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1、【精品文檔】如有侵權(quán),請聯(lián)系網(wǎng)站刪除,僅供學(xué)習(xí)與交流高中生物選修一問題導(dǎo)學(xué)答案版.精品文檔.選修1生物技術(shù)與實踐一、果酒和果醋的制作1.果酒制作利用的微生物是酵母菌,該菌是兼性厭氧型的真菌(真核)。有氧條件:C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O +能量(條件:酶);無氧條件:C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量(條件:酶,場所:細胞質(zhì)基質(zhì))。酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在1825,pH大約在4.05.8。2.果醋制作利用的微生物是醋酸菌,該菌是一種好氧型細菌(原核),即使短時間中斷通入氧氣,也會引起醋酸菌死亡。糖源充足時:C6H12O63CH3COOH;缺少糖源時:C2H5
2、OH +O2CH3COOH+H2O。醋酸菌的最適生長溫度為3035,pH大約在5.46.3。3.實驗流程:挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵(果酒)醋酸發(fā)酵(果醋)。裝置各部分功能:充氣口:在釀酒時先打開,后關(guān)閉;在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣。排氣口:在酒精發(fā)酵時用來排出CO2的。出料口:用來取樣和出料的。制果酒時先通氣是為了讓酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖,建立種群優(yōu)勢;后斷氣是為了讓酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精。果酒制作裝置保持通氣并提高溫度可用于制作果醋。4.葡萄應(yīng)先沖洗再去梗,避免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。家庭制作葡萄酒時,葡萄不能清洗得太干凈,因為制酒過程需要的酵母菌來自葡萄表面的
3、野生酵母菌。5.裝瓶時留有1/3的空間是為了防止發(fā)酵液溢出污染瓶口,并且酵母菌可以有氧呼吸大量繁殖。6.用簡易裝置制作果酒適時擰松瓶蓋目的是放出CO2,防止爆瓶。不能擰開,防止雜菌污染。7.防止發(fā)酵液被污染:榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈(可以用70%的酒精);每次排氣時只需擰松瓶蓋,不要完全打開瓶蓋。8.果酒檢測:嗅味和品嘗;顯微鏡觀察酵母菌;酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。果醋檢測:觀察菌膜的形成;嗅味和品嘗;檢測和比較醋酸發(fā)酵前后的pH;顯微鏡觀察發(fā)酵液中是否有醋酸菌。9.葡萄酒一般呈深紅色的原因:紅葡萄皮的色素進入發(fā)酵液。二、腐乳的制作1.腐乳制作的微生物主要是毛霉(還有青霉、酵
4、母、曲霉等)。原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。溫度:1518。表面的“皮”是毛霉的匍匐菌絲。2.腐乳制作的流程:讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制。3.腐乳制作的豆腐一般選擇含水量70%左右的豆腐,含水量過高不易成形,含水量過低不利于毛霉生長。4.加鹽的作用是:析出豆腐中的水分,使豆腐塊變硬;抑制微生物生長,發(fā)避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。(調(diào)味;浸提毛霉菌絲中的蛋白酶)。鹽的用法用量:逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。5.加酒可以抑制微生物的生長,同時能使腐乳具有獨特的香味。含量一般控制在
5、12%左右。酒精含量過高,腐乳成熟的時間將會延長;酒精含量過低,不足以抑制微生物生長,可能導(dǎo)致豆腐腐敗。6.香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,也具有防腐殺菌的作用。7.防止雜菌污染:玻璃瓶要洗凈并煮沸消毒;裝瓶時,操作要迅速小心,瓶口要密封;密封時,最好將瓶口通過酒精燈火焰,防止瓶口被污染。三、微生物的分離和培養(yǎng)1.培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。一般成分:水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源(提供氮元素的物質(zhì))和無機鹽。培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。2.培養(yǎng)基按狀態(tài)分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基,可根據(jù)是否加入瓊脂來判斷。按功能可分
6、為基本培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。3.消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法:煮沸消毒法:日常生活中的物品消毒;巴氏消毒法:對于一些不耐高溫的液體,如牛奶;化學(xué)試劑消毒法:如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。4.滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法:灼燒滅菌:如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具;干熱滅菌:如玻璃器皿、金屬用具等;高壓蒸汽滅菌:如培養(yǎng)基、玻璃器皿等。5.固體培養(yǎng)基配制的一般步驟:計算稱量溶化滅菌倒平板。6.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50 左右時(因為瓊脂在44以下會凝固),才能用來倒平
7、板??梢杂檬钟|摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。錐形瓶瓶口要通過火焰灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。平板冷凝后倒置是因為平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。將空白平板置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),若無雜菌生長即為合格的培養(yǎng)基。在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。7.平板劃線操作時,操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存
8、在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到單菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。在灼燒接種環(huán)之后,要等其冷卻后再進行劃線,以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。在作第二次以及其后的劃線操作時,要從上一次劃線的末端開始劃線是因為劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。8.微生物純
9、化常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,后者適合計數(shù)。將未稀釋的菌液吸取1mL加入到9mL無菌水中即可稀釋10倍。9.測定微生物數(shù)量常用方法有顯微鏡直接計數(shù)法、平板菌落計數(shù)法等。菌落是由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)。每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M,C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋倍數(shù)。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。這是因為當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落。10.實驗室中微生物的篩選原理:人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營
