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文檔簡介
1、生藥學(xué)實(shí)驗(yàn)講義黑河醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校實(shí)驗(yàn)室守則實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)二 實(shí)驗(yàn)三 實(shí)驗(yàn)四 實(shí)驗(yàn)五 實(shí)驗(yàn)六 實(shí)驗(yàn)七 實(shí)驗(yàn)八 實(shí)驗(yàn)九 實(shí)驗(yàn)十實(shí)驗(yàn)十一 實(shí)驗(yàn)十二 實(shí)驗(yàn)十三 實(shí)驗(yàn)十四 實(shí)驗(yàn)十五 實(shí)驗(yàn)十六 實(shí)驗(yàn)十七 實(shí)驗(yàn)十八 實(shí)驗(yàn)十九實(shí)驗(yàn)二十實(shí)驗(yàn)二十一 實(shí)驗(yàn)二十二 實(shí)驗(yàn)二十三 實(shí)驗(yàn)二十四 附錄一 附錄二 附錄三 附錄五 附錄六生藥中常見的化學(xué)成分的理化鑒定4生藥中常見的化學(xué)成分的理化鑒定(二)5根類生藥6根莖類生藥7皮類生藥8莖木類生藥9植物細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)10植物的組織11根的組織構(gòu)造12雙子葉植物莖的初生構(gòu)造和次生構(gòu)造單子葉植物、裸子植物莖的構(gòu)造13葉的構(gòu)造14花的組織構(gòu)造15果實(shí)的內(nèi)部組織構(gòu)造16種子的內(nèi)部組織構(gòu)造1
2、7菌類、裸子植物的性狀顯微鑒定18雙子葉植物根及根莖類生藥的顯微及顯微理化鑒定19單子葉植物根及根莖類生藥的顯微及顯微理化鑒定20皮類生藥的顯微及顯微理化鑒定21花類生藥的顯微及顯微理化鑒定22果實(shí)種子類生藥的顯微及顯微理化鑒定23全草及其他類類生藥的顯微及顯微理化鑒定24動(dòng)物類和礦物類生藥的性狀鑒別25戶外見習(xí)26附院藥房見習(xí)27常用試劑配置法28層離法常用顯色劑29顯微鏡測量法30顯微鏡的構(gòu)造與使用31生物繪圖32實(shí)驗(yàn)室守則一、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):1 .根據(jù)教學(xué)進(jìn)程,溫習(xí)與本次實(shí)驗(yàn)有關(guān)的課堂講授內(nèi)容。2 .仔細(xì)閱讀本次實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容,要求弄懂實(shí)驗(yàn)的原理與方法。3 .準(zhǔn)備好各種自備的實(shí)驗(yàn)用品,如鉛筆、
3、橡皮、直尺、報(bào)告紙等。二、實(shí)驗(yàn)過程中的幾點(diǎn)要求:1 .遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則,保持實(shí)驗(yàn)室安靜。2 .實(shí)驗(yàn)認(rèn)真,觀察仔細(xì),觀察應(yīng)當(dāng)與思考結(jié)合起來,應(yīng)當(dāng)手、眼、腦三者并用。3 .