T∕CAIA YQ004-2018 液相色譜與原子熒光光譜聯(lián)用儀性能測試方法

1、T/CAIA中國分析測試協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)T/CAIA/YQ004-2018液相色譜與原子熒光光譜聯(lián)用儀性能測試方法Performance testing method for liquid chromatograph coupled with atomic fluorescence spectrometer2018-12-28 發(fā)布2019-03-01 實(shí)施中國分析測試協(xié)會發(fā)布II前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009 給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由中國分析測試協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)化委員會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：中國分析測試協(xié)會、北京博暉創(chuàng)新生物技術(shù)股份有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：周志恒、李飛、宗林茂、劉海濤、

2、汪正范液相色譜與原子熒光光譜聯(lián)用儀性能測試方法1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了液相色譜與原子熒光光譜聯(lián)用儀性能測試的方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于液相色譜與原子熒光光譜聯(lián)用儀性能的測試和評價。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 13966分析儀器術(shù)語GB/T 26792高效液相色譜儀GB/T 6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3 術(shù)語與定義GB/T 13966 確立的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1 靜態(tài)基線穩(wěn)定性static base line stabil

3、ity儀器在 30min 內(nèi)靜態(tài)基線的漂移及噪聲。3.2 最小檢測量minimum detectable concentration表征分析方法的最大檢測能力。3.3 線性linearity儀器的輸出與輸入呈一次函數(shù)關(guān)系的線性動態(tài)范圍，用一元線性回歸方程所計算出的相關(guān)系數(shù) r 來表示。3.4 穩(wěn)定性stability在規(guī)定的條件下計量儀器保持其計量特性恒定(不隨時間而變化)的能力。這里特指對特定溶液進(jìn)行連續(xù)4h測量的穩(wěn)定性，用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差來表示。3.5 動態(tài)基線穩(wěn)定性dynamic base line stability13所選基線范圍內(nèi)動態(tài)基線的漂移及噪聲。3.6 梯度 As（）信噪比 gr

4、adient As() signal to noise ratio梯度洗脫后,As（V）信噪比。4 試劑和材料4.1 試劑4.1.1 鹽酸（優(yōu)級純）HCl；4.1.2 硝酸（優(yōu)級純）HNO3；4.1.3 甲醇（色譜醇）CH3OH；4.1.4 氫氧化鉀（分析純）KOH；4.1.5 硼氫化鉀（質(zhì)量分?jǐn)?shù)不小于 95%）KBH4；4.1.5.1 硼氫化鉀與硼氫化鈉可互相代替使用，但因鉀鹽相對分子質(zhì)量大，故應(yīng)進(jìn)行濃度換算以保持硼氫根的量一致，換算系數(shù)為 0.7（即硼氫化鉀溶液 20g/L 濃度相當(dāng)于硼氫化鈉溶液 14g/L 的濃度）。4.1.5.2 硼氫化鉀溶液（20g/L）：稱取 5g 氫氧化鉀溶于約

5、 200mL 實(shí)驗(yàn)室一級水，加入 20g 硼氫化鉀并使之溶解，用實(shí)驗(yàn)室一級水稀釋至 1000mL，搖勻，用時現(xiàn)配。4.1.6 磷酸二氫銨（分析純）NH4H2PO4；4.1.7 甲酸（分析純）HCOOH；4.1.8 實(shí)驗(yàn)室一級水；434.1.9 試驗(yàn)用各種元素的標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，均應(yīng)使用國家認(rèn)可的一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行逐級稀釋。砷酸根（ AsO3- ）、亞砷酸根（ AsO3- ）；一甲基砷（MMA）、二甲基砷（DMA），制備方法見附錄 A。4.2 材料4.2.1 氬氣（體積分?jǐn)?shù)不小于 99.99%）；4.2.2 帶100L定量環(huán)的進(jìn)樣閥；4.2.3 陰離子色譜柱（250mm×4.1mm ，10m

