觀察護(hù)肝解毒沖劑的抗肝損傷作用(一)

1、觀察護(hù)肝解毒沖劑的抗肝損傷作用(一)    【關(guān)鍵詞】 護(hù)肝解毒沖劑,；,大鼠,；,肝損傷摘要：目的觀察護(hù)肝解毒沖劑的抗肝損傷作用。方法用D半乳糖胺（DGaLN）復(fù)制急性肝損傷模型；采用四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)慢性肝損傷模型。實驗結(jié)束時分別取血測ALT，AST活性和總蛋白（TP），白蛋白（ALB），白/球比例（A/G），透明質(zhì)酸（HA），同時均取肝組織做病理檢查。結(jié)果急性肝損傷時，護(hù)肝解毒沖劑能降低ALT，AST活性及減輕肝細(xì)胞壞死及炎細(xì)胞浸潤；慢性肝損傷時， 其能降低ALT，AST和HA，升高TP，ALB和A/G，并減輕肝細(xì)胞變性，減少纖維組織增生。結(jié)

2、論護(hù)肝解毒沖劑對大鼠DGaLN 所致急性肝損傷和CCl4所致慢性肝損傷均具有保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：護(hù)肝解毒沖劑 ； 大鼠 ； 肝損傷護(hù)肝解毒沖劑是由茵陳、梔子、大黃（制）、白術(shù)、云苓、白花蛇舌草、金錢草、蚤休、赤芍、丹參、郁金等組成,具有清熱解毒退黃、涼血活血及健脾作用，是治療慢性活動性乙型肝炎的純中藥制劑，為我國“八五”攻關(guān)研究第三類新藥，為了觀察護(hù)肝解毒沖劑的主要藥效，本實驗研究其對DGaLN 所致急性肝損傷和CCl4所致慢性肝損傷的作用?，F(xiàn)報道如下.1 材料與方法1.1 材料1.2 方法2 結(jié)果2.1 一般狀況注射DGaLN 8 h后，模型組大鼠出現(xiàn)精神萎靡，被毛蓬松，治療組情況稍好。皮下注

3、射10% CCl4，模型組大鼠于第7周開始出現(xiàn)精神萎靡、背躬、被毛蓬松，并開始出現(xiàn)死亡，解剖可見腹腔積液，早期死亡者可見肝臟花斑樣改變，晚期死亡者肝色蒼白、質(zhì)硬，死前肛周潮濕，體形消瘦。治療組癥狀有所改善，死亡動物數(shù)減少。2.2 HGCJ對DGaLN急性肝損傷大鼠血清中ALT，AST水平的影響結(jié)果見表1。表1 HGCJ對大鼠急性肝損傷ACT，AST的影響（略）與對照組比較,1）P0.01;與模型組比較,2）P0.05,3）P0.01, n=102.3 HGCJ對四氯化碳慢性肝損傷肝生化指標(biāo)和血清肝纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸HA的影響結(jié)果見表2。表2 HGCJ對慢性肝損傷對肝生化指標(biāo)和透明質(zhì)酸HA的影響

4、（略）與對照組比較,1）P0.01,* P0.05；與模型組比較，2）P0.01,n=102.4 肝臟病理改變按毒理病理要求，對各組大鼠肝臟進(jìn)行13項指標(biāo)即肝細(xì)胞胞漿疏松化、濁腫、脂肪變、水變性、嗜酸性變、壞死、炎細(xì)胞浸潤、枯否氏細(xì)胞增生、淤血、出血、肝細(xì)胞增生、結(jié)締組織增生、早期假小葉形成等全面觀察。急性肝損傷實驗中空白對照組肝組織結(jié)構(gòu)清楚，肝細(xì)胞無變性、壞死、出血。模型組全部大鼠均有肝細(xì)胞壞死及炎細(xì)胞浸潤，且均較其余實驗組重。復(fù)肝康組肝細(xì)胞胞漿疏松化、脂肪變性、水變性比HGCJ各劑量組重，HGCJ大劑量組肝細(xì)胞胞漿疏松化比中、小劑量組少，且無脂肪變性。慢性肝損傷實驗?zāi)Ｐ徒M肝臟肉眼觀呈淺灰色

