探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化

1、.培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化.基基 礎(chǔ)礎(chǔ) 回回 扣扣1、酵母菌、酵母菌酵母菌是單細(xì)胞真核生物。生長(zhǎng)周期短，增殖速度快，還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判斷細(xì)胞的死活探究膜的透性）.2、種群數(shù)量的變化、種群數(shù)量的變化 種群數(shù)量的變化包括增長(zhǎng)、波動(dòng)、穩(wěn)定、下降等種群數(shù)量的變化包括增長(zhǎng)、波動(dòng)、穩(wěn)定、下降等 “S”型曲線有一個(gè)型曲線有一個(gè)K值，即環(huán)境容納量。值，即環(huán)境容納量。 種群數(shù)量的增長(zhǎng)也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培種群數(shù)量的增長(zhǎng)也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培養(yǎng)液的養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等

2、）的影響。）的影響。.探究過程 1 1提出問題：提出問題： 2 2作出假設(shè)：作出假設(shè)： 3 3設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)： 4 4進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)： 5 5分析結(jié)果和分析結(jié)果和 表達(dá)交流：表達(dá)交流： 6 6得出結(jié)論：得出結(jié)論：培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？酵母菌在開始一段時(shí)間呈酵母菌在開始一段時(shí)間呈“J J”型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間的推移，由于資源和空間有限，呈的推移，由于資源和空間有限，呈“S S”型增長(zhǎng)。型增長(zhǎng)。 連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)5 5天，每天用顯微鏡和血球計(jì)數(shù)天，每天用顯微鏡和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)出酵母菌種群密度板計(jì)數(shù)出酵母菌種群密度

3、各小組匯報(bào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合前各小組匯報(bào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合前4 4天的結(jié)果，天的結(jié)果，畫出酵母種群增長(zhǎng)的曲線圖并進(jìn)行分析。畫出酵母種群增長(zhǎng)的曲線圖并進(jìn)行分析。 酵母菌在開始一段時(shí)間呈酵母菌在開始一段時(shí)間呈“J J”型增長(zhǎng)，但型增長(zhǎng)，但隨著時(shí)間的推移，由于資源和空間有限，隨著時(shí)間的推移，由于資源和空間有限，將呈將呈“S S”型增長(zhǎng)，并最終將全部死亡。型增長(zhǎng)，并最終將全部死亡。 .3 3設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)： 將將10mL10mL無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中；無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中； 將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻；將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻； 將試管在將試管在

4、2828條件下連續(xù)培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)5d5d； 每天取樣計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量；每天取樣計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量； 分析結(jié)果，得出結(jié)論。分析結(jié)果，得出結(jié)論。是否設(shè)置對(duì)照組和多組重復(fù)實(shí)驗(yàn)？是否設(shè)置對(duì)照組和多組重復(fù)實(shí)驗(yàn)？如何取樣計(jì)數(shù)？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？計(jì)數(shù)時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？如何取樣計(jì)數(shù)？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？計(jì)數(shù)時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？.計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室（中間大方格）的長(zhǎng)和寬各為計(jì)數(shù)室（中間大方格）的長(zhǎng)和寬各為1mm1mm，深度為，深度為0.1mm0.1mm，其體積為，其體積為_mm_mm3 3 ，合，合_mL_mL。1mm0.1110-4血球計(jì)數(shù)板血球計(jì)數(shù)板:一種專門計(jì)數(shù)較大單細(xì)胞微生物的儀器一種專門計(jì)數(shù)較大單細(xì)胞微生物的儀

5、器.計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室分為計(jì)數(shù)室分為25中格中格（雙線邊雙線邊）每一中格又分為每一中格又分為16小格小格計(jì)數(shù)室是由計(jì)數(shù)室是由_個(gè)小格組成個(gè)小格組成2516=400.如何計(jì)數(shù)？如何計(jì)數(shù)？五點(diǎn)取樣法五點(diǎn)取樣法樣方法樣方法每每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量= =A ( (平均每個(gè)中格酵母細(xì)胞數(shù)平均每個(gè)中格酵母細(xì)胞數(shù)) )25104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)A1A2A5A3A4.第第 1 1 天天.第第 4 4 天天第第 6 6 天天.第第 7 7 天天死亡死亡.酵母菌數(shù)量變化記錄表酵母菌數(shù)量變化記錄表.計(jì)數(shù)時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？計(jì)數(shù)時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管從試管中吸出培

6、養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾次輕輕震蕩幾次； 如果酵母菌濃度過大，應(yīng)先如果酵母菌濃度過大，應(yīng)先稀釋稀釋。對(duì)于壓在中格界線上的酵母菌，一般只取對(duì)于壓在中格界線上的酵母菌，一般只取相鄰兩邊及夾角相鄰兩邊及夾角計(jì)數(shù)；計(jì)數(shù)；對(duì)于已經(jīng)出芽的酵母菌，對(duì)于已經(jīng)出芽的酵母菌，芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半時(shí)，即可時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)算；作為兩個(gè)菌體計(jì)算；已死亡的酵母菌不計(jì)數(shù)已死亡的酵母菌不計(jì)數(shù)。每個(gè)樣品一般計(jì)數(shù)三次，取其每個(gè)樣品一般計(jì)數(shù)三次，取其平均值平均值。.培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化 .死亡死亡.在計(jì)數(shù)前，還應(yīng)有哪些步驟？需注意些什么？在計(jì)數(shù)前，還應(yīng)有

