美國CLIA’88臨床檢驗各專業(yè)室內(nèi)質(zhì)量控制文件

1、美國CLIA88臨床檢驗各專業(yè)室內(nèi)質(zhì)量控制文件（一）美國CLIA88質(zhì)量控制要求  美國臨床實驗室改進(jìn)修正法案最終規(guī)則(CLIA final rule)于2003年1月24日通過，2003年4月24日實施。其中K-非豁免試驗的質(zhì)量體系，分析系統(tǒng)中493.1256標(biāo)準(zhǔn)：控制程序(control procedures)對各專業(yè)質(zhì)量控制提出具體要求。  1、控制程序根據(jù)美國CLIA88最終規(guī)則Sec.493.1256標(biāo)準(zhǔn)：控制程序  (a)對于每一檢測系統(tǒng)，實驗室負(fù)責(zé)制定控制程序，監(jiān)測整個分析過程的準(zhǔn)確度和精密度。  (b)實驗室必須建立檢測控制物的數(shù)量、類型

2、和頻率，如果適合，實驗室應(yīng)按Sec.493.1256 (b)(3)規(guī)定驗證或建立性能規(guī)范。  (c)控制程序必須  (1)立即檢測出由于檢測系統(tǒng)故障、不利的環(huán)境條件及操作者性能而產(chǎn)生的誤差。  (2)長期監(jiān)測由于檢測系統(tǒng)性能和環(huán)境條件改變和操作者性能變化而可能影響到的準(zhǔn)確度和精密度性能。  (d)除了CMS批準(zhǔn)的程序，如國家操作手冊附錄C中規(guī)定(CMS Pub7)的外，提供了等效質(zhì)量檢測，實驗室必須  (1)執(zhí)行本節(jié)規(guī)定的質(zhì)量控制程序，除非在493.1261到493.1278部分其他專業(yè)和亞專業(yè)有其他的規(guī)定。  (2)對于每一檢測系統(tǒng)

3、，當(dāng)他們滿足或超出本節(jié)(d)(3)部分要求時，執(zhí)行的質(zhì)量控制程序使用廠家規(guī)定或?qū)嶒炇医⒌膫€數(shù)和頻率。  (3)每天檢測患者標(biāo)本時至少每天檢測一次控制品，或執(zhí)行如下的步驟  (i)每一定量檢測程序，包括兩個不同濃度水平的控制品；  (ii)對每一定性的檢測程序，包括一個陰性和一個陽性控制品；  (iii)對于產(chǎn)生分級或滴度結(jié)果的檢測程序，分別包括陰性控制品和具有分級或滴度反應(yīng)性的控制品；  (iV)對于具有提取階段的每一檢測系統(tǒng)，包括兩個控制品，其中一種能夠檢出提取階段的誤差；  (v)對于每一種分子擴(kuò)增程序，包括兩個控制品，如果反應(yīng)

4、抑制性是假陰性結(jié)果的顯著性來源，一個控制品能夠檢出抑制性作用。  (4)對于薄層層析    (i)如果適當(dāng)時，在每一板或卡上點上含有所有已知的物質(zhì)或藥物組的校準(zhǔn)品，其經(jīng)薄層層析識別，由實驗室報告；  (ii)適當(dāng)時，在每板或卡上包括至少一個控制品，應(yīng)與患者標(biāo)本檢測步驟一樣處理，包括提取過程。  (5)對于每個電泳程序，和患者標(biāo)本一樣處理，至少有一個控制品，其含有確定或檢測的物質(zhì)。  (6)當(dāng)引入完全改變的試劑，執(zhí)行了主要的預(yù)防性維護(hù)；或更換影響試驗性能的任何關(guān)鍵部件時，在恢復(fù)患者檢測之前，應(yīng)按照本節(jié)的規(guī)定進(jìn)行控制品的檢測。&

5、#160; (7)在整個檢測時間內(nèi)，所有進(jìn)行試驗的檢驗人員均使用相同的控制品進(jìn)行檢測。    (8)應(yīng)與檢測患者標(biāo)本一樣的方式來檢測控制品。    (9)當(dāng)校準(zhǔn)品作為控制品時，使用與用于建立切值或校準(zhǔn)檢測系統(tǒng)不同批號的校準(zhǔn)品。    (10)建立或驗證所有控制品的可接受的標(biāo)準(zhǔn)。    (i)當(dāng)使用的控制品提供定量的結(jié)果時，必須確定每一批號控制品的統(tǒng)計參數(shù)(如：均值和標(biāo)準(zhǔn)差)。    (ii)實驗室可使用商品化定值的控制品，其定值是與實驗室所使方法