6、）；4.2.4 微量進(jìn)樣針（200L）。5 儀器5.1 分析天平：準(zhǔn)確度級別為I 級，實(shí)際標(biāo)尺分度值 0.1 mg；5.2 經(jīng)計量檢定檢驗(yàn)合格的容量瓶、移液管、移液器、燒杯、稱量瓶等；5.3 砷（As）原子熒光專用空心陰極燈；5.4 超聲波清洗器（功率500W,超聲頻率 40KHz-130KHz）；5.5 溶劑過濾器、微孔濾膜（0.45m）（帶真空泵,抽氣速率30L/min）。6 條件6.1 儀器工作條件6.1.1環(huán)境溫度：1530；6.1.2 相對濕度：應(yīng)不大于 80%；6.1.3 供電電源：交流 220V±22V ，頻率 50Hz±1Hz ，并有良好接地；6.1.4 室

7、內(nèi)應(yīng)明亮且無直射光源、整潔、無塵、無腐蝕性氣體，有良好的通風(fēng)裝置；6.1.5 無影響儀器使用的振動和電磁干擾。6.2 試驗(yàn)條件6.2.1 在試驗(yàn)前將儀器調(diào)整至正常工作狀態(tài)并預(yù)熱 30min；6.2.2 設(shè)置負(fù)高壓為 240V 以上；6.2.3 燈工作電流為 40mA100mA；6.2.4 液相泵流量為0.55.0mL/min；6.2.4流動相、標(biāo)準(zhǔn)溶液與試劑配制見附錄A。7 性能指標(biāo)的測定所有性能指標(biāo)均在同一測試條件下完成(梯度泵洗脫程序除外）。7.1 靜態(tài)基線穩(wěn)定性7.1.1 設(shè)備與材料a） 見5.3b） 流動相：磷酸鹽緩沖液，見附錄A.4.3；7.1.2 靜態(tài)基線漂移測量條件見 6，啟動泵

8、（只用流動相），連續(xù)測量 30min。將 30min 內(nèi)測定結(jié)果取其最大值和最小值，按公式（1）計算出靜態(tài)基線漂移。d = Imax - Imin ´100%I. (1)式中：d 漂移量，%；I max 30min內(nèi)測得熒光強(qiáng)度最大值；Imin 30min內(nèi)測得熒光強(qiáng)度最小值；I 測得熒光強(qiáng)度的算術(shù)平均值。7.1.3 靜態(tài)基線噪聲測量條件見6，啟動泵（只用流動相），連續(xù)測量30min。求取基線峰-峰值表示基線噪聲，以基線噪聲與初始值的比值（%）表示。7.2 最小檢測量7.2.1 試劑與材料a） 流動相：磷酸鹽緩沖液，見附錄A.4.3；b） 試樣：10ng/mL的As（）、DMA、MM

9、A、As（V）混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，見附錄A.7。7.2.2 試驗(yàn)程序?qū)x器系統(tǒng)連接好，儀器各參數(shù)調(diào)至最佳狀態(tài)。測量條件見 6，高壓輸液泵流量 1.0mL/min，淋洗至基線穩(wěn)定，對 10ng/mL 試樣（100µL）進(jìn)行測量，采集色譜圖，記錄色譜圖中四個組分的峰高和基線。根據(jù)基線噪聲，以 DMA 為代表組分按公式（2）計算最小檢測量（ng）：D = 2Nd cVL103 H.(2)式中：DL 最小檢測濃度，ng；Nd 基線噪聲,mV；c 標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，ng/mL；H 標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰高,mV；V 進(jìn)樣體積，L。7.3 重復(fù)性7.3.1 試劑與材料a） 流動相：磷酸鹽緩沖液，見附錄A.4.

