植物組織培養(yǎng)之培養(yǎng)基

1、植物組織培養(yǎng)之培養(yǎng)基設(shè)計主要是參考分析植物體養(yǎng)分而來，但須注意的是，試管培養(yǎng)之培殖體 吸收養(yǎng)分的途徑和栽植在土讓利用根系吸收養(yǎng)分之機(jī)制有所不同。在早期組織培養(yǎng)試驗顯示氮、 磷、鉀、鈣、鎂及硫為細(xì)胞正常生長之重要元素，上述之養(yǎng)分稱為巨量元素，癒合組織培養(yǎng)通常 需要較高濃度巨量元素，而根之培養(yǎng)度濃度則需降低。在木本植物組織培養(yǎng)中最常使用之培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，或?qū)S培養(yǎng)基修飾呈不同濃度層級,但在針葉樹培養(yǎng)， MS培養(yǎng)基則較少使用。培養(yǎng)基是否適於培養(yǎng)特定植物或誘導(dǎo)植物之型態(tài)發(fā) 展，其關(guān)鍵在於培養(yǎng)基之離子強(qiáng)度、總氮含量、硝酸態(tài)氮與銨態(tài)氮之比、鈣離子及培殖體是否對 氯離子敏感。當(dāng)培養(yǎng)之樹種尚無研究資料時

2、，一般建議先使用養(yǎng)分濃度較低之培養(yǎng)基，如此可使培殖體之死亡 率降低，後序之培養(yǎng)如有需要可逐漸提高養(yǎng)分濃度。培養(yǎng)基之養(yǎng)分濃度隨培養(yǎng)時間改變，有些元素養(yǎng)分消耗很快，養(yǎng)分元素消耗之情形主要和物種及 培殖體種類有關(guān)。當(dāng)培殖體生長迅速時，頻繁之繼代培養(yǎng)可保持培養(yǎng)基之養(yǎng)分維持在最低底線 上，尤其是使用低養(yǎng)分濃度之培養(yǎng)基更需時常繼代培養(yǎng)。組織培養(yǎng)之培養(yǎng)基組成份可分成三大類，即巨量元素(Macroelements)、微量元素(Microelements)及維生素(Vitamins)。以本實驗室最常使用之培養(yǎng)基MS及 WPM 為例,其組成份如下。MSWPMMacronutrients in mg/LNH4NO3

3、1650400CaCl 2? 2H2O44096MgSO4? 7H2O370370KNO 31900-KH 2PO4170170Ca(NO 3)2? 4H2O-556K2SO4990Micronutrients in mg/LH3BO36.26.2CoCl 2? 6H2O0.025-CuSO4? 5H2O0.0250.25Na2EDTA37.2537.25FeS04 ? 7H2O27.8527.85MnSO 4? 4H2O22.322.3KI0.83-Na2MoO4? 2H2O0.250.25ZnSO 4? 7H2O8.68.6Vitamins in mg/LMy-i no sitol100100Glyc ine2.020Nicoti nic acid0.50.5Pyridoxi ne-HCl0.50.5Thiami n-HCl0.11.0培養(yǎng)液通常先配成數(shù)瓶貯存液(Stock solution )存放4 °C冰箱，待要配製培養(yǎng)基時才進(jìn)行稀釋,配貯存液時許要注意幾點：i高濃度鈣離子與硫酸鹽離子及磷酸鹽離子會形成不