生產(chǎn)白蛋白的工藝技術(shù)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上生產(chǎn)白蛋白的工藝技術(shù)閆朗 天津生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院 08生物3班摘要：白蛋白有維持血漿膠體滲透壓的功能，以廣泛地應(yīng)用于失血性休克、嚴(yán)重?zé)齻⒌偷鞍籽Y的臨床治療。那么本文就以白蛋白的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)、功能、白蛋白的生產(chǎn)原料、生產(chǎn)試劑、生產(chǎn)器材、白蛋白的生產(chǎn)工藝路線、白蛋白生產(chǎn)的具體操作步驟、白蛋白檢驗(yàn)的方法等方面來(lái)闡明白蛋白從無(wú)到有的全過(guò)程并表達(dá)本人對(duì)此過(guò)程的一些不成熟的觀點(diǎn)和結(jié)論。關(guān)鍵詞：白蛋白，提取，鹽析、沉淀、熱處理前言：白蛋白是由人類(lèi)血漿提取的一類(lèi)血液制劑藥品，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)用于預(yù)防和治療不可缺少的藥品，它是一類(lèi)特殊的藥品，其唯一原料是人血，一方面受社會(huì)，經(jīng)濟(jì)和政治因素

2、的制約，不能隨意開(kāi)發(fā)，另一方面是維持生命的重要物質(zhì)，它又不可缺少。人血白蛋白在臨床上是急需補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和蛋白質(zhì)的多種重癥疾病患者不可缺少的治療劑，是醫(yī)院臨床急救或重癥手術(shù)的必備藥品，使用量很大。除臨床需求外白蛋白作為生產(chǎn)疫苗的培養(yǎng)基成分和保護(hù)劑的市場(chǎng)也十分可觀。另外，還有許多生物藥的生產(chǎn)過(guò)程和最終產(chǎn)品中都需要白蛋白做保護(hù)劑。從各個(gè)方面來(lái)說(shuō)，加快我國(guó)白蛋白的研制和生產(chǎn)已是勢(shì)在必行。1 白蛋白結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、功能 白蛋白又稱(chēng)清蛋白，是人血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，約占血漿總蛋白的35%?！?】人白蛋白對(duì)人體無(wú)抗原性。白蛋白是由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，在血漿中的半壽期約為15-19天，其合成率雖然受食物中蛋白質(zhì)含量的影

3、響，但主要受血漿中白蛋白水平調(diào)節(jié)，在肝細(xì)胞中沒(méi)有儲(chǔ)存，在所有細(xì)胞外液中都含有微量的白蛋白。關(guān)于白蛋白在腎小球中的濾過(guò)情況，一般認(rèn)為在正常情況下其量甚微，約為血漿中白蛋白的0.04%，按此計(jì)算每天從腎小球?yàn)V過(guò)液中排出的白蛋白即可達(dá)3.6g，為尿中蛋白質(zhì)排出量的30-40倍，可見(jiàn)濾過(guò)液中多數(shù)白蛋白是可被腎小管重新吸收的。有實(shí)驗(yàn)證實(shí)白蛋白在近曲小管中吸收，在小管細(xì)胞中被溶酶體中的水解酶降解為小分子片段而進(jìn)入血循環(huán)。白蛋白可以在不同組織中被細(xì)胞內(nèi)吞而攝取，其氨基酸可被用為組織修補(bǔ)。白蛋白相對(duì)分子質(zhì)量較小。白蛋白為單鏈，含575個(gè)氨基酸殘基，相對(duì)分子質(zhì)量為65000，其N(xiāo)末端為天冬氨酸，C末端為亮氨酸，

4、PI為4.7。【1】可溶于水、稀酸、稀堿、稀鹽和半飽和的硫酸銨溶液中，沉降系數(shù)（S20W）為4.6，電泳遷移率為5.92。一般在60%的硫酸銨飽和度時(shí)析出沉淀【1】。對(duì)酸較穩(wěn)定。受熱后可聚合變性，但仍較其他血漿蛋白質(zhì)耐熱，蛋白質(zhì)的濃度大時(shí)熱穩(wěn)定性小。氯化鈉或脂肪酸鹽可提高白蛋白的熱穩(wěn)定性?！?】利用這種性質(zhì)，可使白蛋白與其他蛋白質(zhì)分離。主要功能是維持血漿膠體滲透壓。白蛋白是血漿中含量最多、分子最小、溶解度大、功能較多的一種蛋白質(zhì)。血漿膠體滲透壓的維持主要依靠血漿中的白蛋白，膠體滲透壓是使靜脈端組織間液重返回血管內(nèi)的主要?jiǎng)恿Α．?dāng)血漿白蛋白因病理?xiàng)l件引起下降時(shí)，血漿的膠體滲透壓也隨之下降，可導(dǎo)致血