6、和儀器有關(guān)；實驗室需要對其值進(jìn)行驗證。    (iii)通過長時期同時檢測已有統(tǒng)計學(xué)參數(shù)的控制品，實驗室應(yīng)建立起非定值控制品的統(tǒng)計學(xué)參數(shù)。    (e)對于試劑、培養(yǎng)基和供應(yīng)品的檢查，實驗室必須做如下的工作：    (1)當(dāng)制備或打開時，若合適，檢查每批自制的、或商品的每個批號的試劑、培養(yǎng)基平板、染色液、抗血清和鑒定系統(tǒng)(使用兩個或更多物質(zhì)、或兩個或更多以上的試劑、或各種組合的系統(tǒng))的陽性和陰性反應(yīng)性，以及反應(yīng)性等級。    (2)每個工作日(除了本亞章的規(guī)定外)，檢查染色物

7、質(zhì)的反應(yīng)性以保證出現(xiàn)預(yù)期的染色特征。如適當(dāng)，應(yīng)包括陽性和陰性反應(yīng)性的控制品。    (3)每次使用時，檢查熒光和免疫組織化學(xué)染色劑對反應(yīng)陰性和陽性時的反應(yīng)性。    (4)在之前，或與最初同時使用    (i)如果檢測要求無菌，應(yīng)對每一批號培養(yǎng)基進(jìn)行無菌試驗；    (ii)檢測每批培養(yǎng)基對各菌種的支持生長的能力，必要時，可選擇或抑制特定的生物，或產(chǎn)生生化反應(yīng)。    (iii)當(dāng)向廠家報告培養(yǎng)基任何的變質(zhì)時，文件記錄培養(yǎng)基的物理特征。 

8、;   (5)按照制造商說明書，使用試劑、培養(yǎng)基和供應(yīng)品，并對檢驗結(jié)果負(fù)責(zé)。    (f)在報告患者試驗結(jié)果之前，控制品的結(jié)果必須滿足實驗室的，以及必要時，廠家檢測系統(tǒng)可接受準(zhǔn)則的要求。    (g)實驗室必須記錄執(zhí)行的所有控制程序。    (h)如果無法獲得控制品，實驗室必須有替代機(jī)制檢出即刻的誤差及長期監(jiān)測檢測系統(tǒng)性能。必須文件記錄替代控制程序的性能。    2、 Sec.493.1261標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌學(xué)  (a)實驗室必須使用控制生物體來檢查下

9、列的陽性和陰性的反應(yīng)性：  (1)每日檢查所使用的-內(nèi)酰胺酶。  (2)每周要檢查所做的革蘭染色。  (3)當(dāng)制備或打開每一批(實驗室自制)、批號(商品制備)和抗血清的運(yùn)輸時，需要每6個月檢查一次。  (b)對于抗生素敏感試驗，實驗室必須在之前、同時、最初使用時，使用批準(zhǔn)的控制生物體，來檢查每批培養(yǎng)基、抗生素。  (1)對于每天進(jìn)行的試驗，實驗室必須使用適當(dāng)?shù)目刂频纳矬w來檢查程序。  (2)在報告患者結(jié)果之前，實驗室控制生物體的區(qū)帶大小或最低抑制濃度必須在規(guī)定的界限之內(nèi)。  (c)實驗室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制

10、程序。   3、Sec.493.1262標(biāo)準(zhǔn)：分枝桿菌學(xué)  (a)每日檢查，實驗室必須用至少一種快酸生物體，其可產(chǎn)生陽性反應(yīng)和一種快酸生物體產(chǎn)生陰性反應(yīng)來檢查用于分枝桿菌鑒定的所有試劑或檢測程序。  (b)對于抗分枝桿菌敏感試驗，實驗室必須在之前、或同時在最初使用，使用批準(zhǔn)的控制生物體，來檢查每批培養(yǎng)基、抗分支桿菌劑。  (1)實驗室必須建立可接受控制結(jié)果的界限。  (2)每周執(zhí)行的試驗，實驗室必須使用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控生物體來檢查程序。  (3)在報告患者結(jié)果之前，控制生物體的結(jié)果必須在建立的界限之內(nèi)。  (c)實驗室必

