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文檔簡(jiǎn)介
1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題2002 年協(xié)和醫(yī)大細(xì)胞生物學(xué)博士試題共 5 道大題,都比較基礎(chǔ),前兩道是:1、細(xì)胞連接包括幾種類型,及其各自的特點(diǎn)2、核纖層的形態(tài)結(jié)構(gòu),及其同中間纖維的共同點(diǎn)3、泛素降解蛋白的途徑4、核糖體中蛋白組分同RNA 的功能5、一群細(xì)胞死亡,試舉三個(gè)以上證據(jù),證明它們是調(diào)亡而非壞死(不能超過400 字,否則扣分2002 年協(xié)和醫(yī)大細(xì)胞生物學(xué)博士試題1、細(xì)胞連接包括幾種類型,及其各自的特點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞連接按其功能分三大類:緊密連接、錨定連接和通訊連接。緊密連接的主要作用是封閉相鄰細(xì)胞間的接縫,防止溶液中的分子沿細(xì)胞間隙滲入體內(nèi),從而保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定;特
2、點(diǎn)是通過跨膜蛋白相連。錨定連接通過細(xì)胞的骨架系統(tǒng)將細(xì)胞或細(xì)胞與基質(zhì)相連成一個(gè)堅(jiān)挺、有序的細(xì)胞群體,使細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間具有抵抗機(jī)械張力的牢固粘合。參與錨定連接的骨架系統(tǒng)可分兩種不同形式,與中間纖維相連的錨定連接主要包括橋粒和半橋粒;與肌動(dòng)蛋白纖維相連的錨定連接主要包括粘合帶與粘合斑。間隙連接是動(dòng)物細(xì)胞間最普遍的細(xì)胞連接,是在相互接觸的細(xì)胞之間建立的有孔道的、由連接蛋白形成的親水性跨膜通道,允許無機(jī)離子、第二信使及水溶性小分子量的代謝物質(zhì)從中通過,從而溝通細(xì)胞達(dá)到代謝與功能的統(tǒng)一。2、核纖層的形態(tài)結(jié)構(gòu),及其同中間纖維的共同點(diǎn)核纖層纖維的直徑為10nm 左右,縱橫排列整齊,呈正交狀編織成網(wǎng)絡(luò),分
3、布于內(nèi)層核膜與染色質(zhì)之間。一般認(rèn)為核纖層結(jié)構(gòu)整體觀呈一球狀或籠狀網(wǎng)絡(luò),切面觀呈片層結(jié)構(gòu)。在分裂期細(xì)胞,核纖層解體,以單體形式存在于胞質(zhì)中。核纖層是位于細(xì)胞核內(nèi)層核膜下的纖維蛋白片層或纖維網(wǎng)絡(luò),核纖層由1 至 3種核纖層蛋白多肽組成。核纖層與中間纖維有許多共同點(diǎn):(1) 兩者均形成10nm 纖維;(2)兩者均能抵抗高鹽和非離子去垢劑的抽提;(3) 某些抗中間纖維蛋白的抗體能與核纖層發(fā)生交叉反應(yīng),說明中間纖維蛋白與核纖層蛋白分子存在相同的抗原決定簇(Osborn Weber ,1987) ; (4) 兩者在結(jié)構(gòu)上有密切聯(lián)系,核纖層成為核骨架與中間纖維之間的橋梁3、泛素降解蛋白的途徑4、核糖體中蛋白
4、組分同RNA 的功能細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題rRNA 具有肽酰轉(zhuǎn)移酶的活性;為 tRNA 提供結(jié)合位點(diǎn)(A 位點(diǎn)、 P 位點(diǎn)和 E 位點(diǎn)); 為多種蛋白質(zhì)合成因子提供結(jié)合位點(diǎn);在蛋白質(zhì)合成起始時(shí)參與同mRNA 選擇性地結(jié)合以及在肽鏈的延伸中與mRNA 結(jié)合;核糖體大小亞單位的結(jié)合、校正閱讀(proofreading) 、無意義鏈或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用等都與 rRNA 有關(guān)。5、一群細(xì)胞死亡,試舉三個(gè)以上證據(jù),證明它們是調(diào)亡而非壞死(不能超過400 字,否則扣分2003 年博士研究生入學(xué)考試試題細(xì)胞生物學(xué)試題(本人懷疑是生化題)一、名詞解釋(1-5 每題 2 分, 6-9 每題 2.5
5、 分,共 20 分)1、a互補(bǔ) 現(xiàn)在使用的許多載體都帶有一個(gè)E.coli DNA的短區(qū)段,其中含有伊半乳糖甘酶的-a肽基因( lacZ )的調(diào)控序列和頭146 個(gè)氨基酸的編碼信息。這個(gè)編碼區(qū)中插入了一個(gè)MCS ,它并不破壞讀框,但是可使少數(shù)幾個(gè)氨基酸插入到3半乳糖甘酶的氨基端而不影響功能,這種載體適用于編碼伊半乳糖甘酶C 端部分序列的宿主細(xì)胞,雖然宿主和質(zhì)粒編碼的片段各自都沒有酶活性,但它們可融為一體,形成具有酶活性的蛋白,從而實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)。2、 RT-PCR3、親和層析親和層析是一種吸附層析,抗原(或抗體)和相應(yīng)的抗體(或抗原)發(fā)生特異性結(jié)合,而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。所以將抗原(或抗
