎn)線上剔除，在模擬試驗時也可剔除。模擬試驗時產(chǎn)生的這類產(chǎn)品（容器）可不培養(yǎng)，但不培養(yǎng)的容器應(yīng)予以記錄并評估其合理性。如在干預(yù)發(fā)生前已經(jīng)密封，在日常生產(chǎn)中按規(guī)定不需要剔除的產(chǎn)品，模擬試驗時也應(yīng)保留、培養(yǎng)并納入評估。6.8.6. 記錄 模擬試驗過程中的所有干預(yù)必須記錄。糾正性干預(yù)記錄的內(nèi)容至少應(yīng)包括糾正性干預(yù)的類型、位置、次數(shù)；固有干預(yù)記錄至少包括干預(yù)內(nèi)容和發(fā)生頻率。6.9. 容器規(guī)格 一條灌裝線

24、上有多種規(guī)格容器時，應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險評估選擇模擬的容器。一般選擇最小和/或最大尺寸的容器進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝模擬試驗。當(dāng)使用特定的容器/膠塞組合存在特別的操作問題，如卡瓶、卡塞，即增加干預(yù)的情況，建議單獨對其進(jìn)行工藝模擬驗證。通常采用透明的容器代替不透明或棕色的容器。6.10. 培養(yǎng)與觀察6.10.1. 培養(yǎng)前的容器檢查 模擬試驗中密封缺陷產(chǎn)品的剔除工藝應(yīng)采用日常生產(chǎn)的剔除工藝。除密封缺陷的產(chǎn)品外，其他外觀缺陷、灌裝量異常的模擬產(chǎn)品也應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)。6.10.2. 培養(yǎng)條件6.10.2.1. 在培養(yǎng)前，一般應(yīng)對模擬灌裝產(chǎn)品進(jìn)行顛倒、輕搖以使培養(yǎng)基接觸所有內(nèi)表面。培養(yǎng)時間至少14天，可選擇兩個溫度進(jìn)行培養(yǎng)：在2

25、0-25培養(yǎng)至少7天，然后在30-35培養(yǎng)至少7天。如選擇其他培養(yǎng)計劃，應(yīng)有試驗數(shù)據(jù)支持所選培養(yǎng)條件的適用性。在整個培養(yǎng)期間應(yīng)連續(xù)監(jiān)控培養(yǎng)溫度。6.10.2.2. 如實際生產(chǎn)過程中，分裝容器內(nèi)需要填充惰性氣體，在模擬試驗過程應(yīng)考慮用無菌空氣替代。替代空氣應(yīng)通過與惰性氣體相同的管道系統(tǒng)以確保完全模擬惰性氣體的使用過程。如必須采用惰性氣體用以模擬厭氧無菌工藝（氧氣濃度低于0.1%）及培養(yǎng)厭氧微生物，應(yīng)確認(rèn)惰性氣體與培養(yǎng)基的組合支持相應(yīng)微生物的生長。6.10.3. 培養(yǎng)后的檢查 培養(yǎng)結(jié)束后，應(yīng)對所有模擬灌裝產(chǎn)品逐支進(jìn)行無菌性檢查，通常應(yīng)在合適的照度下進(jìn)行目視觀察。 在培養(yǎng)期間，應(yīng)定期觀察培養(yǎng)基的培養(yǎng)

26、情況，如在培養(yǎng)期間發(fā)現(xiàn)異常情況時應(yīng)做進(jìn)一步調(diào)查。 如在培養(yǎng)后檢查中發(fā)現(xiàn)密封缺陷的灌裝產(chǎn)品，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑蛘{(diào)查并采取糾正措施。 當(dāng)灌裝不透明的容器，應(yīng)考慮將轉(zhuǎn)移至透明容器觀察的可能性，以確保陽性容器的發(fā)現(xiàn)。6.11. 計數(shù)與數(shù)量平衡 為保證模擬試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)對各個階段的模擬灌裝產(chǎn)品進(jìn)行準(zhǔn)確計數(shù)：包括灌裝、培養(yǎng)前檢查、培養(yǎng)后檢查的數(shù)量等。數(shù)量應(yīng)平衡，如發(fā)現(xiàn)不平衡，應(yīng)調(diào)查原因并判斷本次模擬試驗是否有效。6.12. 環(huán)境（包括人員）監(jiān)控6.12.1. 環(huán)境監(jiān)控方案設(shè)計 應(yīng)通過風(fēng)險評估確定日常生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控的各要素，如取樣點、取樣對象、取樣頻率、警戒和糾偏標(biāo)準(zhǔn)、實施方法等。 模擬試驗時應(yīng)與日常生產(chǎn)