11、須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制程序。   4、Sec.493.1263標(biāo)準(zhǔn)：真菌學(xué)   (a)當(dāng)制備或打開時，用控制生物體檢查每批自制的、或商品的每個批號的試劑和乳(酸)酚棉藍(lán)的運(yùn)輸?shù)姆磻?yīng)性。   (b)對于真菌敏感試驗，實驗室必須在之前或同時、最初使用，使用適當(dāng)?shù)目刂粕矬w，來檢查每一批號的培養(yǎng)基、抗真菌試劑。    (1)實驗室必須建立可接受質(zhì)控結(jié)果的界限。    (2)每天執(zhí)行的試驗，實驗室必須使用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控生物體來檢查程序。    (

12、3)在報告患者結(jié)果之前，質(zhì)控生物體的結(jié)果必須在建立的界限之內(nèi)。    (c)實驗室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制程序。   5、Sec.493.1264標(biāo)準(zhǔn)：寄生蟲學(xué)   (a)實驗室必須具有可獲得的參考標(biāo)本的載物片或照片，如果可獲得寄生蟲鑒定的粗的標(biāo)本，可使用這些作為實驗室與診斷標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)比較的參考。   (b)實驗室必須校準(zhǔn)和使用校準(zhǔn)的目鏡測微計來確定卵和寄生蟲的大小，如果大小是關(guān)鍵參數(shù)。    (c)每月使用，實驗室必須使用糞便樣本控制品檢查永久的染色將證實染色

13、特征。    (d)實驗室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制程序。    6、Sec.493.1265標(biāo)準(zhǔn)：病毒學(xué)    (a)當(dāng)使用細(xì)胞培養(yǎng)來分離或鑒定病毒時，實驗室必須同時培養(yǎng)一種細(xì)胞底物的控制品或非接種的細(xì)胞作為陰性控制品。    (b)實驗室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的執(zhí)行的所有控制程序。   7、Sec.493.1267標(biāo)準(zhǔn)：常規(guī)化學(xué)    對于血?dú)夥治觯瑢嶒炇冶仨殘?zhí)行如下步驟：    (a

14、)根據(jù)廠家的說明書和廠家推薦的最少的頻次進(jìn)行校準(zhǔn)或驗證校準(zhǔn)。    (b)每8小時檢測一個控制品樣本，每天檢測應(yīng)使用低和高值的控制品。    (c)除非自動化儀器至少每30分鐘內(nèi)部驗證校準(zhǔn)，每次檢測標(biāo)本都應(yīng)同時測一份控制品。    (d)文件記錄本部分規(guī)定的執(zhí)行的所有控制程序。    8、Sec.493.1269標(biāo)準(zhǔn)：血液學(xué)    (a)對于使用血球計數(shù)器手工進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)的    (1)每8個小時操作必須檢測一個控制

15、品。    (2)患者標(biāo)本和控制品必須進(jìn)行雙份檢測。    (b)對于所有非手工的凝血檢測系統(tǒng)，每8個小時的操作和每次更換試劑，實驗室必須包括兩個水平的控制品。    (c)對于手工凝血試驗    (1)在檢測患者樣本和每次更換試劑之前，每次執(zhí)行的試驗必須檢測兩個水平的控制品；    (2)患者標(biāo)本和控制品必須以雙份進(jìn)行檢測。    (d)實驗室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的所執(zhí)行的所有控制程序。  &#

16、160; 9、Sec.493.1271  標(biāo)準(zhǔn)：免疫血液學(xué)    (a)患者檢測    (1)實驗室必須按照廠家的說明書執(zhí)行AB0型，D(Rho)型，未預(yù)見到抗體檢測、抗體識別和相容性試驗，如果適用，從21 CFR 606.151(a)到(e)。    I    (2)實驗室必須通過用抗-A和抗-B試劑與未知紅細(xì)胞同時進(jìn)行檢測來確定AB0 血型。對于確認(rèn)AB0血型，用已知Al和B紅細(xì)胞與未知血清進(jìn)行檢測。    l  