6、體)固相化后,就可以使存在液相中的相應(yīng)抗體(或抗原)選擇性地結(jié)合在固相載體上,借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開,達(dá)到分離提純的目的。4、偏愛密碼子5、同工酶( isoenzyme )是指催化的化學(xué)反應(yīng)相同,酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。這類酶存在于生物的同一種屬或同一個(gè)體的不同組織、甚至同一組織或細(xì)胞中。翻譯并且解釋名詞6、 chromatin chromosome7、nuclear matrix用核酸酶與高鹽溶液對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行處理,將 DNA、組蛋白和 RNA抽提后,殘留纖維蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。8、 gene cluster 指基因家族中的各成員緊密成簇排列成大串的重復(fù)單位,定
7、于染色體的的特殊區(qū)域。他 們屬于同一個(gè)祖先的基因擴(kuò)增產(chǎn)物。也有一些基因家族的成員在染色體上排列并不緊密,中間還含有一些無關(guān)序列。但總體是分布在染色體上相對(duì)集中的區(qū)域。9、 transformation二、填空(每空1 分,共 15 分)3、協(xié)和生物化學(xué)系主任吳憲(1893-1959)對(duì)我國(guó)的科學(xué)事業(yè)貢獻(xiàn)巨大。4、科學(xué)家1928年格里非斯(P. Griffith )首次證明DNA是遺傳物質(zhì),該證明實(shí)驗(yàn)是肺炎雙球菌感染小家鼠的實(shí)驗(yàn)。5、能夠進(jìn)行可逆磷酸化的氨基酸是(3 個(gè) )Ser 、 Thr 。6、維持DNAZ螺旋的力是 堿基堆積力 和氫鍵。8、 真核細(xì)胞核糖體大亞基 的 18S rRNA 與原
8、核細(xì)胞16S rRNA 同源。9、 Plindromatic sequence 又叫 , 定義是 : 。三、判斷并改錯(cuò)(每題2.5 分,共 5 分)1、細(xì)菌的操縱基因總在啟動(dòng)子的后面。2、乳酸操縱子模型中,阻遏蛋白與RNA聚合酶結(jié)合阻止啟動(dòng)子啟動(dòng)。四、簡(jiǎn)答(每題5 分,共 20 分)1、CAMP敷活蛋白激酶的分子機(jī)制 ?中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題2、核酸和蛋白質(zhì)分子為什么具有方向性?核酸鏈具有方向性,有兩個(gè)末端分別是5末端與3末端。5 末端含磷酸基團(tuán),3末端含羥基。核酸鏈內(nèi)的前一個(gè)核苷酸的3羥基和下一個(gè)核苷酸的5磷酸形成3,5磷酸二酯鍵,故核酸中的核苷酸被稱為核苷酸殘基。3、紫外線
9、造成皮膚細(xì)胞DNA可種損傷?如何修復(fù)?4、使肽鍵形成的酶叫什么名字?其化學(xué)本質(zhì)是什么?存在于細(xì)胞的什么位置?五 論述(每題20 分,共 40 分)1、何謂限制性內(nèi)切酶的星活性?影響因素是什么?所謂星活性又稱Star 活性。 是指由于反應(yīng)條件不同而產(chǎn)生的切斷與識(shí)別位點(diǎn)相似但不完全相同的序列。導(dǎo)致星號(hào)活性的因素:1 .較高的甘油濃度(>5% v/v ) ;2 .酶與底物DNA比例過高(不同的酶情況不同,通常為 >100 U/聞);3 . 低鹽濃度(<25 mM )4 . 高 pH 值( >pH 8.0 )5 .存在有機(jī)溶劑(如DMSO 、乙醇(9)、乙烯乙二醇、二甲基乙酰胺
10、、二甲基甲酰胺、sulphalane 等)6 .用其他二價(jià)離子替代鎂離子(如Mn2+, Cu2+, Co2+, Zn2+等)抑制星號(hào)活性的方法:1. 盡量用較少的酶進(jìn)行完全消化反應(yīng)。這樣可以避免過度消化以及過高的甘油濃度。2. 盡量避免有機(jī)溶劑(如制備DNA 時(shí)引入的乙醇)的污染。3. 將離子濃度提高到100-150 mM (若酶活性不受離子強(qiáng)度影響)。4. 將反應(yīng)緩沖液的pH 值降到7.0。5. 二價(jià)離子用Mg 2+。2、已知一個(gè)蛋白質(zhì)的全長(zhǎng)CDNA設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟從 CDNAF始提純此蛋白。2004 年協(xié)和考博細(xì)胞生物學(xué)試卷名解(不全)1 . 芽孢 細(xì)胞質(zhì)高度濃縮脫水所形成的一種抗逆性很強(qiáng)
