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文檔簡(jiǎn)介
1、概論第01講概論(一)學(xué)習(xí)免疫學(xué)的基本概念,了解臨床免疫學(xué)的理論基礎(chǔ),掌握免疫技術(shù)的檢測(cè)原理是學(xué)習(xí)和研究臨床免疫學(xué)與免疫技術(shù)的重要保障。免疫學(xué)簡(jiǎn)介臨床免疫學(xué)臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)講義編號(hào)NODE70276100010100000101:針對(duì)本講義提問免疫的概念宿主體內(nèi)的免疫系統(tǒng),能識(shí)別并清除從外環(huán)境中侵入的病原生物及其產(chǎn)生的毒素、內(nèi)環(huán)境中因基因突變產(chǎn)生的腫瘤細(xì)胞、自身衰老殘損的組織細(xì)胞或自身變性抗原,實(shí)現(xiàn)免疫防御、免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視的功能,保持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。講義編號(hào)NODE70276100010100000102:針對(duì)本講義提問免疫系統(tǒng)免疫器官免疫細(xì)胞免疫分子中樞外周膜型分子分泌型分子胸腺骨髓
2、脾臟、淋巴結(jié)、黏膜伴隨淋巴組織淋巴細(xì)胞(T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞)免疫輔助細(xì)胞(吞噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等)TCRBCRCD分子粘附分子MHC其他免疫球蛋白補(bǔ)體分子細(xì)胞因子講義編號(hào)NODE70276100010100000103:針對(duì)本講義提問免疫系統(tǒng)-免疫器官與組織中樞免疫器官講義編號(hào)NODE70276100010100000104:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100010100000105:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100010100000106:針對(duì)本講義提問免疫系統(tǒng)-免疫細(xì)胞講義編號(hào)NODE70276100010100000107:針對(duì)本講義提問T細(xì)胞講義編號(hào)NO
3、DE70276100010100000108:針對(duì)本講義提問B細(xì)胞 講義編號(hào)NODE70276100010100000109:針對(duì)本講義提問第02講概論(二)免疫系統(tǒng)免疫分子1.免疫球蛋白講義編號(hào)NODE70276100010200000101:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100010200000102:針對(duì)本講義提問2.補(bǔ)體系統(tǒng)講義編號(hào)NODE70276100010200000103:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100010200000104:針對(duì)本講義提問3.細(xì)胞因子講義編號(hào)NODE70276100010200000105:針對(duì)本講義提問4.黏附分子講義編號(hào)NODE
4、70276100010200000106:針對(duì)本講義提問5.CD抗原人類白細(xì)胞分化抗原(HLA)是指血細(xì)胞在分化成熟為不同譜系、分化的不同階段及細(xì)胞活化過程中,出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)記分子。采用單克隆抗體鑒定識(shí)別的自細(xì)胞分化抗原稱CD抗原。檢測(cè)CD抗原是實(shí)驗(yàn)室識(shí)別細(xì)胞及不同分化階段細(xì)胞或細(xì)胞亞群最主要的方法。講義編號(hào)NODE70276100010200000107:針對(duì)本講義提問免疫功能生理性(有利)病理性(不利)免疫防御抗感染免疫缺陷病超敏反應(yīng)免疫自穩(wěn)清除損傷或衰老細(xì)胞自身免疫病免疫監(jiān)視殺傷和清除異常突變細(xì)胞腫瘤持續(xù)病毒感染講義編號(hào)NODE70276100010200000108:針對(duì)本講義
5、提問免疫應(yīng)答固有免疫,innate immunity。適應(yīng)性免疫,adaptive immunity。-體液免疫應(yīng)答、細(xì)胞免疫應(yīng)答。講義編號(hào)NODE70276100010200000109:針對(duì)本講義提問臨床免疫學(xué)臨床免疫學(xué)是將免疫學(xué)基礎(chǔ)理論、臨床疾病與免疫學(xué)技術(shù)相結(jié)合,用于研究疾病的免疫病理機(jī)制、診斷與鑒別診斷、評(píng)價(jià)治療效果和判斷預(yù)后的多個(gè)分支學(xué)科的總稱。免疫病理與免疫性疾病移植免疫學(xué)腫瘤免疫學(xué)感染免疫學(xué)講義編號(hào)NODE70276100010200000110:針對(duì)本講義提問臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)臨免疫檢驗(yàn)可分為兩部分,一部分為利用免疫檢測(cè)原理與技術(shù)檢測(cè)免疫相關(guān)物質(zhì);另一部分是利用免疫檢測(cè)原理
6、與技術(shù)檢測(cè)體液中微量物質(zhì)。講義編號(hào)NODE70276100010200000111:針對(duì)本講義提問【習(xí)題】免疫的概念是指機(jī)體免疫系統(tǒng)具有A.發(fā)現(xiàn)并排除有毒因子的能力B.識(shí)別和排除抗原性異物的能力C.抵抗并清除傳染性因子的能力D.發(fā)現(xiàn)和消除惡變細(xì)胞的能力E.清除體內(nèi)衰老損傷細(xì)胞的能力 正確答案B答案解析免疫的概念是指機(jī)體免疫系統(tǒng)具有識(shí)別和排除抗原性異物的能力。講義編號(hào)NODE70276100010200000112:針對(duì)本講義提問機(jī)體免疫自穩(wěn)功能低下,可導(dǎo)致A.免疫缺陷病B.免疫增殖病C.自身免疫病D.惡性腫瘤E.超敏反應(yīng) 正確答案C答案解析免疫自穩(wěn)是
7、清除損傷或衰老細(xì)胞,功能低下時(shí)可導(dǎo)致自身免疫病。講義編號(hào)NODE70276100010200000113:針對(duì)本講義提問人體內(nèi)最大的外周免疫器官是A.胸腺B.骨髓C.脾D.淋巴結(jié)E.法氏囊 正確答案C答案解析人體內(nèi)最大的外周免疫器官是脾。講義編號(hào)NODE70276100010200000114:針對(duì)本講義提問可非特異直接殺傷靶細(xì)胞的是A.NK細(xì)胞B.Th細(xì)胞C.Ts細(xì)胞D.Tc細(xì)胞E.TCR細(xì)胞 正確答案A答案解析NK細(xì)胞可非特異直接殺傷靶細(xì)胞。講義編號(hào)NODE70276100010200000115:針對(duì)本講義提問新生兒從初乳中獲得的Ig主要是A.
