瀉心湯不同煎煮法對(duì)涼血止血功效的影響

1、瀉心湯不同煎煮法對(duì)涼血止血功效的影響潘寶峰、全嬿嬿、高斌、杜程昊、陳吉、卞青、高惠峰指導(dǎo)教師：李福鳳（上海中醫(yī)藥大學(xué)01級(jí)七年制臨床醫(yī)學(xué)方向，上海201203）摘要 目的：觀察瀉心湯不同煎煮法對(duì)熱盛小鼠模型涼血止血功效的影響。方法：用溫?zé)崴幖友a(bǔ)氣藥造成小鼠熱證，分別灌以沸水浸泡而成的瀉心湯和普通煎煮法而成的瀉心湯進(jìn)行治療。測定服用用不同煎煮法瀉心湯小鼠的凝血時(shí)間，PT、APTT、Fbg。結(jié)果：在凝血時(shí)間上各組存在差異（p<0.05），而PT、APTT、Fbg各組卻不存在差異（p>0.05）。結(jié)論：這可能與造模時(shí)間過短，尚未引起相應(yīng)的病理生理改變。關(guān)鍵詞 三黃瀉心湯；中藥煎煮法；涼血

2、止血；凝血古人對(duì)中藥藥物的煎煮十分講究，例如古方銀翹散方后注中要求：“共杵為散，每服六錢，鮮葦根湯煎，香氣大出，即取服，勿過煮。肺藥取輕清，過煮則味厚而入中焦也?！卑谆⒅袢~石膏湯的煎煮法中要求應(yīng)煮至“米熟”（方內(nèi)有粳米）1。李時(shí)珍說：“凡服湯藥，雖品物專精，修治如法，而煎煮者，魯莽造次，水火不良，火候失度則藥亦無功?！鼻叭藢?duì)中藥煎煮如此重視，其原因就在于煎煮方法會(huì)影響到藥物的療效?，F(xiàn)代臨床除了對(duì)中藥先煎、后下、包煎、烊化等仍有強(qiáng)調(diào)以外，已經(jīng)對(duì)其它的煎煮方面不太重視，關(guān)于煎煮方法對(duì)方藥影響的研究也較少，因此我們選取瀉心湯，觀察不同煎煮法對(duì)涼血止血功效的影響。瀉心湯出自金匱要略，其方組成為大黃

3、、黃芩、黃連，主治心火亢盛、迫血妄行。傷寒論中有大黃黃連瀉心湯，主治“心下痞，按之濡，其脈關(guān)上浮者”，據(jù)林億方后注，湯中當(dāng)有黃芩，現(xiàn)多數(shù)醫(yī)家也認(rèn)為湯中當(dāng)有黃芩。故兩方組成相同，但兩方的煎煮方法卻有異，金匱要略中“以水三升，煎取一升”，傷寒論中則是“以麻沸湯二升，漬之須臾，絞去滓”。從張仲景的文中可知，同一方的不同煎煮方法可能直接影響其主治。本次實(shí)驗(yàn)我們對(duì)該方不同煎煮法對(duì)于涼血止血功效是否存在差異？存在多大差異？作一探索。1. 材料與方法1.1 動(dòng)物及分組選用雄性昆明種小鼠40只，由上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物房提供，體重為20g至30g。將小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組和熱盛模型組，空白對(duì)照組每天灌服普通飲用水

4、1ml/只，熱盛模型組每天灌服造模藥1ml/只。所有小鼠均以普通飼料和飲用水喂養(yǎng)。1.2 實(shí)驗(yàn)試劑實(shí)驗(yàn)所有藥物均購自上海市徐匯區(qū)中醫(yī)特色門診藥房，配制比例如下：（1）造模藥：附子、干姜、肉桂、黨參、黃芪、白術(shù)為1：1：1：1：1：1，制成的0.72g/ml水煎劑。先加水浸泡20分鐘后，用武火煎開，再用文火煎20分鐘，取藥汁，并在其中溶解普通蜂皇漿巧克力7塊，用兩層紗布過濾后，濃縮成所需藥量，放入4冰箱保存。（2）治療藥：瀉心湯按大黃：黃芩：黃連為2：1：1制成2g/ml水煎劑和以沸水浸泡而成的湯劑。水煎劑先加水浸泡20分鐘后，用武火煎開，再用文火煎20分鐘，取藥汁，沸水浸泡劑用100沸水浸泡藥

