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1、第三章 酶學(xué)習(xí)要點(diǎn)一、概述 定義,RNA也有催化功能作為生物催化劑的特點(diǎn):高效率,高度專一性,對(duì)作用條件敏感,活性可調(diào);專一性:絕對(duì)專一性,相對(duì)專一性,立體專一性組成:簡(jiǎn)單酶,結(jié)合酶全酶酶蛋白輔助因子(輔酶、輔基)二、酶的作用機(jī)理 1.活性中心:概念構(gòu)成:立體結(jié)構(gòu)、其組分的一級(jí)結(jié)構(gòu)不連續(xù) 2.酶(E)與底物(S)結(jié)合:中間產(chǎn)物學(xué)說(E+S=E·SE+P)誘導(dǎo)契合學(xué)說(底物誘導(dǎo)酶活性中心構(gòu)象變化,使之與其構(gòu)象匹配) 3.反應(yīng)活化能的降低:反應(yīng)活化能;酶降低活化能的方式(形成E·S,經(jīng)歷與一般反應(yīng)不同的途徑) 三、影響酶促反應(yīng)速度的因素:1.底物濃度:米氏方程(V=VmS/Km

2、+S)米氏常數(shù)的意義:物理意義:V1/2Vm時(shí)的S;生物意義:Km是特征常數(shù),倒數(shù)表示親和力,多個(gè)底物有多個(gè)Km值、最適底物的Km值最小,計(jì)算 2溫度:最適溫度,原因:變性與反應(yīng)3pH:最適pH 4激活劑:概念,種類:金屬離子、有機(jī)分子、蛋白分子5抑制劑:概念,分類:不可逆抑制、可逆抑制可逆抑制(1)競(jìng)爭(zhēng)性抑制:I與S相似,競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合活性中心,增加S可去除抑制,Vm不變,Km變大(2)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制:I與S不相似,結(jié)合于活性中心之外,不能通過增加S去除,Km不變,Vm變小五、別構(gòu)酶與同工酶1.別構(gòu)酶:結(jié)構(gòu):多亞基,兩中心調(diào)節(jié)因子;正調(diào)節(jié),負(fù)調(diào)節(jié);別構(gòu)效應(yīng)動(dòng)力學(xué)特點(diǎn):S形曲線優(yōu)點(diǎn):S變化小,V變化大

3、 2同工酶:概念,六、分類 氧化還原酶類,轉(zhuǎn)移酶類,水解酶類,裂合酶類,異構(gòu)酶類,合成酶類七、酶活力的測(cè)定1.反應(yīng)速度2酶活力單位(U): 25,1個(gè)大氣壓,1分鐘轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量八、輔助因子和維生素 1NAD和NADP(含煙酰胺,VB5):NAD+(NADP+)2e-2H+NADH(NADPH)H+,氧化還原酶輔助因子2.FMN、FAD(含核黃素,VB2):FAD(FMN)2e-2H+FADH2(FMAH2),氧化還原酶輔助因子3.焦磷酸硫胺素(TPP)(含硫胺素, VB1):脫羧酶輔助因子 4.磷酸吡哆素(含吡哆素,VB6):轉(zhuǎn)氨酶輔助因子 5.生物素(VH):羧化酶輔助因子6.泛酸

4、(VB3):CoA的組成7.硫辛酸8.血紅素習(xí) 題一.選擇題1.酶的活性中心是指:(d)a.酶分子上含有必需基團(tuán)的肽段 b.酶分子與調(diào)節(jié)分子結(jié)合的部位c.酶分子有絲氨酸殘基、二硫鍵存在的部位d.酶分子發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵性區(qū)域2酶的化學(xué)本質(zhì)是:(b)a.糖類 b.蛋白質(zhì) c.脂肪酸 d.DNA 3.同工酶的特點(diǎn)是:(c)a.不同生物體其催化相同反應(yīng)的酶的總稱 b.催化同一底物起不同反應(yīng)酶的總稱c. 催化作用相同但分子組成和理化性質(zhì)不同的酶d. 催化一種底物起聯(lián)鎖反應(yīng)的酶的總稱4.別構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)曲線呈S型,它說明:(b)別構(gòu)酶是單體酶在底物濃度變化很小,別構(gòu)酶活性變化很大別構(gòu)酶催化的反應(yīng)速度比非別