10、3；b） 試樣：100ng/mL的As（），DMA，MMA，As（V）混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，見附錄A.7。7.3.2 試驗(yàn)程序測量條件見 6，高壓輸液泵流量 1.0mL/min，淋洗至基線穩(wěn)定，對 100ng/mL 試樣（100µL）進(jìn)行連續(xù) 7次重復(fù)測量，記錄峰高或峰面積。定量重復(fù)性按公式（3）進(jìn)行計算。定性重復(fù)性按公式（4）進(jìn)行計算。712å(Ii - I0 )RSDI = ´I0 i=1´100%(3)7 -1式中：RSDI 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,%；Ii 熒光強(qiáng)度測量值；I 0 7次測量熒光強(qiáng)度值的算術(shù)平均值。7å(T - T )21i0RSDT =

11、´T0 i=1´100%(4)7 -1RSDT 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,%；Ti 色譜峰起始時間；I 0 7次測量色譜峰起始時間的算術(shù)平均值。7.4 線性測定線性可采用表1中的溶液進(jìn)行測試，計算結(jié)果。7.4.1 試劑與材料a） 流動相：磷酸鹽緩沖液，見附錄A.4.3；b） 試樣：As（），DMA，MMA，As（V）混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，見附錄A.7。7.4.2 試驗(yàn)程序測量條件見 6，高壓輸液泵流量 1.0mL/min，淋洗至基線穩(wěn)定，用微量進(jìn)樣針(100µL) 按表 1 中規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的質(zhì)量濃度進(jìn)行測量。分別對標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行 3 次平行測定，取算術(shù)平均值后，按一元線性回歸方程求出工

12、作曲線的相關(guān)系數(shù) r。表1線性測量用 As（），DMA，MMA，As（V）標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度As（），DMA，MMA，As（V）標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度/(ng/mL)C1C2C3C4C5C610204060801007.5 等度分離度與動態(tài)基線穩(wěn)定性7.5.1 試劑與材料同7.3.1。7.5.2 試驗(yàn)程序 測量條件見6，高壓輸液泵流量1.0mL/min，淋洗至基線穩(wěn)定，對試樣（100µL）進(jìn)行測量，As（）、DMA、MMA、As（V）采集完成后，記錄DMA和MMA兩個組分的保持時間與兩色譜峰底寬度，按公式（5）計算分離度。取測量開始至第一個色譜峰出峰時間之間的基線與最后一個色譜峰結(jié)束時間至測

13、量停止的基線，在所選兩段基線中取其最大值最小值，按公式（6）計算出動態(tài)基線漂移。所選基線峰-峰值表示動態(tài)基線噪聲，以動態(tài)基線噪聲與初始值的比值（%）表示。2 éët (R2 ) - t (R1 )ùûR =W1 +W2. (5)式中：R 分離度；t (R2 ) MMA的保留時間，min；t (R1 ) DMA的保留時間，min；W1 DMA的峰底寬，min；W2 MMA的峰底寬，min。d = Imax - Imin ´100%I. (6)式中：d 漂移量%；Imax 所選基線內(nèi)測得熒光強(qiáng)度最大值；Imin 所選基線內(nèi)測得熒光強(qiáng)度最小值；I 亞

14、砷酸根色譜峰熒光強(qiáng)度最大值。7.6 梯度As（）信噪比7.6.1 試劑與材料a） 流動相：磷酸鹽緩沖液，見附錄A.4.4，A.4.5；b） 試樣：100ng/mL的As（），DMA，MMA，As（V）混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，見附錄A.7。7.6.2 試驗(yàn)過程梯度洗脫，測量條件見6，梯度洗脫程序見附錄A中A.8，高壓輸液泵流量1.0mL/min，淋洗至基線穩(wěn)定， 對試樣（100µL）進(jìn)行測量，As（），DMA，MMA，As（V）采集完成后，按公式（6），計算As（V） 信噪比。D = S ´100%N. (7)式中：DAs（V）信噪比，%； SAs（V）信號強(qiáng)度； N 基線噪聲強(qiáng)度。7