17、;  (3)實驗室必須通過未知紅細(xì)胞與抗-D(抗-RhD)血型試劑一起檢測來確定D(RhD)型    (b)免疫血液學(xué)檢測和血液和血制品的分配。血液和血產(chǎn)品的檢測和分配必須遵守21 CFR 606.100(b)(12)；606.160(b)(3)(ii)和(b)(3)(v)；610.40；640.5(a)，(b)，(c)，和(e)；和640.11(b)。    (c)血液和血液產(chǎn)品的保存。血液和血液產(chǎn)品必須保存在適當(dāng)?shù)臈l件下，應(yīng)包括適當(dāng)?shù)臏囟染瘓笙到y(tǒng)，并定期對其檢查。    (1)可聽見的警報系

18、統(tǒng)必須監(jiān)測適當(dāng)?shù)难汉脱寒a(chǎn)品24小時時間內(nèi)的保存溫度。    (2)必須文件記錄警報系統(tǒng)的檢查。    (d)保留輸血的樣本。根據(jù)實驗室已建立的程序，輸完血的每一單位的樣本必須保留為出現(xiàn)輸血反應(yīng)后的進(jìn)一步檢測。實驗室必須立即處理已過有效期不用保留作進(jìn)一步檢測的血液。  (e)輸血反應(yīng)的調(diào)查。  (1)根據(jù)其已建立的程序，實驗室執(zhí)行相容性試驗，或發(fā)出血液或血液產(chǎn)品，必須迅速地調(diào)查機(jī)構(gòu)內(nèi)發(fā)生的所有輸血反應(yīng)，機(jī)構(gòu)有調(diào)查責(zé)任及給醫(yī)護(hù)人員提供關(guān)于輸血程序改進(jìn)的建議。  (2)若適用時，實驗室必須文件記錄采取所有必

19、需的糾正措施，防止輸血反應(yīng)的再發(fā)生，以及審核所有的政策和程序確保它們對于保證輸血安全是適當(dāng)?shù)摹?#160; (f)實驗室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的所執(zhí)行的所有控制程序。 （二） 臨床化學(xué)檢驗質(zhì)量控制根據(jù)美國CLIA88最終規(guī)則規(guī)定的質(zhì)量控制程序如下：每一定量檢測程序，包括兩個不同濃度的控制品。通過上述的質(zhì)量控制方法選擇和設(shè)計指南(允許總誤差、不精密度和不準(zhǔn)確度，90誤差檢出概率和小于5的假失控概率等)對常規(guī)化學(xué)檢驗項目設(shè)計質(zhì)控方法，其誤差檢出概率可滿足要求。如果選擇的質(zhì)控方法其誤差檢出概率處于中度和低度的情況，根據(jù)全面質(zhì)控策略(total QC strategy)，可采用其他的質(zhì)量控制方

20、法和質(zhì)量改進(jìn)措施。（三）臨床血液學(xué)檢驗質(zhì)量控制    其統(tǒng)計質(zhì)控方法設(shè)計方案同常規(guī)化學(xué)檢測項目。由于控制品有效期較短，不可能完全使用上述臨床化學(xué)使用的繪制質(zhì)控圖方法，此時可采用短期控制品繪制質(zhì)控圖的方式，另一方面可采用保留患者樣品、患者樣品雙份測定的方法進(jìn)行質(zhì)量控制。對于紅細(xì)胞指數(shù)項目更多的是采用患者數(shù)據(jù)方式，即BullS移動均值法。（四）臨床免疫學(xué)檢驗質(zhì)量控制定性檢驗項目的質(zhì)量控制 根據(jù)美國CLIA88最終規(guī)則規(guī)定的質(zhì)量控制程序如下：對每一定性的檢測程序，每一分析批應(yīng)包括一個陰性和一個陽性控制品；對于產(chǎn)生分級或滴度結(jié)果的檢測程序，分別包括陰性控制品和具

21、有分級或滴度反應(yīng)性的陽性控制品。兩種控制品的選擇應(yīng)基于雙重反應(yīng)的不可靠性，即控制品在C0和C1濃度應(yīng)可獲得來執(zhí)行這一方法：在C1濃度的控制品A(+)（臨界值控制品），在C0濃度的控制品B(-).通過使用這兩個控制品，可制作如圖17-3所示的圖形，根據(jù)可建立四種不同的區(qū)間：區(qū)間(1)代表處于控制狀態(tài)；區(qū)間(2)和(3)，相當(dāng)于單一假反應(yīng)：區(qū)間(2)為假陽性反應(yīng)，區(qū)間(3)為假陰性反應(yīng)；區(qū)間(4)，代表雙重的假反應(yīng)：假陽性及假陰性(此種控制圖可由ClinetIQC軟件制作)。在定性分析中這種質(zhì)控圖的主要目的是控制提供雙重反應(yīng)的儀器系統(tǒng)的性能。這    種質(zhì)控圖的目的是