8、IgEB.IgDC.IgGD.SIgAE.IgM 正確答案D答案解析新生兒從初乳中獲得的Ig主要是SIgA。講義編號(hào)NODE70276100010200000116:針對(duì)本講義提問特異性免疫效應(yīng)功能不包括A.漿細(xì)胞分泌特異性抗體,執(zhí)行體液免疫功能B.Th細(xì)胞分泌細(xì)胞因子等效應(yīng)因子,執(zhí)行細(xì)胞免疫功能C.CTL細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞D.產(chǎn)生記憶細(xì)胞E.中性粒細(xì)胞吞噬與殺滅細(xì)菌 正確答案E答案解析中性粒細(xì)胞吞噬與殺滅細(xì)菌屬于固有免疫,是非特異性免疫。講義編號(hào)NODE70276100010200000117:針對(duì)本講義提問粘膜伴隨的淋巴組織主要的功能是A.B、T淋巴
9、細(xì)胞棲息和增殖場(chǎng)所B.各種免疫細(xì)胞的發(fā)源地C.T細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所D.B細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所E.主要產(chǎn)生IgA及分泌性IgA,執(zhí)行體液免疫與局部特異免疫作用 正確答案E答案解析粘膜伴隨的淋巴組織主要的功能是分泌性IgA。 講義編號(hào)NODE70276100010200000118:針對(duì)本講義提問抗原抗體反應(yīng)第01講抗原抗體反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。體內(nèi)反應(yīng)可介導(dǎo)吞噬、溶菌、殺菌、中和毒素等體液免疫效應(yīng);體外反應(yīng)則根據(jù)抗原、抗體性質(zhì)的不同和反應(yīng)條件的差別,在抗原抗體復(fù)合物形成后表現(xiàn)為不同的現(xiàn)象。包括:沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)等??乖贵w反應(yīng)(antig
10、en-antibody reaction)講義編號(hào)NODE70276100020100000101:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100020100000102:針對(duì)本講義提問抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)影響抗原抗體反應(yīng)的因素免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的類型抗原抗體反應(yīng)的原理一、抗原抗體結(jié)合力抗原和抗體的結(jié)合為分子間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的特異結(jié)合,是一種非共價(jià)的結(jié)合,不形成牢固的共價(jià)鍵。在抗原抗體特異結(jié)合后有四種分子間引力參與并促進(jìn)其結(jié)合。靜電引力范德華引力氫鍵疏水作用力講義編號(hào)NODE70276100020100000103:針對(duì)本講義提問靜電引力(electrostatic forces)范德華
11、引力:作用最小。(van der Waals interactions)氫鍵: 最具特異性。(hydrogen bond )疏水作用力: 作用最大。(hydrophobic interactions)講義編號(hào)NODE70276100020100000104:針對(duì)本講義提問二、抗原抗體的親和力與親合力親和性(affinity)抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與一個(gè)相應(yīng)抗原表位之間結(jié)合強(qiáng)度,抗原抗體的親和性取決于兩者空間構(gòu)型互補(bǔ)的程度。講義編號(hào)NODE70276100020100000105:針對(duì)本講義提問親合力(avidity)指一個(gè)完整抗體分子的抗原結(jié)合部位與若干相應(yīng)抗原表位之間的結(jié)合強(qiáng)度。與親和性、
12、抗體結(jié)合價(jià)、抗原的有效抗原表位有關(guān)。AvidityThe overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs講義編號(hào)NODE70276100020100000106:針對(duì)本講義提問三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)特異性可逆性比例性階段性講義編號(hào)NODE70276100020100000107:針對(duì)本講義提問一、特異性抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性分子基礎(chǔ):抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補(bǔ)性。講義編號(hào)NODE70276100020100000108:針對(duì)本講義提
13、問兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位,可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng),稱為交叉反應(yīng)。講義編號(hào)NODE70276100020100000109:針對(duì)本講義提問二、比例性抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系等價(jià)帶:抗原抗體比例合適。帶現(xiàn)象:抗原抗體比例不合適。前帶:抗體過量。后帶:抗原過量。講義編號(hào)NODE70276100020100000110:針對(duì)本講義提問三、可逆性免疫復(fù)合物可在一定條件下解離為游離抗原與抗體影響因素:抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親合力越高,結(jié)合越牢固,越不易解離。環(huán)境因素對(duì)復(fù)合物的影響pH、離子強(qiáng)度。講義編號(hào)NODE70276100020100000111:針對(duì)本講