7、哪些步驟？需注意些什么？ 培養(yǎng)液配制培養(yǎng)液配制 滅菌滅菌 接種接種 培養(yǎng)培養(yǎng).試管試管編號(hào)編號(hào)培養(yǎng)液培養(yǎng)液/mL/mL無菌水無菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL溫度溫度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828 針對(duì)針對(duì)“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化化”，有人提出了新的問題，某同學(xué)按下表完，有人提出了新的問題，某同學(xué)按下表完成了有關(guān)實(shí)驗(yàn)。成了有關(guān)實(shí)驗(yàn)。 .溫度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)酵母菌生長(zhǎng)的影響溫度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)酵母菌生長(zhǎng)的影響 .試管試管編號(hào)編號(hào)培養(yǎng)液培養(yǎng)液/mL/mL無菌水無菌水/mL/mL

8、酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL溫度溫度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828.以計(jì)數(shù)酵母菌為例以計(jì)數(shù)酵母菌為例(1)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個(gè)數(shù)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個(gè)數(shù).(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù),以每小以每小方格內(nèi)含有方格內(nèi)含有4-5個(gè)酵母細(xì)胞為宜個(gè)酵母細(xì)胞為宜,一般稀釋一般稀釋10倍即可倍即可. (3)將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計(jì)數(shù)室上加在中央的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的厚玻片蓋專用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵母菌懸液將稀釋

9、后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣片的邊緣,使菌液緩緩滲入使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi)使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi).血球計(jì)數(shù)板的使用血球計(jì)數(shù)板的使用.(5)計(jì)數(shù)時(shí)計(jì)數(shù)時(shí),如果使用如果使用16格格25格規(guī)格的計(jì)數(shù)室格規(guī)格的計(jì)數(shù)室,要按要按對(duì)角線位對(duì)角線位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4個(gè)中格個(gè)中格(即即100個(gè)個(gè)小格小格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為如果規(guī)格為25格格16格的計(jì)數(shù)板格的計(jì)數(shù)板,除了取其除了取其4個(gè)對(duì)角方位外個(gè)對(duì)角方位外,還需再數(shù)中央的一個(gè)中格還需

10、再數(shù)中央的一個(gè)中格(即即80個(gè)小方格個(gè)小方格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù). (6)當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計(jì)數(shù)大方一般只計(jì)數(shù)大方格的上方和左方線上的酵母細(xì)胞格的上方和左方線上的酵母細(xì)胞 (7)對(duì)每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次對(duì)每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次,取其平均值取其平均值,按下列公式計(jì)按下列公式計(jì)算每算每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù). .3.計(jì)算公式計(jì)算公式(1)16格格25格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式:酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)(2)25格格x16格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公

11、式格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式:酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù). 怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？ 對(duì)一支試管中的培養(yǎng)液對(duì)一支試管中的培養(yǎng)液( (可定為可定為10ml)10ml)中的酵母菌中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測(cè)的方法：逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測(cè)的方法：先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底吸

12、去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計(jì)算中的酵母菌的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計(jì)算中的酵母菌總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為0.1mm0.1mm，可算出，可算出10ml10ml培培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：2.52.510104 4x(xx(x為小方格內(nèi)酵為小方格內(nèi)酵母菌數(shù)母菌數(shù)) ). 從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？振蕩幾次。

13、這是為什么？ 本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要請(qǐng)討論對(duì)照組應(yīng)怎樣本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要請(qǐng)討論對(duì)照組應(yīng)怎樣設(shè)計(jì)和操作；如果不需要，請(qǐng)說明理由。設(shè)計(jì)和操作；如果不需要，請(qǐng)說明理由。 需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？ 目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差。 不需要，本實(shí)驗(yàn)旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定不需要，本實(shí)驗(yàn)旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實(shí)驗(yàn)，獲得平均數(shù)條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實(shí)驗(yàn)，獲得平均數(shù)值即可。值即可。 不用重復(fù)，只要分組實(shí)驗(yàn)獲得平均值即可。不用重復(fù)，只要分組

14、實(shí)驗(yàn)獲得平均值即可。.5 5、怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？ 如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)采取怎樣如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)采取怎樣的措施？的措施？第第1 1天天第第2 2天天第第3 3天天第第4 4天天第第5 5天天第第6 6天天第第7 7天天第第1 1組組第第2 2組組第第3 3組組-第第n n組組平均值平均值 搖勻試管取搖勻試管取1mL1mL酵母菌培養(yǎng)液稀釋酵母菌培養(yǎng)液稀釋n n倍后，倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值所得數(shù)值乘以乘以n n2.52.510104 4，即為即為10mL10mL酵母菌液中酵母菌個(gè)數(shù)。

15、酵母菌液中酵母菌個(gè)數(shù)。只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。7 7 對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？. 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：A組為實(shí)驗(yàn)組，裝培養(yǎng)液組為實(shí)驗(yàn)組，裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28。B組裝培養(yǎng)液組裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度5，與，與A組形成溫度條件對(duì)照。組形成溫度條件對(duì)照。C組不裝培養(yǎng)液，只裝無菌水組不裝培養(yǎng)液，只裝無菌水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28，與，與A組形成營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)照。組形成營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)照。. 計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)：首先取樣，每計(jì)數(shù)：首先取樣，每 天取樣時(shí)間大體一致，并要遵守?zé)o天取樣時(shí)間大體一致，并要遵守?zé)o菌操作規(guī)范。菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地使用，正確地使用1mL刻度吸管將刻度吸管將lmL酵母菌培養(yǎng)液移入酵母菌培養(yǎng)液移入1支干凈的試管里，支干凈的試管里，然后然后用滴管吸取用滴管吸取1滴培養(yǎng)液滴在已蓋在血球計(jì)數(shù)板網(wǎng)格上滴培養(yǎng)液滴在已蓋在血球計(jì)數(shù)板網(wǎng)格上的蓋