中藥化學成分提取分離方法課件

1、關于中藥化學成分提取分離方法1現(xiàn)在學習的是第1頁，共55頁2一、中藥化學成分的提取一、中藥化學成分的提取 ( (一一) )溶劑提取法溶劑提取法v依據(jù)：化學成分的溶解性（極性）依據(jù)：化學成分的溶解性（極性）v關鍵：提取溶劑的選擇關鍵：提取溶劑的選擇v溶劑的選擇原則：相似相溶的原則，溶劑的選擇原則：相似相溶的原則， 價廉、易得、無毒、安全等。價廉、易得、無毒、安全等。v提取方法：浸漬法、滲漉法、煎煮法、提取方法：浸漬法、滲漉法、煎煮法、 回流提取法、連續(xù)回流提取法?；亓魈崛》ā⑦B續(xù)回流提取法。 現(xiàn)在學習的是第2頁，共55頁3常用提取溶劑性能特點常用提取溶劑性能特點 提取溶劑提取溶劑 性能特點性能特

2、點 適宜提取成分適宜提取成分 提取方法提取方法強極性溶劑強極性溶劑 溶解范圍廣溶解范圍廣 生物堿鹽生物堿鹽 水水 穿透能力強穿透能力強 苷類苷類 煎煮法煎煮法 易得、安全易得、安全 糅質(zhì)糅質(zhì) 糖類糖類 滲漉法滲漉法 氨基酸氨基酸 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 現(xiàn)在學習的是第3頁，共55頁4v 有些苷類成分的酶解有些苷類成分的酶解v 有些脂溶性成分溶解不完全有些脂溶性成分溶解不完全 v 水提液易發(fā)霉、變質(zhì)水提液易發(fā)霉、變質(zhì)v 水溶性雜質(zhì)多，過濾困難水溶性雜質(zhì)多，過濾困難v 沸點高，濃縮困難沸點高，濃縮困難現(xiàn)在學習的是第4頁，共55頁5 親水性有機溶劑親水性有機溶劑 （和水可任意混溶）（和水可任意混溶） 溶解范圍

3、廣溶解范圍廣 除多糖、除多糖、 滲濾法滲濾法 水溶性雜質(zhì)溶出少水溶性雜質(zhì)溶出少 蛋白質(zhì)外蛋白質(zhì)外 浸漬法浸漬法 乙醇乙醇 可抑制酶的活性可抑制酶的活性 大多數(shù)大多數(shù) 回流法回流法 提取液不易發(fā)霉、變質(zhì)提取液不易發(fā)霉、變質(zhì) 化學成分化學成分 連續(xù)回流法連續(xù)回流法 大部分可回收利用大部分可回收利用 均可溶解均可溶解 但有揮發(fā)性、易燃燒但有揮發(fā)性、易燃燒現(xiàn)在學習的是第5頁，共55頁6甲醇甲醇 溶解特點與乙醇相似，但有毒溶解特點與乙醇相似，但有毒丙酮丙酮 溶解性能同乙醇，但沸點低、易揮發(fā)，溶解性能同乙醇，但沸點低、易揮發(fā)， 不常于提取溶劑；對色素溶解性好，不常于提取溶劑；對色素溶解性好， 常用于分離、

4、精制。常用于分離、精制?，F(xiàn)在學習的是第6頁，共55頁7親脂性有機溶劑親脂性有機溶劑 對化合物溶解選擇性較強對化合物溶解選擇性較強 水溶性雜質(zhì)少、易純化水溶性雜質(zhì)少、易純化 連續(xù)回流法連續(xù)回流法 揮發(fā)性大、易燃燒揮發(fā)性大、易燃燒 回流法回流法有毒、價格昂貴，有毒、價格昂貴， 對提取設備要求高對提取設備要求高 苷元苷元 穿透力較弱，提取時間長穿透力較弱，提取時間長 某些苷類某些苷類作為提取溶劑不常用作為提取溶劑不常用 游離生物堿游離生物堿 ?，F(xiàn)在學習的是第7頁，共55頁8 乙醚乙醚 bp.35bp.35，極易燃，極易燃 氯仿氯仿 bp.61bp.61、d 1.48d 1.48，不易燃，毒性大，不易