14、義提問四、階段性講義編號(hào)NODE70276100020100000112:針對(duì)本講義提問影響抗原抗體反應(yīng)的因素一、反應(yīng)物自身因素1.抗原抗原的理化性狀、表面抗原決定簇的種類和數(shù)目均可影響抗原抗體反應(yīng)的結(jié)果。2.抗體抗體的來源、濃度、特異性與親和性均可影響抗原抗體反應(yīng)。講義編號(hào)NODE70276100020100000113:針對(duì)本講義提問二、環(huán)境因素電解質(zhì):生理鹽水或緩沖液。酸堿度:pH69。溫 度:1540,37最適。講義編號(hào)NODE70276100020100000114:針對(duì)本講義提問免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的類型取決于:抗原、抗體的性質(zhì)反應(yīng)條件其他參與成分五種主要類型:凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)補(bǔ)體參與的
15、反應(yīng)中和反應(yīng)標(biāo)記免疫反應(yīng)講義編號(hào)NODE70276100020100000115:針對(duì)本講義提問【習(xí)題】抗原抗體結(jié)合力中作用最大的是A.靜電引力 B.范德華引力 C.氫鍵結(jié)合力D.疏水作用力E.分子間結(jié)合力 正確答案D答案解析抗原抗體結(jié)合力中作用最大的是疏水作用力。講義編號(hào)NODE70276100020100000116:針對(duì)本講義提問用已知抗原或抗體來檢測(cè)相對(duì)應(yīng)的抗體或抗原,是由于抗原抗體反應(yīng)具有A.特異性B.比例性C.可逆性D.親和性E.帶現(xiàn)象 正確答案A答案解析已知抗原或抗體來檢測(cè)相對(duì)應(yīng)的抗體或抗原是由于抗原抗體反應(yīng)具有特異性。講義編號(hào)NODE
16、70276100020100000117:針對(duì)本講義提問抗原抗體反應(yīng)比例不合適出現(xiàn)的沉淀物減少的現(xiàn)象稱為A.前帶B.后帶C.帶現(xiàn)象D.等價(jià)帶E.等電點(diǎn) 正確答案C答案解析抗原抗體反應(yīng)比例不合適出現(xiàn)的沉淀物減少的現(xiàn)象稱為帶現(xiàn)象。講義編號(hào)NODE70276100020100000118:針對(duì)本講義提問有關(guān)交叉反應(yīng)的描述,正確的是A.為非特異性抗原抗體反應(yīng)B.由于不同抗原分子上存在共同抗原表位所致C.對(duì)免疫學(xué)診斷結(jié)果判斷沒影響D.利用交叉反應(yīng)進(jìn)行診斷典型例子是肥達(dá)試驗(yàn)E.利用交叉反應(yīng)進(jìn)行診斷典型例子是庫姆試驗(yàn) 正確答案B答案解析交叉反應(yīng)是由于不同抗原分子上
17、存在共同抗原表位。講義編號(hào)NODE70276100020100000119:針對(duì)本講義提問下列關(guān)于抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)表述,正確的是A.抗原抗體反應(yīng)有交叉反應(yīng),故抗原抗體反應(yīng)特異性不強(qiáng)B.抗原抗體反應(yīng)必須抗體量略大于抗原量C.抗原抗體反應(yīng)形成的復(fù)合物又可解離為游離的抗原與抗體D.抗體與抗原結(jié)合牢固,不易被解離E.抗原抗體反應(yīng)分為兩個(gè)階段,兩個(gè)階段之間有明顯的界限 正確答案C答案解析抗原抗體反應(yīng)形成的復(fù)合物又可解離為游離的抗原與抗體,這是抗原抗體反應(yīng)的可逆性。 免疫原和抗血清的制備第01講免疫原和抗血清的制備免疫原和抗血清的制備抗原和抗體是免疫反應(yīng)的基本條件也是免疫檢驗(yàn)的兩大
18、重要因素。抗原是制備特異性抗體的前提條件,抗體可用于純化抗原和檢測(cè)抗原,也是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中用于疾病診斷和研究的重要物質(zhì)。免疫原的制備免疫佐劑抗血清的制備抗血清的鑒定和保存抗血清的純化講義編號(hào)NODE70276100030100000101:針對(duì)本講義提問顆粒性抗原的制備顆粒性抗原主要是指細(xì)胞抗原和細(xì)菌抗原,制備的方法較簡(jiǎn)單,通過分離或純培養(yǎng)即可得到。細(xì)胞抗原綿羊紅細(xì)胞。細(xì)菌抗原菌體O抗原??扇苄钥乖闹苽淇扇苄钥乖旱鞍踪|(zhì)、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補(bǔ)體、細(xì)菌外毒素等。(一)組織可溶性抗原的粗提(二)可溶性抗原的純化(三)純化抗原的鑒定講義編號(hào)NODE70276100030100000102:針對(duì)本講
19、義提問(一)組織可溶性抗原的粗提1.組織均漿的制備:高速組織搗碎機(jī)法、研磨法;2.細(xì)胞的破碎:反復(fù)凍融法、超聲破碎法、自溶法、酶處理法、表面活性劑處理法。(二)可溶性抗原的提取和純化1.超速離心法;2.選擇性沉淀法:核酸去除法、鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、聚合物沉淀法;3.凝膠過濾法;4.離子交換層析法;5.親和層析法;6.電泳法。(三)純化抗原的鑒定主要包括蛋白含量測(cè)定、分子量測(cè)定、純度鑒定、免疫活性鑒定等。講義編號(hào)NODE70276100030100000103:針對(duì)本講義提問半抗原性免疫原的制備半抗原只具有抗原性而無免疫原性;如某些多肽、多糖、激素、小分子量的藥物等。半抗原與蛋白質(zhì)載體或高分
20、子聚合物結(jié)合后才有免疫原性。(一)載體1.蛋白質(zhì)類:牛血白蛋白等;2.多肽聚合物:多聚賴氨酸等;3.大分子聚合物和某些顆粒:聚乙烯吡咯烷酮等。(二)半抗原與載體的連接方法1.物理方法:通過電荷和微孔吸附半抗原,吸附的載體有淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、硫酸葡聚糖、羧甲基纖維素等。2.化學(xué)方法:利用某些功能基團(tuán)將半抗原連接到載體上。如碳二亞胺法、戊二醛法等。(三)半抗原性免疫原的鑒定與載體結(jié)合的半抗原數(shù)目與免疫原性密切相關(guān)。所以,應(yīng)測(cè)定半抗原與載體的比例,方法有:吸收光譜分析法:放射性核素標(biāo)記半抗原滲入法。講義編號(hào)NODE70276100030100000104:針對(duì)本講義提問免疫佐劑指先于抗原或與抗原