27、的環(huán)境監(jiān)控方案為基礎(chǔ)，模擬生產(chǎn)狀況，包括采樣儀器、耗材的轉(zhuǎn)移、消毒等，任何異于日常環(huán)境監(jiān)控的情況都應(yīng)有說明和記錄。 與實際生產(chǎn)工藝相比，模擬實驗中的環(huán)境監(jiān)控應(yīng)考慮增加額外的監(jiān)測環(huán)節(jié)。6.12.2. 環(huán)境監(jiān)控數(shù)據(jù)處理 環(huán)境（包括人員）監(jiān)控的數(shù)據(jù)結(jié)果用于評估模擬生產(chǎn)過程中的環(huán)境條件是否適宜于生產(chǎn)。當(dāng)模擬試驗出現(xiàn)陽性結(jié)果時，環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)可用于進(jìn)行根本原因的調(diào)查。 模擬試驗時發(fā)生的環(huán)境偏差并不是模擬試驗成功的否決條件，是否通過試驗取決于調(diào)查的結(jié)果。環(huán)境監(jiān)測結(jié)果異常時，即使試驗結(jié)果成功，也應(yīng)進(jìn)行必要的調(diào)查和糾正。即使最終決定在環(huán)境監(jiān)控結(jié)果超出糾偏標(biāo)準(zhǔn)時無菌工藝模擬試驗依然通過，也不意味著日常生產(chǎn)可以在同

28、等環(huán)境偏差的條件下進(jìn)行。6.13. 人員因素 所有被授權(quán)在生產(chǎn)時進(jìn)入無菌灌裝間的人員，包括觀察人員和維修人員，每年至少參加一次成功的無菌工藝模擬實驗，方可參與正常生產(chǎn)的無菌操作。模擬試驗方案的設(shè)計、實施及微生物污染調(diào)查應(yīng)有具備微生物方面專業(yè)知識的人員參與。6.14. 不同劑型應(yīng)考慮的特殊因素6.14.1. 凍干制劑6.14.1.1. 凍干過程的進(jìn)箱、凍干、出箱操作是凍干制劑無菌工藝一部分，因此應(yīng)在無菌工藝模擬試驗中模擬產(chǎn)品的凍干操作過程。冷凍可能使培養(yǎng)基捕獲的微生物受損，影響其生長，因此方案設(shè)計時應(yīng)給予考慮和評估。如影響明顯，則不推薦模擬冷凍過程。模擬凍干時，必須考慮真空度、維持時間及溫度。一

29、定溫度下的真空度會使培養(yǎng)基沸騰，應(yīng)避免這種情況的發(fā)生。6.14.1.2. 模擬凍干操作過程有以下兩種模式，企業(yè)應(yīng)基于風(fēng)險評估設(shè)計模擬的方式。6.14.1.2.1. 縮短維持時間模式 即培養(yǎng)基灌裝到容器中，半壓塞，將容器轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)內(nèi),在凍干機(jī)箱體內(nèi)部分抽真空，維持真空狀態(tài)的時間短于實際凍干周期，然后箱體破空（可依據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)計破空次數(shù)），在凍干機(jī)內(nèi)完全壓塞。 此模式關(guān)注了風(fēng)險最大的裝載和壓塞操作，但模擬凍干的時間較短，可能導(dǎo)致污染風(fēng)險低于正常生產(chǎn)。6.14.1.2.2. 全程維持時間模式 即培養(yǎng)基灌裝到容器中，半壓塞，將容器轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)內(nèi),模擬正常的生產(chǎn)的凍干時間，在凍干機(jī)箱體內(nèi)全部或部分抽真

30、空，箱體破空，在凍干機(jī)內(nèi)完全壓塞，轉(zhuǎn)移至下道工序密封。此種模式為全程模擬，和實際生產(chǎn)一致。但應(yīng)關(guān)注長時間真空可能導(dǎo)致培養(yǎng)基水分揮發(fā)過度，可能降低微生物回收率，且較為費時。6.14.1.3. 應(yīng)基于風(fēng)險評估設(shè)計模擬試驗時培養(yǎng)基在凍干機(jī)內(nèi)放置的位置。6.14.1.4. 抽真空后，通常應(yīng)采用無菌空氣代替惰性氣體平衡腔室壓力，以利于TSB培養(yǎng)基支持微生物的生長。6.14.2. 懸濁液6.14.2.1. 懸濁液用于不溶性無菌產(chǎn)品，如一些抗生素、疫苗和皮質(zhì)激素。懸濁液模擬應(yīng)包含懸濁液使用的工藝及相應(yīng)的無菌操作。6.14.2.2. 模擬程序應(yīng)該包括懸濁液生產(chǎn)的特征步驟，如賦形劑的滅菌，無菌粉末的加入和懸濁液