5、液中的水份過(guò)多進(jìn)入組織液而出現(xiàn)水腫。白蛋白損失它多會(huì)引起血量減少，是早產(chǎn)出血性休克的主要原因。血漿白蛋白有運(yùn)輸功能，血漿白蛋白能與體內(nèi)許多難溶性的小分子有機(jī)物和無(wú)機(jī)離子可逆地結(jié)合形成易溶性的復(fù)合物，成為這些物質(zhì)在血液循環(huán)中的運(yùn)輸形式。由此可見(jiàn)白蛋白屬于非專(zhuān)一性的運(yùn)輸?shù)鞍?，在生理上具有重要性，與人體的健康密切相關(guān)。血漿白蛋白在臨床上用于失血性休克以及由腦水腫或大腦損傷所致的腦顱壓增高，嚴(yán)重?zé)齻?，低蛋白血癥的治療;尿白蛋白可作為臨床診斷用酶的保護(hù)劑、尿激酶標(biāo)準(zhǔn)品中的保護(hù)劑、測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量用的標(biāo)準(zhǔn)蛋白等，是一種廉價(jià)而易得的人血白蛋白的代用品。目前從人血漿中分離的白蛋白有兩種制品：一種是從健康

6、人血漿中分離制得的，稱(chēng)人血白蛋白;另一種是從健康產(chǎn)婦胎盤(pán)血中分離制得，稱(chēng)胎盤(pán)血白蛋白。從動(dòng)物血漿制備的白蛋白，稱(chēng)動(dòng)物血白蛋白。從男性尿液中制備的白蛋白，稱(chēng)尿液白蛋白。白蛋白制劑為淡黃色略稠的澄明液體或白色疏松狀（凍干）固體?！?】2 生產(chǎn)白蛋白的原料、試劑、器材2.1原料選用新鮮干凈的人胎盤(pán)，健康成人的血液，健康成人男性的尿液，三者均可。2.2試劑鹽酸：這里用來(lái)調(diào)節(jié)PH，選用化學(xué)純?cè)噭?。氫氧化鈉：這里用來(lái)調(diào)節(jié)PH，選用化學(xué)純?cè)噭?。硫酸銨：這里作為沉淀劑，選用化學(xué)純?cè)噭?。碳酸鈉：這里用來(lái)調(diào)節(jié)溶液的PH，選用化學(xué)純?cè)噭?。利凡諾：這里作為沉淀劑，選用化學(xué)純?cè)噭?。氯化鈉：這里用于鹽析，選用化學(xué)純?cè)噭?/p>

7、硝酸銀：這里作為鑒定試劑，選用分析純?cè)噭?。氫氧化鋁：這里作為吸附劑，選用分析純?cè)噭；钚蕴浚哼@里用來(lái)調(diào)節(jié)PH，選用藥用活性炭。D-160樹(shù)脂：一種大孔徑陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，用于吸附白蛋白。DEAE-纖維素：是一種陰離子交換纖維素，主要用于中型或酸性蛋白的分離。白蛋白的等電點(diǎn)為4.7，因此在高于白蛋白的等電點(diǎn)時(shí)，DEAE-纖維素即可吸附帶負(fù)電荷的白蛋白。這里用于分離純化白蛋白。磷酸：這里作為溶劑，選用化學(xué)純?cè)噭?。EDTA（二乙胺四乙酸）：這里作為穩(wěn)定劑，選用化學(xué)純?cè)噭?.05mol/L PH=5.2的乙酸-乙酸鈉：這里作為緩沖液，選用化學(xué)純?cè)噭?。檸檬酸三鈉：這里作為抗凝劑，選用化學(xué)純?cè)噭?。聚乙二?/p>