5、燃，毒性大 對生物堿溶解性好對生物堿溶解性好 苯苯 bp.80.1bp.80.1，毒性大，毒性大 石油醚石油醚 沸程沸程30306060、60609090、 9090120 120 脫脂、脫色脫脂、脫色 現(xiàn)在學習的是第8頁，共55頁9（二）水蒸氣蒸餾法（二）水蒸氣蒸餾法 適用于揮發(fā)性成分（主要適用于揮發(fā)性成分（主要 是揮發(fā)油）的提取是揮發(fā)油）的提?。ㄈ┒趸汲R界流體萃取技術（三）二氧化碳超臨界流體萃取技術（COCO2 2-SFE-SFE）COCO2 2-SFE-SFE ：以超臨界流體作為萃?。阂猿R界流體作為萃取介質(zhì)的一種提取新技術。介質(zhì)的一種提取新技術。超臨界流體超臨界流體：處于臨界溫

6、度（：處于臨界溫度（TcTc）、臨界壓力）、臨界壓力（PcPc）以上，介于氣體與液體之間）以上，介于氣體與液體之間的流體。的流體。 現(xiàn)在學習的是第9頁，共55頁10特點特點：具有液體和氣體的雙重特性，：具有液體和氣體的雙重特性，如：密度與液體近似如：密度與液體近似 黏度與氣體近似黏度與氣體近似 對很多物質(zhì)有很強對很多物質(zhì)有很強擴散系數(shù)是液體擴散系數(shù)是液體 的溶解能力的溶解能力 的的100100倍倍中藥提取常用的超臨界流體中藥提取常用的超臨界流體 ：二氧化碳二氧化碳現(xiàn)在學習的是第10頁，共55頁11 優(yōu)點：優(yōu)點： 1.1.臨界溫度（臨界溫度（Tc=31.4Tc=31.4）接近室溫）接近室溫, ,

7、 熱敏成熱敏成 分穩(wěn)定分穩(wěn)定. . 2. 2.臨界壓力（臨界壓力（Pc=7.37 MPaPc=7.37 MPa）不高）不高, , 易操作易操作. . 3. 3.本身呈惰性，與化合物不反應本身呈惰性，與化合物不反應. . 4. 4.價格便宜價格便宜. .現(xiàn)在學習的是第11頁，共55頁12超臨界流體萃取中藥成分的主要優(yōu)點：超臨界流體萃取中藥成分的主要優(yōu)點： 1. 1. 可以在接近室溫下工作，防止熱敏成分可以在接近室溫下工作，防止熱敏成分 的破壞或逸散。的破壞或逸散。 2. 2. 萃取過程幾乎不用有機溶劑，萃取物中萃取過程幾乎不用有機溶劑，萃取物中 無溶劑殘留，對環(huán)境無污染。無溶劑殘留，對環(huán)境無污染

8、。 3. 3. 提取效率高，節(jié)約能耗。提取效率高，節(jié)約能耗?，F(xiàn)在學習的是第12頁，共55頁13 二中藥化學成分分離與精制方法二中藥化學成分分離與精制方法分離依據(jù)分離依據(jù) 分離方法分離方法 分離原理或特點分離原理或特點 二相萃取法二相萃取法 逆流分溶法（逆流分溶法（CCDCCD） 液滴逆流色譜法（液滴逆流色譜法（DCCCDCCC） 高速逆流色譜法（高速逆流色譜法（HSCCCHSCCC） 液液- -液分配柱色譜液分配柱色譜 正相色譜和反相色譜正相色譜和反相色譜 加壓液相色譜法加壓液相色譜法 正相色譜和反相色譜正相色譜和反相色譜 快速色譜快速色譜 低壓液相色譜（低壓液相色譜（LPLCLPLC） 中壓

9、液相色譜（中壓液相色譜（MPLCMPLC） 高壓高壓( (效效) )液相色譜法（液相色譜法（HPLCHPLC） 分配系數(shù)（分配系數(shù)（K K）差異）差異 現(xiàn)在學習的是第13頁，共55頁14 溶解度差異溶解度差異溶劑沉淀法溶劑沉淀法水提醇沉法（水水提醇沉法（水/ /醇法）醇法） 除去多糖、蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)除去多糖、蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)醇提水沉法（醇醇提水沉法（醇/ /水法）水法） 除去樹脂、葉綠素等脂溶性雜質(zhì)除去樹脂、葉綠素等脂溶性雜質(zhì)醇醇/ /醚（丙酮）法醚（丙酮）法 皂苷的純化（除去脂溶性雜質(zhì)）皂苷的純化（除去脂溶性雜質(zhì)）酸酸/ /堿法堿法 生物堿的分離純化生物堿的分離純化 堿堿/ /酸法酸法

