科華ST-360酶標(biāo)儀操作規(guī)程

1、ST-360酶標(biāo)分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.目的通過(guò)對(duì)ST-360酶標(biāo)儀的規(guī)范操作，以獲取準(zhǔn)確的結(jié)果，使其處于良好的工作狀態(tài)，并保證操作人員的人身健康與安全。2范圍 適用于ST-360酶標(biāo)儀的操作、維護(hù)及保養(yǎng)。3職責(zé)化驗(yàn)員嚴(yán)格按照程序進(jìn)行操作、維修、保養(yǎng)及記錄。 計(jì)量員負(fù)責(zé)其校驗(yàn)。衛(wèi)檢科負(fù)責(zé)監(jiān)督。4.基本原理ST-360酶標(biāo)供醫(yī)療機(jī)構(gòu)用于酶聯(lián)免疫測(cè)定。酶免反應(yīng)中的顯色反應(yīng)是通過(guò)顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。酶標(biāo)儀利用分光光度計(jì)的原理，讀取酶免實(shí)驗(yàn)中反應(yīng)物的吸光度值，進(jìn)而進(jìn)行分析。ST-360酶標(biāo)儀適用于96孔平板式樣品盤(pán)，有六種測(cè)量方式和九種計(jì)算方式，形式多樣靈活，

2、最終結(jié)果可以打印，也可通過(guò)串行口輸出給計(jì)算機(jī)。ST-360酶標(biāo)儀時(shí)一種通道垂直光路光密度檢測(cè)儀，可用來(lái)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)光密度測(cè)定與凝集反應(yīng)檢測(cè)為了提高酶標(biāo)儀光源能量的效率及確保光源的穩(wěn)定性，ST-360酶標(biāo)儀具有電壓自動(dòng)調(diào)節(jié)功能。5. 檢測(cè)原理ST-360酶標(biāo)儀利用了垂直光密度檢測(cè)的概念，即光束經(jīng)過(guò)整個(gè)標(biāo)本的垂直測(cè)光發(fā)，光的吸收與板孔中吸光物質(zhì)的多少呈正比。吸光值由以下公式表示：A = （a/s）×mA = 吸光度值；a = 物質(zhì)的克分子吸收率 ；m = 吸光物質(zhì)的質(zhì)量 ；s = 垂直于光路的橫切面積。6.操作規(guī)程6.1 開(kāi)機(jī)將酶標(biāo)儀后部的開(kāi)關(guān)打開(kāi)，儀器將顯示正在自檢，隨后顯示當(dāng)前的測(cè)量方式

3、和計(jì)算方式及“準(zhǔn)備就緒”。在自檢過(guò)程中，儀器對(duì)每一個(gè)已裝的濾光片選擇合適的光強(qiáng)度，等待1分鐘預(yù)熱。注：儀器顯示測(cè)量方式和計(jì)算方式是在兩個(gè)頁(yè)面，須按【】【】鍵查看，后續(xù)相同。6.2 將待測(cè)板放置于載物臺(tái)上6.3 按【】【】鍵以選擇待測(cè)項(xiàng)目的相應(yīng)程序（每個(gè)通道存放的程序已由本室人員根據(jù)試劑盒的要求事先輸入）。6.4 按【開(kāi)始】鍵進(jìn)行掃描。6.5 儀器掃描后，正常情況下屏幕即顯示96孔測(cè)試結(jié)果。顯示結(jié)果為+、值時(shí)為一頁(yè)，顯示結(jié)果為濃度或吸光度值時(shí)分二頁(yè)，須用【】【】鍵翻閱查看。6.6 打開(kāi)打印機(jī)電源，放上A4 紙，打印出測(cè)試結(jié)果。6.7 關(guān)閉酶標(biāo)儀及打印機(jī)電源。7 鍵盤(pán)功能7.1 【打印】：打印屏幕

4、顯示結(jié)果。7.2 【功能】：選擇儀器功能。7.3 【測(cè)量方式】：選擇測(cè)量方式。7.4 【計(jì)算方式】：選擇計(jì)算方式。7.5 【開(kāi)始】：開(kāi)始檢測(cè)。7.6 【退出】：從設(shè)置功能項(xiàng)或樣品測(cè)試中退出。7.7 【清除】：在確認(rèn)前更正數(shù)據(jù)。7.8 【確定】：對(duì)輸入模式和輸入?yún)?shù)確認(rèn)。7.9 【】：向前查閱模式和參數(shù)。7.10 【】：向后查閱模式和參數(shù)。8編制測(cè)試程序8.1 測(cè)量方式8.1.1 按【測(cè)量方式】鍵，參照屏幕顯示按16中的任一數(shù)字鍵或按【】、【】鍵移動(dòng)并按【確定】鍵，選擇所需的測(cè)量方式。8.1.2 當(dāng)選擇了測(cè)試方式中的某一項(xiàng)后，有相應(yīng)的參數(shù)需要設(shè)置。8.1.2.1 單波長(zhǎng)檢測(cè)參數(shù)設(shè)置：波長(zhǎng)值和空白