8、：這里作為致孔劑，選用化學(xué)純?cè)噭?.3器材不銹鋼夾層反應(yīng)罐、不銹鋼夾層反應(yīng)鍋、搪瓷缸、不銹鋼桶（50L）、冷凍干燥機(jī)、酸度計(jì)、尼龍布、溫度計(jì)（1-1000c）。【3】3 生產(chǎn)白蛋白的工藝路線選用新鮮干凈的人胎盤(pán)在潔凈度為十萬(wàn)級(jí)的區(qū)域進(jìn)行預(yù)處理制成胎盤(pán)漿使胎盤(pán)漿能夠合并，在潔凈度萬(wàn)級(jí)的區(qū)域用低溫氯化鈉溶液提取胎盤(pán)漿中的液體，用硫酸銨鹽析出沉淀，沉淀是用來(lái)制備免疫球蛋白的原料，而鹽析出的濾液用鹽酸沉淀后棄去濾液，而沉淀物經(jīng)超濾后，將濾液在潔凈度為十萬(wàn)級(jí)的區(qū)域中進(jìn)行病毒滅活，也就是熱處理收集濾液，轉(zhuǎn)入潔凈度為百級(jí)的區(qū)域中進(jìn)行二次鹽析棄去濾液，收集鹽析物進(jìn)行二次超濾，收集超濾液吸附除雜，后處理，在潔

9、凈度為十萬(wàn)級(jí)的區(qū)域中進(jìn)行分裝，用于分裝的內(nèi)包裝材料要先粗洗，再到潔凈度為十萬(wàn)級(jí)的區(qū)域中進(jìn)行精細(xì)與滅菌除熱原。然后才可分裝和包裝全檢后入庫(kù)。4 生產(chǎn)白蛋白具體操作步驟及生產(chǎn)質(zhì)量要點(diǎn)4.1生產(chǎn)白蛋白具體操作步驟4.1.1預(yù)處理將冷凍的健康人胎盤(pán)，用無(wú)菌的剪刀剪去并擠出臍帶血，將胎盤(pán)剪成適當(dāng)碎塊，放入滅菌的絞肉機(jī)中絞碎，制成胎盤(pán)漿。4.1.2提取將制好的胎盤(pán)漿放入不銹鋼鍋中，按每個(gè)胎盤(pán)加1L無(wú)熱原的40g/L（4%）氯化鈉溶液（內(nèi)含0.5%苯酚），浸漬提取一小時(shí)，然后用紗布過(guò)濾，收集濾液。剩下的固體雜質(zhì)用500ml無(wú)熱原的40g/L（4%）氯化鈉溶液（內(nèi)含0.5%苯酚），浸漬提取一小時(shí)，然后用紗布過(guò)

10、濾，剩下的固體雜質(zhì)用250ml無(wú)熱原的40g/L（4%）氯化鈉溶液（內(nèi)含0.5%苯酚），浸漬提取一小時(shí)，然后用紗布過(guò)濾，收集三次的濾液，調(diào)試離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為2000r/min,除去濾液中的紅細(xì)胞，得到提取液。4.1.3鹽析 將以上經(jīng)離心后的胎盤(pán)提取液傾入搪瓷缸中，在攪拌下加入等體積飽和硫酸銨溶液，然后放置一小時(shí)以上，使球蛋白沉淀析出，用尼龍布自然過(guò)濾，收集濾液。沉淀是生產(chǎn)免疫球蛋白的原料。4.1.4沉淀 將以上濾液傾倒在不銹鋼桶中，用1mol/L鹽酸調(diào)節(jié)PH至4.3-4.4，放置一小時(shí)后，然后用尼龍布自然過(guò)濾，收集沉淀物。4.1.5超濾 將以上沉淀物溶解于5-10倍的蒸餾水中，然后用超濾器過(guò)濾，