5、材5分鐘后取藥汁。兩瀉心湯用兩層紗布過濾后，濃縮成所需藥量，放入4冰箱保存。凝血指標(biāo)檢測試劑，包括凝血酶原時(shí)間（PT）測定試劑盒、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）測定試劑盒、纖維蛋白原（Fbg）測定試劑盒均為上海太陽生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，在使用前按說明書要求配制試劑。1.3 實(shí)驗(yàn)方法（1）體表溫度測定使用數(shù)字溫度計(jì)，將探頭置于小鼠腹正中線處記測小鼠體表溫度，探頭測溫時(shí)間每次2min。測溫時(shí)間安排在17時(shí)18時(shí)，測溫同時(shí)，記錄室溫。（2）用毛細(xì)玻管法測定小鼠的凝血時(shí)間，將毛細(xì)玻管插入小鼠內(nèi)眥球后靜脈叢，深約45mm，自有血液流進(jìn)管內(nèi)開始計(jì)時(shí)，血液注滿后取出毛細(xì)玻管平放于桌上，每隔30s折斷毛細(xì)玻

6、管約5mm，觀察折斷處是否有血凝絲，一旦有血凝絲出現(xiàn)，其所歷時(shí)間即為凝血時(shí)間2 。（3）運(yùn)用摘除小鼠眼球法取血，使用3.2%的枸櫞酸鈉溶液與全血1：9抗凝，以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，取上層血漿，運(yùn)用C2000-2型血凝儀測定每只小鼠的PT、APTT、Fbg。1.4 統(tǒng)計(jì)與處理本試驗(yàn)所得結(jié)果以平均值±SD表示，使用EXCEL軟件的分析工具庫進(jìn)行數(shù)據(jù)的方差分析。2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1 動(dòng)物造模情況造模過程中，模型組小鼠飲水量有增多趨勢(shì)。造模結(jié)束后，測定小鼠腹部體溫，發(fā)現(xiàn)較造模前升高，造模組小鼠腳掌、尾部較空白對(duì)照組稍紅，造模組第1、2籠活動(dòng)明顯較造模前減弱，而造模組第3籠活動(dòng)明顯較造

7、模前增強(qiáng)。表1 造模前后空白對(duì)照組與模型組小鼠腹溫比較（室溫23）組別n腹溫（）造模前空白對(duì)照組1034.13±0.28造模后空白對(duì)照組1034.10±0.26造模前模型組3033.84±0.51造模后模型組2334.25±0.30*注：造模后模型組與造模前比較 *p<0.012.2 凝血時(shí)間的測定表2 瀉心湯不同煎煮法對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響組別n凝血時(shí)間（min）空白對(duì)照組73.71±0.70模型對(duì)照組74.50±0.58*治療組173.50±0.41*治療組284.00±0.38#注：模型對(duì)照組與空白對(duì)照組

8、比較 *p<0.05；治療組1與模型對(duì)照組比較 *p<0.01；治療組1與治療組2比較 #p<0.052.3 PT的測定表3 瀉心湯不同煎煮法對(duì)小鼠PT的影響組別nPT（s）空白對(duì)照組79.54±0.48模型對(duì)照組79.70±5.16治療組179.03±0.69治療組288.43±1.17*注：治療組2與空白對(duì)照組比較 *p<0.052.4 APTT的測定表4 瀉心湯不同煎煮法對(duì)小鼠APTT的影響組別nAPTT（s）空白對(duì)照組717.63±5.69模型對(duì)照組717.67±9.06治療組1718.90±

9、11.86治療組2816.18±6.162.5 Fbg的測定表5 瀉心湯不同煎煮法對(duì)小鼠Fbg的影響組別nFbg（mg/dl）空白對(duì)照組72.50±0.94模型對(duì)照組73.12±1.32治療組173.05±0.98治療組282.68±0.673. 討 論3.1 關(guān)于造模從現(xiàn)代研究來看，對(duì)于小鼠的實(shí)熱證造模研究較少，缺乏統(tǒng)一認(rèn)可的造模標(biāo)準(zhǔn)。我們?cè)炷２捎脽嵝灾兴?、補(bǔ)氣中藥、巧克力相結(jié)合的方法。使用熱性中藥（附子、干姜、肉桂）依據(jù)臨床過服熱性方藥患者可致體質(zhì)改變而出現(xiàn)熱證。有資料表明3用溫?zé)崴幐阶?、麻黃、蒼術(shù)、豬苓、干姜以1：1：1：1：1比例做成的