22、檢出假陽性反應(yīng)和假陰性反應(yīng)，看來為了這一目的同時使用兩個控制品是非常方便的。    （五）臨床微生物學(xué)檢驗質(zhì)量控制    中國合格評定國家認(rèn)可委員會CNAS-CL31醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床    微生物學(xué)檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用說明。  、檢驗前程序   1檢驗申請單應(yīng)包括標(biāo)本來源，必要時說明感染類型和或目標(biāo)微生物。2除一般要求外，微生物標(biāo)本的采集及運(yùn)送指南，應(yīng)特別注意以下內(nèi)容：    (1)不同部位標(biāo)本的采集方法

23、。如：血培養(yǎng)應(yīng)明確說明并執(zhí)行標(biāo)本采集的消毒技術(shù)、    合適的標(biāo)本量；  (2)合格的標(biāo)本類型、送檢次數(shù)、標(biāo)本量。如：糞便常規(guī)培養(yǎng)宜包括未向?qū)I(yè)人員咨詢前。每位患者采集標(biāo)本不多于2份；(3)應(yīng)明確規(guī)定需要盡快運(yùn)送的標(biāo)本，以便最大程度地減少延誤并盡快處理；(4)合適的運(yùn)送培養(yǎng)基；      (5)延遲運(yùn)送時，標(biāo)本的貯藏方法；    (6)安全運(yùn)送標(biāo)本的方法(如：密封容器、無標(biāo)本外漏等)；      (7)標(biāo)本標(biāo)識。&#

24、160;   3應(yīng)制定標(biāo)本接收標(biāo)準(zhǔn)，如無肉眼可見的滲漏、合適的標(biāo)本類型/量、正確的保存、預(yù)防拭子干燥、正確的運(yùn)送培養(yǎng)基等。應(yīng)評估標(biāo)本合格與否。不合格的痰標(biāo)本應(yīng)盡快通知醫(yī)生、護(hù)士或患者（門診）以便重新采集。、檢驗程序    細(xì)菌：所選擇的涂片、染色技術(shù)、培養(yǎng)基應(yīng)能從標(biāo)本中分離、識別相應(yīng)的病原菌鑒定方法應(yīng)符合要求(如：通過血清學(xué)、革蘭染色、茵落形態(tài)、生長條件、代謝反應(yīng)、生化和酶活    性、抗茵藥物耐藥性譜等特性鑒定)；應(yīng)能處理組織標(biāo)本。    抗菌藥物敏感性試驗方法包括紙片擴(kuò)散法、稀釋法

25、(瓊脂稀釋法、液體稀釋法)、濃度    梯度擴(kuò)散法(E試驗)或自動化儀器檢測。實驗室應(yīng)遵循一定的準(zhǔn)則，提供與服務(wù)相適應(yīng)    的抗菌藥物敏感性試驗，并能檢測苯唑西林耐藥金黃色葡萄球菌、萬古霉素耐藥腸球菌    青霉素不敏感肺炎鏈球菌等病原菌。    痰培養(yǎng)應(yīng)包括肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、腸桿菌科細(xì)菌的分離，若    標(biāo)本被唾液嚴(yán)重污染，可以不鑒定全部細(xì)菌或不做藥敏試驗；呼吸道和耳鼻喉標(biāo)本應(yīng)能分   離溶血鏈球菌

26、和嗜血桿菌；支氣管肺泡灌洗液和支氣管鏡檢查標(biāo)本應(yīng)能定量培養(yǎng)。    尿液常規(guī)進(jìn)行定量培養(yǎng)(菌落計數(shù))，應(yīng)能分離、鑒定革蘭陽性和或革蘭陰性細(xì)菌。    泌尿生殖道標(biāo)本應(yīng)有合適條件培養(yǎng)淋病奈瑟菌；陰道炎患者標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行革蘭染色；最好能開展孕婦(懷孕3537周)B群鏈球菌的篩查，藥敏實驗應(yīng)包括林可霉素和紅霉素。    糞便標(biāo)本應(yīng)能分離、鑒定腹瀉相關(guān)病原菌(如沙門菌、志賀菌、耶爾森桿菌、彎曲菌、腸出血性大腸桿菌、嗜水氣單胞菌)，結(jié)果報告應(yīng)標(biāo)明具體的細(xì)菌名稱，如未檢出沙門菌、志賀菌等；無癥狀攜帶者，常規(guī)使用增菌培養(yǎng)基