15、.7 穩(wěn)定性7.7.1 試劑與材料同7.3.1。7.7.2 試驗(yàn)程序測量條件見 6，高壓輸液泵流量 1.0 mL/min，淋洗至基線穩(wěn)定，對 100ng/mL 試樣進(jìn)行測量，采集色譜圖，記錄色譜圖中DMA 的峰高或峰面積，連續(xù)測量 4h，測量次數(shù)大于 24 次，按公式（3），（4）進(jìn)行計算，用計算結(jié)果的 RSD 表征即為穩(wěn)定性。附錄A（規(guī)范性附錄）原子熒光與液相色譜聯(lián)用儀測試用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備A.1 玻璃器皿的處理A.1.1 將所用的玻璃器皿用清水沖洗干凈，然后用30%硝酸浸泡24h。A.1.2 用清水沖洗干凈后，再用實(shí)驗(yàn)室一級水沖洗34次。A.1.3 洗凈的玻璃器皿干燥后備用。A.2 試劑A.

16、2.1 鹽酸（優(yōu)級純）HCl。A.2.2 硝酸（優(yōu)級純）HNO3。A.2.3 甲醇（色譜純）CH3OH。A.2.4 氫氧化鉀（分析純）KOH。A.2.5 硼氫化鉀（含量不小于95%）KBH4。A.2.6 磷酸二氫銨（分析純）NH4H2PO4。A.2.7 甲酸（分析純）HCOOH。A.2.8 實(shí)驗(yàn)室一級水。A.3 設(shè)備與材料A.3.1 分析天平：準(zhǔn)確度級別為I級，實(shí)際標(biāo)尺分度值0.1 mg。A.3.2 經(jīng)計量檢驗(yàn)合格的容量瓶、移液管、移液器、燒杯等。A.4 試劑的配制A.4.1 5%鹽酸溶液的配制取 50 mL 濃鹽酸加入到已有適量水的 1000mL 的容量瓶中，加水至刻度。搖勻備用。A.4.2

17、 20g/L硼氫化鉀溶液的配制稱取 5gKOH 加入到已有適量水的 1000mL 的燒杯中，攪拌溶解后，加入 20gKBH4，加水至 1000mL， 攪勻備用。A.4.3 磷酸二氫銨溶液（15mmol/L）稱取 1.7g 磷酸二氫銨，溶于 1000mL 水中，以氨水調(diào)節(jié) pH 至 6.0，經(jīng) 0.45µm 水系濾膜過濾后，于超聲水浴中超聲脫氣 30min。A.4.4 流動相 A：磷酸二氫銨溶液（2mmol/L）：稱取 0.23g 磷酸二氫銨，溶于 1000mL 水中，以氨水調(diào)節(jié)pH 至 8.5，經(jīng) 0.45µm 水系濾膜過濾后，于超聲水浴中超聲脫氣 30min。A.4.5

18、流動相B：磷酸二氫銨溶液（60mmol/L）：稱取 6.90g 磷酸二氫銨，溶于 1000mL 水中，以氨水調(diào)節(jié)pH 至 8.0，經(jīng) 0.45µm 水系濾膜過濾后，于超聲水浴中超聲脫氣 30min。A.5 標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液A.5.1 砷酸根As()以 As 計：（17.5±0.4 ）g/g。A.5.2 一甲基砷MMA以 As 計：（25.1±0.8 ）g/g。A.5.3 二甲基砷DMA以 As 計：（52.9±1.8 ）g/g。A.5.4 亞砷酸根As() 以 As 計：（75.7±1.2 ）g/g。均購自國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。A.6 標(biāo)準(zhǔn)使用液的制備A.6.1 砷酸根（1g/mL，以As計）標(biāo)準(zhǔn)使用液的制備用移液器準(zhǔn)確吸取A.5.1 砷酸根標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液 571L 于 10 mL 容量瓶中，用實(shí)驗(yàn)室一級水稀釋至刻度， 搖勻，于冰箱中保存。A.6.2 一甲基砷（1g/mL，以