5、構(gòu)酶慢 別構(gòu)酶的反應(yīng)速度與底物濃度無關(guān)5.下列內(nèi)容不屬于酶催化特點(diǎn)的是:(d)a.高度專一性 b.高效率 c. 活性可調(diào) d.反應(yīng)速度恒定6.米氏常數(shù)可表示:(b)a.酶促反應(yīng)的最適底物濃度 b. 酶和底物的親和力 c.酶的穩(wěn)定性 d. 酶和輔酶的親和力 7.競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑作用的特點(diǎn)是:(b)a.與底物競(jìng)爭(zhēng)激活劑 b.與底物競(jìng)爭(zhēng)活性中心 c.與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的輔基 d.與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的必需基團(tuán)8.非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的影響是:(c)a.Km增大,Vm變小 b.Km減小,Vm變小 c.Km不變,Vm變小 d.Km與Vm無變化9酶加快反應(yīng)速度的原因是:(b) a.升高反應(yīng)活化能 b.降低反應(yīng)活化

6、能 c.降低反應(yīng)物的能量水平 d.升高反應(yīng)物的能量水平10酶蛋白變性后活性喪失,這是因?yàn)椋?b) a.酶蛋白被水解 b.高級(jí)結(jié)構(gòu)被破壞 c.失去激活劑 d.活性中心構(gòu)象變化11Km值有如下特點(diǎn):(b) a. 對(duì)酶的最適底物其Km最大 b. 對(duì)酶的最適底物其Km最小 c.Km值隨底物濃度的增大而減少 d.Km值受pH和溫度變化的影響12當(dāng)反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度的60時(shí),此時(shí)底物濃度為Km值的多少倍?(c) a.0.6倍 b.1.2倍 c.1.5倍 d.2倍13某酶有四種底物,其Km值分別為:甲:1.5×10-6、乙:1.5×10-2、丙:1.5×10-4、?。?.5

7、×10-5,該酶的最適底物應(yīng)為:(a) a.甲 b.乙 c.丙 d.丁14.含B族維生素的輔助因子在酶促反應(yīng)中的作用是:(d)促進(jìn)酶與底物的結(jié)合 b.穩(wěn)定酶蛋白的空間構(gòu)象 c. 決定酶蛋白的特異性 d.傳遞質(zhì)子、電子、和化學(xué)基團(tuán)15.作為?;d體的輔助因子含有:(d) a.硫胺素 b.核黃素 c.吡哆醛 d.泛酸16.氧化脫羧作用中所需的輔助因子是下列那種物質(zhì):(b) a.生物素 b. 焦磷酸硫胺素 c.磷酸吡哆醛 d.抗壞血酸 17.維生素B6(吡哆醛)通常是下列那個(gè)反應(yīng)所需輔助因子的前體:(d)a.水解作用 b.氧化作用 c.裂合作用 d.轉(zhuǎn)氨作用二.填空1.酶是_活細(xì)胞_產(chǎn)生的

8、,具有催化活性的_蛋白質(zhì)_。2.從目前的研究水平看,具有催化活性的物質(zhì)不僅有 _蛋白質(zhì)_,而且還有 _ RNA _。3.酶具有_高效性、高度專一性、對(duì)作用條件敏感和受調(diào)控_催化特性。4.從酶蛋白結(jié)構(gòu)看,別構(gòu)酶不僅有 _活性中心_,而且有_調(diào)節(jié)中心_,因此可作為很好的_調(diào)節(jié)_酶類。5.結(jié)合酶(雙成分酶)由蛋白質(zhì)部分和非蛋白質(zhì)部分組成,非蛋白質(zhì)部分稱為_輔助因子_,其中與酶蛋白結(jié)合緊密,不能用透析法除去的稱為_輔基 ,而結(jié)合不緊密,可用透析法除去的稱為_ 輔酶_。6.酶的活性中心是指_酶直接與底物結(jié)合并進(jìn)行催化的_的區(qū)域,活性中心由肽鏈在一級(jí)結(jié)構(gòu)不相鄰而空間構(gòu)象在一起的幾個(gè)_側(cè)鏈基團(tuán)_組成。7.闡