11、注意過(guò)濾所使用的濾膜為分子量30000的超濾膜，直至硫酸銨含量低于2g/L(0.2%)時(shí)為止，收集超濾液?！?】4.1.6熱處理將以上收集的超濾液倒入不銹鋼桶中，加入適量的氯化鈉使之溶解，使氯化鈉濃度達(dá)8.5g/L（0.85%），用尼龍布自然過(guò)濾，全部過(guò)濾完之后測(cè)定濾液的蛋白質(zhì)含量，再加入無(wú)熱原水稀釋蛋白質(zhì)濃度至12-20g/L(1.2%-2%)。然后按2g/L(0.2%)的量加入固體辛酸鈉，用1mol/L鹽酸調(diào)節(jié)PH至5-5.2，攪拌溶解后在0-5oc的條件下放置一個(gè)晚上。次日將溶液倒入反應(yīng)鍋中，再重新調(diào)節(jié)PH至5-5.2，然后將其加熱，當(dāng)加熱至67OC時(shí)加入2g/L(0.2%)活性炭，攪拌

12、15min,加溫至69oc后保溫一小時(shí)冷卻至45oc以下，也可以是60oc保溫十小時(shí)，用帆布自然過(guò)濾收集濾液。4.1.7二次鹽析 將以上濾液按照1g的體積的四十倍加入氯化鈉化學(xué)純?cè)噭┗蚣尤肓蛩徜@，使硫酸銨的質(zhì)量濃度達(dá)到178g/L,以1mol/L鹽酸調(diào)節(jié)PH調(diào)節(jié)至3.75-3.85，放置一小時(shí)后，用帆布自然過(guò)濾壓干收集沉淀物。4.1.8二次超濾 將以上沉淀物先加入適量的0.5mol/L的氫氧化鈉充分?jǐn)嚢枵{(diào)成漿糊狀，再加入適量的1mol/L的氫氧化鈉充分?jǐn)嚢枵{(diào)成漿糊狀，最后加入適量的2mol/L的氫氧化鈉充分?jǐn)嚢枵{(diào)成漿糊狀，然后再加入5-10倍的無(wú)熱原水，并調(diào)節(jié)PH至7.8-8，用截留分子量為3

13、0000的超濾膜超濾透，直到用硝酸銀試劑檢查氯離子不高于自來(lái)水的空白對(duì)照時(shí)為止，收集超濾液?！?】4.1.9吸附除雜 將以上超濾液倒入不銹鋼桶中，加入吸附劑，吸附劑為2-4g/L(0.2%-0.4%)氫氧化鋁或20-30g/L(2%-3%)活性炭，進(jìn)行攪拌吸附一小時(shí)，然后用尼龍布自然過(guò)濾收集濾液。4.1.10后處理將以上濾液調(diào)節(jié)PH至6.6-7，將蛋白質(zhì)稀釋至100g/L(10%)或250g/L(25%)，除菌過(guò)濾取樣進(jìn)行藥品的質(zhì)量檢查，合格后制成凍干制品。4.2白蛋白的生產(chǎn)管理、質(zhì)量控制的要點(diǎn)、樣品儲(chǔ)存、運(yùn)輸4.2.1生產(chǎn)管理的要點(diǎn)生產(chǎn)時(shí)所使用的器具無(wú)論是直接用于生產(chǎn)的金屬或玻璃等器具，還是

14、間接用于生產(chǎn)的金屬或玻璃等器具都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格清洗消毒滅菌處理后專(zhuān)用。原料健康人胎盤(pán)的采集和質(zhì)量應(yīng)符合原料人胎盤(pán)采集規(guī)程要求。健康人胎盤(pán)的采集應(yīng)盡可能保持無(wú)菌，并在八小時(shí)內(nèi)冰凍至-20 OC至以下，原料檢定合格后就可以及時(shí)投料制造，也可以置于-20oc以下冰凍保存，但保存期不得超過(guò)2年。蛋白質(zhì)的透析與濃縮都應(yīng)采用超濾法。在澄清和除菌過(guò)濾時(shí)應(yīng)使用尼龍布和紗布，這種無(wú)石棉的介質(zhì)。病毒滅活時(shí)應(yīng)保證每批產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)60+0.5oc至少十小時(shí)的連續(xù)加溫，這樣才能滅活可能殘留的污染病毒。分裝與凍干必須在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行。凍干制品分裝后應(yīng)及時(shí)冷凍，采用適宜條件進(jìn)行凍干，凍干過(guò)程制品溫度不得超過(guò)50oc,真空