10、 酸性成分（如苷元）的分離純化酸性成分（如苷元）的分離純化試劑沉淀法試劑沉淀法鈣、鋇、鉛鹽沉淀法鈣、鋇、鉛鹽沉淀法 酸性成分的分離酸性成分的分離生物堿沉淀試劑沉淀法生物堿沉淀試劑沉淀法 生物堿的分離純化生物堿的分離純化結晶及重結晶結晶及重結晶 化合物的進一步精制化合物的進一步精制溶解度差異溶解度差異現(xiàn)在學習的是第14頁，共55頁15 物理吸附（表面吸附）物理吸附（表面吸附） 無選擇性、吸附無選擇性、吸附 可逆、可快速進行，應用較多可逆、可快速進行，應用較多 硅膠硅膠 極性吸附劑極性吸附劑 氧化鋁氧化鋁 極性吸附劑極性吸附劑 吸附性差別吸附性差別 活性炭活性炭 非極性吸附劑非極性吸附劑 化學吸附

11、化學吸附 有選擇性、吸附牢固或不可有選擇性、吸附牢固或不可 逆、洗脫難，逆、洗脫難， 應用較少應用較少 半化學吸附半化學吸附 吸附力介于上述二者之間吸附力介于上述二者之間吸附性差別吸附性差別 現(xiàn)在學習的是第15頁，共55頁16堿性氧化鋁對酚酸類（黃酮、蒽醌）的吸附堿性氧化鋁對酚酸類（黃酮、蒽醌）的吸附酸性硅膠對生物堿的吸附酸性硅膠對生物堿的吸附聚酰胺聚酰胺 （氫鍵吸附）（氫鍵吸附）大孔吸附樹脂大孔吸附樹脂吸附原理（范德華引力或產(chǎn)生氫鍵）吸附原理（范德華引力或產(chǎn)生氫鍵） 分子篩原理（本身多孔性結構的性質(zhì)決定的）分子篩原理（本身多孔性結構的性質(zhì)決定的）吸附性差別吸附性差別 現(xiàn)在學習的是第16頁，共

12、55頁17透析法透析法 ( (半透膜膜孔的半透膜膜孔的分子篩作用分子篩作用) )凝膠濾過法凝膠濾過法 ( (三維網(wǎng)狀三維網(wǎng)狀結構的分子篩作用結構的分子篩作用) ) 超濾法超濾法 ( (分子大小不同分子大小不同引起的擴散速度的差別引起的擴散速度的差別) ) 超速離心法超速離心法 ( (溶質(zhì)在超溶質(zhì)在超速離心作用下沉降性的差速離心作用下沉降性的差別別) ) 蛋白質(zhì)的脫鹽精制蛋白質(zhì)的脫鹽精制 蛋白、多糖的分離及蛋白、多糖的分離及 小分子化合物的分離小分子化合物的分離 大分子化合物精制分離大分子化合物精制分離 同上同上 分子大小差別分子大小差別 現(xiàn)在學習的是第17頁，共55頁18離子交換樹脂法離子交換

13、樹脂法 氨基酸、生物堿、氨基酸、生物堿、 有機酸的分離有機酸的分離陽離子交換樹脂陽離子交換樹脂陰離子交換樹脂陰離子交換樹脂 離解程度不同離解程度不同現(xiàn)在學習的是第18頁，共55頁19常用色譜分離方法介紹常用色譜分離方法介紹 ： 吸附色譜吸附色譜吸附劑吸附劑 分離原理分離原理 吸附規(guī)律吸附規(guī)律 應應 用用 硅膠硅膠 吸附原理吸附原理 弱酸性、極性吸附劑弱酸性、極性吸附劑 廣泛（酸、堿及廣泛（酸、堿及 化合物極性越大、化合物極性越大、 中性成分均可）中性成分均可） 吸附能力強（難洗脫）吸附能力強（難洗脫） 溶劑極性越小，吸附力越強溶劑極性越小，吸附力越強 氧化鋁氧化鋁 吸附原理吸附原理 堿性、極性