10、水煎劑灌胃小鼠，可在半小時(shí)后出現(xiàn)熱證，但僅能觀察7小時(shí)。使用補(bǔ)氣中藥（黨參、黃芪、白術(shù)）依據(jù)格致余論：“氣有余便是火”。中醫(yī)名辭術(shù)語解釋：“氣化過盛出現(xiàn)火象火化的陽氣，即不再具有正常的溫化和生氣作用，而只是會(huì)產(chǎn)生耗氣，灼津傷津的病理損害，表現(xiàn)為實(shí)火實(shí)熱證象”。說明補(bǔ)氣太過可產(chǎn)生實(shí)熱證。加入巧克力，主要根據(jù)民間巧克力食用過量會(huì)導(dǎo)致熱證癥候，甚者鼻出血的現(xiàn)象，這也是我們實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)之一。從實(shí)驗(yàn)造模的結(jié)果分析，模型組小鼠飲水量有增多趨勢(shì)。小鼠腹部體溫升高（p<0.01），造模組小鼠腳掌、尾部較空白對(duì)照組稍紅，造模組第1、2籠活動(dòng)明顯較造模前減弱，而造模組第3籠活動(dòng)明顯較造模前增強(qiáng)。有資料表明3

11、，熱證小鼠活動(dòng)增加或少動(dòng)，飲水量增加，這些結(jié)果均表明我們的造?；境晒Α?.2 關(guān)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果從先前的各項(xiàng)研究已經(jīng)證實(shí)普通煎煮法瀉心湯確實(shí)具有明顯的促凝血和止血作用，治療組血小板數(shù)明顯高于模型對(duì)照組，治療組凝血時(shí)間明顯低于模型對(duì)照組。本次實(shí)驗(yàn)由于學(xué)校設(shè)備條件有限，我們無法對(duì)血小板數(shù)進(jìn)行測定與比較，但從凝血時(shí)間上進(jìn)行比較，我們研究結(jié)果表明用普通煎煮法煎煮的瀉心湯能明顯縮短熱盛小鼠的凝血時(shí)間，且其療效要優(yōu)于用沸水泡制成的瀉心湯。瀉心湯用沸水浸泡不用煎煮，是取其清淡之性味，以清心火，泄胃熱，消痞滿，而將其煎煮以后則顯現(xiàn)出其降火止血之功。對(duì)于血熱證型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)PT、APTT指標(biāo)的測試比較國內(nèi)開展較少。吳潤

12、秋，唐紅波，郭建生4在復(fù)方胃熱康對(duì)熱盛胃出血模型止血作用的影響研究中報(bào)道熱盛小鼠在治療后其PT、APTT有顯著性改變（p<0.05）。我們尚未發(fā)現(xiàn)國內(nèi)有關(guān)血熱證型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)Fbg指標(biāo)的測試比較。從我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，各組小鼠的PT、APTT、Fbg均無顯著差異。這可能的原因有造模時(shí)間過短，尚未引起相應(yīng)的病理生理改變；而凝血時(shí)間的測定由于采用的是毛細(xì)玻管法，且每隔30s折斷一次，用人工觀察有無血凝絲形成，可能會(huì)有較大誤差，故我們不能排除在凝血時(shí)間測定上可能也不存在差異的可能性。瀉心湯不同煎煮方法對(duì)小鼠的凝血系統(tǒng)沒有影響。樣本量太少等。因此有關(guān)熱盛小鼠的PT、APTT、Fbg等凝血指標(biāo)的變化情況還有待進(jìn)一步研究。3.3 實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新點(diǎn)1、關(guān)于煎煮方法對(duì)方藥影響的研究現(xiàn)代開展較少，尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)金匱要略與傷寒論中瀉心湯的比較實(shí)驗(yàn)研究。2、造模藥中加入巧克力。3、有關(guān)小鼠出血模型PT