由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間有限,實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)善于安排自己的工作,注意力應(yīng)當(dāng)集中在主要問題上,不要 用過多時(shí)間去鉆研細(xì)小的次要問題,一時(shí)解決不了的次要問題,可留課外時(shí)間去解決o4 .在實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)當(dāng)隨時(shí)注意觀察到的現(xiàn)象,測量或稱量的數(shù)據(jù),計(jì)算結(jié)果等寫在報(bào)告紙上,成能隨時(shí)作出準(zhǔn)確、清淅、整齊的記錄而不需要重抄的良好習(xí)慣。5 .實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過程中,必須注意聽取教師的指導(dǎo)。6 .實(shí)驗(yàn)桌前應(yīng)隨時(shí)保持整潔,非實(shí)驗(yàn)必要物品一律不許放在桌面或桌架上。7 .紙屑、廢
4、物應(yīng)放人污物缸內(nèi),不得亂丟地上,污物缸內(nèi)不得倒入液體。、實(shí)驗(yàn)完畢時(shí)的幾點(diǎn)要求:1 .按照教師指定時(shí)間完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。2 .把實(shí)驗(yàn)用儀器、用品等收拾干凈,放在指定位置。發(fā)放給個(gè)人保管的可放抽屜或柜內(nèi)3 .臨時(shí)借用物品應(yīng)及時(shí)歸還。4 .值日生負(fù)責(zé)最后清掃實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生,并及時(shí)清除污物缸內(nèi)的廢克物。5 .實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,檢查門、窗、水、電,保證無安全隱患后方可離開實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)一生藥中常見化學(xué)成分的理化鑒定(一)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊螅? . 了解化學(xué)檢出法在藥材鑒定中的應(yīng)用。2 .熟悉藥材鑒定中常用的理化鑒定方法。3 .掌握生物堿,羥基蔥釀的理化性質(zhì)和定性檢識(shí)反應(yīng)。 二、實(shí)驗(yàn)主要材料、儀器及試劑:馬錢子、黃柏(苦參
5、)黃連、大黃、秦皮、黃連乙醇液。水浴鍋、熒光燈、蒸發(fā)皿、錐形瓶、試管、微量升華裝置。碘化鋅鉀試液、碘化汞鉀試液、碘一碘化鉀試液、濃硝酸、濃硫酸、5% NaOH、HCl、乙觸、氨水。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1 .顯微化學(xué)反應(yīng)法:(1)將藥材的切片或粉未置載玻片上,滴加適當(dāng)試液,加蓋玻片在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的顏色或結(jié) 晶東作為鑒別特征。取干燥馬錢子的胚乳部分作徒手切片,加1%硫磯酸試劑l滴,鏡檢,觀察結(jié)果。另取一切片,加濃硝酸1滴,鏡檢,觀察結(jié)果。(2)取藥材粗粉加適當(dāng)試劑浸出,將浸出液滴于載玻片上,滴加適當(dāng)試劑,加蓋 玻片,鏡檢觀察反應(yīng)結(jié)果。取黃連乙醇液1滴,加濃HN0 3 1滴,鏡檢,觀察結(jié)果。(3)取藥