11、的球形或橢圓形的休眠體。二、問答(不全)2 . 細(xì)胞核線粒體, 高爾基體的分離3 .述NO的信號(hào)通路4 .怎樣分離細(xì)胞骨架,MAR勺生理功能matrinassociation region(MAR)核骨架結(jié)合序列5.腫瘤發(fā)生是一個(gè)多基因多步驟的過程,從癌基因和抑癌基因方面用簡(jiǎn)單的示意圖說明腫瘤的發(fā)生機(jī)制一、名詞解釋(每題5 分,共 20 分)1、米倫反應(yīng)(Mliion reaction) : 蛋白質(zhì)溶液中加入米倫試劑(亞硝酸汞、硝酸汞及硝酸的混合液),蛋白質(zhì)首先沉淀,加熱則變?yōu)榧t色沉淀,此反應(yīng)為酪氨酸的酚核所特有的反應(yīng),因此含有酪氨酸的蛋白質(zhì)均呈米倫反應(yīng)。2、核內(nèi)基質(zhì)3、核定位信號(hào)4、星體形體
12、微管二、判斷(每題1 分,共10 分)一種周期蛋白與一種 CDK相作用。三、填空(每空1 分,共20 分)1、線蟲發(fā)育過程中有 1090個(gè)細(xì)胞,其中凋亡了 131個(gè)細(xì)胞,有14個(gè)基因與凋亡相關(guān)、ced-3和ced-4那兩個(gè)基因于凋亡密切相關(guān), ced-3 基因抑制凋亡。中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題2、電境包埋劑有那四個(gè)特點(diǎn) 高倍放大不顯示本身結(jié)構(gòu)、聚合時(shí)不發(fā)生明顯的收縮、有良好的機(jī)械性,鯉魚切片、易被 電子穿透。3、MA強(qiáng)骨架結(jié)合序列有那四個(gè)特點(diǎn)富含AT、富含DNA解旋元件、富含重復(fù)序列、含有轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。4、G蛋白_憶亞基和_GDP_結(jié)合時(shí),G蛋白無活性5、過氧化物酶體,有兩種
13、酶,一種以FAD為輔基,產(chǎn)生H2O2、另一種是過氧化氫酶酶,分解H2O2生成水和 氧氣。6、根據(jù)著絲粒的位置,染色體可分那四種中著絲粒染色體、亞中著絲粒染色體、亞端著絲粒染色體、端著絲粒染色體。山了問答題(每題 10分,共50分)1、簡(jiǎn)述ATP合成酶合成ATP的過程。2、敘述信號(hào)肽的結(jié)構(gòu)及作用。3、親核蛋白如何入核的 ?4、如何用抗體對(duì)特異抗原進(jìn)行定位,定性?5、P53與凋亡的關(guān)系。2004年協(xié)和考博細(xì)胞生物學(xué)試卷一、名解(不全)1.芽抱二、問答(不全)1 .細(xì)胞核線粒體,高爾基體的分離2 .述NO的信號(hào)通路3 .怎樣分離細(xì)胞骨架,MAR的生理功能4 .?5 .腫瘤發(fā)生是一個(gè)多基因多步驟的過程
14、,從癌基因和抑癌基因方面用簡(jiǎn)單的示意圖說明腫瘤的發(fā)生機(jī)制協(xié)和醫(yī)科大學(xué)2005年細(xì)胞生物學(xué)(博士)一、填空:1、龜?shù)男詣e決定受溫度的影響 雄性 雌性2、核孔復(fù)合體有四部分: 。3、細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子都包括 , , , ,細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子又稱 4、目前推測(cè) R蛋白的功能有三個(gè) , , 。5、酪氨酸信號(hào)通路的受體有兩個(gè) , 。6、膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白有兩類, 。7、細(xì)胞間連接方式有 , , 。8、減數(shù)第一次分裂的偶線期發(fā)生的事件 。9、溶酶體的標(biāo)志酶 。其膜蛋白通過 方式防止自身被水解。10、磷酸肌醇通路的兩個(gè)第二信使 , 。中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題二、判斷:1、核小體蛋白與 DNA的結(jié)合是有選擇
15、性的2吞噬泡的形成需要網(wǎng)格蛋白3線粒體的分裂方式 酵母和撅類主要是通過內(nèi)縮三、名詞10*21、亞線粒體小泡2、隱蔽mRNA3、死亡酶4、易位子5、核仁相隨染色質(zhì)6、傳代培養(yǎng)7、第二信史四、簡(jiǎn)答:1、什么是細(xì)胞工程并舉兩例說明之2、高爾基體的結(jié)構(gòu)和功能3、線粒體蛋白的合成和轉(zhuǎn)運(yùn)方式4、舉例說明CDK的功能5、什么是基因組印記,并舉例說明2005年攻讀博士研究生入學(xué)考試細(xì)胞生物學(xué)試題(回憶型)一、填空:(每題2分,共20分)1、龜?shù)男詣e決定受溫度的影響 低溫雄性高溫雌性。2、核孔復(fù)合體有四部分:孔環(huán)顆粒、周邊顆粒、中央顆粒和無定形物質(zhì)組成3、細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子都包括 , , , , ,細(xì)胞生長(zhǎng)分化因