31、的混合等。與液體制劑模擬差別最大之處在于無菌條件下，將無菌模擬介質(zhì)粉末加入到液體制劑過程。6.14.2.3. 懸濁液的無菌操作與溶液制劑的無菌操作方法類似，但由于懸濁液劑型配制的步驟，會相應(yīng)增加攪拌器、緩沖罐、管路以及相應(yīng)的無菌操作等特別之處。上述步驟均應(yīng)在模擬試驗中體現(xiàn)。6.14.3. 軟膏/乳膏/乳液/凝膠6.14.3.1. 無菌軟膏/乳膏/乳液/凝膠與溶液或懸濁液產(chǎn)品無菌工藝模擬試驗類似。模擬過程應(yīng)涵蓋實際操作的工藝。盡量采用被模擬產(chǎn)品的工藝和無菌操作方式?？稍黾釉龀韯┑饶M介質(zhì)使其更接近被模擬產(chǎn)品特性。6.14.3.2. 無菌軟膏的模擬通常不同于西林瓶或安瓿瓶的設(shè)備上進(jìn)行。模擬的基本方

32、法是類似于其他劑型的。6.14.3.3. 對于軟膏/乳膏/乳液/凝膠產(chǎn)品的模擬特點在于容器的檢查時，模擬介質(zhì)的轉(zhuǎn)出觀察需要特別注意。6.14.4. 粉末制劑（無菌粉末分裝）6.14.4.1. 無菌產(chǎn)品配方中加入其他無菌物質(zhì)的過程應(yīng)被模擬，例如混合、研磨、分裝以及其他工序。6.14.4.2. 粉末灌裝設(shè)備與液體灌裝設(shè)備差異很大，模擬時常包含液體和/或粉末兩種無菌工藝操作。6.14.4.3. 陰性對照 如粉末模擬試驗用到無菌液體和無菌模擬介質(zhì)粉末兩種工藝操作，可采用單獨模擬一些液體容器作為陰性對照。 粉末無菌工藝模擬試驗中模擬介質(zhì)的模擬可能引起塵埃粒子檢測數(shù)據(jù)超標(biāo)，可參考實際生產(chǎn)經(jīng)驗，記錄與分析粒

33、子粒徑，分析粉末灌裝時是否會引起塵埃粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)浮動。6.14.5. 其他劑型 其它一些不常見的劑型，如吸入劑、氣霧劑和植入劑等，可參考本指南提供的設(shè)計理念，以滿足這些劑型的具體要求。6.15. 方案的實施 應(yīng)依據(jù)方案，建立詳細(xì)的用于實施模擬試驗的批記錄。批記錄的格式應(yīng)與產(chǎn)品的批生產(chǎn)記錄格式相同，包括所有與試驗相關(guān)信息和操作人員確認(rèn)簽字及原始記錄等。方案及批記錄應(yīng)得到質(zhì)量管理部門的批準(zhǔn)，驗證實施過程除了嚴(yán)格按照方案及批記錄的要求執(zhí)行外，還應(yīng)關(guān)注以下幾方面的因素：6.15.1. 產(chǎn)品容器、膠塞、接觸產(chǎn)品的設(shè)備和部件應(yīng)按SOP準(zhǔn)備。6.15.2. 為了便于偏差調(diào)查，可對完成密封后的模擬產(chǎn)品包裝單元

34、進(jìn)行編號，每一組編號應(yīng)能追溯到無菌工藝模擬試驗的時間及相應(yīng)的操作。6.15.3. 應(yīng)對無菌工藝模擬試驗過程進(jìn)行相應(yīng)的過程監(jiān)控，確保過程符合方案和批記錄的要求。應(yīng)詳細(xì)準(zhǔn)確記錄模擬試驗中實施的各種干預(yù)，可采取觀察或錄像（電子采集）等技術(shù)對模擬生產(chǎn)的關(guān)鍵過程進(jìn)行詳細(xì)記錄。6.15.4. 無菌工藝模擬結(jié)束，應(yīng)對所有與培養(yǎng)接觸的設(shè)備、容器、部件及環(huán)境進(jìn)行有效清潔，防止培養(yǎng)基殘留造成微生物滋生。6.15.5. 模擬試驗的結(jié)果、評估和結(jié)論應(yīng)形成書面報告并經(jīng)質(zhì)量管理部門批準(zhǔn)。根據(jù)實施記錄，為通過模擬驗證的人員頒發(fā)確認(rèn)書并規(guī)定有效期限。7. 可接受標(biāo)準(zhǔn)與結(jié)果評價 無菌工藝模擬實驗可接受標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)遵循現(xiàn)行GMP無菌