6、材的切片或粉末滴加適當(dāng)試劑,直接觀察里現(xiàn)的種種顏色作為鑒別特征。取大黃飲片,加 5% NaOH 12滴,出現(xiàn)什么顏色 ?再加稀HC1 12滴,又出現(xiàn)什么顏色 ?2 ,微量升華法:是利用藥材中所含的某些成分,在一定溫度下能升華的性質(zhì),獲得升華物,在顯微 鏡下觀察其形狀,顏色及化學(xué)反應(yīng),作為鑒別特征。具體方法:取金屬片,安放在有圓孔(直徑約2cm)的石桶板上,金屬片上抽一力、金屬囪(高度約0.8cm),對(duì)準(zhǔn)石棉板上的圓孔,徐加熱(火焰距板約4cm)數(shù)分鐘,至粉末尸始變焦,并有氣化物發(fā)生,去火待冷,則有結(jié)晶狀升圈內(nèi)加藥材粉末一薄層,圈上放一載玻片,在石棉板下圓孔處用酒精燈徐行如上操作,觀察反應(yīng)籍果。
7、末或提取液等,在熒光燈下觀察熒光,有些藥材不產(chǎn)生熒光,如如取黃連飲片、呼4.層析法:貝母粉末或秦皮水浸液,在紫外燈下觀察熒叫顏色。分為紙層析、柱層析、薄層層析等(略)。5WHHHKW進(jìn)行鑒別。沉淀反應(yīng)來(1)生物堿的檢M :沉淀反應(yīng) 取黃連,馬錢子,黃柏 錐形瓶中,含加木(苦參)粉未各2g,分別盛入1 5ml ,濃HC1 O . 5ml,60 c水浴上溫沖 各取2ml濾液于卜管中,分別加下列試液 碘化鋅鉀試液30分鐘,時(shí)時(shí)振搖,取濾液備用。2 3滴,觀察有何現(xiàn)象?碘化汞鉀試液碘一碘化鉀試液黃連馬錢子黃柏(苦參)(2)羥基功配的檢 加入煮沸,取濾液加加入等量氨試液,振有,觀察反應(yīng)現(xiàn)象。四、作業(yè):
8、簡要記錄各反應(yīng)白|實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果。五、思考題:1 .顯微化學(xué)反應(yīng)法有幾種操作方法2 ,微量升華法用卜生藥鑒別有何特點(diǎn)3 .含何類成分的上藥常會(huì)產(chǎn)生熒光4 .生物堿常甩的卜淀試劑有哪些什么?Bomtrager反應(yīng)取大黃粉未5%NaOH 試液4m1 ,在小火上hCi呈酸性后,再加乙觸0.2g ,置試管中5ml ,振搖,分取觸層,于觸層中?Borntr ?ger反應(yīng)過程的原理是實(shí)驗(yàn)二 生藥中常見化學(xué)成分的理化鑒定(二)工實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊螅赫莆障愣咕?強(qiáng)心昔類、皂甘類、糅質(zhì)類、甄甘類、黃酮類的理化性質(zhì)和定性檢識(shí)反應(yīng)。:、實(shí)驗(yàn)主要材料、儀器及試劑:秦皮、桔梗、穿“龍、五倍子、兒茶、M杏仁、洋地黃葉、黃苓
9、水浴鍋蒸發(fā)皿立形瓶(槐米鹽酸羥胺甲醇液、 酸、1 %鹽酸奎寧試液、明,l %三氯化鐵乙醇液、10%氫氧化鉀甲醇液、乙觸、氯仿、鹽2 %紅血球懸浮液、狡液、鐵鏤磯試液、三氧化鐵試液、冰醋酸、濃硫酸、鎂粉。華物附著于覆蓋的載片上,將載玻片取下反轉(zhuǎn),在顯微鏡下觀察站晶形狀,并可加化學(xué)試液,觀察其變化取大黃粉未,進(jìn)3 .熒光分析法:將藥材切片或粉以酸堿處理或其他化學(xué)方法處理后,可使其中莫些成分在熒光燈下產(chǎn)生熒光,以便鑒別、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1 .化學(xué)定性檢查(1)香豆精類的檢出:異羥肪酸鐵反應(yīng) 取秦皮粗粉0.2g ,置具塞試管中,加乙觸3ml,浸漬510分鐘,時(shí)加振搖,放置,吸取上清液(或?yàn)V過)于試管中加新配