21、同時(shí)注入體內(nèi),可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答的物質(zhì)。佐劑的作用機(jī)制改變抗原的物理性狀,延緩抗原降解和排除;增強(qiáng)APC處理和提呈抗原的能力;刺激淋巴細(xì)胞增殖和分化;改變抗體的產(chǎn)生類型;誘導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)。講義編號(hào)NODE70276100030100000105:針對(duì)本講義提問抗血清的制備將制備好的免疫原按照一定的程序,免疫動(dòng)物,使其產(chǎn)生多克隆抗體。然后采集動(dòng)物血液,分離含有抗體的血清,即為抗血清。講義編號(hào)NODE70276100030100000106:針對(duì)本講義提問免疫動(dòng)物的選擇1.抗原來源與動(dòng)物種屬差異越大,免疫原性越強(qiáng),免疫效果越好。2.適齡、健康、體重合適。3.對(duì)于蛋白質(zhì)抗原大部分動(dòng)物皆適合
22、,常用的是山羊和家兔。講義編號(hào)NODE70276100030100000107:針對(duì)本講義提問免疫程序1.免疫原的劑量:由免疫原性的強(qiáng)弱、動(dòng)物的個(gè)體狀態(tài)和免疫時(shí)間確定。2.免疫途徑:初次免疫一般選擇皮內(nèi)接種,加強(qiáng)免疫和顆粒性抗原一般選擇靜脈注射。3.免疫間隔時(shí)間:重要因素。第1次與第2次免疫間隔時(shí)間以1020天為好,第3次及以后的間隔一般為710天。講義編號(hào)NODE70276100030100000108:針對(duì)本講義提問動(dòng)物采血法1.頸動(dòng)脈采血法2.心臟采血法3.靜脈采血法講義編號(hào)NODE70276100030100000109:針對(duì)本講義提問抗血清的鑒定和保存抗血清的鑒定1.抗體特異性的鑒定
23、2.抗體效價(jià)的測(cè)定3.抗體純度的鑒定4.抗體親和力的鑒定講義編號(hào)NODE70276100030100000110:針對(duì)本講義提問抗血清的保存28保存:用于短期保存;冷凍保存:一般可保存5年;真空干燥保存:用真空凍干機(jī)進(jìn)行干燥,在冰箱中可保存510年。講義編號(hào)NODE70276100030100000111:針對(duì)本講義提問抗血清的純化純化方法有鹽析法、凝膠過濾法、離子交換層析法、親和層析法等。講義編號(hào)NODE70276100030100000112:針對(duì)本講義提問【習(xí)題】屬于顆粒性抗原的是A.脂多糖B.球蛋白C.白蛋白D.DNAE.血小板 正確答案E答案解析顆粒性抗原包括血
24、小板??扇苄钥乖旱鞍踪|(zhì)、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補(bǔ)體、細(xì)菌外毒素等。講義編號(hào)NODE70276100030100000113:針對(duì)本講義提問顆粒性抗原免疫接種方法一般采用A.淋巴結(jié)注射B.靜脈注射C.皮內(nèi)注射D.皮下注射E.肌肉內(nèi)注射 正確答案B答案解析顆粒性抗原免疫接種方法一般采用靜脈注射。講義編號(hào)NODE70276100030100000114:針對(duì)本講義提問要從組織和細(xì)胞勻漿中粗提某種蛋白抗原,最常用又簡(jiǎn)便的分離方法A.鹽析法B.凝膠過濾法C.離子交換層析法D.免疫親和層析法E.免疫電泳法 正確答案A答案解析鹽析法是組織和細(xì)胞中粗提蛋白抗原最常
25、用且簡(jiǎn)便的分離方法。講義編號(hào)NODE70276100030100000115:針對(duì)本講義提問純化特異性抗體時(shí),可采用下列哪種方法除去雜抗體A.鹽析法B.凝膠過濾法C.離子交換層析法D.免疫親和層析法E.免疫電泳法 正確答案D答案解析免疫親和層析法能有效的去除雜抗體。講義編號(hào)NODE70276100030100000116:針對(duì)本講義提問蛋白質(zhì)抗原首次免疫接種后,最好間隔多長(zhǎng)時(shí)間再進(jìn)行第二次免疫A.710天B.1020天C.2030天D.3060天E.3個(gè)月 正確答案B答案解析蛋白質(zhì)抗原首次免疫接種后,最好間隔1020天再進(jìn)行第二次免疫。講義編號(hào)NOD
26、E70276100030100000117:針對(duì)本講義提問免疫小鼠的采血方法常為A.靜脈采血法B.心臟采血法C.頸動(dòng)脈放血法D.斷尾法或摘除眼球法E.股動(dòng)脈放血法 正確答案D答案解析免疫小鼠的采血方法常為斷尾法或摘除眼球法。單克隆抗體與基因工程抗體的制備第01講單克隆抗體與基因工程抗體的制備單克隆抗體與基因工程抗體的制備由一個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,針對(duì)單一表位、結(jié)構(gòu)相同、功能均一的抗體,稱為單克隆抗體(mAb)。第一代抗體:多克隆抗體(pAb);第二代抗體:?jiǎn)慰寺】贵w(mAb);第三代抗體:基因工程抗體(GEAb)。雜交瘤技術(shù)的基本原理單克隆抗體的制備基因工程抗體制備單克隆抗
27、體的應(yīng)用講義編號(hào)NODE70276100040100000101:針對(duì)本講義提問Georges Kohler and Cesar Milstein,1975,discovered hybridoma technique1984講義編號(hào)NODE70276100040100000102:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100040100000103:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100040100000104:針對(duì)本講義提問雜交瘤技術(shù)1.小鼠骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞株穩(wěn)定,易于傳代培養(yǎng);細(xì)胞株自身不會(huì)產(chǎn)生免疫球蛋白或細(xì)胞因子;次黃嘌呤磷酸核酸核糖轉(zhuǎn)化酶(HGPRT)的缺陷株。講義編號(hào)NOD
28、E70276100040100000105:針對(duì)本講義提問2.免疫脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞同源的純系小鼠;皮內(nèi)多點(diǎn)注射抗原。講義編號(hào)NODE70276100040100000106:針對(duì)本講義提問3.細(xì)胞融合PEG可能導(dǎo)致細(xì)胞膜上脂類物質(zhì)的物理結(jié)構(gòu)重排,使細(xì)胞膜容易打開而有助于細(xì)胞融合。講義編號(hào)NODE70276100040100000107:針對(duì)本講義提問4.雜交瘤細(xì)胞的選擇性培養(yǎng)講義編號(hào)NODE70276100040100000108:針對(duì)本講義提問陽性雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)與凍存有限稀釋法講義編號(hào)NODE70276100040100000109:針對(duì)本講義提問有限稀釋法講義編號(hào)NODE7027