5、方式。當(dāng)選擇單波長(zhǎng)方式后，參照屏幕顯示可按AH中的任一字母鍵或按【】、【】并確認(rèn)所需波長(zhǎng)，按【確定】鍵，再按屏幕顯示可按14中的任一數(shù)字鍵或按【】、【】移動(dòng)并確認(rèn)，選擇空白方式。（1）當(dāng)選擇多孔試劑空白時(shí)，參照屏幕顯示可設(shè)置A1H12的任一位置，按【確定】鍵后在相應(yīng)位置上出現(xiàn)黑點(diǎn)。用戶(hù)可設(shè)置最多8空白位置，當(dāng)設(shè)置完相應(yīng)的空白位置后，按【確定】鍵退出。注：儀器始終保持前一次所選狀態(tài)，開(kāi)始選擇后，儀器會(huì)自動(dòng)重新刷新，按【清除】鍵可恢復(fù)上一次的空白設(shè)置。（2）當(dāng)選擇列空白時(shí)，參照屏幕顯示可選擇112的任一數(shù)字鍵，按【確定】鍵后，則在相應(yīng)列上出現(xiàn)一列黑點(diǎn)。列空白即為每行采用各自不同的空白。（3）當(dāng)選擇

6、行空白時(shí)，參照屏幕顯示可選擇任一字母鍵，按【確定】鍵后，可在相應(yīng)行上出現(xiàn)一行黑點(diǎn)。行空白即為每行采用各自不同的空白。8.1.2.2 雙波長(zhǎng)檢測(cè)參數(shù)設(shè)置：第一波長(zhǎng)值和第二波長(zhǎng)值、空白方式。選擇雙波長(zhǎng)時(shí)，參照屏幕顯示可選擇AH中的任一字母鍵或按【】、【】鍵選擇第一/第二波長(zhǎng)后，按【確定】鍵，再進(jìn)行空白方式選擇。其空白方式同單波長(zhǎng)空白方式設(shè)置。8.1.2.3 雙時(shí)法檢測(cè)參數(shù)設(shè)置：波長(zhǎng)、空白方式、間歇時(shí)間，其中波長(zhǎng)及空白方式設(shè)置同上。當(dāng)設(shè)置完空白方式，參照屏幕顯示可按相應(yīng)數(shù)字鍵依次輸入時(shí)、分、秒。注：最短間歇時(shí)間為5秒。8.1.2.4 動(dòng)力學(xué)法檢測(cè)參數(shù)設(shè)置：波長(zhǎng)、空白方式、間歇時(shí)間、延遲時(shí)間、全部時(shí)間

7、，其參數(shù)設(shè)置同上。注：最短間歇時(shí)間為5秒，全部時(shí)間必須大于間歇時(shí)間與延遲時(shí)間之和。8.1.2.5 多波長(zhǎng)檢測(cè)相應(yīng)參數(shù)為第一列波長(zhǎng)、第十二列波長(zhǎng)及空白選擇，設(shè)置方法同上。8.2 計(jì)算方式儀器的計(jì)算方式有九種，當(dāng)選擇了計(jì)算方式中的某一項(xiàng)后，有相應(yīng)的參數(shù)需要選擇和設(shè)置。8.2.1 吸光度法：結(jié)果以吸光度形式輸出，無(wú)需參數(shù)設(shè)置。8.2.2 因子計(jì)算法：測(cè)出的吸光度值和用戶(hù)給出的因子相乘得出濃度，濃度單位由因子單位確定。濃度根據(jù)以下公式計(jì)算：濃度 = 因子×吸光度參數(shù)設(shè)置：因子。8.2.3 標(biāo)準(zhǔn)濃度法：用戶(hù)輸入標(biāo)準(zhǔn)品濃度，酶標(biāo)儀通過(guò)這些標(biāo)準(zhǔn)品，用所選公式擬合成曲線(xiàn)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，可將測(cè)量得出的