5、、質(zhì)地變硬，鏡下見肝細(xì)胞變性如胞漿疏松化、脂肪變、水變性等嚴(yán)重，74%病例結(jié)締組織增生，有早期肝硬變傾向；二劑量組肝細(xì)胞變性比模型組明顯減輕，只有11%15%病例有結(jié)締組織增生，未見有早期肝硬變改變，大劑量組病變更輕。3 討論DGaLN是肝細(xì)胞的磷酸尿嘧啶核苷的干擾劑，可造成肝彌漫性壞死和炎癥，與臨床上病毒性肝炎的肝臟病理變化相似。當(dāng)DGaLN進(jìn)入體內(nèi)后與磷酸尿苷UDP結(jié)合形成UDPD半乳糖胺，致使磷酸尿苷耗竭，從而使依賴其生物合成的核酸、糖蛋白、脂糖等物質(zhì)合成受抑制，限制了細(xì)胞器及酶的生成和補充，使肝細(xì)胞受損13。本實驗?zāi)Ｐ徒MALT，AST明顯增高，與空白對照組比較P0.01。由于ALT主要

6、存在于肝細(xì)胞漿中，AST存在于肝細(xì)胞胞漿和線粒體中，肝細(xì)胞細(xì)胞膜通透性增加或破損，胞漿內(nèi)ALT，AST釋放入血，使血清中二者均升高；血清ALT水平的高低可靈敏反映肝細(xì)胞變性、壞死的程度，因其大部分存在于胞漿中。說明模型復(fù)制是成功的。HGCJ中、大劑量治療組的ALT，AST與模型組比較明顯降低（P0.01），且病理檢查的結(jié)果顯示，HGCJ各治療組能減輕病理損傷如肝細(xì)胞壞死及炎細(xì)胞浸潤，表明HGCJ能減輕DGaLN的肝損傷作用。CCl4為常用的肝纖維化動物模型化學(xué)誘生劑，其所致肝纖維化改變與人類肝纖維化的形態(tài)特征相似，比較適合于肝纖維化特別是有活動性病變的慢性肝病所致肝纖維化的防治作用及其作用機(jī)制

7、的研究。CCl4對肝毒性損傷主要是由于經(jīng)肝細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素代謝裂解成三氯甲基自由基（CCl3），CCl3可進(jìn)一步氧化反應(yīng)形成具有更強(qiáng)反應(yīng)活性的基團(tuán)，從而產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化作用，破壞肝細(xì)胞的膜性結(jié)構(gòu)4，5。此損傷不斷反復(fù)，繼之有肝細(xì)胞壞死、炎癥激活肝臟內(nèi)Kupffer細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等，使其釋放各種細(xì)胞因子，細(xì)胞因子進(jìn)一步激活靜息狀態(tài)的星狀細(xì)胞（HSC），使之轉(zhuǎn)化為肌成纖維樣細(xì)胞（MFBLC），MFBLC過度增殖，同時大量合成各種細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），ECM過度沉積而導(dǎo)致肝纖維化6。由于此模型的死亡率高，故于造模開始時的動物數(shù)應(yīng)多增加些。CCl4所致慢性肝損傷時ALT，AST，HA均升高，TP，ALB，A/G均降低。肝纖維化時，肝間質(zhì)成纖維細(xì)胞增生，合成HA增加，肝內(nèi)細(xì)胞受損，對血液中HA的攝取及降解障礙，導(dǎo)致HA升高。而肝細(xì)胞是合成蛋白質(zhì)場所，肝細(xì)胞受損時合成蛋白質(zhì)功能降低，血中白蛋白降低，但肝細(xì)胞同時激活肝免疫系統(tǒng)，使球蛋白合成增加，故A/G降低。HGCJ兩個劑量組能降低ALT，AST，HA，同時升高TP，ALB，A/G比例，且能減輕肝細(xì)胞變性，減