10、制的鹽酸羥胺甲醇溶液23滴,l 0%氫氧化鉀甲醇溶液23滴,水浴溫?zé)?2分鐘,冷后加l 0%鹽酸,使pH為34 ,再加1%三氯化鐵乙醇溶液12滴,兩液混合面或溶液應(yīng)顯什么顏色?5(2)強(qiáng)心昔的檢出:三氯化鐵一冰醛限反應(yīng)取洋地黃葉粉末0.5g ,力口水5ml ,水浴加熱20分鐘,濾液加 搖萃取后,再加乙觸3mlCHCl 3,振3ml ,待分層,用吸管吸取取下層,將CHCl 3層轉(zhuǎn)于蒸發(fā)皿中蒸干,放冷,加冰醛酸lml使殘?jiān)芙?,移人試管中,加三氯化鐵溶皺 1滴,并沿管壁緩緩注入濃 H 2S04 l520滴,觀察上層液及界面的顏色變化(3)皂昔的檢出:泡沫反應(yīng)取正 注意是否產(chǎn)生大量持夕溶血試驗(yàn)取:置
11、試管中,各加 懸浮液0.3ml ,搖勻(4)糅質(zhì)的檢出顯色及沉淀反應(yīng) 加用。I自梗粉末0.2g ,加水 .性泡沫。5ml ,加熱煮沸,過濾,濾液在試管中強(qiáng)烈振搖,親山龍的l%生理鹽水押液2%紅血球放置,注意觀察哪支|式管溶液變清而透明。取五倍子,兒茶粉末各25ml水,水浴加熱,過濾備各取濾液 2ml ,1%鹽酸奎寧試液lml和l %生理鹽水(示溶血現(xiàn)象)lml ,分別0.5g ,分別置于錐形瓶中,別加下列試劑,觀察反應(yīng)現(xiàn)象。明膠液鐵鏤磯試液、五倍子 兒茶(5)甄甘類的檢 出:苦味酸鈉反應(yīng)取苦杏仁一粒搗碎, 用水濕潤置試管中, 中懸掛用味酸試紙一條,用軟木塞塞 緊,置(6)黃酮昔的檢 出:40
12、50 水浴中,觀察試紙顏色變 化。NaHC0 3飽和溶液濕潤 的苦取黃苓(槐米)粉末細(xì)0.2g ,加乙醇5ml ,水浴 酸鎂粉反應(yīng)溫?zé)峒s5加鎂粉少量,混勻,沛加鹽酸數(shù)滴,注意有氣泡產(chǎn)生,同時(shí)觀察呈現(xiàn)什九鐘,濾過,取濾 2ml液,么顏色。|四、作業(yè):簡要記錄各反應(yīng)曲實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果。五、思考題:1、香豆精甘,強(qiáng)2、黃酮類成分遇 顯紅色心甘,甄甘,黃酮普及糅質(zhì)的反應(yīng)機(jī)理是什么? 鹽酸一鎂粉是否都?如不顯紅色是否可以否定黃酮成分的存在?實(shí)率三 根類生藥Rabix Astragali 、甘草 Radix 黃黃 Clycyrrbizae實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簂、掌握黃黃、甘苴生藥性狀。2、掌握黃黃、甘草粉末顯微特征。
13、:、實(shí)驗(yàn)主要儀器及記劑:顯微鏡、臨時(shí)裝片用具、蒸儲(chǔ)水、水合氯醛溶液、白瓷板、蒸發(fā)皿、蒸儲(chǔ)水、80 %硫酸。、實(shí)驗(yàn)材料:蒙古黃黃 Astmgalis membranaceus Bg clycyrrbiza uralensisc . Var . mongholieus(Bgc . )Hsiao 粉末、方草Fisch.粉末。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟:1、鏡檢黃黃粉末,分別以蒸儲(chǔ)水和水合氯醛試液裝片,注意以下特征:纖維眾多,成束,細(xì)長,直徑936 um,壁厚,非木化,孔溝不明顯。另取黃黃生 藥,刮取少量纖維(粉末),透化后裝片,注意纖維的先端常縱裂成掃帚狀。與管 主為具緣紋孔與管,紋孔呈橢圓形,類方類或斜方