14、吸附劑堿性、極性吸附劑 堿性、中性成分堿性、中性成分 吸附規(guī)律同上吸附規(guī)律同上 （酸性成分與鋁絡合（酸性成分與鋁絡合）活性炭活性炭 吸附原理吸附原理 非極性吸附劑非極性吸附劑 從稀水溶液中富集微量物質(zhì)從稀水溶液中富集微量物質(zhì) 吸附規(guī)律與上相反吸附規(guī)律與上相反 脫色（脂溶性色素）脫色（脂溶性色素） 現(xiàn)在學習的是第19頁，共55頁20 聚酰胺聚酰胺 氫鍵吸附氫鍵吸附 酚羥基數(shù)目多，吸附力強酚羥基數(shù)目多，吸附力強 能形成分子內(nèi)氫鍵者，吸附力下降能形成分子內(nèi)氫鍵者，吸附力下降 黃酮、蒽醌的芳香化程度高黃酮、蒽醌的芳香化程度高 吸附力增強吸附力增強 水洗脫力弱水洗脫力弱現(xiàn)在學習的是第20頁，共55頁21

15、大孔吸附樹脂大孔吸附樹脂 吸附原理吸附原理 非極性化合物易被非極性樹脂非極性化合物易被非極性樹脂 吸附吸附-糖與苷的分離糖與苷的分離分子篩原理在分子篩原理在溶劑中溶解度增大，吸附力溶劑中溶解度增大，吸附力 下降（從水提液富集苷類）下降（從水提液富集苷類） 非極性樹脂，極性小的溶劑洗脫力強非極性樹脂，極性小的溶劑洗脫力強 現(xiàn)在學習的是第21頁，共55頁22液液- -液分配色譜（分配原理）液分配色譜（分配原理）類類 型型 固定相固定相 流動相流動相 應應 用用正相色譜正相色譜 水水 BAW BAW系統(tǒng)系統(tǒng) 極性、中極性物質(zhì)分離極性、中極性物質(zhì)分離 （以（以PPCPPC為例）為例）反相色譜反相色譜

16、ODSODS 20.2 20.2 105 1mg105 1mg左右左右制備用高壓液相色譜（制備用高壓液相色譜（HPLCHPLC） 5mg 5mg中壓液相色譜中壓液相色譜 ( MPLC ) 5.05( MPLC ) 5.0520.2 20.2 105 100mg105 100mg低壓液相色譜低壓液相色譜 ( LPLC ) 5.05 ( LPLC ) 10mg105 10mg現(xiàn)在學習的是第23頁，共55頁24葡聚糖凝膠色譜葡聚糖凝膠色譜 類類 型型 原原 理理 溶脹溶劑溶脹溶劑 應應 用用葡聚糖凝膠葡聚糖凝膠 分子篩分子篩 水水 多糖、多肽、多糖、多肽、 （大（大?。┬。?蛋白質(zhì)分離蛋白質(zhì)分離 羥

17、丙基羥丙基 分子篩分子篩 水、極性水、極性 適于不同類型適于不同類型葡聚糖凝膠葡聚糖凝膠 （糖苷）（糖苷） 有機溶劑有機溶劑 吸附原理吸附原理 或二者的混合溶劑或二者的混合溶劑 （苷元）（苷元） 化合物分離化合物分離現(xiàn)在學習的是第24頁，共55頁25離子交換吸附樹脂離子交換吸附樹脂 樹脂類型樹脂類型 原原 理理 應應 用用陽離子交換樹脂陽離子交換樹脂 離子交換離子交換 從酸水溶液中吸附堿性從酸水溶液中吸附堿性 成分（生物堿）成分（生物堿） 強酸性（強酸性（R-SO3-H+） 陽離子陽離子 除去酸性、中性成分除去酸性、中性成分弱酸性（弱酸性（-COO-H+）陰離子交換樹脂陰離子交換樹脂 離子交換

18、離子交換 從堿水溶液中吸附酸性從堿水溶液中吸附酸性 成分（有機酸）成分（有機酸）強堿性（強堿性（RN+(CH3)3CI-） 陰離子陰離子 除去堿性、中性成分除去堿性、中性成分弱堿性弱堿性 (伯、仲、叔胺伯、仲、叔胺)現(xiàn)在學習的是第25頁，共55頁26三、結構研究三、結構研究化合物純度的判定方法化合物純度的判定方法1 1結晶均勻、一致。結晶均勻、一致。2 2熔點明確、敏銳（熔點明確、敏銳（0.51.00.51.0）3 3TLC (PPC):TLC (PPC):三種以上不同展開劑展開，三種以上不同展開劑展開， 均呈現(xiàn)單一斑點。均呈現(xiàn)單一斑點。4 4HPLCHPLC、GCGC也可以用于化合物純度的判