29、6100040100000110:針對(duì)本講義提問單克隆抗體的制備單克隆抗體的產(chǎn)生體內(nèi)誘生法體外培養(yǎng)法:將雜交瘤細(xì)胞置培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),待培養(yǎng)液顏色改變或細(xì)胞過多開始死亡時(shí),收集上清液,離心去掉碎片及細(xì)胞即可。講義編號(hào)NODE70276100040100000111:針對(duì)本講義提問單克隆抗體的純化用半飽和、飽和硫酸銨進(jìn)行沉淀,達(dá)到初步濃縮和純化的目的。經(jīng)過適當(dāng)溶解和充分稀釋后,用親和層析法進(jìn)一步純化。單克隆抗體的性質(zhì)鑒定Ig類型測(cè)定、特異性測(cè)定、抗體效價(jià)測(cè)定、表位測(cè)定、親和力測(cè)定。單克隆抗體的特性1.高度特異性。2.高度的均一性和可重復(fù)性。3.弱凝集反應(yīng)和不呈現(xiàn)沉淀反應(yīng)。4.對(duì)環(huán)境敏感性。講義編號(hào)N
30、ODE70276100040100000112:針對(duì)本講義提問單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)(1)雜交瘤可以在體外“永久”地存活并傳代。(2)可以用相對(duì)不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。(3)適用于以標(biāo)記抗體為特點(diǎn)的免疫學(xué)分析方法,如IRMA和ELISA等。(4)由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學(xué)功能,可用于體內(nèi)的放射免疫顯像和免疫導(dǎo)向治療。單克隆抗體的局限性(1)單克隆抗體固有的親和性和局限的生物活性限制了它的應(yīng)用范圍。(2)反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體。(3)制備技術(shù)復(fù)雜,而且費(fèi)時(shí)費(fèi)工,價(jià)格較高。講義編號(hào)NODE70276100040100000113:針對(duì)本講義提問基因工程抗體制備多克隆抗體和單
31、克隆抗體來自異種動(dòng)物,用于人體會(huì)引起很強(qiáng)的排斥反應(yīng)。應(yīng)用DNA重組及蛋白工程技術(shù)對(duì)抗體編碼基因按不同需要進(jìn)行改造和裝配,經(jīng)導(dǎo)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞后重新表達(dá)的抗體,稱為基因工程抗體。降低甚至消除人體對(duì)抗體的排斥反應(yīng);分子量較小,更有利于穿透血管壁,進(jìn)入病灶的核心部位;根據(jù)治療的需要,制備新型抗體;生產(chǎn)成本低。人源化抗體、小分子抗體、抗體融合蛋白、雙特異性抗體、噬菌體抗體庫技術(shù)。講義編號(hào)NODE70276100040100000114:針對(duì)本講義提問單克隆抗體的應(yīng)用檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑單克隆抗體廣泛應(yīng)用于ELISA、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù),并且單克隆抗體的應(yīng)用很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒
32、的發(fā)展。病原微生物抗原、抗體的檢測(cè);腫瘤抗原的檢測(cè);免疫細(xì)胞及其亞群的檢測(cè);激素測(cè)定;細(xì)胞因子的測(cè)定講義編號(hào)NODE70276100040100000115:針對(duì)本講義提問蛋白質(zhì)的提純講義編號(hào)NODE70276100040100000116:針對(duì)本講義提問【習(xí)題】單克隆抗體目前效果較好的純化方法A.親和層析法B.凝膠過濾法C.離子交換層析法D.超速離心法E.鹽析法 正確答案A答案解析單克隆抗體目前效果較好的純化方法是親和層析法。講義編號(hào)NODE70276100040100000117:針對(duì)本講義提問在HAT選擇培養(yǎng)基中可長(zhǎng)期存活者是A.細(xì)胞多聚體B.融合的脾細(xì)胞與瘤細(xì)胞C
33、.融合的瘤細(xì)胞與瘤細(xì)胞D.未融合的瘤細(xì)胞E.未融合的脾細(xì)胞 正確答案B答案解析融合的脾細(xì)胞與瘤細(xì)胞能在HAT選擇培養(yǎng)基中可長(zhǎng)期存活。講義編號(hào)NODE70276100040100000118:針對(duì)本講義提問雜交瘤技術(shù)中的骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)具備的特點(diǎn)不包括A.穩(wěn)定和易培養(yǎng)B.自身無分泌功能C.細(xì)胞無惡性變化D.融合度高E.HGPRT缺陷 正確答案C答案解析雜交瘤技術(shù)中的骨髓瘤細(xì)胞需要其惡性變化。講義編號(hào)NODE70276100040100000119:針對(duì)本講義提問小鼠骨髓瘤細(xì)胞與下列哪種細(xì)胞融合A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.未經(jīng)過免疫的
34、B淋巴細(xì)胞D.未經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞E.淋巴細(xì)胞 正確答案A答案解析小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合。講義編號(hào)NODE70276100040100000120:針對(duì)本講義提問關(guān)于雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)的錯(cuò)誤描述A.具備了雙親細(xì)胞的特點(diǎn)B.分泌人源性單克隆抗體C.分泌鼠源性單克隆抗體D.體外繁殖快速E.能分泌抗體 正確答案B答案解析雜交瘤細(xì)胞是分泌鼠源性單克隆抗體,而不是人源性單克隆抗體。講義編號(hào)NODE70276100040100000121:針對(duì)本講義提問HAT培養(yǎng)基中三種關(guān)鍵成分為A.次黃嘌嶺、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷B.黃嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶
35、核苷C.氨基嘌嶺、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D.腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E.鳥嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷 正確答案A答案解析HAT培養(yǎng)基中三種關(guān)鍵成分為次黃嘌嶺、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷。講義編號(hào)NODE70276100040100000122:針對(duì)本講義提問凝集反應(yīng)第01講凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體在適當(dāng)電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象,稱為凝集反應(yīng)。凝集反應(yīng)的特點(diǎn)直接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)的特點(diǎn)1.可定性檢測(cè),也可進(jìn)行半定量檢測(cè)。2.靈敏度高、方法簡(jiǎn)便,因而在臨床檢驗(yàn)中被廣泛應(yīng)用。3.分為兩個(gè)階段:抗原抗體的特異性結(jié)合;出現(xiàn)可見的顆
36、粒凝聚。講義編號(hào)NODE70276100050100000101:針對(duì)本講義提問直接凝集反應(yīng)細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆粒性抗原,在適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集。講義編號(hào)NODE70276100050100000102:針對(duì)本講義提問玻片凝集試驗(yàn)講義編號(hào)NODE70276100050100000103:針對(duì)本講義提問試管凝集試驗(yàn)講義編號(hào)NODE70276100050100000104:針對(duì)本講義提問間接凝集反應(yīng)將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體表面(致敏顆粒),然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用,在適宜電解質(zhì)存在的條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象,稱為間接凝集反應(yīng)。講義編號(hào)N
37、ODE70276100050100000105:針對(duì)本講義提問間接凝集反應(yīng)的類型1.正向間接凝集反應(yīng)可溶性抗原致敏載體,用于檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)抗體的方法。簡(jiǎn)便、快速、敏感性和特異性好,成本低。講義編號(hào)NODE70276100050100000106:針對(duì)本講義提問2.反向間接凝集反應(yīng)選用已知特異性抗體致敏載體以檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原。講義編號(hào)NODE70276100050100000107:針對(duì)本講義提問3.間接凝集抑制反應(yīng)先將可溶性抗原(或抗體)與相應(yīng)的抗體(或抗原)混合,然后再加入抗原(或抗體)致敏的紅細(xì)胞,則能抑制原先的血凝現(xiàn)象。講義編號(hào)NODE70276100050100000108:針對(duì)本
38、講義提問4.協(xié)同凝集反應(yīng)實(shí)質(zhì)上是反向間接凝集試驗(yàn),但所用載體是金黃色葡萄球菌。方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏,可用于細(xì)菌、病毒、毒素及各種可溶性抗原的檢測(cè)。講義編號(hào)NODE70276100050100000109:針對(duì)本講義提問間接血凝試驗(yàn)是以紅細(xì)胞作為載體的間接凝集試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定,具有簡(jiǎn)便、快速、成本低廉等特點(diǎn),其敏感性高于膠乳凝集試驗(yàn)和直接凝集反應(yīng)。講義編號(hào)NODE70276100050100000110:針對(duì)本講義提問膠乳凝集試驗(yàn)是以聚苯乙烯膠乳微粒(0.8m)作為載體,將抗原(或抗體)與膠乳顆粒結(jié)合成為致敏乳膠后,直接用以檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)抗體(或抗原)的凝集反應(yīng)。明膠凝集試驗(yàn)將病毒抗原或重組抗
39、原吸附于粉紅色明膠顆粒上,當(dāng)致敏顆粒與樣品血清作用時(shí),若血清含有抗病毒抗體則可形成肉眼可見的粉紅色凝集。間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用快速、敏感、操作簡(jiǎn)便、無需特殊的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,可用于抗原或抗體的測(cè)定。講義編號(hào)NODE70276100050100000111:針對(duì)本講義提問【習(xí)題】試管凝集試驗(yàn)的效價(jià)判斷標(biāo)準(zhǔn)是依據(jù)出現(xiàn)肉眼可見的如下凝集現(xiàn)象A.+B.+或+C.+D.+E.+ 正確答案C答案解析試管凝集試驗(yàn)的效價(jià)判斷標(biāo)準(zhǔn)是依據(jù)出現(xiàn)肉眼可見的+凝集現(xiàn)象。講義編號(hào)NODE70276100050100000112:針對(duì)本講義提問間接凝集反應(yīng)不能檢測(cè)A.抗體B.AFP抗原C.傷寒沙門菌菌體抗原D.