10、養(yǎng)、溫度、pH等),同時抑制或阻止其他微生物生長。在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱做選擇培養(yǎng)基。11.設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響,提高實驗結(jié)果的可信度。微生物計數(shù)時,通常設(shè)置空白對照來排除培養(yǎng)基污染帶來的誤差。12.分解尿素的微生物可以用以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選。在細菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中,細菌合成的脲酶將尿素分解成了氨,氨會使培養(yǎng)基的堿性增強,pH升高。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細菌后,如果pH升高,指示劑將變紅。13.纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認為它至少包括三種組分,即C1
11、酶、CX酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。篩選纖維素分解菌可以采用剛果紅染色法。剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。四、酶的研究與應(yīng)用1.加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉。目前常用的酶制劑有:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。2.加酶洗衣粉可以使污漬中的大分子水解成小分子,從而使污跡容易從衣物上脫落,因而具有更好的去污能力。3.溫度、酸堿度和表面活性劑都會
12、影響酶的活性,將酶直接加入洗衣粉中,酶很快就會失活。科學(xué)家通過基因工程生產(chǎn)出了能夠耐酸、耐堿、忍受表面活性劑和較高溫度的酶,并且通過特殊化學(xué)物質(zhì)將酶包裹使其與洗衣粉的其他成分隔離。4.固定化酶和固定化細胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)。這樣使酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,還可以反復(fù)利用。包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化,而細胞多采用包埋法固定化。5.固定化酵母細胞分析:酵母活化:讓處于休眠狀態(tài)的酵母菌重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。海藻酸鈉:要小火或不間斷加熱并不斷攪拌,冷卻到室溫再與酵母細胞混合。CaCl2溶液:使海藻酸鈉形
13、成凝膠珠(Ca2+能穩(wěn)定海藻酸鈉凝膠的結(jié)構(gòu),是一種交聯(lián)劑)。凝膠珠質(zhì)量:凝膠珠呈現(xiàn)球形或橢球形,顏色呈淡黃色(如果凝膠珠不是球形或橢球形,說明海藻酸鈉濃度過高;如果凝膠珠顏色過淺呈白色,說明海藻酸鈉的濃度偏低,固定的酵母細胞數(shù)目較少。五、DNA的粗提取與鑒定1.DNA粗提取的基因思路是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)等方面的差異,提取DNA,去除其他成分。2.DNA在濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,在蒸餾水和2mol/L的NaCl溶液中溶解度都較高。3.將DNA與蛋白質(zhì)分離有3種方案:通過控制NaCl的濃度使DNA溶解或析出;直接在濾液中加入嫩肉粉,嫩肉粉中的
14、木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì);將濾液放在6075的恒溫水浴箱中保溫。4.提取DNA的實驗材料:原則上,凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是,選用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大。動物材料常選用雞血紅細胞,植物材料常選用菜花。5.在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水(雞血細胞就會吸水破裂),同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。6.利用植物材料提取DNA時,需要加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分地攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。洗滌劑能夠瓦解細胞膜,食鹽能夠溶解DNA。7.實驗室獲得高純度的DNA常用十六烷基溴化銨(CTAB)、十二烷基硫酸鈉(SDS)或吐溫等化學(xué)試劑。8.冷卻的95%酒精
15、的作用:抑制核酸水解酶活性,防止DNA分子降解;降低分子運動,易于形成沉淀析出;低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂。9.DNA鑒定:將DNA溶于2mol/L的NaCl溶液中,然后加入二苯胺試劑,沸水中加熱變藍。二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用。六、植物有效成分的提取1.蒸餾法 壓榨法 萃取法。蒸餾法一般用于難溶于水,揮發(fā)性較強,化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定加熱不易分解的物質(zhì)提取。壓榨法一般用于難溶于水,化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定,受熱易分解,或者原料加熱易焦糊的物質(zhì)提取。萃取法一般用于提取物難溶于水,易溶于有機溶劑的物質(zhì)提取。2.水蒸氣蒸餾法的原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的的植物芳香油攜帶出來,形成油水混合物,冷卻后,混合
16、物又會重新分出油層和水層。水蒸氣蒸餾法分為:水中蒸餾、水上蒸餾、水氣蒸餾。3.玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機溶劑,能隨水蒸氣一同蒸餾。流程詳見教材P73,圖6-1。提取需要蒸餾裝置、冷凝裝置、油水分離裝置三部分。剛蒸餾得到的產(chǎn)物是乳白色的乳濁液,為油水混合物,先加入NaCl增大鹽溶液濃度,即可出現(xiàn)油水分離,放出分液漏斗下方的水層,再加入一些無水硫酸鈉即可除去殘余水分,得到玫瑰精油了。4.橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解,同時使用水中蒸餾時會發(fā)生原料焦糊的問題。提取流程詳見教材P74,圖6-4。為了提高橘皮精油的出油率,需要先將橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡。浸泡后的
17、橘皮需要用流水漂洗去除石灰水。為使橘皮油易與水分離,需要加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%Na2SO4,并調(diào)節(jié)pH至78。5.胡蘿卜素在人或動物體內(nèi)被氧化成兩分子維生素A。微生素A可以治療夜盲癥,幼兒發(fā)育不良,還可以作為食用色素,治療癌細胞等。工業(yè)上一般從植物、巖藻、發(fā)酵的微生物中提取胡蘿卜素。6.胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,難溶于乙醇,易溶于石油醚等有機溶劑。故采用有機溶劑萃取的方法提取胡蘿卜素。提取流程詳見教材P78,圖6-6。胡蘿卜的粉碎和干燥都是為了提高萃取效率,粉碎越小越好,干燥要注意控制時間和溫度不要太高,干燥時間太長和溫度太高會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。萃取過程要注意萃取劑的性質(zhì)和用量還有用水浴加熱控制萃取溫度,以及用冷凝回流裝置防止萃取劑揮發(fā)引發(fā)爆炸危險
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