19、斷。也可以用于化合物純度的判斷。現(xiàn)在學習的是第26頁，共55頁27（二）四大光譜在結構測定中的應用（二）四大光譜在結構測定中的應用v紫外紫外 可見光譜（可見光譜（UV -VISUV -VIS） 共軛體系共軛體系特征特征v分子中電子躍遷（從基態(tài)至激發(fā)態(tài)）。分子中電子躍遷（從基態(tài)至激發(fā)態(tài)）。 n-n-* *、-* * 躍遷可因吸收紫外光及可見躍遷可因吸收紫外光及可見光所引起，吸收光譜將出現(xiàn)在光的紫外區(qū)和可光所引起，吸收光譜將出現(xiàn)在光的紫外區(qū)和可見區(qū)（見區(qū)（200200700nm700nm） 200nm 400 700nm200nm 400 700nm 紫外區(qū)（紫外區(qū)（UVUV） 可見區(qū)（可見區(qū)（V

20、ISVIS） 現(xiàn)在學習的是第27頁，共55頁28 應用：應用：v推斷化合物的骨架類型推斷化合物的骨架類型 共軛系統(tǒng)。共軛系統(tǒng)。v取代基團的推斷。如加入診斷試劑推斷黃酮取代基團的推斷。如加入診斷試劑推斷黃酮的取代模式（類型、數(shù)目、排列方式）的取代模式（類型、數(shù)目、排列方式）v用于含量測定（以最大吸收波長作為檢測波用于含量測定（以最大吸收波長作為檢測波長進行含量測定）。長進行含量測定）?，F(xiàn)在學習的是第28頁，共55頁29 紅外光譜（紅外光譜（IRIR）分子中價鍵的伸縮及彎曲振動所引起的吸收而測得的吸分子中價鍵的伸縮及彎曲振動所引起的吸收而測得的吸收圖譜，稱為紅外光譜。收圖譜，稱為紅外光譜。4000

21、 3600 3000 1500 1000 625cm-1特征頻率區(qū)特征頻率區(qū) 指紋區(qū)指紋區(qū)特征官能團的鑒別特征官能團的鑒別 化合物真?zhèn)蔚蔫b別化合物真?zhèn)蔚蔫b別 現(xiàn)在學習的是第29頁，共55頁30羥基（酚羥基、醇羥基）羥基（酚羥基、醇羥基） 36003200 cm-1 游離羥基游離羥基 3600 cm-1 氫鍵締合羥基氫鍵締合羥基 34003200 cm-1 羰基羰基 16001800 cm-1酮酮 1710 cm-1酯酯17101735 cm-1芳環(huán)芳環(huán) 1600、1580、1500cm-1 有有23個峰個峰 雙鍵雙鍵 16201680 cm-1 兩個化合物完全相同的條件兩個化合物完全相同的條件

22、 1 1、 特征區(qū)完全吻合特征區(qū)完全吻合 2、 指紋區(qū)也需完全一致指紋區(qū)也需完全一致 1H-NMR（核磁共振氫譜）（核磁共振氫譜）:信息參數(shù)：化學位移（信息參數(shù)：化學位移（）、）、峰面積、峰裂分峰面積、峰裂分（s 、d、t、q、m）及偶合常數(shù)及偶合常數(shù)（）現(xiàn)在學習的是第30頁，共55頁31v（1 1）化學位移（）化學位移（ppmppm）: : v與與1H1H核所處的化學環(huán)境（核所處的化學環(huán)境（1H1H核周圍的核周圍的電子云密度）有關電子云密度）有關v電子云密度大，處于高場，電子云密度大，處于高場，值小值小v電子云密度小，處于高場，電子云密度小，處于高場，值大值大現(xiàn)在學習的是第31頁，共55頁3

23、20.9-C-CH3 1.8-C=C-CH32.1-COCH3 3.0-NCH3 3.7-OCH3 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0-COOH -CHO Ar-H -C=C-H 常見結構的化學位移大致范圍常見結構的化學位移大致范圍（要求熟記）（要求熟記） (ppm) 推斷化合物的結構（含推斷化合物的結構（含1H1H核基團的結構）核基團的結構） 現(xiàn)在學習的是第32頁，共55頁33（二）峰面積（二）峰面積: : 磁等同質(zhì)子的數(shù)目磁等同質(zhì)子的數(shù)目 用積分曲線面積（高度）表示用積分曲線面積（高度）表示（三）峰裂分及偶和常數(shù)（三）峰裂分及偶和常數(shù): :磁不等同兩個或兩組磁不等同兩個或兩