40、類風(fēng)濕因子E.HCG抗原 正確答案C答案解析傷寒沙門菌菌體抗原是顆粒性抗原,屬于直接凝集反應(yīng)。講義編號(hào)NODE70276100050100000113:針對(duì)本講義提問關(guān)于正向間接凝集試驗(yàn)說法錯(cuò)誤的是A.抗原致敏載體B.用于檢測(cè)標(biāo)本中抗原C.出現(xiàn)凝集則為陽性D.敏感性高E.特異性強(qiáng) 正確答案B答案解析正向間接凝集試驗(yàn)用于檢測(cè)標(biāo)本中抗體。講義編號(hào)NODE70276100050100000114:針對(duì)本講義提問關(guān)于間接血凝試驗(yàn)說法錯(cuò)誤的是A.紅細(xì)胞作為載體B.不能檢測(cè)抗原C.可檢測(cè)抗體D.可判斷陽性反應(yīng)的強(qiáng)弱E.應(yīng)用廣泛 正確答案B答
41、案解析間接血凝試驗(yàn)可以檢測(cè)抗原也可以檢測(cè)抗體。講義編號(hào)NODE70276100050100000115:針對(duì)本講義提問關(guān)于反向間接凝集試驗(yàn)說法錯(cuò)誤的是A.抗體致敏載體B.用于檢測(cè)標(biāo)本中抗原C.出現(xiàn)凝集為陰性D.敏感性高E.特異性強(qiáng) 正確答案C答案解析反向間接凝集試驗(yàn)出現(xiàn)凝集為陽性。講義編號(hào)NODE70276100050100000116:針對(duì)本講義提問關(guān)于間接凝集抑制試驗(yàn)說法錯(cuò)誤的是A.檢測(cè)標(biāo)本中抗原B.出現(xiàn)凝集為陽性C.抗體為診斷試劑D.抗原致敏載體E.不出現(xiàn)凝集為陽性 正確答案B答案解析間接凝集抑制試驗(yàn)出現(xiàn)凝集為陰性。講義編號(hào)NODE702761
42、00050100000117:針對(duì)本講義提問協(xié)同凝集試驗(yàn)所用的載體是A.新鮮紅細(xì)胞B.洗滌紅細(xì)胞C.醛化紅細(xì)胞D.聚苯乙烯顆粒E.金黃色葡萄球菌 正確答案E答案解析協(xié)同凝集試驗(yàn)所用的載體是金黃色葡萄球菌。講義編號(hào)NODE70276100050100000118:針對(duì)本講義提問沉淀反應(yīng)第01講沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)蛋白質(zhì)、多糖、毒素等可溶性抗原與相應(yīng)抗體在特定條件下特異性結(jié)合,出現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象,稱為沉淀反應(yīng)。沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)?zāi)z內(nèi)沉淀試驗(yàn)免疫電泳技術(shù)講義編號(hào)NODE70276100060100000101:針對(duì)本講義提問沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)差異凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)抗原性質(zhì)顆粒性抗
43、原可溶性抗原反應(yīng)時(shí)間數(shù)分鐘數(shù)小時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物凝集物沉淀物敏感性高低講義編號(hào)NODE70276100060100000102:針對(duì)本講義提問液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)受抗原抗體比例的影響非常明顯,常用作測(cè)定抗原抗體的最適比例。有抗原稀釋法、抗體稀釋法和棋盤滴定法。講義編號(hào)NODE70276100060100000103:針對(duì)本講義提問免疫濁度測(cè)定應(yīng)用抗原、抗體在液相中反應(yīng)后形成的免疫復(fù)合物微粒對(duì)光線的干擾,利用儀器進(jìn)行定量檢測(cè)的一種方法。講義編號(hào)NODE70276100060100000104:針對(duì)本講義提問在一定范圍內(nèi),吸光度與免疫復(fù)合物的量呈正相關(guān)。講義編號(hào)NODE70276100060100000105:
44、針對(duì)本講義提問免疫濁度測(cè)定的影響因素1.抗原抗體比例當(dāng)反應(yīng)液中抗體過量時(shí),IC的形成隨著抗原遞增而增加,至抗原、抗體最適比例處達(dá)最高峰,這就是經(jīng)典的海德堡曲線理論。講義編號(hào)NODE70276100060100000106:針對(duì)本講義提問2.抗體的質(zhì)量要求:抗體的特異性強(qiáng)、效價(jià)高、親和力強(qiáng)。R型H型。3.抗原抗體反應(yīng)的溶液pH6.58.5,磷酸鹽緩沖液。4.增濁劑聚乙二醇(PEG)、吐溫-20,可消除抗原或抗體分子周圍的電子云和水化層,促進(jìn)抗原、抗體分子靠近,結(jié)合形成大分子復(fù)合物。講義編號(hào)NODE70276100060100000107:針對(duì)本講義提問免疫比濁方法分類透射和散射免疫比濁法講義編號(hào)
