醫(yī)學(xué)專題—-花藥和花粉培養(yǎng)課件

1、醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)第第5 5章章 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)(hufn)培養(yǎng)培養(yǎng) 大大 家家 好好 ！植物植物(zhw)組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)第一頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)第第5 5章章 花藥和花粉培養(yǎng)花藥和花粉培養(yǎng)(piyng)(piyng)(3學(xué)學(xué)時時) 本章主要內(nèi)容本章主要內(nèi)容(nirng)：l花粉和花藥培養(yǎng)技術(shù)花粉和花藥培養(yǎng)技術(shù)l花粉和花藥培養(yǎng)應(yīng)用花粉和花藥培養(yǎng)應(yīng)用第第5章章 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)培養(yǎng)第二頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)l(1)掌握花藥培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)的區(qū)別；掌握花藥培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)的區(qū)別；l(2)了解花藥最佳接種了解花藥最佳接種

2、(jizhng)時期；時期；l(3)掌握花藥培養(yǎng)的大致過程；掌握花藥培養(yǎng)的大致過程；l(4)掌握花粉發(fā)育的四種途徑；掌握花粉發(fā)育的四種途徑；l(5)掌握花粉培養(yǎng)的大致過程。掌握花粉培養(yǎng)的大致過程。 第第5章章 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)培養(yǎng)本章教學(xué)目的本章教學(xué)目的(md)與要求與要求第三頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)花粉和花藥的培養(yǎng)花粉和花藥的培養(yǎng)(pollen and anther culture) 是指花粉在培養(yǎng)基上改變其正常發(fā)育和機能，不經(jīng)受精是指花粉在培養(yǎng)基上改變其正常發(fā)育和機能，不經(jīng)受精(shu jng)而發(fā)生細(xì)胞分裂，由單個花粉粒發(fā)育成完整單倍體而發(fā)生細(xì)胞分裂，

3、由單個花粉粒發(fā)育成完整單倍體植株的技術(shù)。植株的技術(shù)。第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)單倍體植物單倍體植物( (haplobiont)haplobiont) 用離體培養(yǎng)花藥的方法用離體培養(yǎng)花藥的方法(fngf)(fngf)使花粉發(fā)育成一個使花粉發(fā)育成一個完整的植株。完整的植株。名詞名詞第四頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)花藥和花粉培養(yǎng)(piyng)技術(shù)技術(shù)花藥培養(yǎng)花藥培養(yǎng)是是將花粉發(fā)育至一定階段的花藥將花粉發(fā)育至一定階段的花藥(huyo)接接種到人工培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，以形成花粉胚或種到人工培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，以形成花粉胚或愈傷組織進而分化成植

4、株的技術(shù)。愈傷組織進而分化成植株的技術(shù)。第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)第五頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)l花粉花粉(hufn)培養(yǎng)：培養(yǎng)：是將花粉從花藥中分離出是將花粉從花藥中分離出來進行離體培養(yǎng)的過程。來進行離體培養(yǎng)的過程。油菜成熟油菜成熟(chngsh)花藥的花藥的結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)花粉囊花粉囊花粉囊壁花粉囊壁成熟成熟(chngsh)花粉?；ǚ哿；ㄋ幜芽诨ㄋ幜芽诘谝还?jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)技術(shù)花藥和花粉培養(yǎng)技術(shù)第六頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)一、花藥一、花藥(huyo)和花粉的培養(yǎng)方法：和花粉的培養(yǎng)方法：（一）花粉發(fā)育（一）花粉發(fā)育(fy)時期：時期：1、

5、適宜時期、適宜時期：單核期：單核期,尤其是單核中、晚期尤其是單核中、晚期(單核靠邊期單核靠邊期)雄配子體的發(fā)育 營養(yǎng)細(xì)胞營養(yǎng)細(xì)胞生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞精子精子第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)花藥和花粉培養(yǎng)(piyng)技術(shù)技術(shù)第七頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)花藥和花粉培養(yǎng)(piyng)技術(shù)技術(shù) 第八頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)2、花粉發(fā)育時期、花粉發(fā)育時期(shq)的檢測：的檢測：外部形態(tài)觀察外部形態(tài)觀察：在水稻中，一般葉枕距為：在水稻中，一般葉枕距為5-5-1515cmcm，穎片淡黃綠色、雄蕊長度接近穎片長穎片淡黃綠色、雄蕊長度接近穎片長度的度的1/

6、21/2時，可能為單核靠邊期的花粉時，可能為單核靠邊期的花粉(hufn)(hufn)。壓片染色法壓片染色法：是檢測花粉發(fā)育時期的簡便有：是檢測花粉發(fā)育時期的簡便有效方法，常用染色劑為效方法，常用染色劑為醋酸洋紅醋酸洋紅。第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)技術(shù)第九頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)（二）培養(yǎng)（二）培養(yǎng)(piyng)過過程程1、花藥培養(yǎng)過程：、花藥培養(yǎng)過程：1）預(yù)處理）預(yù)處理:低溫冷藏低溫冷藏是最是最常用的方法常用的方法2）表面消毒）表面消毒3）接種）接種4）培養(yǎng)）培養(yǎng)(piyng)形成花粉植株。形成花粉植株。 花粉花粉-愈傷組織愈傷組織-苗苗 花粉花