27、或選擇培養(yǎng)基；應(yīng)能檢測霍亂弧菌、艱難梭菌；粘性較低的培養(yǎng)標(biāo)本，宜進(jìn)行直接顯微鏡檢查。年齡大于6個月，有抗菌藥物治療史的嚴(yán)重腹瀉患者，糞便常規(guī)培養(yǎng)無異常發(fā)現(xiàn)時，可檢測艱難梭菌毒素。    腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)立即處理，常規(guī)進(jìn)行革蘭染色，培養(yǎng)基和孵育條件確保能培養(yǎng)常見苛養(yǎng)菌(腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、單核細(xì)胞李斯特菌、奴卡菌等)；應(yīng)根據(jù)實驗室制定的危急值處理規(guī)程報告陽性結(jié)果(包括顯微鏡檢查結(jié)果)；抗原試驗，無論結(jié)果為陽性還是陰性，都應(yīng)再進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)；最好有其他方法檢測不能培養(yǎng)或難培養(yǎng)的細(xì)菌。    傷口標(biāo)本應(yīng)明確培養(yǎng)程序，深部傷口感染應(yīng)至少

28、包括標(biāo)本采集、需氧菌及厭氧菌的培養(yǎng)及鑒定。如果不具備厭氧培養(yǎng)條件，則應(yīng)有程序表明，標(biāo)本置合格的運(yùn)送系統(tǒng)迅速送有條件的實驗室。應(yīng)有適當(dāng)?shù)姆椒z測苛養(yǎng)菌(如放線菌，快速生長的分枝桿菌)。最好進(jìn)行直接涂片革蘭染色檢查并報告結(jié)果。    厭氧菌培養(yǎng)時間與標(biāo)本類型、診斷有關(guān)，但在第一次培養(yǎng)評估之前應(yīng)有足夠的培養(yǎng)時間(至少48小時)。應(yīng)有合適的液體培養(yǎng)基(如巰基乙酸鹽培養(yǎng)基)，有合適的鑒定方法(適用時)。    分枝桿菌：檢查標(biāo)本應(yīng)置密閉的防滲漏容器內(nèi)；某些標(biāo)本(如：尿液、痰液)抗酸染色及培養(yǎng)前應(yīng)濃縮。應(yīng)以密閉的螺旋蓋試管置密封的離心架內(nèi)離心，以

29、最大程度減少氣溶膠危害。應(yīng)進(jìn)行原始標(biāo)本涂片分枝桿菌熒光染色；常規(guī)培養(yǎng)在3537，當(dāng)臨床有特殊說明(某些特殊菌屬)時，可置3032。C或42。標(biāo)本量大時，宜至少接種2類培養(yǎng)基。應(yīng)在收到標(biāo)本24小時內(nèi)報告抗酸染色結(jié)果。    真菌：應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和環(huán)境，以保證分離重要的致病菌，并盡量減少污染；分離和鑒定程序應(yīng)包括直接或染色(如10KOH，墨汁染色或吉姆薩染色)初篩、合適的選擇性培養(yǎng)基、孵育溫度以及藥敏試驗。應(yīng)準(zhǔn)備兩種培養(yǎng)基(含或不含抗菌藥物)。如果在室溫下培養(yǎng)，應(yīng)每天監(jiān)測并記錄室溫(2226)以確定室溫持續(xù)滿足真菌的生長。    提供

