分子生物學(xué)與基因工程試卷庫(kù)4

1、分子生物學(xué)與基因工程試題庫(kù)（4）一、選擇題（每題2分，共計(jì)20分）1.交配型轉(zhuǎn)換反應(yīng)：( ) (a)涉及將DNA盒從一個(gè)沉默基因座(HML或HMR)轉(zhuǎn)移到MAT基因座 (b)通常導(dǎo)致交配型的改變(c)不發(fā)生在單倍體細(xì)胞中 2.鋅指蛋白與DNA的結(jié)合( ) (a)位于DNA大溝 (b)通過(guò)“鋅指”的C端進(jìn)行 (c)利用蛋白的-螺旋區(qū)域 (d)每個(gè)“指”通過(guò)形成兩個(gè)序列特異的DNA接觸位點(diǎn) (e)通過(guò)“指”中保守的氨基酸同DNA結(jié)合 3. 在O連接寡聚糖中，直接同多肽相連的糖基是( ) (a)甘露糖 (b)N乙酰葡糖胺 (c)C-半乳糖或N乙酰半乳糖胺 (d)半乳糖或N-乙酰葡萄糖胺(e)葡萄糖

2、4. 在真核生物細(xì)胞中，翻譯的哪一個(gè)階段需要GTP?( ) (a)mRNA的5'末端區(qū)的二級(jí)結(jié)構(gòu)解旋 (b)起始tRNA同核糖體的結(jié)合 (c)在延伸的過(guò)程中，tRNA同核糖體的結(jié)合 (d)核糖體的解體(e)5'帽子結(jié)構(gòu)的識(shí)別 5. 第一個(gè)作為重組DNA載體的質(zhì)粒是( )(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 6. RFLP產(chǎn)生自( ) (a)使用不同的限制性內(nèi)切核酸酶 (b)每種類型的染色體有兩條(二倍體) (c)染色體中堿基的隨機(jī)變化 (d)Southern印跡(e)不同探針的使用 7. DNA連接酶在體內(nèi)的主要作用是在DNA復(fù)制、修復(fù)中封

3、閉缺口，( ) (a)將雙鏈DNA分子中的5磷酸基團(tuán)同3-OH末端重新形成磷酸二酯鍵 (b)作用時(shí)不消耗能量 (c)需要Mn2+等二價(jià)輔助離子(d)也可以連接RNA分子 8. 下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒(relaxedplasmid)性質(zhì)的描述中，( )是不正確的 (a)質(zhì)粒的復(fù)制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制，而不受染色體復(fù)制機(jī)制的制約，因而有較多的拷貝數(shù) (b)可以在氯霉素作用下進(jìn)行擴(kuò)增 (c)通常帶有抗藥性標(biāo)記(d)同嚴(yán)緊型質(zhì)粒融合后，雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復(fù)制子 9. pBluescriptMl3載體在多克隆位點(diǎn)的兩側(cè)引入了T7和T3兩個(gè)噬菌體的啟動(dòng)子，這樣增加了該載體的功能，如： (a)可以

4、對(duì)插入到多克隆位點(diǎn)的外源片段進(jìn)行轉(zhuǎn)錄分析 (b)利用這兩個(gè)啟動(dòng)子的通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增 (c)利用通用引物進(jìn)行序列分析 (d)利用這兩個(gè)啟動(dòng)子進(jìn)行定點(diǎn)突變上述四種功能中哪一種是不正確的?( ) 10. 所謂引物就是同DNA互補(bǔ)的一小段RNA分子。 二、判斷題（每題1分，共計(jì)10分）1 大腸桿菌中，復(fù)制叉以每秒500個(gè)堿基對(duì)的速度向前移動(dòng)，復(fù)制叉前的DNA以大約3000rmin的速度旋轉(zhuǎn)。 （ ）2 在高鹽和低溫條件下由DNA單鏈雜交形成的雙螺旋表現(xiàn)出幾乎完全的互補(bǔ)性，這一過(guò)程可看作是一個(gè)復(fù)性(退火)反應(yīng)。 （ ）3 核酸雜交探針就是帶有放射性標(biāo)記的DNA分子. （ ）4 用不同的產(chǎn)生黏性末端

5、的限制性內(nèi)切核酸酶分別切割載體和外源DNA，得到的黏性末端是不親和的黏性末端。 （ ）5 所謂引物就是同DNA互補(bǔ)的一小段RNA分子。 （ ）6. 根據(jù)不同物種同一蛋白質(zhì)中氨基酸的不同來(lái)估計(jì)突變率往往較實(shí)際的突變率低，因?yàn)橐恍┩蛔凅w由于危及蛋白質(zhì)功能，在選擇壓力下從種群中消失。 ( )7. 大腸桿菌DNA聚合酶缺失3 5校正外切核酸酶活性時(shí)會(huì)降低DNA合成的速率但不影響它的可靠性。 ( ) 8. 內(nèi)含子通?？梢栽谙嚓P(guān)基因的同一位置發(fā)現(xiàn)。 ( )9.轉(zhuǎn)錄因子具有獨(dú)立的DNA結(jié)合和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域。 ( )10.延伸因子eEF-la幫助氨酰tRNA進(jìn)入A位點(diǎn)依賴于ATP內(nèi)一個(gè)高能鍵的斷裂。 ( )三

