藥學(xué)論文：膚癢顆粒的質(zhì)量控制研究

1、藥學(xué)論文：膚癢顆粒的質(zhì)量控制研究                   作者：吳和珍,宋愛華,楊艷芳,施 峰,劉焱文    【摘要】  目的 建立膚癢顆粒的定性定量檢測方法。方法 采用薄層色譜法鑒別膚癢顆粒中地膚子、白英,高效液相色譜法測定紅花中羥基紅花黃色素A的含量。使用C18色譜柱,流動相為甲醇-乙腈-0.7%磷酸(24670),檢測波長為403 nm。結(jié)果 定性方

2、法能夠檢出地膚子、白英；羥基紅花黃色素A在0.1281.024 g范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系,r0.999 8,平均回收率為99.52%,RSD1.97%(n5)。結(jié)論 該方法可作為膚癢顆粒的定性、定量檢測方法。     【關(guān)鍵詞】  膚癢顆粒；薄層色譜法；高效液相色譜法；羥基紅花黃色素A        Abstract：Objective To establish the qualitative and quantitative detective methods of

3、 Fuyang granules. Methods The TLC methods for identification of Fructus kochiae and Herba solani lyrati were established. A simple HPLC was established for the determination of hydroxysafflor A (HYSA). The mobile phase was methanol-acetonitrile-0.7% phosphoric acid (24670). UV detecting wavelength w

4、as at 403 nm. Results Fructus kochiae and Herba solani lyrati could be identified by TLC. HYSA showed a linear relationship at the concentration range of 0.1281.024 g, r0.999 8. The average recovery was 99.52% and RSD1.97% (n5). Conclusion The method can be used for qualitative identification and qu

5、antization determination of Fuyang granules.    Key words：Fuyang granules；TLC；HPLC；hydroxysafflor A     膚癢顆粒收載于中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑1,由紅花、地膚子、白英、蒼耳子、川芎5味中藥組成,具有祛風(fēng)活血、除濕止癢的功效,臨床用于皮膚瘙癢癥,濕疹,蕁麻疹等瘙癢性皮膚病。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中只有2個理化鑒別,無薄層定性和含量測定方法。為了更好地控制制劑的內(nèi)在質(zhì)量,本試驗對其定性、含量測定方法進(jìn)行了探索。

6、    1  儀器與試藥   Agilent 1100高效液相色譜儀,G1314A紫外檢測器。水為重蒸餾水,所用試劑均為分析純。地膚子對照藥材、齊墩果酸對照品、羥基紅花黃色素A(hydroxysafflor A,HYSA)對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供。白英對照藥材購自湖北省中藥材公司,經(jīng)湖北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院鑒定教研室鑒定。膚癢顆粒由湖北東信藥業(yè)有限公司提供。    2  方法與結(jié)果    2.1  定性鑒別 &

7、#160;      取本品4.0 g,研細(xì),加乙醇40 mL,超聲處理5 min,濾過,濾液加鹽酸3.0 mL,加熱回流2 h,溶液放至室溫后,濾過,濾液于水浴上揮去乙醇至干,殘渣加水20 mL使溶解,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,以石油醚(6090 )萃取2次,每次15 mL,合并石油醚提取液,置水浴上揮干,殘渣加乙醇1 mL溶解,作為供試品溶液。另取地膚子對照藥材1 g,加甲醇20 mL,超聲處理5 min,濾過,加鹽酸1.5 mL,加熱回流2 h,放至室溫后,濾過,于水浴上揮去乙醇至干,殘渣加水10 mL使溶解,溶液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,以石

8、油醚(6090 )萃取2次,每次10 mL,合并石油醚提取液,置水浴上揮干,殘渣加乙醇1 mL溶解,作為對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品適量,以乙醇溶解,制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取上述3種溶液各10 L,分別點于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以石油醚-三氯甲烷-丙酮(522)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,于105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。經(jīng)3批樣品及陰性對照試驗,結(jié)果陰性無干擾。 &