24、組1H1H核在一核在一定距離內(nèi)相互自旋偶合干擾，定距離內(nèi)相互自旋偶合干擾，發(fā)生的分裂所表現(xiàn)出的不同裂分發(fā)生的分裂所表現(xiàn)出的不同裂分 符合符合 n+1 n+1 規(guī)律規(guī)律 ( n = ( n = 磁等同質(zhì)子的數(shù)目磁等同質(zhì)子的數(shù)目 ) ) 用偶合常數(shù)（用偶合常數(shù)（J J）表示）表示 峰裂分的數(shù)目峰裂分的數(shù)目 峰裂分的距離峰裂分的距離 不同系統(tǒng)偶合常數(shù)不同系統(tǒng)偶合常數(shù) (J Hz) (J Hz) 大小大小s s 單峰單峰 d d 雙峰雙峰 t t 三重峰三重峰 q q 四重峰四重峰 m m 多重峰多重峰 現(xiàn)在學習的是第33頁，共55頁34 芳環(huán)芳環(huán) J鄰鄰610Hz J間間 03Hz J對對01Hz

25、雙鍵雙鍵 J順順711 Hz J反反1218 Hz 飽和烴類相鄰碳原子上質(zhì)子偶合常數(shù)的大小飽和烴類相鄰碳原子上質(zhì)子偶合常數(shù)的大小 與兩個氫原子之間的立體夾角與兩個氫原子之間的立體夾角有關有關 現(xiàn)在學習的是第34頁，共55頁35v=60=60 J = 2 J = 24 Hz4 Hzv=180=180 J = 9 J = 910 Hz10 Hzv 環(huán)己烷及其類似物相鄰碳原子上質(zhì)子的偶合環(huán)己烷及其類似物相鄰碳原子上質(zhì)子的偶合常數(shù)常數(shù)v Jaa 10Jaa 1013Hz ( =18013Hz ( =180) )vJae 2Jae 25Hz ( =605Hz ( =60) )vJee 2Jee 25Hz

26、 ( =605Hz ( =60) )現(xiàn)在學習的是第35頁，共55頁361 1H-NMRH-NMR核磁共振輔助技術核磁共振輔助技術：（1 1）重氫）重氫 (D(D2 2O) O) 交換交換 推斷活潑質(zhì)子推斷活潑質(zhì)子（羥基）的存在與否（羥基）的存在與否（2 2）核增益效應（）核增益效應（NOENOE）：）：指在核磁共振中選指在核磁共振中選擇性照射一種質(zhì)子使其飽和，則與該質(zhì)子在擇性照射一種質(zhì)子使其飽和，則與該質(zhì)子在立體空間位置上接近的另一或數(shù)個質(zhì)子信號立體空間位置上接近的另一或數(shù)個質(zhì)子信號強度增高的現(xiàn)象。強度增高的現(xiàn)象。（3 3）溶劑位移：）溶劑位移：苯誘導位移苯誘導位移 由于溶劑分由于溶劑分子（苯

27、）的接近，對化合物將發(fā)生不同的屏子（苯）的接近，對化合物將發(fā)生不同的屏蔽及去屏蔽作用，使質(zhì)子化學位移發(fā)生變化蔽及去屏蔽作用，使質(zhì)子化學位移發(fā)生變化的現(xiàn)象。的現(xiàn)象?，F(xiàn)在學習的是第36頁，共55頁371313C-NMRC-NMR（ 核磁共振碳譜核磁共振碳譜 ）：）： FT-NMR: FT-NMR: 即脈沖傅里葉變換核磁共振。其裝即脈沖傅里葉變換核磁共振。其裝置原理為采用強的脈沖照射使分子中所有的置原理為采用強的脈沖照射使分子中所有的1313C C 核同時發(fā)生共振，生成在馳豫期內(nèi)表現(xiàn)為指數(shù)核同時發(fā)生共振，生成在馳豫期內(nèi)表現(xiàn)為指數(shù)形式衰減的正弦波信號（自由誘導衰減；形式衰減的正弦波信號（自由誘導衰減；