14、形。7木栓細(xì)胞表面觀呈多角形或類方形。淀粉粒單粒類圓形、橢圓形或類腎形,直徑313um,復(fù)粒由 24分粒組成。2、鏡檢甘草粉末 分別以蒸儲(chǔ)水和水合氯醛試液裝片,注意以下特征:纖維 眾多,成束或散離,細(xì)長,直徑 614 u m,壁厚,木化或非木化,孔溝不明顯; 晶鞘纖維易察見,草酸鈣方晶類雙錐形,長方形或類方形,含晶細(xì)胞的壁增厚,微木化或非木 化。與管 主為具緣紋孔與管,多破碎,紋孔橢圓形或略呈斜方形,對(duì)列或互列,有的導(dǎo)管旁可見小型具緣紋孔管胞。木栓細(xì)胞棕紅色,壁薄,微木化,表面觀呈多角形。淀粉粒眾多,單粒橢圓形、卵形或類球形,直徑316 um,臍點(diǎn)點(diǎn)狀或短縫狀。復(fù)粒稀少,由2分粒組成。止匕外,
15、尚有少數(shù)黃棕色或紅棕色的色素塊。五、作業(yè):1、繪黃黃粉末特征圖,示纖維,與管,木栓細(xì)胞與淀粉粒。2、繪甘草粉末顯微特征圖,示晶纖維,具緣紋孔與管,木栓細(xì)胞和淀粉粒。 六、思考題:1、甘草的組織構(gòu)造中,有哪些較顯著的鑒別特征?2、什么是晶鞘纖維?3、如何能方便而有效地鑒別甘草和黃黃粉末?實(shí)驗(yàn)四根莖類生藥黃連、大黃一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、掌握黃連、大黃的生藥性狀特征。2、掌握黃連大黃的粉末顯微待征。3、了解其它根及根莖類中藥的性狀特征二、實(shí)驗(yàn)主要儀器及試劑:顯微鏡、臨時(shí)裝片用具、蒸儲(chǔ)水、水合氯醛試液。三、實(shí)驗(yàn)材料:黃連 Coptis chinensis Franch .原植物標(biāo)本、生藥(味連)組織切片及
16、粉末。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟:1、取黃連粉末分別以蒸儲(chǔ)水及水合氯醛試液裝片,鏡檢下列特征:石細(xì)胞鮮黃色、類圓形、類方形或類多角形,有時(shí)稍延長,長徑 25 75 u m,孔溝及紋孔I韌皮纖維鮮黃色,紡錘形或長梭形,直徑: 2040 u m,壁較厚,紋孔少。木纖維眾多,常成束,鮮黃色,直徑 l 535 u m,壁具裂隙狀紋孔。導(dǎo)管多為孔紋與管,也有具緣紋孔,網(wǎng)紋及螺紋與管。鱗葉表皮細(xì)胞類方形或長方形,壁薄曩垂廚壁微波狀。淀粉粒單粒長圓形、腎形或類球形,直徑110 um,復(fù)粒少,由 24分粒組成。2、取大黃粉末分別以蒸儲(chǔ)水及水合氯醛試液裝片,鏡檢下列特征:草酸鈣簇晶大而多,棱角大多短鈍。, O與管主為網(wǎng)
17、紋與管,并有具緣紋孔及細(xì)小螺紋與管,直徑約至140 u m,非木化。淀粉粒單粒呈圓球形或長圓形,臍點(diǎn)大多呈星狀,復(fù)粒由27個(gè)分粒組成。3、觀察所示標(biāo)本的性狀特征。五、作業(yè):1、繪黃連粉末顯微特征圖,示石細(xì)胞、韌皮纖維、木纖維、與管、鱗葉表皮細(xì)胞及淀粉粒。2、繪大黃粉末顯微特征圖,示草酸鈣簇晶、與管、淀粉粒。六、思考題:1、如何從性狀與組織上鑒別“味連”、“雅連”和“云連”實(shí)驗(yàn)五皮類生藥 肉桂、黃柏 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、掌握肉桂、黃柏的生藥性狀與組織鑒別特征。2、掌握皮類生藥的鑒別特征。二、實(shí)驗(yàn)主要儀器及試劑:顯微鏡、臨時(shí)裝片用具、蒸儲(chǔ)水、水合氯醛試液、稀甘油,間苯三酚溶液、濃 HCl、小試管、1