16、子又 稱。4、目前推測(cè)R蛋白的功能有三個(gè)對(duì) rRNA折疊成有功能的三維結(jié)構(gòu)是十分重要的、在蛋白質(zhì)合成過程中,核糖體的空間構(gòu)象發(fā)生一系列的變化,某些r蛋白質(zhì)隊(duì)核糖體起“微調(diào)”作用、rRNA和r蛋白質(zhì)共同行使核糖體上的結(jié)合位點(diǎn)和催化作用中心。5、酪氨酸信號(hào)通路的受體有兩個(gè) , 。9、溶酶體的標(biāo)志酶酸性磷酸酶。其膜蛋白通過膜蛋白高度糖基化方式防止自身被水解。二、判斷(每題1分,共10分)1、核小體蛋白與 DNA勺結(jié)合是有選擇性的。2、吞噬泡的形成需要網(wǎng)格蛋白。3、線粒體的分裂方式 酵母和撅類主要是通過內(nèi)縮。三、名詞解釋(每題 2分,共20分)1、亞線粒體小泡 用超聲波把線粒體破碎,線粒體內(nèi)膜碎片可形
17、成顆粒朝外的小膜泡。2、隱蔽mRNA 一般情況下,存在于未受精卵細(xì)胞中并不用以翻譯蛋白質(zhì),為早期蛋白質(zhì)合成提供模板,在卵細(xì)胞中與抑制蛋白質(zhì)結(jié)合而失去活性的mRNA。3、死亡酶 即apopain催化poly (ADP-ribose ) Polymerase ( PARP),即聚(ADP-核糖)聚合酶的裂解執(zhí),行著與線蟲中的ced3相同的功能,導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡。4位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的與新合成的多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)的蛋白復(fù)合物,其本質(zhì)是一種通道蛋白。5、核仁相隨染色質(zhì) 分為兩部分,一部分位于核仁周圍,成為核仁周染色質(zhì),即異染色質(zhì);一部分位于核中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題仁內(nèi),為常染色質(zhì),即核仁組織區(qū)
18、,是 rDNA所在的位置。6、傳代培養(yǎng) 將培養(yǎng)細(xì)胞從培養(yǎng)器中取出,把一部分移至新的培養(yǎng)器中再進(jìn)行培養(yǎng),這種培養(yǎng)方式稱為 傳代培養(yǎng)。7、第二信史四、簡(jiǎn)答(每題10分,共50分)1、什么是細(xì)胞工程并舉兩例說明之。以細(xì)胞為對(duì)象,應(yīng)用生命科學(xué)理論,借助工程學(xué)原理與技術(shù),有目的地利用或改造生物遺傳特性,以 獲得特定的細(xì)胞、組織產(chǎn)品或新型物種的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。細(xì)胞融合技術(shù)和細(xì)胞雜合技術(shù)、單克隆技術(shù)2、高爾基體的結(jié)構(gòu)和功能。高爾基體是由數(shù)個(gè)扁平囊泡堆在一起形成的高度有極性的細(xì)胞器。常分布于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜之間,呈弓形或半球形,凸出的一面對(duì)著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稱為形成面(forming face )或順面(cis fa
19、ce )。凹進(jìn)的一面對(duì)著質(zhì)膜稱為成熟面(mature face )或反面(trans face )。順面和反面都有一些或大或小的運(yùn)輸小泡,在具有 極性的細(xì)胞中,高爾基體常大量分布于分泌端的細(xì)胞質(zhì)中。高爾基體的主要功能將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的蛋白質(zhì)進(jìn) 行加工、分類、與包裝,然后分門別類地送到細(xì)胞特定的部位或分泌到細(xì)胞外。1、蛋白質(zhì)的糖基化 N-連接的糖鏈合成起始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),完成與高爾基體。2、參與細(xì)胞分泌活動(dòng)負(fù)責(zé)對(duì)細(xì)胞合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,分類,并運(yùn)出,其過程是SER上合成蛋白質(zhì)一進(jìn)入ER腔一以出芽形成囊泡一進(jìn)入 CGN 一在medial Gdgi中加工一在TGN形成囊泡一囊泡與質(zhì)膜融 合、排出。3、進(jìn)行膜
20、的轉(zhuǎn)化功能高爾基體的膜無論是厚度還是在化學(xué)組成上都處于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和質(zhì)膜之間,因此高爾 基體在進(jìn)行著膜轉(zhuǎn)化的功能,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的新膜轉(zhuǎn)移至高爾基體后,經(jīng)過修飾和加工,形成運(yùn)輸泡與質(zhì)膜融合,使新形成的膜整合到質(zhì)膜上。4、將蛋白水解為活性物質(zhì)如將蛋白質(zhì)N端或C端切除,成為有活性的物質(zhì)(胰島素 C端)或?qū)⒑卸鄠€(gè)相同氨基序列的前體水解為有活性的多肽。5、參與形成溶酶體。6、參與植物細(xì)胞壁的形成。7、合成植物細(xì)胞壁中的纖維素和果膠質(zhì)。3、線粒體蛋白的合成和轉(zhuǎn)運(yùn)方式。構(gòu)成線粒體的蛋白主要是核基因編碼的,少量是線粒體基因編碼的,無論是核基因還是線粒體基因編 碼的蛋白質(zhì)都要轉(zhuǎn)運(yùn)定位。線粒體有四個(gè)組成部分,其中有