28、FIDFID）經(jīng)傅里葉變換即成為正常的經(jīng)傅里葉變換即成為正常的NMR NMR 信號。信號?，F(xiàn)在學習的是第37頁，共55頁38v隨著脈沖掃描次數(shù)的增加及計算機的累加計隨著脈沖掃描次數(shù)的增加及計算機的累加計算，算，1313C C信號將不斷增強，噪音則越來越弱。信號將不斷增強，噪音則越來越弱。v經(jīng)過若干次的掃描及累加計算，最后即得到經(jīng)過若干次的掃描及累加計算，最后即得到一張好的一張好的NMRNMR譜。由于該裝置的出現(xiàn)及計算機譜。由于該裝置的出現(xiàn)及計算機的引入，才使得的引入，才使得1313C-NMRC-NMR用于有機化合物結構用于有機化合物結構研究成為可能。研究成為可能。v信息參數(shù)：化學位移（信息參數(shù)

29、：化學位移（CC）、異核偶合常數(shù)）、異核偶合常數(shù)（JCHJCH）、馳豫時間（）、馳豫時間（T T1 1）現(xiàn)在學習的是第38頁，共55頁39(1) (1) 化學位移：大致范圍化學位移：大致范圍 (C (C ） 0-200ppm0-200ppm 不同不同 1313C C 核核CC大小與大小與13C 核所處的化學環(huán)境（周圍核所處的化學環(huán)境（周圍電子云密度）有關電子云密度）有關 用于用于1313C C 核類型的推斷核類型的推斷 ( C ppm ) 150220( c=o) 200 150 100 50 0 c=c Ar 5080 (c-o) 飽和碳原子（飽和碳原子（060060） 主要結構主要結構13

30、13C C 核核CC的大致范圍的大致范圍 ( ( 要求熟記要求熟記 ) ) 現(xiàn)在學習的是第39頁，共55頁40常用常用1313C- NMRC- NMR測定技術及其特征：測定技術及其特征： (1)(1)質(zhì)子寬帶去偶（質(zhì)子寬帶去偶（BBOBBO）: : 也叫全氫去也叫全氫去偶（偶（COMCOM）. . 噪音去偶噪音去偶. . 采用寬頻電磁輻射照射所有采用寬頻電磁輻射照射所有1 1H H核使之飽和后測得的核使之飽和后測得的1313C- NMRC- NMR譜（即去掉所有氫核對碳核的偶合影響）。譜（即去掉所有氫核對碳核的偶合影響）?，F(xiàn)在學習的是第40頁，共55頁41v特征：圖譜簡化，每個碳原子都為單峰，

31、互不特征：圖譜簡化，每個碳原子都為單峰，互不重疊。重疊。v方便于判斷碳信號的化學位移。方便于判斷碳信號的化學位移。v伯、仲、叔碳峰增強，季碳為弱峰（照射伯、仲、叔碳峰增強，季碳為弱峰（照射1H1H核核產(chǎn)生產(chǎn)生NOENOE效應）效應）v無法區(qū)別碳上連接的無法區(qū)別碳上連接的1H1H核數(shù)目。核數(shù)目。現(xiàn)在學習的是第41頁，共55頁42（2 2）偏共振去偶：（此法現(xiàn)已基本上被）偏共振去偶：（此法現(xiàn)已基本上被DEPTDEPT所所替代）替代）僅保留直接與碳原子相連僅保留直接與碳原子相連1H1H核對碳的偶合核對碳的偶合J 1CH（即去掉氫核對碳核的遠程偶合（即去掉氫核對碳核的遠程偶合J 2CH J 3CH）

32、伯伯（-CH3) 表現(xiàn)為表現(xiàn)為 四重峰四重峰 （q）仲仲（-CH2-) 三重峰三重峰 (t)叔（叔（-CH-) 雙峰雙峰 (d) 季季（-C-） 單峰單峰 (s) 碳核（伯、仲、叔、季）類型的判斷碳核（伯、仲、叔、季）類型的判斷 現(xiàn)在學習的是第42頁，共55頁43（3 3）DEPT (DEPT (無畸變極化轉移增強法無畸變極化轉移增強法) ) ：（為：（為1313C- NMRC- NMR譜的一種常規(guī)測定方法）譜的一種常規(guī)測定方法） 通過改變照射通過改變照射1 1 H H核的脈沖寬度（或設定不同核的脈沖寬度（或設定不同的馳豫時間）使不同類型的馳豫時間）使不同類型1313C C信號在譜圖上呈單峰信

