核型多角體病毒的殺蟲作用及其田間應(yīng)用方法

1、核型多角體病毒的殺蟲作用及其田間應(yīng)用方法核型多角體病毒殺蟲劑具有特異性強(qiáng)、不易產(chǎn)生抗藥性、安全、無害、后效作用明顯等優(yōu)點，然而，在田間實際應(yīng)用中也存在殺蟲譜窄、殺蟲速度慢、受自然因素影響較大等限制因素。結(jié)合國內(nèi)、外已開展的核型多角體病毒生物特性和田間應(yīng)用研究情況，對核型多角體病毒殺蟲劑的殺蟲特點和應(yīng)用技術(shù)進(jìn)行了總結(jié)與闡述,并提出了田間應(yīng)用技術(shù)措施。核型多角體病毒(NPV,下稱)屬桿狀病毒科的一類病毒。其作為殺蟲劑，目前已廣泛用于以鱗翅目害蟲為主的農(nóng)林害蟲生物防治。與傳統(tǒng)化學(xué)藥劑相比，其具有特異性強(qiáng)、不易產(chǎn)生抗藥性、安全、無害等特點，同時還可以對整個害蟲種群起到一定的致弱作用，從而實現(xiàn)對害蟲的可

2、持續(xù)控制。然而，NPV殺蟲劑在田間實際應(yīng)用中也存在殺蟲譜窄、殺蟲速度慢和受自然因素影響較大等問題。因此，如何根據(jù)NPV殺蟲劑自身特點在田間合理使用，成為該項技術(shù)進(jìn)一步推廣應(yīng)用所面臨的緊迫課題之一。為此，筆者結(jié)合國內(nèi)、外已開展的NPV生物特性和田間應(yīng)用的研究情況，對NPV殺蟲劑的特點和應(yīng)用進(jìn)行了總結(jié)與闡述，并提出了田間應(yīng)用技術(shù)建議。1NPV種類NPV類能在昆蟲細(xì)胞核內(nèi)增殖的，具有蛋白質(zhì)包涵體的桿狀病毒。它的數(shù)量在已知的昆蟲病毒中居首位。在我國已報道的超過290種昆蟲病毒中，有212種為NPV。目前，國際上已有多種NPV殺蟲劑應(yīng)用于農(nóng)林害蟲的防治表1國外核型多角體病毒殺蟲劑使用情況(表1)。其中我

3、國正式登記的有8種(表2)。病是有稱防治對象應(yīng)用作物使用國家美洲棉鈴蟲核型多角體病(HelicoverpazeaNPV)毒美洲棉鈴蟲棉花、煙草、大豆、蔬菜美國甘藍(lán)夜蛾核型多角體病(MamestrabrassicaeNPV)毒多種鱗翅目昆蟲(主治甘盅夜蛾)蔬菜法國甜菜夜蛾核型多角體病(SpodopteraexiguaNPV)毒甜菜夜蛾蔬菜荷蘭、美國、泰國苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病(AutographacalifornicaNPV)毒多種鱗翅目昆蟲蔬菜危地馬拉、美國茶小卷葉蛾核型多角體病毒茶小卷葉蛾蔬菜德國(AdoxophyesoranaNPV)粉紋夜蛾核型多角體病毒(Inchoplusiani粉紋

4、夜蛾蔬菜美國NPV)芹菜夜蛾核型多角體病(AnagraphafalciferaNPV)毒棉鈴蟲、甜菜夜蛾、芹菜夜蛾棉花、蔬菜美國灰翅夜蛾核型多角體病毒灰翅夜蛾棉花法國(SpodopteralittoralisNPV)大豆夜蛾核型多角體病毒大豆夜蛾大豆巴西(AnticarsiagemmatalisNPV)黃杉毒蛾核型多角體病(OrgyiapseudotsugataNPV)毒黃杉、冷杉毒蛾森林美國、加拿大舞毒蛾核型多角體病毒舞毒蛾森林美國、加拿大、(LymantriadisparNPV)俄羅斯松黃葉蜂核型多角體病毒松黃葉蜂森林美國、英國、(NeodiprionsertiferNPV)法國棉鈴蟲核型

5、多角體病毒棉鈴蟲棉花、蔬菜俄羅斯(HelicoverpaarmigeraNPV)馬鈴薯麥蛾核型多角體病毒馬鈴薯麥蛾茄科蔬菜、煙秘魯、埃及、(PhthorimaeaoperculellaNPV)草突尼斯美國白蛾核型多角體病毒美國白蛾森林俄羅斯(HyphantriacuneaNPV)表2中國已登記的核型多角體病毒殺蟲劑使用情況病是有稱登記作物防治對象棉鈴蟲核型多角體病毒(HelicoverpaarmigeraNPV)棉花、煙草棉鈴蟲、煙青蟲斜紋夜蛾核型多角體病毒(SpodopteralituraNPV)十字花科蔬菜斜紋夜蛾甜采伐蛾核型多角體病毒(SpodopteraexiguaNPV)十字花科蔬菜