45、NODE70276100060100000108:針對(duì)本講義提問免疫膠乳比濁法講義編號(hào)NODE70276100060100000109:針對(duì)本講義提問凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)Mancini曲線:適用大分子抗原和長(zhǎng)時(shí)間擴(kuò)散(48小時(shí))的結(jié)果;公式:cd2k。Fahey曲線:適用于小分子抗原和較短時(shí)間(24h)擴(kuò)散的結(jié)果處理,用半對(duì)數(shù)紙畫線。公式:logcdk。講義編號(hào)NODE70276100060100000110:針對(duì)本講義提問雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)講義編號(hào)NODE70276100060100000111:針對(duì)本講義提問講義編號(hào)NODE70276100060100000112:針對(duì)本講義提問講
46、義編號(hào)NODE70276100060100000113:針對(duì)本講義提問免疫電泳技術(shù)免疫電泳技術(shù)是電泳分析與沉淀反應(yīng)的結(jié)合產(chǎn)物。1.加快了反應(yīng)速度2.集中了擴(kuò)散方向3.分開了不同的蛋白講義編號(hào)NODE70276100060100000114:針對(duì)本講義提問火箭免疫電泳講義編號(hào)NODE70276100060100000115:針對(duì)本講義提問免疫電泳講義編號(hào)NODE70276100060100000116:針對(duì)本講義提問免疫固定電泳免疫固定電流模式圖講義編號(hào)NODE70276100060100000117:針對(duì)本講義提問沉淀反應(yīng)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用方法評(píng)價(jià)應(yīng)用經(jīng)典沉淀反應(yīng)試驗(yàn)操作繁瑣、敏感度低、精密度
47、差、時(shí)間長(zhǎng)和難以自動(dòng)化逐漸減少免疫比濁法穩(wěn)定性好,敏感度高(達(dá)ngL),精確度,簡(jiǎn)便快速,易于自動(dòng)化,無放射性核素污染,適合于大批量標(biāo)本的檢測(cè)血液、體液中蛋白質(zhì)的測(cè)定免疫固定電泳技術(shù)分辨力強(qiáng),敏感度高,結(jié)果易于分析M蛋白的鑒定與分型講義編號(hào)NODE70276100060100000118:針對(duì)本講義提問【習(xí)題】下列哪項(xiàng)不是沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)A.其特性與經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)相同B.抗原是可溶性抗原C.反應(yīng)可分為兩個(gè)階段D.抗體是McAbE.需一定電解質(zhì) 正確答案D答案解析沉淀反應(yīng)抗體不是單克隆抗體。講義編號(hào)NODE70276100060100000119:針對(duì)本講義提問Mancin
48、i曲線A.適用于小分子抗原,擴(kuò)散時(shí)間大于48hB.適用于小分子抗原,擴(kuò)散時(shí)間小于24hC.適用于大分子抗原,擴(kuò)散時(shí)間小于24hD.抗原濃度與沉淀環(huán)直徑的平方呈線性關(guān)系E.使用半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙作圖 正確答案D答案解析Mancini曲線抗原濃度與沉淀環(huán)直徑的平方呈線性關(guān)系。講義編號(hào)NODE70276100060100000120:針對(duì)本講義提問單向瓊脂擴(kuò)散法可用于A.抗體定性B.抗體定量C.抗原定性D.抗原定量E.抗體效價(jià)滴定 正確答案D答案解析單向瓊脂擴(kuò)散法可用于抗原定量。講義編號(hào)NODE70276100060100000121:針對(duì)本講義提問雙向瓊脂擴(kuò)散
49、試驗(yàn)出現(xiàn)多條沉淀線的原因A.抗原抗體過剩B.抗原抗體相等C.抗原抗體缺乏D.抗原抗體不純E.抗原抗體分子量不等 正確答案D答案解析雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)出現(xiàn)多條沉淀線是由于抗原抗體不純。講義編號(hào)NODE70276100060100000122:針對(duì)本講義提問根據(jù)海德堡曲線,下列說法錯(cuò)誤的是A.抗原過量時(shí)產(chǎn)生鉤狀效應(yīng),沉淀物少B.抗體過量時(shí),沉淀物也少C.抗原抗體比例適當(dāng)時(shí)產(chǎn)生沉淀量最多D.免疫比濁法中抗原過量導(dǎo)致測(cè)量失敗E.免疫比濁法中抗體過量導(dǎo)致測(cè)量失敗 正確答案E答案解析海德堡曲線免疫比濁法中抗原過量導(dǎo)致測(cè)量失敗。放射免疫分析第01講放射免疫分析放射免疫分析放射免疫分析是利用放射性核素可探測(cè)的靈敏性、精確性和抗原抗體反應(yīng)特異性相結(jié)合的一種免疫技術(shù)。放射免疫技術(shù)放射免疫分析
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