35、藥品附錄中的有關(guān)規(guī)定。7.1出現(xiàn)任何陽性均應(yīng)進(jìn)行徹底、規(guī)范的調(diào)查；在科學(xué)評估的基礎(chǔ)上采取適當(dāng)?shù)募m偏措施。7.2. 采用良好設(shè)計且受控的無菌灌裝系統(tǒng)，特別是自動化的系統(tǒng)如吹灌封、隔離器等，污染率可大幅度降低。7.3. 即使每次模擬試驗的污染率都符合可接受標(biāo)準(zhǔn)，如果連續(xù)進(jìn)行的模擬試驗批中反復(fù)出現(xiàn)陽性意味著無菌生產(chǎn)工藝存在系統(tǒng)性問題，必須得到有效解決。8. 污染調(diào)查及糾正措施8.1. 無菌工藝模擬試驗存在污染，即意味著無菌保證可能存在問題，出現(xiàn)的任何污染樣品均應(yīng)視為偏差并徹底調(diào)查，并為改進(jìn)無菌工藝提供數(shù)據(jù)支持。污染調(diào)查流程及方法應(yīng)在方案中明確規(guī)定。8.2. 可通過查看無菌工藝模擬試驗的錄像或現(xiàn)場記錄

36、，還原模擬試驗過程中人員操作行為、干預(yù)及設(shè)備運行等真實狀況。對無菌工藝模擬實驗實施過程相關(guān)的所有記錄進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，并關(guān)注各種偏差、驗證、變更等。8.3. 所有偏離原始驗證狀態(tài)情況均應(yīng)逐一評估并說明。檢查所有相關(guān)人員的培訓(xùn)和資質(zhì)確認(rèn)記錄。8.4. 應(yīng)對模擬試驗中發(fā)現(xiàn)的微生物進(jìn)行鑒別，以便開展污染途徑調(diào)查，并列入企業(yè)微生物菌種庫。8.5. 調(diào)查的關(guān)鍵是查找污染來源，結(jié)合調(diào)查需要，應(yīng)制定一個完整的取樣和微生物鑒別計劃，調(diào)查過程應(yīng)有記錄并歸檔。調(diào)查結(jié)果應(yīng)形成書面報告并得到質(zhì)量管理部門的批準(zhǔn)8.6. 如調(diào)查找到明確的原因，應(yīng)制定糾正預(yù)防措施，并再次進(jìn)行模擬試驗，以證明措施的有效性。如調(diào)查無法找到根本原因

37、，應(yīng)對生產(chǎn)工藝過程的無菌控制開展系統(tǒng)性評估，在現(xiàn)有模擬試驗方案的基礎(chǔ)上增加取樣點和頻次，以獲得更多數(shù)據(jù)支持原因調(diào)查，同時應(yīng)適當(dāng)增加試驗批次。9. 模擬試驗的周期與再驗證9.1. 新建無菌生產(chǎn)線，在正式投產(chǎn)之前，每班次應(yīng)當(dāng)連續(xù)進(jìn)行3次合格的模擬試驗，在無菌生產(chǎn)工藝中一條生產(chǎn)線存在多臺相同功能設(shè)備時，應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險評估確定相關(guān)驗證次數(shù)，但每臺設(shè)備應(yīng)至少經(jīng)過一次模擬試驗。9.2. 正常生產(chǎn)期間應(yīng)當(dāng)按照每條生產(chǎn)線每班次每半年進(jìn)行一次試驗，每次至少一批。對于因其它原因停產(chǎn)一定周期的生產(chǎn)線，在恢復(fù)正式生產(chǎn)前應(yīng)進(jìn)行無菌工藝模擬實驗。9.3. 空氣凈化系統(tǒng)、生產(chǎn)用設(shè)備、無菌生產(chǎn)工藝及人員重大變更，或設(shè)備的重大維修后，應(yīng)通過風(fēng)險評估確定無菌工藝模擬再試驗的批