9、述酶與底物結(jié)合的學(xué)說有_中間產(chǎn)物學(xué)說 和_誘導(dǎo)契合學(xué)說_兩種學(xué)說。8.根據(jù)酶對(duì)底物選擇的嚴(yán)格程度不同,可將酶的專一性分為絕對(duì)專一性、_相對(duì)專一性_和_立體異構(gòu)專一性 _三大類。9.影響酶促反應(yīng)速度的因素有_底物濃度、溫度、pH、抑制劑_和_激活劑_。10.米氏常數(shù)(Km)為反應(yīng)速度達(dá)到_最大反應(yīng)速度_一半時(shí)的_底物濃度,其單位為_濃度單位_。11.為使酶活力達(dá)到最大,要求酶促反應(yīng)必須在_最適溫度_和_最適pH _環(huán)境條件下進(jìn)行。12.Km值大時(shí),酶與底物 _親和力_??;酶作用不同底物,其Km值_不同_,其中Km值最小的稱為_最適底物_。13.在未催化時(shí),酶的活性中心基團(tuán)的空間構(gòu)象與底物分子_不

10、一定匹配_,只有底物分子接近活性中心才對(duì)活性中心產(chǎn)生 _誘導(dǎo)_,使二者的空間構(gòu)象相_匹配(契合)_,從而形成酶與底物的復(fù)合物。14.競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑與底物分子的結(jié)構(gòu)_相似_,二者競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合_活性中心 _。15.別構(gòu)酶的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是(1)_多亞基_(2)_ 雙中心_它的動(dòng)力學(xué)方程不符合一般的_米氏方程,其曲線是 _ S _型曲線。16同工酶是催化反應(yīng)_相同_,而_結(jié)構(gòu)、性質(zhì)_不同的一類酶,它屬于_調(diào)節(jié)酶 _酶類。17.NAD、NADP是_氧化還原酶_輔酶 ,FAD、FMN是 _氧化還原酶_的輔基,生物素是_羧化酶_的輔基,焦磷酸硫胺素是_脫羧酶_的輔基。18 .轉(zhuǎn)氨酶的輔助因子為_磷酸吡哆素_含維生素_

11、B6_。三、是非題1.酶促反應(yīng)的速度與底物濃度無關(guān)。(×)2.酶催化的高效率是因?yàn)槊柑岣吡朔磻?yīng)的活化能。(×)3.酶有幾種底物時(shí),其Km值也不相同。()4.別構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)曲線符合米氏方程。(×)5.酶的最適pH 是酶的特征常數(shù)。(×)6.測(cè)定酶活力時(shí),需要在最適溫度和最適pH 條件下進(jìn)行。()7.競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在下,加入足夠量的底物,酶促的反應(yīng)能夠達(dá)到正常的Vm。()8三氯乙酸可使蛋白質(zhì)變性,所以它是一種抑制劑。(×)9底物與酶分子接近時(shí),酶活性中心的構(gòu)象要發(fā)生改變。()10增加底物濃度可以加快反應(yīng)速度,所以底物也是激活劑。(×)11