30、鑒定服務(wù)的實驗室，應(yīng)建立完善的真菌鑒定程序，包括玻片培養(yǎng)(必要時)，生化反應(yīng)，營養(yǎng)試驗(必要時)。否則應(yīng)送有條件的實驗室鑒定。    經(jīng)空氣傳播有高度傳染性的微生物標(biāo)本、含菌絲體的真菌應(yīng)在生物安全柜或安全罩內(nèi)處理。若采用平板培養(yǎng)，應(yīng)有適當(dāng)?shù)陌踩胧?如封蓋)，以防止平板意外打開。只有具備嚴(yán)格的、適當(dāng)?shù)陌踩胧┎拍苓M(jìn)行玻片培養(yǎng)。病毒：單層細(xì)胞應(yīng)孵育一定時間，以滿足相應(yīng)病毒的生琵要求；應(yīng)詳細(xì)記錄細(xì)胞類型、傳代數(shù)、細(xì)胞來源、培養(yǎng)基及生長狀況；應(yīng)檢測并記錄培養(yǎng)基和稀釋劑的無菌試驗和pH；應(yīng)監(jiān)測細(xì)胞病變效應(yīng)，以優(yōu)化培養(yǎng)的最佳時fB3。宜比較未經(jīng)接種或接種無菌物質(zhì)的單層細(xì)胞與

31、接種臨床標(biāo)本的培養(yǎng)物。應(yīng)建立程序，對定量血清試驗的紅細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測并標(biāo)準(zhǔn)化。工作表和或記錄應(yīng)顯示試劑或參比血清的滴度(如果可能)，以及檢測結(jié)果的實際滴度。所有血清學(xué)試驗檢測抗原或抗體，應(yīng)設(shè)立陽性和陰性對照。    寄生蟲：實驗室應(yīng)與臨床醫(yī)師協(xié)商制定寄生蟲常規(guī)檢驗操作規(guī)程并遵循，其中包括常規(guī)寄生蟲學(xué)試驗糞便標(biāo)本的采集時間、次數(shù)、標(biāo)本量。糞便顯微鏡檢查蟲卵和寄生蟲，應(yīng)包括濃縮過程和固定染色試驗；新鮮稀便顯微鏡檢查應(yīng)包括直接濕片檢查，以觀察寄生蟲的動力。    血液寄生蟲(瘧原蟲或其他血源性寄生蟲)顯微鏡檢查應(yīng)制備厚血涂片和薄血涂片，陽性

32、結(jié)果應(yīng)執(zhí)行危急值報告程序。血涂片檢驗瘧原蟲陽性時，應(yīng)同時報告鑒定結(jié)果。    分子微生物學(xué)：每次患者標(biāo)本核酸提取、準(zhǔn)備過程(手工或自動化)，應(yīng)平行設(shè)立陰陽性質(zhì)控。應(yīng)規(guī)定并記錄所有孵育(反應(yīng))溫度。如果孵育溫度超出規(guī)定范圍，應(yīng)在發(fā)報告前采取糾正措施。試驗操作和結(jié)果報告應(yīng)遵循制造商的建議，而不用其他試劑、探針取代。    應(yīng)制定程序驗證所有環(huán)節(jié)，包括染色、試劑、培養(yǎng)基、抗血清和分析軟件等符合預(yù)期性能。應(yīng)規(guī)定特殊病原體的識別、隔離、報告，以及特殊處理程序。除一般內(nèi)容外，程序還應(yīng)包括適宜的培養(yǎng)環(huán)境和足夠的培養(yǎng)時間；非選擇性培養(yǎng)基(平板直徑大于

33、9cm)宜只接種一份標(biāo)本。應(yīng)能夠盡快完成白喉桿菌、氣性壞疽菌群、炭疽桿菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)桿菌檢測；痰標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行常規(guī)涂片、革蘭染色，以確定標(biāo)本的可接受性或培養(yǎng)范圍。、檢驗程序的質(zhì)量保證實驗室的內(nèi)部質(zhì)量控制體系應(yīng)以文件形式明確規(guī)定，包括整個實驗操作過程，如實驗分析前、中、后(報告)，以及病人識別及準(zhǔn)備；標(biāo)本采集、標(biāo)識、保存、運(yùn)送、處理、檢測后貯藏；報告發(fā)送時間。這些內(nèi)容應(yīng)符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。如：應(yīng)對檢測儀器進(jìn)行維護(hù)、功能評估及溫度監(jiān)測；在報告患者結(jié)果之前，應(yīng)確認(rèn)質(zhì)控在可接受范圍；缺乏審核者的報告結(jié)果，應(yīng)由適當(dāng)人員在24小時內(nèi)進(jìn)行評估；應(yīng)有措施發(fā)現(xiàn)并更正重大的文字錯誤、實驗錯誤以及可能影響患者處理的不尋