18、0 %鹽酸苯肌試液 三、實(shí)驗(yàn)材料:肉桂、黃柏粉末。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟:1、取肉桂粉末分別用蒸儲(chǔ)水及水合氯醛試液裝片后進(jìn)行鏡檢,注意下列顯微特征:纖維大多單個(gè)散在,長梭形,壁極厚,木化,紋孔及紋孔溝不明顯。石細(xì)胞較多,類方形或類圓形,壁厚,有的一面菲薄。油細(xì)胞類圓形或長圓形,有時(shí)尚含黃色揮發(fā)油滴。草酸鈣針晶眾多,細(xì)小,散在或成束,常存在于射線細(xì)胞中。木栓細(xì)胞多角形,壁木化,內(nèi)含紅棕色物。淀粉粒單?;?4分粒組成的復(fù)粒。2、理化鑒定(1)取肉粉末約0.1 g置小試管中,加氯仿l2ml浸數(shù)分鐘。吸取氯仿浸出液2滴置載玻片上, 再加10%鹽酸苯肌試液l滴,加蓋玻片后鏡檢,可見桂皮醛苯肌桿狀結(jié)晶o(2)
19、取肉桂粉末少許,進(jìn)行微量升華,于升華物上加10%鹽酸苯肌液l滴,加蓋玻片鏡檢,可見桂皮醛苯肌桿狀結(jié)晶。3、取黃柏粉未分別用蒸儲(chǔ)水及水合氯醛試液裝片進(jìn)行鏡檢,注意下列顯微特征:纖維及晶鞘纖維較多,鮮黃色,直徑18 32 u m,多成束存在o石細(xì)胞鮮黃色,成群或單個(gè)散在,類圓形者直徑40128 u m,分枝狀石細(xì)胞較多,長可至240 u m,壁厚,層紋細(xì)密,孔溝不明顯或較短。草酸鈣方晶較多,直徑824m。粘液細(xì)胞多見,直徑可至80 u m。淀粉粒細(xì)小,多單粒球形,直徑 28叩。五、作業(yè):l、繪肉桂粉末特征圖、示木栓細(xì)胞、纖維、石細(xì)胞及草酸鈣針晶。2、繪黃柏粉末特征圖,示纖維及晶鞘纖維,石細(xì)胞,粘液
20、細(xì)胞等。 六、思考題:1、如何從性狀及組織上鑒別JI黃柏與關(guān)黃柏?2、黃柏的石細(xì)胞有何特征?3、肉桂橫切組織有何特征?實(shí)驗(yàn)六 葉類、花類、果實(shí)、菌類生藥 大青葉、金銀花、小茴香、茯苓一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簂、掌握大青葉、金銀花、小茴香、茯苓的生藥性狀及粉末顯微特征。2、熟悉其它葉類、花類生藥的顯微特征。二、實(shí)驗(yàn)主要儀器及試劑:顯微鏡,臨時(shí)裝片用具,水合氯醛試液,甘油醛酸液,5% KOH溶液。三、實(shí)驗(yàn)材料:大青葉、金銀花、小茴香生藥、茯苓。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容入步驟:1、取大青葉粉末少量,水合氯醛試液透化裝片,鏡檢下列特征:。靛籃結(jié)晶藍(lán)色,存在于葉肉細(xì)胞和表皮細(xì)胞中,呈細(xì)小顆粒狀或片狀,常聚集成堆。上表皮細(xì)胞垂周壁近平直,下表皮細(xì)胞垂周壁稍彎曲,略呈連珠狀增厚。氣孔多存在于下表皮,不等式,副衛(wèi)細(xì)胞 3 4個(gè)。2、取金銀花粉末,以水合氯醛裝片后鏡檢,可見以下特征:(1) 腺毛多見,有兩種:一種頭部倒圓錐形, 頂部平坦,約1030個(gè)細(xì)胞,排成24層,柄25個(gè)細(xì)胞;另一種頭部類圓形或扁圓形,約620個(gè)細(xì)胞,柄 24個(gè)細(xì)胞。(2) 非腺毛有兩種:一種為厚壁性,多為單細(xì)胞,表面有微細(xì)疣狀突起,有的具角質(zhì)螺紋;另一種為薄壁性,單細(xì)胞,甚長,彎曲或皺縮。(3要粉g類球形,表面有細(xì)密短刺及顆粒狀雕三孔(4 )草酸鈣簇晶多見,常存在于萼筒組織中。3、小茴香的鑒別(1)性狀鑒定注意其為完整雙
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