21、兩層膜,所以由細(xì)胞質(zhì)核糖體合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體基質(zhì)必須穿過兩層膜障礙。大部分線粒體蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)核糖體上合成時(shí),其N端都帶有一肽段,稱為導(dǎo)肽,內(nèi)含定向運(yùn)往線粒體的信息。導(dǎo)肽的長(zhǎng)短與被引導(dǎo)的蛋白質(zhì)定位在線粒體的不同部位有一定的關(guān)系。定位于基質(zhì)中的蛋白質(zhì)一般具有較短的導(dǎo)肽。線粒體蛋白質(zhì)分別定位于外膜、內(nèi)膜、基質(zhì)以及內(nèi)外膜間隙。線粒體基質(zhì)蛋白,除極少數(shù)外,都是游離核糖體合成,并通過轉(zhuǎn)運(yùn)肽轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)來的,轉(zhuǎn)運(yùn)過程十分復(fù)雜。線粒體膜間隙蛋白,如細(xì)胞色素c的定位需要兩個(gè)導(dǎo)向序列,位于N端最前面的為基質(zhì)導(dǎo)向序列(matrix-targeting sequence ),其后還有第二個(gè)導(dǎo)向序列,即膜間隙導(dǎo)向序列
22、( intermembrane-space-targeting sequence ),功能是將蛋白質(zhì)定位于內(nèi) 膜或膜間隙,這類蛋白有兩種轉(zhuǎn)運(yùn)定位方式。線粒體膜間隙蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題線粒體膜間隙蛋白,如細(xì)胞色素 c的定位需要兩個(gè)導(dǎo)向序列,位于 N端最前面的為基質(zhì)導(dǎo)向序列 (matrix-targeting sequence ), 其后還有第二個(gè)導(dǎo)向序列,即膜間隙導(dǎo)向序列 (intermembrane-space-targeting sequence ),功能是將蛋白質(zhì)定位于內(nèi)膜或膜間隙,這類蛋白有兩種轉(zhuǎn) 運(yùn)定位方式。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理保守性尋靶(conservati
23、ve targeting )前體蛋白在 N-端的基質(zhì)導(dǎo)向序列引導(dǎo)下采用與線粒體基質(zhì)蛋 白同樣的運(yùn)輸方式,將前體蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體基質(zhì),在基質(zhì)中由轉(zhuǎn)肽酶切除基質(zhì)導(dǎo)向序列后,膜間隙導(dǎo)向序列就成了 N端的導(dǎo)向序列,它能夠識(shí)別內(nèi)膜的受體和轉(zhuǎn)運(yùn)通道蛋白,引導(dǎo)蛋白質(zhì)穿過內(nèi)膜,進(jìn)入線粒體膜間隙,然后由線粒體膜間隙中的轉(zhuǎn)肽酶將膜間隙導(dǎo)向序列切除(圖7-15)。非保守性尋靶(nonconservative targeting )與保守 性尋靶不同,蛋白質(zhì)的非保守性尋靶首先在線粒體基質(zhì)導(dǎo)向序列的引導(dǎo)下,通過線粒體的外 膜和內(nèi)膜,但是疏水的膜間隙導(dǎo)向序列作為停止轉(zhuǎn)運(yùn)序列( stop- transfer sequenc
24、e )錨定在內(nèi)膜上,從 而阻止了蛋白質(zhì)的 C-末端穿過內(nèi)膜進(jìn)入線粒體基質(zhì);然后通過蛋白質(zhì)的擴(kuò)散作用,錨定在內(nèi)膜上的蛋白逐 漸離開轉(zhuǎn)運(yùn)通道,最后在轉(zhuǎn)肽酶的作用下,將膜間隙導(dǎo)向序列切除,蛋白質(zhì)釋放到膜間隙,結(jié)合血紅素后,蛋白質(zhì)折疊成正確的構(gòu)型。4、舉例說明CDK的功能。5、什么是基因組印記,并舉例說明。基因組印記是指同一等位基因根據(jù)其是母方還是父方的來源進(jìn)行選擇性差異表達(dá)的現(xiàn)象.基因組印記可以是共價(jià)標(biāo)記(DNA甲基化)上的,也可以是非共價(jià)標(biāo)記( DNA-蛋白質(zhì)和DNA-RNA互作,核基因組 定位),印記方法包括在整個(gè)細(xì)胞周期中維持雙親表觀記號(hào)的特化的核內(nèi)酶的作用機(jī)制?;蛴∮浥c動(dòng)物克隆技術(shù)基因印記