7、粉-胚狀體胚狀體-苗苗第一節(jié)第一節(jié) 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)技術(shù)和花粉培養(yǎng)技術(shù)選幼年樹花蕾選幼年樹花蕾第十頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)水稻水稻(shudo)(shudo)花藥培養(yǎng)過程：花藥培養(yǎng)過程：旗葉鞘旗葉鞘(yqio)(yqio)用用7070酒精擦洗一遍酒精擦洗一遍剝?nèi)テ烊~鞘剝?nèi)テ烊~鞘(yqio)(yqio)，取出，取出稻穗稻穗10漂白粉漂白粉10 min無菌水洗無菌水洗3 3次次培養(yǎng)培養(yǎng)5 5天，花藥變褐，天，花藥變褐，2020天后花藥裂開，天后花藥裂開，長出淡黃色的花粉愈傷組織，先長芽，長出淡黃色的花粉愈傷組織，先長芽，后長根，形成幼苗。后長根，形成幼苗。用接種環(huán)接種

8、到用接種環(huán)接種到培養(yǎng)基上培養(yǎng)基上左手持穗，右手左手持穗，右手用鑷子取花藥，用鑷子取花藥，放無菌培養(yǎng)皿中放無菌培養(yǎng)皿中第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)技術(shù)花藥和花粉培養(yǎng)技術(shù)第十一頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)花藥培養(yǎng)脫毒花藥培養(yǎng)脫毒l1974年日本年日本(r bn)：花藥培養(yǎng)可以脫除草莓病毒；：花藥培養(yǎng)可以脫除草莓病毒；l花藥采取時期花藥采取時期單核期：花蕾單核期：花蕾4-64-6mmmm，花藥花藥1 1mmmml花藥誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基花藥誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L+MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L+蔗糖蔗糖3030g+g

9、+瓊脂瓊脂7 7g/Lg/Ll增殖分化培養(yǎng)基增殖分化培養(yǎng)基MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L+MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L+蔗糖蔗糖3030g+g+瓊脂瓊脂7 7g/Lg/Ll生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基1/21/2MS+IBA0.2mg/L+MS+IBA0.2mg/L+活性炭活性炭3 3g/L+g/L+蔗糖蔗糖2020g+g+瓊脂瓊脂7 7g/Lg/L第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)技術(shù)第十二頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)草莓花藥愈傷組織草莓花藥愈傷組織,再生再生(zishng)植株植株,花藥植株花藥植株第一節(jié)

10、第一節(jié) 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)技術(shù)和花粉培養(yǎng)技術(shù)第十三頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)2、花粉、花粉(hufn)培養(yǎng)培養(yǎng)l花粉培養(yǎng)成苗途徑與花藥培養(yǎng)比較花粉培養(yǎng)成苗途徑與花藥培養(yǎng)比較: 相同點相同點：l胚狀體成苗途徑、愈傷組織再分化成苗途徑胚狀體成苗途徑、愈傷組織再分化成苗途徑 不同點不同點：l花粉培養(yǎng)：花粉培養(yǎng)： 需進行需進行(jnxng)花粉的分離花粉的分離 特殊的花粉誘導(dǎo)培養(yǎng)特殊的花粉誘導(dǎo)培養(yǎng)第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)技術(shù)第十四頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)花粉培養(yǎng)花粉培養(yǎng)(piyng)過過程程取花蕾（鏡檢）取花蕾（鏡檢）預(yù)培養(yǎng)數(shù)

11、天預(yù)培養(yǎng)數(shù)天取花藥取花藥消毒消毒分離花粉分離花粉第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)花藥和花粉培養(yǎng)(piyng)技術(shù)技術(shù)接種接種培養(yǎng)培養(yǎng)愈傷組織發(fā)生愈傷組織發(fā)生第十五頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)二、培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)技術(shù)基本基本(jbn)培養(yǎng)培養(yǎng)基基激素激素(j s)種種類和濃度類和濃度蔗糖濃度蔗糖濃度第十六頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)（一）基本（一）基本(jbn)培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：第一節(jié)第一節(jié) 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)技術(shù)和花粉培養(yǎng)技術(shù)lMSMS和和H H培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：適合適合(shh)(shh)雙子葉植物花藥培養(yǎng)

12、；雙子葉植物花藥培養(yǎng)；lB5B5培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：適合豆科和十字花科花藥培養(yǎng)；適合豆科和十字花科花藥培養(yǎng)；lN6N6培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：適合禾谷類作物的花藥培養(yǎng)。適合禾谷類作物的花藥培養(yǎng)。第十七頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)第一節(jié)第一節(jié) 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)技術(shù)和花粉培養(yǎng)技術(shù)u 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素可促進可促進(cjn)(cjn)胚狀體形成；胚狀體形成； 生長素生長素可誘導(dǎo)愈傷組織形成?？烧T導(dǎo)愈傷組織形成。u 細(xì)胞分裂素與生長素比值高細(xì)胞分裂素與生長素比值高時可誘時可誘導(dǎo)愈傷組織分化苗導(dǎo)愈傷組織分化苗（二）激素（二）激素(j s)種類和濃度種類和濃度第十八頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題

