


下載本文檔
版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、精選文檔PBS緩沖液配制 0.01M 磷酸鹽緩沖液(PBS)配制方法稱(chēng)取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調(diào)整溶液的pH值至7.4,最終加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鐘),保存存于室溫或4冰箱中。需要留意的是,通常所說(shuō)的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中全部的磷酸根濃度,而非Na 離子或K 離子的濃度,Na 離子和K 離子只是用來(lái)調(diào)整滲透壓的。假如是用于免疫組化的話(huà),則需要在配置的時(shí)候分別加入100 u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH、定
2、容、滅菌消毒。 NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸餾水 至 1000ml,調(diào)整pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4調(diào)整) 。 用于免疫反應(yīng)時(shí)可加入 0.1%疊氮鈉(0.1g/100ml PBS);當(dāng)試劑中含有辣根過(guò)氧化物酶時(shí),嚴(yán)禁使用疊氮鈉,可改用0.01%柳硫汞。PBS緩沖液配方PH 7.6 7.4
3、0; 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl 8.5
4、; 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2 NaH2PO4 0.1 0.2&
5、#160; 0.3 0.4依據(jù)閱歷來(lái)看,新穎配置的PBS攪勻后其PH值約在7.2-7.4之間,可是在溫度的影響下,尤其在夏天,其電離常數(shù)發(fā)生了轉(zhuǎn)變,在經(jīng)過(guò)晝夜的時(shí)間后,PH值會(huì)明顯轉(zhuǎn)變(我親自測(cè)過(guò)偏酸)。所以做試驗(yàn)的同學(xué)可要留意了,PH值可能會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果,甚至可能導(dǎo)致陰性。所以務(wù)必記得這個(gè)時(shí)候和天氣,要加強(qiáng)試驗(yàn)條件把握問(wèn)題。每次使用前最好用試紙測(cè)一下過(guò)夜了的PBS,假如發(fā)生偏酸或偏堿,留意重新?lián)Q新液。 PBS緩沖液 稱(chēng)取NaCl
6、 8g,KCl 0.2g,Na2HPO412H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml雙蒸水中,用鹽酸調(diào)pH值至7.4,加水定容至1L,常溫保存?zhèn)溆?。PBST緩沖液 取300l Tween-20 加入PBS 100ml中,混勻后即刻使用?,F(xiàn)用現(xiàn)配。 假如是把全部固體加大十倍,配置為濃縮液,工作時(shí)候十倍稀釋?zhuān)敲?,在剛配好濃縮液時(shí),PH在6.5左右,明顯偏酸。不能用鹽酸調(diào)。雖然可以用氫氧化鈉顆粒調(diào),但是有更便利的方法。 十倍稀釋以后,PH自動(dòng)上升到所需要的值。不需要其它任何處理。這個(gè)可以先取少量試一試,配好之后再測(cè)一次 PH8.0的PBS配方具體1. NaCl 1
7、37mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L 2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?. 滴加濃鹽酸將pH值調(diào)整至8.0,然后加入去離子水將溶液定容至1 L。4. 高溫高壓滅菌后,室溫保存。留意:上述PBS Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子,如需要,可在配方中補(bǔ)充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 0.05mol/L PBS(磷酸緩沖液Phosphate Buffer Solution,PBS)的配制: 甲液:0.05mol/L Na2H
8、PO4溶液 :稱(chēng)取磷酸氫二鈉9.465g 7.099g,加蒸 餾水至1000ml ; 乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 稱(chēng)取磷酸二氫鉀, 9.07g 6.803g,加蒸餾水至1000m1。 將甲乙液分裝在棕色瓶?jī)?nèi),于4冰箱中保存,用時(shí)甲、乙兩液各按不同比例混合,即可得所需pH的緩沖液,見(jiàn)下表: pH 甲液ml 乙液mI 5.29 2.5 97.5 5.59
9、 5.0 95.0 5.91 10.0 90.0 6.24 20.0 80.0 6.47 30.0 70.0 6.64 40.0 60.0 6.81 50.0 50.0 6.98 60.0 40.0 7.17 70.0 30.0 7.38 80.0
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 江蘇南京秦淮中學(xué)2024~2025學(xué)年高二下冊(cè)期末調(diào)研數(shù)學(xué)試題學(xué)生卷
- 江蘇常州高級(jí)中學(xué)2024~2025學(xué)年高一下冊(cè)期末質(zhì)量檢查數(shù)學(xué)試題學(xué)生卷
- 2024~2025學(xué)年山東泰安新泰七年級(jí)下冊(cè)4月期中數(shù)學(xué)試題【帶答案】
- 過(guò)敏原特異性免疫治療研究考核試卷
- 災(zāi)害影響下的公共設(shè)施應(yīng)急恢復(fù)計(jì)劃考核試卷
- 醫(yī)藥研發(fā)外包服務(wù)市場(chǎng)分析考核試卷
- 部編道德與法治三年級(jí)下冊(cè)教案
- 2025年中國(guó)PET薄膜帶數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)報(bào)告
- 2025年中國(guó)DVD沖壓件數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)研究報(bào)告
- 2025年中國(guó)6-16防區(qū)擴(kuò)展防盜報(bào)警系統(tǒng)數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)報(bào)告
- 新疆維吾爾自治區(qū)2024年普通高校招生單列類(lèi)(選考外語(yǔ))本科一批次投檔情況(文史)
- 委托收款協(xié)議書(shū)模板
- 信息系統(tǒng)的使用與維護(hù)管理制度
- 全國(guó)中小學(xué)生學(xué)籍信息管理系統(tǒng)用戶(hù)操作手冊(cè)(學(xué)校級(jí))
- 2025年北京市第一次普通高中學(xué)業(yè)水平合格性考試仿真模擬物理試卷01(解析版)
- 稽留流產(chǎn)治療
- 雪亮工程可行性研究報(bào)告
- 小學(xué)班會(huì)-小學(xué)生主題班會(huì)版期末頒獎(jiǎng)班會(huì)-蔬菜篇(課件)(共23張課件)
- 肝包蟲(chóng)手術(shù)麻醉
- 床上用品采購(gòu)?fù)稑?biāo)方案(技術(shù)方案)
- 2023-2024學(xué)年廣東省深圳市鹽田外國(guó)語(yǔ)學(xué)校七年級(jí)(下)期末地理試卷
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論