25、(imprinting)對(duì)核移植后基因組重新編程的影響?;蛴∮洭F(xiàn)象在哺乳動(dòng)物的發(fā)育過程中普遍存在,它是指基因的表達(dá)與否取決于它們是在父源染色體上還是母源染色體上。有些印記基因只從母源 染色體上表達(dá),而有些則只從父源染色體上表達(dá)?;蛴∮浥c動(dòng)物克隆技術(shù)的成功及不足有何關(guān)系值得深入研究。基因組印記病主要表現(xiàn)為過度生長(zhǎng)、生長(zhǎng)遲緩、智力障礙、行為異常。目前在腫瘤的研究中認(rèn) 為印記缺失是引起腫瘤最常見的遺傳學(xué)因素之一。協(xié)和醫(yī)科大學(xué)2007考博細(xì)胞生物和生化記憶版 名次解釋:LCAT;LDL;呼吸鏈;r谷氨?;h(huán);崗崎片斷;kelow片斷填空亞氨基酸是哪個(gè);含硫氨基酸有哪幾個(gè);糖原合成酶;問答為什么肝
26、硬化的病人不能用堿性利尿藥,為什么不能用堿性液體灌腸。膽固醇的合成,運(yùn)輸和去向酵母發(fā)生變異,從 3 - p甘油醛車專變了 3- p甘油酸是否對(duì)酵母有利,為什么。補(bǔ)救合成的途徑,及其意義為什么文獻(xiàn)里用對(duì)應(yīng)于編碼鏈的另一條鏈作為基因的序列,那條鏈又名什么camp分子的作用機(jī)制是什么協(xié)和2007博士細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué) 代碼3421 .分離細(xì)胞組分時(shí),用 _,_方法破壞細(xì)胞膜。中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題2 . 細(xì)胞外基質(zhì)成分主要有, ,。3 .核骨架結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)錄因子有特異的DNA序列特異性,包括 ,q4 .微管附屬蛋白的功能,。5 .癌基因編碼的蛋白包括, ,。6 .染色體包括 , 三
27、種。7 .腫瘤病毒8 .多潛能性9 .布朗棘輪模型10 .核被膜11 .細(xì)胞黏附因子有哪幾類,各自的特征和主要作用。12 .受體酪氨酸激酶介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑13 .核纖層蛋白的分子結(jié)構(gòu)和他與中間纖維的關(guān)系14 .有絲分裂中染色體的運(yùn)動(dòng)15 .什么叫基因的查次表達(dá),意義?2007年博士研究生入學(xué)考試細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)試題一、填空(每空 0.5分,共20分)1、使細(xì)胞膜破損分離細(xì)胞器的常用方法桿狀玻璃勻漿器法、高速組織搗碎機(jī)法、超聲波處理法、化學(xué)裂介法、反復(fù)凍融法。2、染色質(zhì) DNA包括蛋白編碼序列、編碼 rRNA, tRNA, snRNA和組蛋白的串列重復(fù)序列、重復(fù)序列的 DNA。3、微管蛋白附屬結(jié)
28、構(gòu)的作用。4、NO分子通過與 結(jié)合,產(chǎn)生 。5、CDK酶有兩個(gè)亞基 和 ,通過使蛋白 發(fā)揮作用,受 負(fù)調(diào)節(jié)。 6、細(xì)胞外基質(zhì)包括參與8、生物大分子的裝配方式大體可分為自我組裝、協(xié)助組裝 和直接組裝 以及更為復(fù)雜的細(xì)胞結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)體系之間的裝配。9、核骨架結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子具有嚴(yán)格的DNA列特異性,包括 DNA復(fù)制;復(fù)制起始點(diǎn)是 MAR, DNA聚合酶與核骨架結(jié)合而被?敷活、活性基因和RNA聚合酶結(jié)合于核骨架上,RNA合成在核骨架上進(jìn)行、與病毒的復(fù)制有關(guān)、參與染色體的構(gòu)建。10、細(xì)胞的決定與記憶有關(guān),而細(xì)胞記憶可通過兩種方式實(shí)現(xiàn),一是 正反饋途徑:細(xì)胞接受信號(hào)刺激后, 活化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,該因子不僅誘
29、導(dǎo)自身基因的表達(dá),還誘導(dǎo)其他組織特異性基因的表達(dá);,二是染色體結(jié)構(gòu)變化的信息傳到子代細(xì)胞。 11、癌基因編碼的蛋白主要包括 生長(zhǎng)因子、生長(zhǎng)因子受體、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中分子、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子、細(xì) 胞凋亡蛋白、DNA修復(fù)相關(guān)蛋白、細(xì)胞周期調(diào)控蛋白等幾大類。二、名詞解釋(每題 4分,共40分) 1、核被膜 內(nèi)外兩層平行但不連續(xù)的單位膜組成,面向核質(zhì)的一層是內(nèi)核膜,面向胞質(zhì)的是外核膜。2、不朗棘輪模型指線粒體前體蛋白從粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體內(nèi)膜是由于前體蛋白的擺動(dòng)性(即布朗運(yùn)動(dòng)),可能會(huì)剛進(jìn)入線粒體內(nèi)膜即出膜,所以有 mhsp (內(nèi)膜熱休克蛋 白)70與蛋白的N-導(dǎo)肽結(jié)合從而 固定在內(nèi)膜的表面,N-導(dǎo)肽在