34、常的檢測結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程內(nèi)容應(yīng)包括：實驗原理、臨床意義、標(biāo)本類型、檢測試劑、定標(biāo)試劑、質(zhì)控、操作步驟、計算方法、生物參考區(qū)間及檢測結(jié)果的解釋，并注明分析前后注意事項。操作者應(yīng)能方便取閱，實際操作應(yīng)與之相符。      應(yīng)有文檔資料證明，工作人員了解其操作活動涉及的所有文件。質(zhì)量管理體系文件應(yīng)至少每年一次由實驗室負(fù)責(zé)人或其指定人員評估。新的制度、操作規(guī)程或原有文件的重要變更實施前，應(yīng)由實驗室負(fù)責(zé)人或其指定人員評估并批準(zhǔn)。    應(yīng)有措施保證所有工作人員顯微鏡檢查結(jié)果判斷及報告的一致性。  &#

35、160; 試劑：所有試劑應(yīng)標(biāo)注：名稱和質(zhì)量、濃度或滴度；存放條件；配制時間；失效期。以上內(nèi)容亦應(yīng)記錄。若試劑啟封，改變了有效期和儲存條件，應(yīng)記錄新的有效期。試劑的儲存條件應(yīng)遵循生產(chǎn)商的建議，并在標(biāo)明的有效期內(nèi)使用。    新批號或貨次的試劑使用前，應(yīng)通過直接分析參考物質(zhì)、新舊批號平行實驗或常規(guī)質(zhì)控等方法進(jìn)行性能驗證，并記錄。定性試驗試劑應(yīng)至少檢測一個已知陽性和一個已知陰性樣本。    直接抗原檢測試劑，若含內(nèi)質(zhì)控，每一新批號或相同批號不同貨次應(yīng)檢測陽性和陰性外質(zhì)控并記錄。若不含內(nèi)質(zhì)控，實驗應(yīng)每天檢測陽性和陰性質(zhì)控并記錄。 &

36、#160;   培養(yǎng)基：外觀應(yīng)良好(平滑、水分適宜、無污染、適當(dāng)?shù)念伾秃穸?，試管培養(yǎng)基濕度適宜)，應(yīng)有明確標(biāo)簽，根據(jù)標(biāo)簽應(yīng)能獲得生產(chǎn)日期(批號)、保質(zhì)期、配方(適用時)、質(zhì)量控制、貯存條件等信息。    購買的有質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基，實驗室應(yīng)保存制造商所遵循的質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)，以及每批號產(chǎn)品完成無菌試驗、生長試驗、生化反應(yīng)及質(zhì)量控制性能的合格證明等文件；無質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基，每批號和或每次購買的產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能，包括生長試驗或與舊批號平行試驗、生長抑制試驗(適用時)、生化反應(yīng)(適用時)等。每個批號和或每次購買時，應(yīng)檢查并記錄產(chǎn)品的破損、污染

37、，及外觀、冷凍或加熱現(xiàn)象。    自制培養(yǎng)基，每批號產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能，包括無菌試驗、生長試驗或與舊批號平行試驗、生長抑制試驗(適用時)、生化反應(yīng)(適用時)等。    細(xì)菌：所有染色劑(革蘭染色、特殊染色、熒光染色)的新批號，以及使用中的染色劑，應(yīng)至少每周用已知陽性和陰性(適用時)的質(zhì)控菌株檢測染色程序；使用的每種染色方法，應(yīng)有操作程序(如：每種試劑作用時間等)，并遵循。    新批號及每一貨次的試劑、紙片，如吲哚試劑，桿菌肽，奧普托辛，X、V、XV因子紙片等應(yīng)有陰陽性質(zhì)控。凝固酶、過氧化氫酶、氧化酶、|3內(nèi)酰胺酶，除新批號及每一貨次外，使用每天應(yīng)做陰性和陽性質(zhì)控，但商業(yè)頭孢菌素試劑的8內(nèi)酰胺酶試驗可遵循制造商的奄議。應(yīng)驗證商業(yè)鑒定系統(tǒng)(包括自動、半自動、手32)結(jié)果的可靠性。    診斷性抗血清試驗應(yīng)設(shè)陰陽性，尤其是陰性對照。    有多種組成部分的試劑盒，應(yīng)使用同-于tL號的成分，除非生產(chǎn)商有特別說明。    應(yīng)每天監(jiān)測并記錄CO2孵育箱內(nèi)的C02濃度。    抗菌藥物敏感性試驗：常規(guī)采用的藥敏試驗方法(紙片擴(kuò)散法、