6、、填空（每空1分，共計(jì)20分）1 重組體的篩選有兩層涵義，一是將-，二是將-。 2.多數(shù)類型的RNA是由加工-產(chǎn)生的， 真核生物前體tRNA的加工包括-的切除和-的拼接。隨著-和-端的序列切除，3，端加上了序列-。 3. 真核生物中有5種DNA聚合酶，它們是：(1)-(2)-(3)-(4)-(5)-。 4. 一種由于蛋白質(zhì)序列中丟失了-殘基引起的突變將會(huì)阻止-橋的形成，這種蛋白質(zhì)更容易-。如果在-溫度是穩(wěn)定的而在-溫度是不穩(wěn)定的，將它稱為-突變，是-突變的一個(gè)例子。 四、簡(jiǎn)答題（每題3分，共計(jì)30分）1.Fredrick和McClarin等用一個(gè)由13個(gè)堿基對(duì)的DNA片段與EcoRI反應(yīng)，然后

7、分離到酶和DNA共結(jié)晶的復(fù)合物，通過(guò)X射線分析發(fā)現(xiàn)了什么? 2. 有兩個(gè)系統(tǒng)發(fā)育上十分接近的物種，它們?nèi)旧w中的(G+C)含量不同，A株(G+C)含量為55而B(niǎo)株是68。同源及異源轉(zhuǎn)化重組實(shí)驗(yàn)表明：來(lái)自(G+C)低的DNA易于轉(zhuǎn)化人(GC)高的生物體基因組中，反之則不然。請(qǐng)說(shuō)明原因。 3. 在RNA編輯中，向?qū)NA(gRNA)的作用是什么?它的哪些部分分別與(1)編輯前mRNA；(2)編輯后的前體mRNA互補(bǔ)? 4. 雖然同源異型蛋白與鋅指蛋白差別很大，但是它們識(shí)別DNA序列的結(jié)構(gòu)元件相似的，這個(gè)元件是什么? 5. 被加工的假基因與其他假基因有哪些不同?它是如何產(chǎn)生的? 6. 列出轉(zhuǎn)化病毒正

8、鏈RNA摻人到宿主雙鏈DNA的詳細(xì)過(guò)程。 7. 什么是增效與減效突變? 8. 在工業(yè)微生物菌種的選育中，人們喜歡用誘變的方法篩選解除了酶合成阻遏的突變株，而不要解除了酶活性反饋抑制的突變株。請(qǐng)解釋原因。 9. RecA蛋白是怎樣調(diào)節(jié)SOS反應(yīng)的? 10. 說(shuō)明為什么mRNA僅占細(xì)胞RNA總量的一小部分(35)。 五、設(shè)計(jì)與分析題（每題5分，共計(jì)10分）1.有一個(gè)被認(rèn)為是mRNA的核苷酸序列，長(zhǎng)300個(gè)堿基，你怎樣才能： (1)證明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。 (2)確定它是真核還是原核mRNA。 2.YES(酵母大腸桿菌穿梭載體)是構(gòu)建cDNA文庫(kù)的高效載體，這種載體是噬菌體基

9、因組與一個(gè)在大腸桿菌和酵母中都能復(fù)制的質(zhì)粒巧妙結(jié)合而成，它兼有病毒和質(zhì)粒載體的優(yōu)點(diǎn)。cDNA被插入載體的質(zhì)粒部分，然后它能在體外被包裝入病毒顆粒中，包裝起采的載體感染大腸桿菌的效率比質(zhì)粒本身要高得多。一旦進(jìn)入了大腸桿菌，XYES中的質(zhì)粒序列能夠被誘導(dǎo)重組出入基因組，并進(jìn)行獨(dú)立復(fù)制，這就可以從質(zhì)粒中分離出來(lái)，以便進(jìn)行進(jìn)一步的遺傳操作。為了最大限度地提高克隆效率，載體用只有一個(gè)切點(diǎn)的限制性內(nèi)切核酸酶Xho(5'-CTCGAG)進(jìn)行切割，然后在dTTP存在的情況下，同DNA聚合酶一起進(jìn)行溫育。將一種具有平末端的雙鏈cDNA同一段含由兩段寡聚核苷酸組成的雙鏈寡聚核苷酸接頭連接起來(lái)，這兩段寡聚核苷酸的序列是：5，CGAGATTTACC和5GGTAAATC，它們的5端都是磷酸。然后將載體和cDNA混合并連接在一起。采用這種方法用2g的載體和O1g的cDNA，構(gòu)建了一個(gè)有4X107個(gè)克隆的cDNA文庫(kù)。問(wèn)： (1)假定載體長(zhǎng)為43kb，cDNA的平均長(zhǎng)度是lkb，請(qǐng)估計(jì)在連接混合物中，載體分子同cDNA的比例是多少? (2)在此過(guò)程中，載體分子轉(zhuǎn)變成重組體的頻率是多少(每對(duì)核苷酸的平均