6、甜菜夜蛾苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒(AutographacalifornicaNPV)十字花科蔬菜甜菜夜蛾油桐尺蟆核型多角體病毒(BuzurasuppressariaNPV)茶樹尺蟆余尺蟆核型多角體病毒(EctropisobliqueNPV)茶樹茶尺蟆黏蟲核型多角體病毒(LeucaniaseparataNPV)小麥黏蟲早原毛蟲核多角體病毒(Gynaephorasp.NPV)草原草原毛蟲2NPV殺蟲劑的殺蟲特點1)特異性強(qiáng)，殺蟲譜窄，對天敵安全。NPV殺劑特異性強(qiáng)，只對特定種或同屬的幾種靶標(biāo)昆蟲起作用，對非靶標(biāo)昆蟲和魚類、鳥類、哺乳動物都無侵染性，對天敵昆蟲也很安全。如蔣杰賢等(2004)研究發(fā)

7、現(xiàn)，斜紋夜蛾幼蟲被斜紋夜蛾側(cè)溝繭蜂寄生后再感染NPV,病毒對寄主體內(nèi)的寄生蜂發(fā)育歷期無明顯影響。羅開理(2005)通過對甜菜夜蛾NPV和擬澳洲赤眼蜂的研究，發(fā)現(xiàn)該病毒對擬澳洲赤眼蜂成蜂的繁殖能力無影響，子代寄生蜂的發(fā)育也不受影響。2)殺蟲速度緩慢，持效期長。由于NPV是通過在蟲體內(nèi)多次侵染從而引起昆蟲死亡，因此,與化學(xué)農(nóng)藥相上匕，NPV殺蟲具有速效性較差，持效性強(qiáng)的特點。毛建萍等(2005)通過對斜紋夜蛾NPV田間流行動態(tài)的研究，發(fā)現(xiàn)在試驗病毒濃度范圍(3.1X113.1X10p|B/ml)內(nèi),幼蟲大多在噴施病毒后4d才開始發(fā)病，57d為發(fā)病高峰，56d開始病死，68d為病死高峰?？锸痰?2

8、004)通過斜紋夜蛾NPV田間防治試驗表明，斜紋夜蛾NPV的防治效果一般在施藥后13d較差，第7d時與對照化學(xué)殺蟲劑基本相同，第14d時則明顯優(yōu)于對照化學(xué)殺蟲劑，表現(xiàn)出較好的持效性。3)可在靶標(biāo)害蟲種群內(nèi)流行傳播。靶標(biāo)害蟲在感染NPV后，其體內(nèi)組織會液化，體壁脆弱易破，并且有些害蟲在感染NPV后還有向植物上部轉(zhuǎn)移的特點。這樣死亡蟲體內(nèi)增殖的病毒就很容易隨昆蟲體液附著在植物外表或土壤表層，在各種媒介的作用下又可作為下1代害蟲的傳染源。因此，NPV在使用1次后就能夠在環(huán)境中積累，引起害蟲群體病毒疾病的流行傳播，從而在相當(dāng)長時間內(nèi)自然控制害蟲消長。4)對靶標(biāo)害蟲具有亞致死作用。NPV不僅對靶標(biāo)害蟲有

9、直接的致死作用，而且還可以使幸存的靶標(biāo)害蟲在取食量、發(fā)育時間、蛹重、產(chǎn)卵量、孵化率、成蟲壽命、雌雄性比、對其他致病因子的敏感性等方面發(fā)生變化，即病毒的亞致死作用。亞致死作用會使靶標(biāo)害蟲繁殖潛勢下降，從而對害蟲種群產(chǎn)生致弱作用。這種作用的效果甚至可以延續(xù)多代。這種亞致死作用在除去其致死作用外，還可使靶標(biāo)害蟲種群數(shù)量再降低20%。3外部因素對NPV殺蟲效果的影響NPV殺蟲劑在實際應(yīng)用過程中受外部因素影響較大。這些因素會對其殺蟲效果產(chǎn)生很大影響，甚至使其失效，直接影響此類殺蟲劑的防治效果和推廣應(yīng)用。其中，影響其殺蟲效果的主要因素有靶標(biāo)害蟲蟲齡、溫度、酸堿度、紫外線強(qiáng)度等。3.1 蟲齡和其他殺蟲劑一樣