8、吸光度換算成濃度。參數(shù)設(shè)置：擬合公式及相應(yīng)系數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)品的序號(hào)、位置、濃度。8.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法：用戶(hù)輸入所選擬合曲線(xiàn)的A、B、C、D值來(lái)確定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，酶標(biāo)儀用該曲線(xiàn)方程來(lái)計(jì)算濃度。參數(shù)設(shè)置：擬合曲線(xiàn)及相應(yīng)擬合曲線(xiàn)系數(shù)。8.2.5 單限檢測(cè)法：儀器測(cè)出的吸光度與用戶(hù)定義的或按公式計(jì)算出的一個(gè)極限值比較，如果低于極限值，會(huì)出現(xiàn)負(fù)號(hào)“”。相反，會(huì)出現(xiàn)正號(hào)“”。如果極限值為負(fù)，出現(xiàn)結(jié)果相反。參數(shù)設(shè)置：極限值、系數(shù)A、B、C及陰陽(yáng)性。8.2.6 雙限檢測(cè)法：儀器測(cè)出的吸光度與用戶(hù)定義的兩個(gè)限值比較。如結(jié)果低于兩個(gè)限值，會(huì)出現(xiàn)負(fù)號(hào)“”；如結(jié)果在兩個(gè)限值之間，出現(xiàn)“0”；如結(jié)果高于兩個(gè)限值，會(huì)出現(xiàn)正號(hào)“”

9、。參數(shù)設(shè)置：低極限值、高極限值。注：低限值必須小于高限值。8.2.7 等級(jí)檢測(cè)法：用戶(hù)定義的數(shù)值被分成10個(gè)部分，10個(gè)部分編號(hào)為09。測(cè)出的吸光度值根據(jù)它所在的部分以09中的編號(hào)反映出來(lái)。參數(shù)設(shè)置：等級(jí)范圍值。8.2.8 列減法：第二列結(jié)果減去第一列結(jié)果，第四列結(jié)果減去第三列結(jié)果，或反之。參數(shù)設(shè)置：列減方法。8.2.9 兩點(diǎn)法：用戶(hù)輸入標(biāo)準(zhǔn)品濃度，儀器通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品計(jì)算出點(diǎn)到點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。通過(guò)這一曲線(xiàn)，將測(cè)得的吸光度值轉(zhuǎn)換成濃度。參數(shù)設(shè)置：標(biāo)準(zhǔn)品的序號(hào)、位置及濃度，設(shè)置方法與標(biāo)準(zhǔn)濃度法相同，只是擬合時(shí)點(diǎn)到點(diǎn)之間為一條直線(xiàn)。8.3 功能設(shè)置8.3.1 樣品盤(pán)運(yùn)動(dòng)方式用戶(hù)可按AD中任一字母鍵或按【】

10、、【】鍵選擇樣品盤(pán)運(yùn)動(dòng)方式并按【確定】鍵確認(rèn)。8.3.2 結(jié)果輸出處理屏幕中，A、B為對(duì)應(yīng)項(xiàng)，C、D為對(duì)應(yīng)項(xiàng)，E、F為對(duì)應(yīng)項(xiàng)，用戶(hù)只能選擇對(duì)應(yīng)項(xiàng)中的某一項(xiàng)。8.3.3 每盤(pán)標(biāo)準(zhǔn)處理用戶(hù)可按A、B選擇或按【】、【】鍵選擇每盤(pán)標(biāo)準(zhǔn)處理方式，并按【確定】鍵確認(rèn)。注：只對(duì)計(jì)算方式3、9有效。8.3.4 存儲(chǔ)當(dāng)前內(nèi)容用戶(hù)可按A、B選擇存儲(chǔ)程序還是結(jié)果，按150選擇存儲(chǔ)的號(hào)碼。儀器共可存儲(chǔ)50個(gè)程序設(shè)置和50次測(cè)量結(jié)果。8.3.5 調(diào)用已存內(nèi)容可按A、B及150調(diào)出上面一步（存儲(chǔ)當(dāng)前內(nèi)容）中存儲(chǔ)的內(nèi)容。8.3.6 打印已存內(nèi)容8.3.7 濾光片設(shè)置輸入要更改的位置和波長(zhǎng)。建議：用戶(hù)不可隨意修改該項(xiàng)設(shè)置。8

11、.3.8 時(shí)鐘設(shè)置按A、B、C、D、E鍵選擇進(jìn)行相應(yīng)設(shè)置。8.3.9 恢復(fù)默認(rèn)值9校正程序9.1 濾光片波長(zhǎng)精度檢查將不同波長(zhǎng)的濾光片從酶標(biāo)儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（波長(zhǎng)精度±0.3nm）于可見(jiàn)光區(qū)對(duì)每個(gè)濾光片進(jìn)行掃描，其檢測(cè)值與標(biāo)定值之差為濾光片波長(zhǎng)精度。一般酶標(biāo)儀無(wú)585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長(zhǎng)為630nm）。9.2 通道差與孔間差檢測(cè)通道差檢測(cè)是取一只酶標(biāo)板小孔杯（杯底須光滑，透明，無(wú)污染以酶標(biāo)板架作載體，將其（內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右）置于8個(gè)通道的相應(yīng)位