15、封口?！?】4.2.2質(zhì)量控制要點(diǎn) 原料及輔料應(yīng)符合中華人民共和國(guó)藥典或中國(guó)生物制品主要原輔料材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求。生產(chǎn)用水應(yīng)符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)，純化水、注射用水和滅菌注射用水應(yīng)符合中華人民共和國(guó)藥典的要求。原料健康人的胎盤(pán)血應(yīng)進(jìn)行HbsAg、HIV-1/HIV-2抗體、HCV抗體、梅毒檢查，均為陰性。原料應(yīng)按照規(guī)程要求進(jìn)行殘留乙醇含量、蛋白質(zhì)含量、純度、PH值、熱原試驗(yàn)，項(xiàng)目的檢測(cè)。半成品立即分裝時(shí)可在除菌后留樣做無(wú)菌檢查。每批成品應(yīng)按規(guī)程要求抽樣做全面檢定，所用的HbsAg、HIV-1/HIV-2抗體、HCV抗體等檢測(cè)試劑盒應(yīng)經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)?！?】4.2.3白蛋白的儲(chǔ)存 白蛋白的正確保

16、存極為重要，一旦處理不當(dāng)，辛辛苦苦生產(chǎn)的白蛋白成品就會(huì)失活、變性、變質(zhì)，使前面的全部制備工作化為烏有，損失慘重。要想從溶液中除去多余水分，采用的方法是在常溫或高溫條件下進(jìn)行蒸發(fā)，但這樣會(huì)使生物活性物質(zhì)加速被破壞，并且改變了這些物質(zhì)的溶解度，所以不宜采用。要想在干燥過(guò)程中最大限度地減少生物活性物質(zhì)被破壞，唯一的方法就是使溶液在低溫下干燥。但是，溫度的降低不但會(huì)使溶液凝固，還會(huì)使水的蒸氣壓力降低從而難以揮發(fā)，這就需要大大降低氣壓使固態(tài)的水直接升華成為水蒸氣。凍干技術(shù)就是在這一理論基礎(chǔ)上產(chǎn)生的。凍干技術(shù)是先將生物大分子溶液中的水凍成冰，然后在低溫和高真空的條件下使冰升華，成為固體干粉。當(dāng)白蛋白溶液冷

17、卻至冰點(diǎn)時(shí)，純水首先結(jié)冰形成初結(jié)晶。初結(jié)晶過(guò)程中若白蛋白所處的溫度低，熱交換速度大時(shí)，溫度下降可達(dá)每秒50oc或更高，這種冷凍方法叫速凍。反之，當(dāng)白蛋白所處的溫度高，熱交換速度小時(shí)，這種冷凍方法叫慢凍。由于冷凍速度不同，冷凍過(guò)程中所形成的結(jié)晶大小也不同。慢凍可使白蛋白形成大的結(jié)晶，使白蛋白中的活性物質(zhì)分子受到應(yīng)力。另外，慢凍延長(zhǎng)了共溶混合物中鹽對(duì)生物活性物質(zhì)的作用時(shí)間，增加了分子聚合的機(jī)會(huì)，導(dǎo)致白蛋白變性。所以白蛋白一般采用速凍。當(dāng)白蛋白的溫度降低為共熔點(diǎn)時(shí)，溶質(zhì)和溶劑將同時(shí)凍結(jié)形成二次結(jié)晶，此時(shí)若能加快熱交換速度或設(shè)法阻止結(jié)晶形成而使混合物以無(wú)定性狀態(tài)凝固，則可減少生物活性物質(zhì)的變性破壞。在

18、略高于或略低于共熔點(diǎn)的溫度下冷凍白蛋白，其變性的程度最小，這可能是冷凍溫度越來(lái)越接近共熔點(diǎn)，白蛋白越有可能形成無(wú)定性狀態(tài)的緣故。 在白蛋白溶液中，水以游離水、中間型結(jié)合水和結(jié)構(gòu)性結(jié)合水三種狀態(tài)存在。第一次干燥的目的主要是除去大量的游離水和部分中間型結(jié)合水。在操作過(guò)程中，壓力通常要求降至0.5-0.1mmHg,因?yàn)樗魵獾膲毫?mmHg,氣壓必須大大低于此值，才能使冰塊比較快地升華。第一次干燥時(shí)，加熱溫度要嚴(yán)格控制，避免凍干物質(zhì)的溫度高于共熔點(diǎn)，否則，白蛋白將溶解產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致白蛋白變性。第一次干燥后，殘余水分為1%-4%。如果白蛋白在這種含濕量下能保持穩(wěn)定，就能夠停止凍干，封口保存。否則，需