30、前體蛋白成熟后會(huì)由特定水解酶將水解掉。3、GTP活化蛋白4、隱蔽mRNA5、微管相關(guān)蛋白各種組織中提純微管蛋白可以發(fā)現(xiàn)還存在一些其他蛋白成分(5%-20% ),這些蛋白具有組織特異性,表現(xiàn)出從相同a 3二聚體聚合形成的微管具有獨(dú)特的性質(zhì),已從人類不同組織中發(fā)現(xiàn)了中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題多種a及3微管蛋白,并追蹤微管基因表現(xiàn)出部分基因家族,某些基因被認(rèn)為是編碼獨(dú)特的微管蛋白。6、G2期檢驗(yàn)點(diǎn) 主要檢驗(yàn)S期DNA是否有損傷,細(xì)胞體積是否夠大,是否可以順利進(jìn)入細(xì)胞分裂期。7、泛素化8、多潛能性指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后仍具有產(chǎn)生完整機(jī)體的潛能或特征9、腫瘤病毒三、問答及論述題(40 分)1、
31、簡(jiǎn)述受體酪氨酸激酶信號(hào)通路。2、核纖層蛋白的分子結(jié)構(gòu)及其與中間纖維的關(guān)系。3、有絲分裂過程中染色體的運(yùn)動(dòng)。4、細(xì)胞表面黏附分子有幾種?其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能?5、什么叫基因差次表達(dá)?有什么意義?協(xié)和醫(yī)科大學(xué)2007 考博 細(xì)胞生物和生化記憶版名次解釋:LCAT; 卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶是參與體內(nèi)脂質(zhì)代謝的主要酶之一, 催化游離膽固醇轉(zhuǎn)變成膽固醇酯參與 HDL 的成熟過程。主要催化卵磷脂S2-2 位上的?;溵D(zhuǎn)移至膽固醇上, 分別生成溶血卵磷脂和膽固醇酯。LDL; 低密度脂蛋白呼吸鏈;又稱電子傳遞鏈,是由一系列電子載體構(gòu)成的,從NADH 或 FADH2 向氧傳遞電子的系統(tǒng)。氫以質(zhì)子形式脫下,電子沿呼吸
32、鏈轉(zhuǎn)移到分子氧,形成粒子型氧,再與質(zhì)子結(jié)合生成水。放出的能量則使ADP和磷酸生成ATP 。電子傳遞和ATP 形成的偶聯(lián)機(jī)制稱為氧化磷酸化作用r-谷氨酰基循環(huán):是指氨基酸從腸粘膜細(xì)胞吸收,通過定位于膜上的r-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶催化使吸收的氨基酸與G-SH反應(yīng),生成r-谷氨?;?氨基酸而將氨基酸轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)的過程。由于該過程具有循環(huán)往復(fù)的性質(zhì) .klenow片斷大腸桿菌DNA聚合酶I大片段(klenow片段)是完整的 DNA聚合酶I的一個(gè)片段,只有在5' -3聚合酶活性和3' -5'外切酶活性,失去了 5'博外切酶活性。它可用于填補(bǔ) DNA單鏈末端成為雙鏈。填空亞氨基酸是P
33、ro;含硫氨基酸有半胱氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸;糖原合成酶;問答為什么肝硬化的病人不能用堿性利尿藥,為什么不能用堿性液體灌腸。膽固醇的合成,運(yùn)輸和去向酵母發(fā)生變異,從3 p 甘油醛轉(zhuǎn)變了3 p 甘油酸是否對(duì)酵母有利,為什么。補(bǔ)救合成的途徑,及其意義為什么文獻(xiàn)里用對(duì)應(yīng)于編碼鏈的另一條鏈作為基因的序列,那條鏈又名什么camp分子的作用機(jī)制是什么9中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題2008 協(xié)和細(xì)胞生物學(xué)考博試題一 .名詞解釋彈性蛋白自噬性溶酶體蛋白質(zhì)分選雙信使系統(tǒng)核酶呼吸鏈核仁組織區(qū)基因敲除去分化Caspase 家族二 .填空三 .問答:原位雜交技術(shù)與免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)的原理,用途,異同受體硌氨酸