12、置，蒸溜水調(diào)零，于490nm處連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道的檢測(cè)器測(cè)量結(jié)果的一致性，可用極差值來(lái)表示。孔間差的測(cè)量是選擇同一廠家，同一批號(hào)酶標(biāo)2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調(diào)至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測(cè)，其誤差大小用±1.96s衡量。9.3 零點(diǎn)飄移（穩(wěn)定性觀察）取8只小孔杯分別置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置，均加入200ul蒸餾水并調(diào)零，于490nm處每隔30分鐘測(cè)一次，觀察各個(gè)通道4小時(shí)內(nèi)吸光度的變化。9.4 精密度評(píng)價(jià)每個(gè)通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同濃度的甲基橙溶解，蒸餾水調(diào)零，于490nm作雙份平行測(cè)定

13、，每日測(cè)二次（上下午各一次），連續(xù)測(cè)定20天。分別計(jì)算其批內(nèi)精密度，日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。9.5 線(xiàn)性測(cè)定用電子天平精確稱(chēng)取甲基橙配制5個(gè)系列的溶液，于490nm平行測(cè)8次，取其均值。計(jì)算其回歸方程，相關(guān)系數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差s，并用±1.96s表示樣品測(cè)量的誤差范圍.雙波長(zhǎng)測(cè)定評(píng)價(jià)：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測(cè)定波長(zhǎng)為490nm，校正波長(zhǎng)為585nm），先后于8個(gè)通道檢測(cè)，每個(gè)通道測(cè)3次，比較各組之間是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以考察雙波長(zhǎng)消除干擾組分的效果。10自校規(guī)范10.1 測(cè)定原理：根據(jù)樣品OD值計(jì)算樣品中抗原或抗體的濃度。10.2 校

14、準(zhǔn)條件：儀器正常工作需要以下環(huán)境：溫度1825，濕度4585%RH，電壓220V。10.3 質(zhì)控品：選擇衛(wèi)生部質(zhì)控血清或公認(rèn)質(zhì)量好的質(zhì)控品嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行質(zhì)量控制。10.4 校準(zhǔn)方法：每日測(cè)定HBsAg質(zhì)控品，月底計(jì)算CV值。10.5 校準(zhǔn)步驟10.5.1 按照操作說(shuō)明進(jìn)行校準(zhǔn)測(cè)定。10.5.2 RCV值的測(cè)定，在日常工作條件下規(guī)范操作，每一個(gè)質(zhì)控項(xiàng)目連續(xù)測(cè)定20天。10.5.3 對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)算出靶值、標(biāo)準(zhǔn)差(SD)、變異系數(shù)(CV)。10.5.4 用RCV的測(cè)定結(jié)果建立室內(nèi)質(zhì)控，判斷標(biāo)準(zhǔn)以臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程為準(zhǔn)。11維護(hù)保養(yǎng)程序11.1 保養(yǎng)11.1.1 為保證儀器持

15、續(xù)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，應(yīng)干擾光學(xué)系統(tǒng)的任何部件。光路的調(diào)校錯(cuò)誤會(huì)影響測(cè)量結(jié)果。11.1.2 保持光學(xué)系統(tǒng)的清潔，以確保正常功能和結(jié)果的準(zhǔn)確，應(yīng)避免任何液體流入儀器內(nèi)部，并防塵、防止其它外源性物質(zhì)，不要用手指摸透鏡表面、濾光鏡、光電檢測(cè)器。11.2 儀器常規(guī)清潔11.2.1 關(guān)掉儀器，并拔掉電源插頭。11.2.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾水或溫和去污劑，清潔儀器外部、導(dǎo)軌和板架。11.3 清潔光學(xué)系統(tǒng)：詳見(jiàn)儀器使用說(shuō)明書(shū)。11.4 消毒方法：在使用危險(xiǎn)性的傳染性物質(zhì)后，用以下方法消毒儀器11.4.1 關(guān)掉儀器，并拉掉電源插頭。11.4.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾70%乙醇，清潔儀器外部、軌道和板架。11.4.3 儀器內(nèi)部消毒，詳見(jiàn)儀器使用說(shuō)明書(shū)。12配套中文電腦操作12.1 打開(kāi)電腦主機(jī)及顯示器。12.2 雙擊進(jìn)入酶免疫管理系統(tǒng)。12.3 在“病人資料”菜單確認(rèn)今日值班。12.4 在“病人資料”菜單中輸入當(dāng)日化驗(yàn)單的病人資料。12.5 在“檢驗(yàn)報(bào)告單”菜單中檢查，修改及打印報(bào)告單。12.6 在“酶免疫管理