13、-花藥和花粉培養(yǎng)p較高較高濃度濃度蔗糖可誘導(dǎo)花粉蔗糖可誘導(dǎo)花粉(hufn)(hufn)形成形成愈傷組織愈傷組織；p較低較低 濃度濃度蔗糖可使愈傷組織分化成蔗糖可使愈傷組織分化成苗苗。第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)花藥和花粉培養(yǎng)(piyng)技術(shù)技術(shù)（三）蔗糖（三）蔗糖(zhtng)濃度濃度第十九頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)三、單倍體植株三、單倍體植株(zhzh)染色體加倍的方法染色體加倍的方法第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)技術(shù)l單倍體植物天然發(fā)生單倍體植物天然發(fā)生(fshng)的途徑：的途徑：孤雌生殖孤雌生殖孤雄生殖孤雄生殖無配子生殖無配子生殖第二十頁，共

14、二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)單倍體植株單倍體植株(zhzh)染色體加倍的方染色體加倍的方法法1、自然加倍自然加倍2、人工人工(rngng)加倍加倍：用秋水仙素溶液浸苗、處理愈用秋水仙素溶液浸苗、處理愈傷組織和用含傷組織和用含0.4%0.4%秋水仙素的羊毛脂涂抹單倍體秋水仙素的羊毛脂涂抹單倍體植株的頂芽、腋芽，可得到能結(jié)實的二倍體植株。植株的頂芽、腋芽，可得到能結(jié)實的二倍體植株。3、愈傷組織反復(fù)愈傷組織反復(fù)繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)，可得到二倍體植株。，可得到二倍體植株。第一節(jié)第一節(jié) 花藥和花粉培養(yǎng)花藥和花粉培養(yǎng)(piyng)技術(shù)技術(shù)第二十一頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)第二節(jié)第二節(jié) 花藥

15、和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)的應(yīng)用培養(yǎng)的應(yīng)用 -單倍體植株育種單倍體植株育種1 1、誘導(dǎo)形成單倍體，快速獲得純系，縮短育種周、誘導(dǎo)形成單倍體，快速獲得純系，縮短育種周期；期；2 2、有利于篩選隱性突變體，提高選擇效率、有利于篩選隱性突變體，提高選擇效率; ;3 3、有利于隱性基因、有利于隱性基因(jyn)(jyn)控制性狀的選擇控制性狀的選擇4 4、快速獲得自交系的超雄株、快速獲得自交系的超雄株第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)第二十二頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)大大縮短育種大大縮短育種(y zhng)周期周期第二節(jié)第二節(jié) 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養(yǎng)

16、的應(yīng)用培養(yǎng)的應(yīng)用第二十三頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和花粉培養(yǎng)l(1)花藥培養(yǎng)是器官培養(yǎng)，花粉培養(yǎng)屬細(xì)胞培養(yǎng)?；ㄋ幣囵B(yǎng)是器官培養(yǎng)，花粉培養(yǎng)屬細(xì)胞培養(yǎng)。l(2)花藥培養(yǎng)一般選擇花粉的單核期進行接種。花藥培養(yǎng)一般選擇花粉的單核期進行接種。l(3)花藥培養(yǎng)包括：選擇材料花藥培養(yǎng)包括：選擇材料-消毒消毒-接種培養(yǎng)接種培養(yǎng)-愈合組織生成愈合組織生成-分化出單倍體植株。分化出單倍體植株。l(4)花粉的發(fā)育途徑包括：營養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育、生殖細(xì)胞發(fā)育、花粉的發(fā)育途徑包括：營養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育、生殖細(xì)胞發(fā)育、營養(yǎng)和生殖細(xì)胞同時發(fā)育及花粉均等分裂發(fā)育。營養(yǎng)和生殖細(xì)胞同時發(fā)育及花粉均等分裂發(fā)育。l(5)花粉培養(yǎng)包括花粉的分離花粉培養(yǎng)包括花粉的分離-預(yù)處理預(yù)處理-培養(yǎng)過程。培養(yǎng)過程。l(6)胚胎培養(yǎng)包括：幼胚培養(yǎng)、成熟胚培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)胚胎培養(yǎng)包括：幼胚培養(yǎng)、成熟胚培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)和胚乳和胚乳(pi r)培養(yǎng)等。培養(yǎng)等。l(7)胚胎的培養(yǎng)的意義。胚胎的培養(yǎng)的意義。第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)本章本章(bn zhn)小結(jié)：小結(jié)：第二十四頁，共二十六頁。醫(yī)學(xué)專題-花藥和