34、激酶介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑什么是染色體支架,與核骨架的關(guān)系,有何重要性?細(xì)胞周期的調(diào)控機(jī)理細(xì)胞分化過程中的基因表達(dá)的調(diào)節(jié)2008 年協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考博真題一 . 填空題1 。原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的區(qū)別2 。細(xì)胞化學(xué)技術(shù)的例子3 . 分子伴侶4。分子*5。線粒體在電鏡下可以觀察到的結(jié)構(gòu)6。通過核孔的四種物質(zhì)7 。核糖體的分類8。核基質(zhì)成分(不全)二 . 判斷對(duì)錯(cuò)題(10 個(gè))三 . 名詞解釋:1 彈性蛋白2 自噬溶酶體3 蛋白質(zhì)分選4 多信使系統(tǒng)5 核酶6 呼吸鏈 7 核仁組織區(qū)8 基因敲除9 去分化 10Capsuse 家族四、問答題:1. 細(xì)胞化學(xué)技術(shù)和分子雜交技術(shù)的原理和用途,有
35、何區(qū)別2. 什么是酪氨酸激酶,以EGF 為例說明信號(hào)傳導(dǎo)過程3. 什么是染色體支架?與核支架的關(guān)系,研究意義4. 細(xì)胞分化的基因調(diào)節(jié)5. 簡(jiǎn)述細(xì)胞周期的調(diào)控2008 協(xié)和細(xì)胞生物學(xué)考博試題一 . 名詞解釋10中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題彈性蛋白主要存在于韌帶和脈管壁。彈性纖維與膠原纖維共同存在, 賦予組織以彈性和抗張能力。彈性蛋白由二種類型短肽段交替排列構(gòu)成。一種是疏水短肽賦予分子以彈性;另一種短肽為富丙氨酸及賴氨酸殘基的a螺旋,負(fù)責(zé)在相鄰分子間形成交聯(lián)。自噬性溶酶體自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡, 作用底物是內(nèi)源性的,即細(xì)胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細(xì)胞器或局部細(xì)胞質(zhì)。它們由單層膜包圍,內(nèi)
36、部常含有尚未分解的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和高爾基復(fù)合體或脂類、糖原等。正常細(xì)胞中的自噬性溶酶體在消化、分解、自然更替一些細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)上起著重要作用。蛋白質(zhì)分選主要是指膜結(jié)合核糖體上合成的蛋白質(zhì), 通過信號(hào)肽,在翻譯的同時(shí)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)然后經(jīng)過各種加工和修飾,使不同去向的蛋白質(zhì)帶上不同的標(biāo)記, 最后經(jīng)過高爾基體反面網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分選,包裝到不同類型的小泡,并運(yùn)送到目的地, 包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞外和核膜等。雙信使系統(tǒng)I 3P 和 DAG核酶呼吸鏈核仁組織區(qū)即 rRNA 序列區(qū),它與細(xì)胞間期核仁形成有關(guān),構(gòu)成核仁的某一個(gè)或幾個(gè)特定染色體片斷。這一片段的 DNA轉(zhuǎn)錄為rRNA。核仁是NOR中的基
37、因活動(dòng)而形成的可見的球體結(jié)構(gòu)。具有核仁組織區(qū)的染色體數(shù)目依不同細(xì)胞種類而異,人有5 對(duì)染色體即13、 14、 15、21 、 22 號(hào)染色體上有核仁組織區(qū)?;蚯贸蚯贸腔虼虬屑夹g(shù)的一種,類似于基因的同源重組。指外源DNA 與受體細(xì)胞基因組中序列相同或相近的基因發(fā)生同源重組,從而代替受體細(xì)胞基因組中的相同 /相似的基因序列,整合入受體細(xì)胞的基因組中,然后從整體觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,推測(cè)相應(yīng)基因的功能。去分化 細(xì)胞改變了原來的分化程序,失去了原來應(yīng)有的結(jié)構(gòu)和功能,成為一個(gè)具有未分化細(xì)胞特征的普通細(xì)胞,細(xì)胞還有繼續(xù)分化的能力。Caspase 家族 保守的 Asp 特異性半胱氨酸蛋白酶(Caspase) 家族是哺乳動(dòng)物細(xì)胞中程序性死細(xì)胞生物學(xué)歷年考博真題亡 (PCD) 的介導(dǎo)者和執(zhí)行者. 原凋亡信號(hào)首先活化不同的Caspase 啟始因子,再由啟始因子激活級(jí)聯(lián)下游的Caspase 效應(yīng)分子,最終由效應(yīng)分子特異地水解細(xì)胞中的一系列底物而導(dǎo)致細(xì)胞解體.Caspase 家族是整個(gè)PCD 過程的關(guān)鍵元件,它們通過與眾多蛋白質(zhì)(激活因子或抑制因子 )的相互作用來調(diào)控細(xì)胞的生死存亡.三 . 問答:原位雜交技術(shù)與免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)的原理,用途,異同受體硌氨
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