12、反應(yīng)速度和酶活力單位是表示酶活性的常用方法。()12別構(gòu)酶一般都是多亞基酶。()13酶分子形成活性中心的氨基酸殘基,在一級(jí)結(jié)構(gòu)上的位置很近,而空間結(jié)構(gòu)上卻相距較遠(yuǎn)。(×)14某酶具有兩個(gè)底物,所以它有相對(duì)專一性。()四、名詞解釋輔助因子:參與酶的催化,決定酶的催化性質(zhì)的非蛋白分子。輔基:與酶分子結(jié)合很緊密不能用透析的方法去除的輔助因子。 輔酶:與酶分子結(jié)合比較松散可以用透析的方法去除的輔助因子。激活劑:可以提高酶催化活性的物質(zhì)。 抑制劑:可以降低酶催化活性的物質(zhì)。別構(gòu)酶:調(diào)節(jié)因子與調(diào)節(jié)中心結(jié)合后,可以很靈活地調(diào)節(jié)酶的催化活性地一類酶。 同工酶:催化反應(yīng)相同,結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同的一類酶。

13、活性中心: 酶分子上直接與底物結(jié)合并進(jìn)行催化地部位。 酶活力單位:25,1個(gè)大氣壓,1分鐘轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量。 酶的專一性:酶只催化一種或一類底物的性質(zhì)。 立體異構(gòu)專一性:酶只催化一種立體異構(gòu)體性質(zhì)。 絕對(duì)專一性:酶只催化一種底物的性質(zhì)。 相對(duì)專一性:酶只催化一類底物的性質(zhì)。五、計(jì)算題1.某酶遵循米氏方程,求:a.v/Vm=99% 時(shí)和v/Vm=90% 時(shí)的S。 2.下列數(shù)據(jù)是酶促反應(yīng)的記錄: S(mol/L) 6.25×10-6 7.5×10-5 1.0×10-4 1×10-3 1×10-2 v(nmol/L.分) 15 56.25 60

14、 74.9 75求Km和Vm參考答案 1. S=99Km S=9Km 2. Vm=75nmol·L-1·min-1 ,Km=2.5×10-5mol·L-1 六、簡(jiǎn)答題1.酶與一般催化劑的區(qū)別是什么?酶的輔助因子與維生素有何關(guān)系?答:酶作為生物催化劑與一般催化劑的區(qū)別是高效率,高度專一性,對(duì)作用條件敏感,活性可調(diào)。酶的大部分輔助因子都含有維生素。NAD和NADP(VB5)是氧化還原酶輔助因子,含有VB5;FMN、FAD是氧化還原酶輔助因子,含有VB2;焦磷酸硫胺素(TPP)是脫羧酶的輔助因子,含有VB1;磷酸吡哆素是轉(zhuǎn)氨酶輔助因子,含有VB6;生物素是羧化

15、酶輔助因子,含有VH;泛酸是CoA的組分,含有VB3。2.酶為什么能加速生物體內(nèi)反應(yīng)的進(jìn)行?答:因?yàn)槊缚梢越档头磻?yīng)活化能。因?yàn)槊傅拇輾緩脚c一般催化劑途徑不同,即生成了E·S中間復(fù)合物。3.何謂米氏方程?討論Km的意義。答:米氏方程見教材。Km的物理意義為V1/2Vm時(shí)的S;生物意義:Km是特征常數(shù),倒數(shù)表示親和力,多個(gè)底物有多個(gè)Km值、最適底物的Km值最小。4.什么是競(jìng)爭(zhēng)性抑制和非競(jìng)爭(zhēng)性抑制,其特點(diǎn)是什么?答:競(jìng)爭(zhēng)性抑制:I與S相似,競(jìng)爭(zhēng)活性中心,增加S去除抑制,Vm不變,Km變大;非競(jìng)爭(zhēng)抑制:I與S不相似,結(jié)合于活性中心之外,不能通過增加S去除,Km不變,Vm變小。5.何謂誘導(dǎo)契合學(xué)說和中間產(chǎn)物學(xué)說?答:中間產(chǎn)物學(xué)說:E+S=E·SE+P;誘導(dǎo)契合學(xué)說:底物與活性中心距離較遠(yuǎn)時(shí),活

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