9、#160;      取本品6.0 g,加乙醇50 mL,加熱回流30 min,放冷,濾過,濾液回收乙醇至干,殘渣加水20 mL使溶解,溶液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,以乙酸乙酯萃取2次,每次15 mL,合并乙酸乙酯提取液,置蒸發(fā)皿中蒸干,殘渣加甲醇1 mL溶解,作為供試品溶液。取白英對照藥材2.0 g,加乙醇20 mL,加熱回流30 min,放至室溫,濾過,濾液置水浴上揮干,殘渣加水10 mL溶解,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,以乙酸乙酯萃取2次,每次10 mL,合并乙酸乙酯提取液,置水浴上揮干,殘渣加甲醇2.0 mL使溶解,作為對照藥材溶液。照薄層色譜

10、法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取上述兩種溶液各10 L,分別點于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯(51)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,于105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。經(jīng)3批樣品及陰性對照試驗,結(jié)果陰性無干擾。    2.2  含量測定        色譜柱：Alltima C18柱(5 m,250 mm×4.6

11、 mm)；流動相：甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(24670)；檢測波長：403 nm；柱溫：25 ；流速：1.0 mL/min；理論塔板數(shù)按HYSA峰計算應(yīng)不低于3 000,陰性對照無干擾。在上述條件下,HYSA的保留時間約為11 min(見圖1)。    取本品顆粒1袋,精密稱定,混勻,研碎,取約2 g,精密稱定,置25 mL量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取本品水溶液5 mL,置50 mL量瓶中,以甲醇稀釋至刻度,濾過,取續(xù)濾液25 mL,置蒸發(fā)皿中揮去甲醇至干,殘渣以25%的甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中,以25%的甲醇溶液稀釋至刻度,搖

12、勻,即得。            取處方量1/10的藥材(缺紅花),置1 000 mL燒瓶中,按生產(chǎn)工藝加水提取2次,合并提取液,靜置8 h,取上清液濃縮至適量體積,轉(zhuǎn)移至100 mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,取溶液2 mL置25 mL量瓶中,加入糊精0.5 g,蔗糖粉1.5 g,照供試品溶液制備方法制備,即得。        精密稱取HYSA對照品6.40 mg,置50 mL量瓶中,加25%

13、甲醇溶解并稀釋至刻度,制成每1 mL含HYSA 0.128 mg的溶液作為儲備液。精密吸取儲備液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL置1 mL量瓶中,加25%甲醇稀釋至刻度,制成每1 mL分別含HYSA 0.012 8、0.025 6、0.051 2、0.076 8、0.102 4 mg的溶液。精密吸取上述溶液各10 L,注入高效液相色譜儀,測定。以峰面積為橫坐標(biāo),HYSA的量(g)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。線形回歸方程為：Y-2 165.1X23.921,r0.999 8。HYSA在0.1281.024 g范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。    

14、        取本品同一供試品溶液,分別于制備后放置0、1、2、4、8、12 h,精密吸取20 L,注入高效液相色譜儀,測定,計算HYSA含量,HYSA含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.0%,表明供試品溶液在制備后12 h內(nèi)測定基本穩(wěn)定。        精密稱取本品同一批樣品5份,按正文含量測定項下方法進(jìn)行測定,結(jié)果HYSA含量標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.0%,表明本方法重現(xiàn)性良好。      &

15、#160;         根據(jù)以上10批樣品測定結(jié)果,依據(jù)中藥新藥研究技術(shù)要求暫擬定本供試品每袋含紅花以HYSA(C27H30O15)計,應(yīng)不少于3.5 mg。    3  討論        本研究參照中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑“膚癢沖劑”質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1擬定,采用TLC法對制劑中的地膚子、白英進(jìn)行鑒別,選擇的制樣方法及展開劑具有分離度好、重復(fù)性好、專屬性強的特點。    含量測定以紅花中HYSA為指標(biāo)成分,采用高效液相色譜法進(jìn)行含量測定。其方法的建立,參照2005年版中華人民共和國藥典(一部)紅花項下含量測定的方法2,根據(jù)本制劑的實際情況,將流動相調(diào)整為上述比例,結(jié)果表明,該方法簡便,準(zhǔn)確,專屬性強,能客觀地反映本品的內(nèi)在質(zhì)量。    【參考文獻(xiàn)】  1 國家藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑(第6冊)S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社,1992.92.2 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社