33、號在譜圖上呈單峰，并分別呈現(xiàn)正向峰或倒置峰，并分別呈現(xiàn)正向峰或倒置峰 現(xiàn)在學習的是第43頁，共55頁44脈沖寬度脈沖寬度 峰的特征峰的特征=450 CH3 CH2 CH ( 代表正向峰代表正向峰)=900 CH =1350 CH3 CH CH2 （ 代表倒置峰代表倒置峰） 可用于區(qū)別伯（可用于區(qū)別伯（CHCH3 3）、仲（）、仲（CHCH2 2）、叔（）、叔（CHCH）碳信）碳信號與質(zhì)子寬帶去偶譜比較，還可以確定季碳（號與質(zhì)子寬帶去偶譜比較，還可以確定季碳（-C-C-）信號）信號 現(xiàn)在學習的是第44頁，共55頁45二維核磁共振譜（二維核磁共振譜（2 2D-NMRD-NMR譜）譜） 質(zhì)譜（質(zhì)譜（

34、MSMS）: : 1 1確定分子量（高分辨質(zhì)譜確定分子量（高分辨質(zhì)譜 可將分子量精確可將分子量精確到小數(shù)點后三位）到小數(shù)點后三位）, , 計算分子式。計算分子式。 2 2提供其他結構信息。如黃酮類，依碎片離子提供其他結構信息。如黃酮類，依碎片離子峰可以確定峰可以確定A-A-環(huán)環(huán), B-, B-環(huán)的取代模式。環(huán)的取代模式。 3 3與標準圖譜比較用于化合物的鑒別（相同條件與標準圖譜比較用于化合物的鑒別（相同條件下，其裂解是符合一定規(guī)律的）。下，其裂解是符合一定規(guī)律的）。 4 4依裂解特征及碎片離子依裂解特征及碎片離子 推定或復核未知化合推定或復核未知化合物分子的部分結構。物分子的部分結構。 現(xiàn)在學

35、習的是第45頁，共55頁46質(zhì)譜主要離子源的電離方式及特點：質(zhì)譜主要離子源的電離方式及特點： 電子轟擊質(zhì)譜（電子轟擊質(zhì)譜（EI-MSEI-MS）：目前常用。）：目前常用。但對于熱敏成分及難于氣化的成分但對于熱敏成分及難于氣化的成分（醇、糖苷、部分羧酸等）（醇、糖苷、部分羧酸等）大分子物質(zhì)（多糖、肽類）難以氣化大分子物質(zhì)（多糖、肽類）難以氣化 測不到分子離子峰測不到分子離子峰亦無法測得分子量亦無法測得分子量 現(xiàn)在學習的是第46頁，共55頁47電離新方法電離新方法 （樣品不必加熱（樣品不必加熱 氣化而直接電離）氣化而直接電離） 化合物乙?；蛉谆衔镆阴；蛉谆柰榛ü柰榛═MSTMS化

36、）化）制成熱穩(wěn)定性好的揮發(fā)制成熱穩(wěn)定性好的揮發(fā)性衍生物進行測定性衍生物進行測定 解決措施解決措施現(xiàn)在學習的是第47頁，共55頁48(1)(1)場解析質(zhì)譜場解析質(zhì)譜 FD-MSFD-MS(2)(2)快原子轟擊質(zhì)譜快原子轟擊質(zhì)譜 FAB-MSFAB-MS(3)(3)化學電離質(zhì)譜化學電離質(zhì)譜 CI-MSCI-MS(4)(4)電噴霧電離質(zhì)譜電噴霧電離質(zhì)譜 ESI-MSESI-MS(5)(5)基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜( MALDI-MS )( MALDI-MS )(6)(6)場致電離場致電離 (FI-MS)(FI-MS)(7)(7)串聯(lián)質(zhì)譜（串聯(lián)質(zhì)譜（MS-MSMS-MS）現(xiàn)在學習的是第48頁，共55頁49中藥化學成分提取分離鑒別中藥化學成分提取分離鑒別一般方法思考題：一般方法思考題： 1 1何謂有效成分及有效部位，二者有何區(qū)別？何謂有效成分及有效部位，二者有何區(qū)別？ 2 2中藥化學成分二次代謝產(chǎn)物的生物合成途徑中藥化學成分二次代謝產(chǎn)物的生物合成途徑 有哪些？其合成的化合物包括哪些類型？有哪些？其合成的化合物包括哪些類型？ 3 3中藥化學成分的主要結構類型及性能特點。中藥化學成分的主要結構類型及性能特點。 4 4中藥化學成分提取