10、，靶標(biāo)害蟲的蟲齡對NPV殺蟲劑的病死率和病死速率有很大的影響。劉勁軍等（2004）通過對不同蟲齡甜菜夜蛾幼蟲對NPV的敏感性研究發(fā)現(xiàn)，甜菜夜蛾幼蟲對病毒的敏感性隨蟲齡的降低而增大，蟲齡愈低，病死率愈高，所需使用的病毒量愈小。王絳輝（2008）通過在實驗室內(nèi)給斜紋夜蛾幼蟲飼喂NPV發(fā)現(xiàn)，隨著幼蟲齡期的增加，LC50值不斷增大。其中2齡幼蟲的LC50值為1齡白2.8倍，3齡與2齡間差別很小，4齡幼蟲的LC50值為3齡白16.4倍，6齡幼蟲的LC50值為3齡白350倍。因此，靶標(biāo)害蟲蟲齡越低，NPV殺蟲劑的防治效果越好。3.2 溫度NPV是在寄主昆蟲細(xì)胞中獲得擴(kuò)增的，有利昆蟲細(xì)胞生長的溫度條件也適于

11、病毒的擴(kuò)增，反之亦然。因而，溫度對NPV在靶標(biāo)昆蟲中的流行有很大的影響，主要影響病死速率和病死率。溫度高幼蟲發(fā)病死亡的潛伏期縮短，而溫度偏低時幼蟲病死時間則明顯延長。據(jù)一些調(diào)查研究顯示，溫度能明顯影響NPV在蟲體內(nèi)的增殖。在適宜溫度范圍內(nèi)，增殖速率隨溫度上升而增大。但當(dāng)溫度高過該病毒的熱抑制溫度時，溫度的升高對病毒又會產(chǎn)生一定的抑制作用，害蟲的病死速率明顯下降。其中，感染NPV的甜菜夜蛾幼蟲在1829c溫度范圍內(nèi)飼育，死亡率隨溫度上升而增加，高于29c時死亡率又開始下降。而茶尺蟆NPV、棉鈴蟲NPV的熱抑制溫度分別為34c和40Co另外，溫度對染病靶標(biāo)害蟲的取食量、生長發(fā)育也會產(chǎn)生影響。張文軍

12、等（1996）通過對斜紋夜蛾幼蟲飼喂病毒發(fā)現(xiàn)，16齡染病幼蟲的取食最適溫度都在2530c之間，在1530c范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，單位時間內(nèi)取食量增大，單位時間內(nèi)病毒的攝入量也增多。3.3 酸堿度NPV是由多角體蛋白與包含在其中的病毒粒子組成。多角體蛋白相對穩(wěn)定，不溶于水和有機(jī)溶劑，對蛋白酶和細(xì)菌有很強(qiáng)的抗性，但在強(qiáng)酸或堿性的環(huán)境下容易溶解，從而釋放出其中的病毒粒子，而病毒粒子在環(huán)境中不穩(wěn)定，容易失去活性。在自然條件下，土壤和作物葉片的pH對許多昆蟲病毒活性具有一定的影響。殷坤山等（2004）通過室內(nèi)試驗證明，一般pH6.08.0的病毒液感染害蟲時具有較高的穩(wěn)定性，在較強(qiáng)的酸性或較強(qiáng)的堿性條件

13、下，保存時間越長，活性喪失越大。3.4 紫外線陽光中的紫外線能使病毒變性失活，從而影響NPV的致病力。殷坤山等（2004）在室內(nèi)對茶尺蟆NPV進(jìn)行照射試驗表明，無論是陽光直射，還是紫外光照射，茶尺蟆NPV的活力與照射時間呈負(fù)相關(guān)。照射的時間越長，病毒的活性越低。經(jīng)陽光直射24h后，病毒幾乎完全喪失活性，用其飼喂的害蟲幼蟲死亡率僅為6.7%。4NPV殺蟲劑田間應(yīng)用方法1）掌握防治適期。在使用NPV殺蟲劑時要嚴(yán)格把握防治適期。由于大多數(shù)害蟲幼蟲具有孵化后咬食卵殼的習(xí)性，而初孵幼蟲對病毒的敏感性最強(qiáng)，其取食卵殼上少量的病毒就可能導(dǎo)致死亡。因此，在靶標(biāo)害蟲卵盛孵期或1、2齡時施藥，能更好地發(fā)揮病毒的作用，達(dá)到事半功倍的防治效果。2）選擇施藥時間。由于高溫、長時間的陽光照射會影響病毒的活性，因此，在使用NPV殺蟲劑時，最好選擇陰天或者下午太陽落山后施藥。這樣可避免陽光直射，減輕紫外線和持續(xù)高溫對多角體病毒的殺傷力，從而提高防治效果。同時，如果有可能，應(yīng)盡量將藥液噴灑在作物葉片的背面。對某些在夜間為害的害蟲，應(yīng)于傍晚施藥，以縮短當(dāng)天施藥后至害蟲取食的時間，提高防治效果。3）確保均勻施藥。由于NPV是通過被害蟲取食進(jìn)入體內(nèi)而