19、要進(jìn)行第二次干燥。 第二次干燥的目的主要是除去殘留的中間型結(jié)合水，但應(yīng)注意不要使結(jié)構(gòu)型結(jié)合水除去，否則將導(dǎo)致白蛋白的氧化，甚至?xí)茐陌椎鞍椎母呒?jí)結(jié)構(gòu)，使其變性失活。通過(guò)凍干得到白蛋白固體樣品有許多優(yōu)點(diǎn)：一個(gè)是由固態(tài)直接升華為氣態(tài)，所以樣品不起泡不報(bào)沸。一個(gè)是得到的干粉樣品不黏壁易取出。一個(gè)是凍干后的樣品是疏松的粉末，易溶于水。一個(gè)是在低溫低壓的條件下干燥，白蛋白不容易氧化變質(zhì)，同時(shí)壓力低使得空氣稀薄有滅菌或抑制某些細(xì)菌的作用。一個(gè)是脫水徹底，適合于長(zhǎng)途運(yùn)輸和長(zhǎng)期保存。凍干特別適用于對(duì)熱敏感、易吸濕、易氧化的白蛋白。對(duì)于極個(gè)別的在凍干時(shí)易變性失活的白蛋白則要十分謹(jǐn)慎，務(wù)必先做小量試驗(yàn)證明凍干對(duì)該

20、白蛋白活性、結(jié)構(gòu)無(wú)損害后可進(jìn)行大量處理。 由于白蛋白對(duì)熱敏感，因此，要低溫保存。一般可根據(jù)白蛋白的用途決定其保存溫度是4oc、-20oc還是-80oc或-196oc液氮中。白蛋白解凍時(shí)勿直接由-20oc或-80oc移至37oc條件解凍，因?yàn)闇囟雀淖兲蠡蛱?，容易引起白蛋白凝結(jié)而發(fā)生沉淀。正確的凍溶步驟是：將白蛋白從-20oc或-80oc轉(zhuǎn)移至4oc條件下解凍1天，然后再轉(zhuǎn)移至室溫下溶解，在溶解過(guò)程中要規(guī)則地均勻搖晃，使溫度與成分均勻，以減少沉淀的發(fā)生。由于白蛋白性質(zhì)不穩(wěn)定，因此，要選擇符合白蛋白性質(zhì)的保存方法，在保證白蛋白生物活性的條件下運(yùn)輸。5 檢驗(yàn)方法 人胎盤(pán)血白蛋白有10%或25%兩種

21、規(guī)格，本制劑為淡黃色略帶粘稠狀的澄明液體或白色疏松物體（凍干品）。按中華人民共和國(guó)藥典2005年版白蛋白制造機(jī)檢定規(guī)程的各項(xiàng)規(guī)定進(jìn)行生產(chǎn)，均應(yīng)符合規(guī)定?！?】以下標(biāo)準(zhǔn)供參考，溶解時(shí)間：本品凍干制劑配成10%蛋白濃度時(shí)，其溶解時(shí)間不得超過(guò)15min;水分：凍干制劑水分含量不得超過(guò)1%；PH:6.6-7.2；【9】白蛋白含量：應(yīng)不低于本品規(guī)格（10%或25%）；純度：藥品中含有白蛋白應(yīng)占藥品整體的95%以上；殘留硫酸銨含量：應(yīng)不超過(guò)0.01%（質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)）；無(wú)菌試驗(yàn)、毒性試驗(yàn)、安全試驗(yàn)、熱原試驗(yàn)均應(yīng)符合規(guī)定?！?0】結(jié)論：白蛋白中的某些陰離子，尤其是一系列脂肪酸的陰離子，在白蛋白等電點(diǎn)的偏酸側(cè)時(shí)，能提高白蛋白的耐熱能力。脂肪酸可與白蛋白結(jié)合生成復(fù)合物，成為保護(hù)劑。所以可利用加入的辛酸鈉作為白蛋白的保護(hù)劑，通過(guò)加熱處理的方法使其他不耐熱的蛋白質(zhì)變性，提高白蛋白的純度和收率。最后一次鹽析沉淀后的透